牙龈卟啉单胞菌W83 PG0352基因突变株构建及鉴定研究 被引量：3

1

作者 李琛 何晓宁 +1 位作者 潘亚萍 郭艳 《中国实用口腔科杂志》 CAS 2012年第11期671-675,共5页

目的探讨牙龈卟啉单胞菌W83PG0352基因突变株的构建和鉴定。方法本实验于2011年7—12月在中国医科大学口腔医学院中心实验室完成。建立PG0352突变质粒,在T载体上插入PG0352上游基因、红霉素抗性基因和PG0352下游基因,用电转化的方法将... 目的探讨牙龈卟啉单胞菌W83PG0352基因突变株的构建和鉴定。方法本实验于2011年7—12月在中国医科大学口腔医学院中心实验室完成。建立PG0352突变质粒,在T载体上插入PG0352上游基因、红霉素抗性基因和PG0352下游基因,用电转化的方法将质粒转入牙龈卟啉单胞菌菌细胞中,用含有红霉素的TSB培养基筛选PG0352突变株,并通过PCR、RT-PCR和酶活性检测方法对突变株进行鉴定。结果在含有红霉素的TSB培养基中可见牙龈卟啉单胞菌的菌落,用PCR方法证实在这些菌落中PG0352基因被红霉素抗性基因所替代,且唾液酸酶活性丧失。结论通过电转化的方法可成功获得PG0352基因突变株,为研究PG0352基因的功能奠定基础。 展开更多

关键词 牙龈卟啉单胞菌W83 PG0352 突变株 PCR 酶活性检测

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正响应盐胁迫的甘蔗6-磷酸葡萄糖脱氢酶基因的克隆 被引量：2

2

作者 杨玉婷 李国印 +2 位作者 苏亚春 郭晋隆 许莉萍 《福建农林大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2014年第2期156-164,共9页

从甘蔗中克隆获得1个6PGDH基因的cDNA序列,记为Sc6PGDH(登录号:KF921299).该基因序列含有1个1467 bp的完整开放阅读框,推导编码488个氨基酸残基.生物信息学分析可知,Sc6PGDH基因编码的蛋白分子质量为53.6561 ku,为酸性稳定的亲水蛋白,... 从甘蔗中克隆获得1个6PGDH基因的cDNA序列,记为Sc6PGDH(登录号:KF921299).该基因序列含有1个1467 bp的完整开放阅读框,推导编码488个氨基酸残基.生物信息学分析可知,Sc6PGDH基因编码的蛋白分子质量为53.6561 ku,为酸性稳定的亲水蛋白,含有信号肽,可能定位于内质网膜上,具有该类蛋白典型的保守结构域6PGD,且与分离自谷子、玉米和水稻的6-磷酸葡萄糖脱氢酶的氨基酸序列同源性分别高达96.11%、95.70%和93.24%,表明该基因在进化过程中比较保守.原核生物生长试验结果显示,甘蔗Sc6PGDH基因的表达蛋白可以显著增强大肠杆菌Rosetta菌株的耐盐性,推测该基因可能参与了生物体对盐胁迫的应答过程. 展开更多

关键词 甘蔗 6-磷酸葡萄糖脱氢酶基因 生物信息学分析 原核生物生长试验 盐胁迫

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外周血结核感染T细胞斑点试验对活动性结核的诊断价值 被引量：18

3

作者 管立学 李海波 +5 位作者 褚锦锦 张丽丽 盖林林 孙家梅 王乐强 谭薇 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期340-345,共6页

目的探讨外周血结核感染T细胞斑点试验(Tuberculosis T cell spot assay,T-SPOT.TB)对活动性结核的诊断价值。方法选取2015年1月-2017年6月医院收治的疑似结核病患者661例为研究对象,另选取同期110名健康对照组人群。根据临床诊断将患... 目的探讨外周血结核感染T细胞斑点试验(Tuberculosis T cell spot assay,T-SPOT.TB)对活动性结核的诊断价值。方法选取2015年1月-2017年6月医院收治的疑似结核病患者661例为研究对象,另选取同期110名健康对照组人群。根据临床诊断将患者分为活动性肺结核组51例,活动性结核性胸膜炎(TBP)组73例,非活动性结核组46例和非结核肺部疾病组491例。计算不同参比条件下外周血T-SPOT.TB对诊断活动性肺结核和TBP的敏感性、特异性、阳性预测值(PPV)、阴性预测值(NPV)、阳性似然比(LR+)、阴性似然比(LR-)和约登指数(Youden Index);分析患者组和健康对照组A抗原(ESAT-6)和B抗原(CFP-10)刺激产生的斑点形成细胞(SFCs)数目水平。结果 639例疑似活动性结核患者中外周血T-SPOT.TB阳性218例(34.12%),活动性结核(肺结核和TBP)患者T-SPOT.TB阳性率为87.10%(108/124)高于非活动性肺结核组58.70%(27/46)、非结核肺部疾病21.18%(104/491)和对照组14.55%(16/110)(P<0.001);活动性肺结核组阳性率为96.08%(49/51)高于活动性TBP组80.82%(59/73)(P=0.013);患者组和对照组CFP-10抗原刺激产生的SFCs(CFP10-SFCs)均高于ESAT-6抗原刺激产生的SFCs(ESAT6-SFCs);活动性肺结核组ESAT6-SFCs和CFP10-SFCs合并值高于活动性TBP组、非活动性肺结核组、非结核肺部疾病组和健康对照组人群(P<0.001);30～39岁年龄组患者合并SFCs为[1.00(0,29.50)]低于≥80岁年龄组患者[3.00(0,26.00)](P=0.001);非结核肺部疾病各亚组和不同年龄组患者T-SPOT.TB阳性率之间比较,差异均无统计学意义。与对照组、非医护人员亚组和非结核肺部疾病组比较,外周血T-SPOT.TB对活动性肺结核和TBP的诊断特征性指标差异较大,非结核肺部疾病组NPV(99.49%,96.51%)高于对照组(97.92%,87.04%)和非医护人员亚组(96.00%,77.42%)(P<0.05)。结论潍坊地区非结核肺部疾病患者和医护人员中LTBI发生率较高;在结核高负担地区,外周血T-SPOT.TB诊断� 展开更多

关键词 结核感染T细胞斑点试验 活动性结核 潜伏结核感染 诊断意义

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T细胞斑点试验技术在结核病诊断方面的应用 被引量：12

4

作者 彭春仙 郑晓燕 +1 位作者 钱峰 范剑 《中国卫生检验杂志》 CAS 2011年第4期918-920,共3页

目的:探讨结核感染T细胞斑点试验(T SPOT TB)在结核病诊断中的应用价值。方法:利用T SPOT TB方法测定61例单纯结核病患者,30例非结核呼吸道疾病患者,30名健康体检者。并与传统结核诊断PPD试验以及痰涂片方法进行比较。结果:结核组(61例)... 目的:探讨结核感染T细胞斑点试验(T SPOT TB)在结核病诊断中的应用价值。方法:利用T SPOT TB方法测定61例单纯结核病患者,30例非结核呼吸道疾病患者,30名健康体检者。并与传统结核诊断PPD试验以及痰涂片方法进行比较。结果:结核组(61例)用T SPOT TB法、TST(PPD试验)和痰涂片检查结核杆菌检测阳性分别为60例(98.4%)、41例(67.2%)和28例(45.9%)。其中PPD阳性组T SPOT TB法的阳性率为100%;PPD阴性组为95.0%。痰涂片检查结核杆菌阳性组T SPOT TB法的阳性率为100%;痰涂片检查结核杆菌阴性组(包括13例肺外结核)为93.9%。T SPOT TB在非结核呼吸系统疾病组、健康对照组中的阳性率均为0%。结论:T SPOT TB法比PPD试验和痰涂片检查结核杆菌方法都好,且不受BCG免疫的影响。 展开更多

关键词 结核病 酶联免疫斑点试验

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部分特发性1型糖尿病存在谷氨酸脱羧酶_(65)反应性T细胞 被引量：10

5

作者 张翼 周智广 +4 位作者 杨琳 周海峰 林健 孙意 黄干 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第16期1102-1105,共4页

目的探讨特发性1型糖尿病(1B 型糖尿病)患者是否存在胰岛自身抗原反应性 T 细胞。方法选择经典1型糖尿病(1A 型糖尿病)患者23例,1B 型糖尿病29例,健康对照16例;放射配体法检测胰岛自身抗体;连续密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞;... 目的探讨特发性1型糖尿病(1B 型糖尿病)患者是否存在胰岛自身抗原反应性 T 细胞。方法选择经典1型糖尿病(1A 型糖尿病)患者23例,1B 型糖尿病29例,健康对照16例;放射配体法检测胰岛自身抗体;连续密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞;酶联免疫斑点法(ELISPOT)检测谷氨酸脱羧酶(GAD_(65))反应性、分泌γ干扰素(IFN-γ)的 T 细胞(IFN-γ-T 细胞)。结果 (1)IFN-γ-T 细胞数(中位数及95%CI 表示)1A 型糖尿病为:12.0个(10.3～20.9个),1B 型糖尿病:3.5个(3.0～5.7个),对照:1.0个(0.3～1.8个)。1A 型糖尿病的 IFN-γ-T 细胞数明显高于1B 型糖尿病及对照(均 P<0.01)。1B 型糖尿病较对照具有更高频率的 IFN-γ-T 细胞(P<0.05)。(2)以>95%CI(对照组)判为 IFN-γ-T 阳性,1A 型糖尿病、1B 型糖尿病及对照的阳性率分别为:78.3%(18/23)、48.3%(14/29)及0。(3)3组对植物血凝素非特异性刺激的 IFN-γ-T 细胞数差异无统计学意义(P>0.05)。结论部分1B 型糖尿病患者存在 GAD_(65)反应性 IFN-γ-T 细胞,即存在 T 细胞免疫异常,具有与1A 型糖尿病相似的病因及发病机制;诊断1B 型糖尿病前应排除 IFN-γ-T 阳性患者,GAD_(65)-IFN-γ-T 检测有望成为糖尿病分型诊断的新指标。 展开更多

关键词 糖尿病 胰岛素依赖型 谷氨酸脱羧酶 T淋巴细胞 酶联免疫斑点试验

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结核感染T细胞斑点试验在肾结核诊断中的应用研究 被引量：10

6

作者 曾春艳 张松旺 于长国 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1199-1202,共4页

目的评估结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)在肾结核诊断中的应用价值。方法分别采用T-SPOT.TB和皮肤结核菌素试验(TST)对112例肾结核疑似病例进行检测,数据使用Kappa检验和Z检验进行统计学分析。结果 112例肾结核疑似病例经临床确诊肾... 目的评估结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)在肾结核诊断中的应用价值。方法分别采用T-SPOT.TB和皮肤结核菌素试验(TST)对112例肾结核疑似病例进行检测,数据使用Kappa检验和Z检验进行统计学分析。结果 112例肾结核疑似病例经临床确诊肾结核44例。与临床诊断相比较,T-SPOT.TB对肾结核诊断的敏感度为95.5%,特异性为92.6%,准确性为93.8%,Youden指数为0.881,Kappa值为0.871;TST对肾结核诊断的敏感度为97.7%,特异性为62.3%,准确性为75.0%,Youden指数为0.60,Kappa值为0.525。T-SPOT.TB的敏感度和阴性预测值与TST相近,差异无统计学意义(P>0.05),特异性和阳性预测值均高于TST,差异有统计学意义(P≤0.05)。结论 T-SPOT.TB在肾结核的检测方面价值优于TST,在辅助肾结核诊断方面具有很高的应用价值。 展开更多

关键词 肾结核 酶联免疫斑点试验 结核感染T细胞斑点试验 皮肤结核菌素试验 干扰素-Γ

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初治肺结核患者血清CA125、IL-18、T-SPOT.TB检测及临床意义 被引量：6

7

作者 刘玉霞 史健 +2 位作者 王卫平 孙征 邓宽国 《临床和实验医学杂志》 2023年第1期94-98,共5页

目的 探讨初治肺结核(TB)患者血清癌抗原125(CA125)、白细胞介素-18(IL-18)、结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)检测及临床意义。方法 回顾性选取2019年1月至2021年1月东营市中医院收治的70例初治肺结核患者纳入初治肺结核组,根病情轻... 目的 探讨初治肺结核(TB)患者血清癌抗原125(CA125)、白细胞介素-18(IL-18)、结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)检测及临床意义。方法 回顾性选取2019年1月至2021年1月东营市中医院收治的70例初治肺结核患者纳入初治肺结核组,根病情轻重、病程长短和肺部病灶范围将其分为轻症组(n=31)和重症组(n=39),另选取同期于东营市中医院行健康体检者70名作为健康对照组。分别于入院次日清晨和体检当日清晨,采用化学发光法检测两组血清CA125水平,采用酶联免疫吸附试验检测血清IL-18水平,同时进行T-SPOT.TB检测。比较初治肺结核组和健康对照组血清CA125、IL-18水平和T-SPOT.TB阳性检出率;以病理组织学结果为金标准,评估T-SPOT.TB检测诊断初治肺结核的敏感度、特异度;比较不同疾病严重程度初治肺结核患者血清CA125、IL-18水平及T-SPOT.TB阳性检出率;受试者工作特征(ROC)曲线评估血清CA125、IL-18及T-SPOT.TB检测结果对初治肺结核诊断和病情严重程度的诊断价值。结果 初治肺结核组血清CA125、IL-18水平、T-SPOT.TB阳性检出率为(45.68±4.93)U/mL、(245.71±39.42)ng/L、89.71%,均显著高于健康对照组[(11.52±3.95)U/mL、(50.71±6.38)ng/L、0],差异均有统计学意义(P<0.05)。T-SPOT.TB检测诊断初治肺结核的敏感度、特异度为96.87%、66.67%,与病理组织学结果一致性较好(Kappa=0.635)。CA125、IL-18及T-SPOT.TB联合检测诊断初治肺结核的曲线下面积(AUC)为0.935。重症组初治肺结核患者CA125、IL-18水平和T-SPOT.TB阳性检出率为(47.03±4.97) U/mL、(260.67±39.11) ng/L、97.44%,均显著高于轻症组[(43.98±4.52) U/mL、(226.89±36.52) ng/L、77.42%],差异均有统计学意义(P<0.05)。血清CA125、IL-18水平及T-SPOT.TB联合检测诊断初治肺结核患者病情严重程度的AUC为0.825。结论 血清CA125、IL-18水平及T-SPOT.TB联合检测对初治肺结核具有较好的诊断价值,可作为患者病情严重 展开更多

关键词 初治肺结核 癌抗原125 白细胞介素-18 结核感染T细胞斑点试验 诊断价值 病情严重程度

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结核菌特异性IFN-γ检测在骨关节结核诊断中的初步应用 被引量：8

8

作者 刘云 丁光贵 +4 位作者 王正 杨林 马克 黄志坚 陈心春 《中国实验诊断学》 北大核心 2011年第11期1888-1891,共4页

目的探讨酶联免疫斑点试验(ELISPOT)检测结核特异性IFN-γ在骨关节结核病患者中的诊断价值。方法收集2009年5月至2011年5月期间,深圳市第三人民医院收治并确诊为骨关节结核病患者及其临床资料,共90例,比较分析ELISPOT检测、涂片染色镜... 目的探讨酶联免疫斑点试验(ELISPOT)检测结核特异性IFN-γ在骨关节结核病患者中的诊断价值。方法收集2009年5月至2011年5月期间,深圳市第三人民医院收治并确诊为骨关节结核病患者及其临床资料,共90例,比较分析ELISPOT检测、涂片染色镜检、结核菌培养、聚合酶链反应(PCR)检测结核菌DNA以及病理检查诊断在骨关节结核病中的阳性率。结果 90例临床确诊骨关节结核患者中,ELISPOT检测阳性率为75.6%,涂片染色法(27.9%),结核菌培养法(51.7%),聚合酶链反应PCR(53.0%),病理诊断(39.1%),ELISPOT阳性率显著高于其它临床常用检测方法,差异有统计学意义(P<0.05);ELISPOT联合涂片染色法、结核菌培养法及PCR检测法,阳性率分别达到80.9%、88.3%、87.9%,当ELISPOT、结核菌培养法和PCR检测法三者联合应用时,阳性率高达90.7%。结论 ELISPOT检测方法在骨关节结核患者中有一定辅助诊断价值,与临床常规检测方法相结合有助于提高诊断率。 展开更多

关键词 骨关节结核 诊断 酶联免疫斑点试验 干扰素

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T细胞斑点试验在肠结核诊断的初步探讨 被引量：8

9

作者 邱志兵 钟良 +3 位作者 杨海静 戎兰 张文宏 乔春萍 《中国感染与化疗杂志》 CAS 北大核心 2012年第5期381-383,共3页

目的探讨结核分枝杆菌感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)对诊断肠结核的临床价值。方法选择13例肠结核患者、20例克罗恩病和20例结肠息肉患者,分别行结核菌素皮试(TST)和T-SPOT.TB检测。结果 13例肠结核、20例克罗恩病和20例结肠息肉患者中,... 目的探讨结核分枝杆菌感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)对诊断肠结核的临床价值。方法选择13例肠结核患者、20例克罗恩病和20例结肠息肉患者,分别行结核菌素皮试(TST)和T-SPOT.TB检测。结果 13例肠结核、20例克罗恩病和20例结肠息肉患者中,TST阳性分别为7例、3例和3例,T-SPOT.TB阳性分别为12例、5例和4例;TST检测活动性肠结核灵敏度53.8%(7/13),特异度85.0%(34/40)。TST和T-SPOT.TB方法用于检测肠结核灵敏度两者差异有统计学意义(P<0.01)。结论 T-SPOT.TB方法可以作为肠结核诊断的一个有效辅助手段。 展开更多

关键词 酶联免疫斑点法 结核菌素皮试 克罗恩病 肠结核 结肠息肉

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酶联免疫斑点法检测慢性乙型肝炎患者HBcAg特异性分泌γ-干扰素细胞及其临床意义 被引量：5

10

作者 张宜俊 夏书奇 +6 位作者 曾水娣 施理 祖萍 刘惠萍 易学瑞 田增遂 朱义鑫 《检验医学》 CAS 北大核心 2006年第1期8-11,共4页

目的观察免疫应答不同期的慢性乙型肝炎（CHB）患者外周血中HBcAg特异性γ-干扰素（IFNγ）分泌细胞数，探讨其在评价患者体内非溶细胞机制清除乙型肝炎病毒（HBV）能力中的临床意义。方法采用酶联免疫斑点法（ELISPOT）检测83例免疫耐... 目的观察免疫应答不同期的慢性乙型肝炎（CHB）患者外周血中HBcAg特异性γ-干扰素（IFNγ）分泌细胞数，探讨其在评价患者体内非溶细胞机制清除乙型肝炎病毒（HBV）能力中的临床意义。方法采用酶联免疫斑点法（ELISPOT）检测83例免疫耐受期、49例免疫清除期患者和18名健康人HBcAg特异性IFNγ分泌细胞。结果健康人HBcAg特异性IFNγ分泌细胞数为11—19个／4×10^5个外周单个核细胞（PBMC），62．2％的免疫耐受期CHB患者低于正常值，44．9％的免疫清除期CHB患者高于正常值。HBcAg特异性IFNγ分泌细胞数与HBV DNA水平未发现有相关性，而HBcAg特异性IFNγ分泌细胞数与HBeAg S／N值在一定范围内有正相关趋势。13例免疫耐受期患者经乙型肝炎疫苗及草分枝杆菌制剂治疗3—6个月后，12例患者HBcAg特异性IFNγ分泌细胞数有不同程度提高。结论采用ELISPOT测定HBcAg特异性IFNγ分泌细胞数可从一个侧面反映大多数CHB患者免疫应答能力，并可以作为治疗效果的评价指标。 展开更多

关键词 乙型肝炎 酶联免疫斑点法 Γ-干扰素

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基于立即早期蛋白IE62建立水痘-带状疱疹病毒感染性滴度检测方法 被引量：5

11

作者 潘德全 王玮 +5 位作者 付文锟 蔡琳俐 叶江辉 朱桦 程通(指导) 夏宁邵 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期1843-1848,共6页

目的:基于水痘-带状疱疹病毒(VZV)立即早期蛋白IE62与酶联免疫斑点检测技术(ELISpot)建立一种新型的VZV感染性滴度的快速检测方法。方法:应用生物信息学方法设计并合成VZV-IE62蛋白的多肽抗原,牛血清白蛋白偶联后免疫BALB/c小鼠,筛选和... 目的:基于水痘-带状疱疹病毒(VZV)立即早期蛋白IE62与酶联免疫斑点检测技术(ELISpot)建立一种新型的VZV感染性滴度的快速检测方法。方法:应用生物信息学方法设计并合成VZV-IE62蛋白的多肽抗原,牛血清白蛋白偶联后免疫BALB/c小鼠,筛选和制备抗VZV-IE62单克隆抗体,应用Western blot和免疫荧光法等开展抗体性能评价,继而应用酶联免疫斑点技术(ELISpot)结合生物素-亲和素放大法建立新型的VZV感染性滴度检测方法,并与经典空斑计数法进行比较。结果:获得抗VZV-IE62的单克隆抗体1B7,应用于ELISpot方法可特异识别VZV感染后的细胞,以之为基础建立了新型的VZV感染性滴度检测方法。相比经典空斑计数法,该方法可显著缩短检测时间(从5至7 d缩短至32 h)检测结果具有较好的一致性。结论:本研究建立了一种新型的基于VZV立即早期蛋白IE62与酶联免疫斑点技术的VZV感染性滴度检测方法(VZV-IE62 ELISpot),具有潜在的转化应用前景,可为VZV的防治研究提供支持。 展开更多

关键词 水痘-带状疱疹病毒 感染性滴度检测方法 立即早期蛋白62 单克隆抗体 酶联免疫斑点技术

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建立尿斑实验系统用于小鼠下尿路功能检测

12

作者 罗闯 杨佳丽 +3 位作者 刘娟 邱湘 谢翔 陈环 《生理学报》 CSCD 北大核心 2023年第5期636-646,共11页

本文旨在提供一套简单且可靠的尿斑实验系统用于检测小鼠下尿路功能,促进尿斑实验标准化。本系统利用紫外光对尿斑进行可视化,筛选出没有自发荧光且对尿液具有良好扩散作用的滤纸,比较不同波长紫外光对尿斑成像效果。制作尿液体积-尿斑... 本文旨在提供一套简单且可靠的尿斑实验系统用于检测小鼠下尿路功能,促进尿斑实验标准化。本系统利用紫外光对尿斑进行可视化,筛选出没有自发荧光且对尿液具有良好扩散作用的滤纸,比较不同波长紫外光对尿斑成像效果。制作尿液体积-尿斑面积标准曲线,明确所选滤纸上形成的尿斑面积和尿液体积的关系,利用建立的尿斑实验系统对12~13周龄C57BL/6J雌性小鼠进行排尿模式分析,并与其他实验室采用相同实验参数设置的尿斑实验结果进行比较。最后利用该系统跟踪尿路感染小鼠和运输应激小鼠排尿模式变化。结果显示:#4滤纸无自发荧光且对尿液具有较好扩散作用,在365 nm紫外光照射下该滤纸上尿斑成像清晰且边界清楚,在尿斑实验中0.7 mm厚度#4号滤纸能保持相对较好的完整性;在该滤纸上,尿液形成的尿斑面积和尿液体积成线性关系;采用该尿斑实验系统检测野生C57BL/6J雌性小鼠4 h尿量约为695.8μL,主尿斑平均体积约为126.4μL,超过84%主尿斑体积在20~200μL,主尿斑数约为5.5个,不同实验室小鼠在主尿斑体积上具有一致性;通过该系统检测小鼠在尿路感染或运输应激后排尿次数增多,主尿斑体积减少,主尿斑数量增加。综上,本研究提供了一套简单且可靠的尿斑实验系统,能对正常小鼠、尿路感染小鼠和运输应激小鼠的排尿模式进行跟踪,检测其下尿路功能变化。 展开更多

关键词 尿斑实验 排尿模式 尿路感染 主尿斑 运输应激

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结核杆菌感染T细胞斑点试验对结核性胸膜炎的诊断价值 被引量：5

13

作者 郭晓桐 范玉春 +3 位作者 贾伟 李刚 吴若芬 陈娟 《宁夏医科大学学报》 2017年第5期509-514,F0003,共7页

目的通过检测胸腔积液患者外周血结核杆菌感染T细胞斑点试验(T.SPOT.TB),评价T.SPOT.TB对结核性胸膜炎的诊断价值及临床应用前景。方法收集2015年3月至2016年10月在宁夏医科大学总医院呼吸与危重症医学科住院部收治的结核性胸膜炎患者63... 目的通过检测胸腔积液患者外周血结核杆菌感染T细胞斑点试验(T.SPOT.TB),评价T.SPOT.TB对结核性胸膜炎的诊断价值及临床应用前景。方法收集2015年3月至2016年10月在宁夏医科大学总医院呼吸与危重症医学科住院部收治的结核性胸膜炎患者63例(TBP组),非结核性胸腔积液患者36例(NTBP组)。对入组患者进行常规胸水细胞学、生化以及腺苷脱氨酶(ADA)活性检测,并行外周血T.SPOT.TB检测,对比TBP组与NTBP组外周血T.SPOT.TB检测及胸水ADA活性检测对TBP的诊断效能。结果 TBP组EAST-6和CFP-10分泌IFN-γ的斑点形成细胞数分别为56/2.5×105个和38/2.5×105个,均高于NTBP组的0/2.5×105个和1/2.5×105个(Z=-6.92和-5.82,P均<0.01)。TBP组胸水ADA活性(39.60U·L-1)高于NTBP组(12.35U/L)(Z=-4.99,P<0.01)。T.SPOT.TB诊断TBP的敏感度(88.90%,56/63)高于ADA活性检测(46.00%,29/63)(χ~2=26.36,P<0.01);T.SPOT.TB诊断TBP的特异度(86.10%,31/36)与ADA活性检测(94.40%,34/36)的差异无统计学意义(χ~2=0.63,P>0.05);T.SPOT.TB诊断TBP的阴性预测值(81.60%,31/38)高于ADA的阴性预测值(50.00%,34/68)(χ~2=10.25,P<0.01);T.SPOT.TB检测的阳性似然比(6.40)与阴性似然比(0.13)均低于ADA活性检测(8.29,0.57)。两项检验方法联合时,诊断TBP的敏感度提高至92.10%(58/63)。结论外周血T.SPOT.TB检测对结核性胸腔积液具有很好的诊断价值,与ADA活性检测联合可提高TBP的诊断。 展开更多

关键词 结核性胸膜炎 T细胞斑点试验 腺苷脱氨酶

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活动性结核病外周血结核感染T细胞斑点试验阴性病例的临床特征 被引量：3

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作者 万荣 李光妹 +3 位作者 马萌 赖明红 刘才 李明武 《昆明医科大学学报》 CAS 2022年第4期132-136,共5页

目的分析活动性结核病外周血结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)阴性病例的临床特征。方法以2019年1~12月在昆明市第三人民医院结核二科住院的经痰检、体液或组织标本检测结核病原学阳性且T-SPOT.TB阴性和同期收治T-SPOT.TB阳性活动性结... 目的分析活动性结核病外周血结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)阴性病例的临床特征。方法以2019年1~12月在昆明市第三人民医院结核二科住院的经痰检、体液或组织标本检测结核病原学阳性且T-SPOT.TB阴性和同期收治T-SPOT.TB阳性活动性结核病为研究对象,T-SPOT.TB阴性病例组83例,TSPOT.TB阳性病例组82例,比较2组病例的临床特征,同时比较常规几种实验检测方法的阳性率。结果TSPOT.TB阴性病例组与T-SPOT.TB阳性病例组,2组年龄、性别,差异无统计学意义(P>0.05),但TSPOT.TB阴性组与阳性组比较,超60岁的病患更多,达22.9%,差异无统计学意义(P>0.05);2组合并基础病方面,差异无统计学意义(P>0.05),均以合并糖尿病多见;合并肺外结核2组均占一半左右,T-SPOT.TB阴性病例组以结核性胸膜炎多见,阳性病例组以气管结核更多见;细胞免疫相关检查,有近90%患者存在细胞免疫功能低下。所有病例均常规开展了抗酸杆菌涂片、TB-DNA、XpertMtb/RIF、结核菌培养相关检查,在2组病例中,XpertMtb/RIF阳性率均为最高,分别为77.1%和64.6%,均明显高于其他3种检测方法,差异有统计学意义(P<0.001)。结论老年、合并肺外结核、免疫功能低下等可能是活动性结核病中T-SPOT.TB阴性的原因;XpertMtb/RIF检测可用于结核病早期快速诊断优于其他常规检测方法。 展开更多

关键词 活动性 结核病 结核感染 T细胞斑点试验 阴性

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结核γ-干扰素酶联免疫斑点检测在结核性心包积液诊断中的应用 被引量：4

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作者 孟娟 廖明凤 +3 位作者 孙秀才 施霞 张明霞 陈心春 《岭南心血管病杂志》 2014年第5期632-635,共4页

目的探讨结核菌特异性γ-干扰素(interferon-gamma,IFN-γ)酶联免疫斑点(enzyme-linked immunosorbent spot,ELISPOT)检测对结核性心包积液的诊断价值。方法采用结核菌特异性IFN-γELISPOT技术同时检测20例结核性心包积液患者(TP组)和1... 目的探讨结核菌特异性γ-干扰素(interferon-gamma,IFN-γ)酶联免疫斑点(enzyme-linked immunosorbent spot,ELISPOT)检测对结核性心包积液的诊断价值。方法采用结核菌特异性IFN-γELISPOT技术同时检测20例结核性心包积液患者(TP组)和14例非结核性心包积液患者(Non-TP组)外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)及心包积液单核细胞(pleural effusion mononuclear cells,PEMC)中结核菌特异性IFN-γ水平。结果 TP组PBMC和PEMC结核菌特异性IFN-γ水平均显著高于Non-TP组,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.01)。TP组心包积液中结核菌特异性IFN-γ水平显著高于外周血IFN-γ水平,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.01)。PBMC ELISPOT检测结核性心包积液的敏感性和特异性分别为80.0%和85.7%;而PEMC ELISPOT敏感性和特异性为90.0%和85.7%。结论结核菌特异性IFN-γELISPOT技术对结核性心包积液诊断和鉴别诊断具有很好的辅助价值。 展开更多

关键词 结核性心包积液 诊断 酶联免疫斑点技术

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成人隐匿性自身免疫糖尿病患者存在GAD65反应性T细胞免疫异常 被引量：4

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作者 张翼 周智广 +3 位作者 杨琳 林健 李霞 何伟民 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第28期1963-1965,共3页

目的探讨成人隐匿性自身免疫糖尿病（LADA）患者细胞水平的免疫发病机制。方法湖南省1型糖尿病协作中心2005年1至6月就诊的LADA患者17例，2004年3月至2006年1月就诊的2型糖尿病（T2DM）患者28例，健康者（对照）16名；放射配体法检测胰... 目的探讨成人隐匿性自身免疫糖尿病（LADA）患者细胞水平的免疫发病机制。方法湖南省1型糖尿病协作中心2005年1至6月就诊的LADA患者17例，2004年3月至2006年1月就诊的2型糖尿病（T2DM）患者28例，健康者（对照）16名；放射配体法检测胰岛自身抗体；连续密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞；酶联免疫斑点法检测谷氨酸脱羧酶（GAD65）反应性、Th1、Th2细胞，两者比值示为Th1／Th2平衡。结果LADA组较T2DM、对照组具有更多Th1细胞，LADA、T2DM及对照组的Th1细胞数分别为4．0、2．0及1．0个，差异有统计学意义（P〈0．01）；3组的Th2细胞分别为2．0、3．3及1．0个（P〉0．05）；3组的Th1／Th2比值分别为3．0、0．4及0．3，差异有统计学意义（P〈0．05）；T2DM组的Th1细胞及Th1／Th2比值均与对照组差异无统计学意义，3组对植物血凝素非特异性刺激的Th1、Th2细胞数差异无统计学意义（均P〉0．05）。结论LADA患者体内存在高频率的Th1细胞以及Th1／Th2平衡向Th1偏移是其细胞水平的免疫发病机制。 展开更多

关键词 糖尿病 1型 免疫 细胞 T淋巴细胞 酶联免疫斑点试验

原文传递

GAD65反应性T细胞检测在成人隐匿性自身免疫糖尿病筛查中的应用研究 被引量：4

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作者 王婉茹 余靖 +4 位作者 孙志纯 王爱红 洪真真 张翼 周智广 《中国实用内科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期617-620,共4页

目的探讨酶联免疫斑点试验(ELISPOT)检测谷氨酸脱羧酶反应性分泌IFN-γT细胞(GAD65-T)在成人隐匿性自身免疫糖尿病(LADA)筛查中的应用。方法选择2014年至2016年福建医科大学附属泉州第一医院收治的LADA患者28例,2型糖尿病(T2DM)40例,健... 目的探讨酶联免疫斑点试验(ELISPOT)检测谷氨酸脱羧酶反应性分泌IFN-γT细胞(GAD65-T)在成人隐匿性自身免疫糖尿病(LADA)筛查中的应用。方法选择2014年至2016年福建医科大学附属泉州第一医院收治的LADA患者28例,2型糖尿病(T2DM)40例,健康对照20例,放射配体法检测GAD65-Ab,连续密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞(PBMC),ELISPOT法检测GAD65-T细胞。将40例T2DM分为GAD65-T细胞ELISPOT检测阳性及阴性组,比较两组的临床特征。结果 GAD65-T细胞数(中位数及95%CI)LADA组为7.2(1.9~11.1)个,T2DM组为3.6(2.9~6.0)个,对照组为0.9(0.2~1.7)个。LADA组的细胞数明显高于T2DM及对照组(P均<0.01);T2DM较对照组具有更高频率的细胞数(P<0.05)。以大于95%CI(对照组)判为阳性,LADA,T2DM及对照组的阳性率分别为71.4%(20/28)、32.5%(13/40)、0。40例T2DM亚组分析显示GAD65-T细胞ELISPOT检测阳性组较阴性组的患者BMI更低、血糖控制更差、空腹C肽水平更低。结论部分GAD65-Ab阴性的T2DM患者存在GAD65-T细胞,联合GAD65-T细胞ELISPOT及GAD65-Ab检测可明显提高LADA的检出率。 展开更多

关键词 糖尿病 自身免疫 隐匿性 谷氨酸脱羧酶 T淋巴细胞 酶联免疫斑点

原文传递

T细胞酶联免疫斑点试验在结核病诊断中的应用价值

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作者 曹敏 顾英 《医学检验与临床》 2023年第6期34-39,共6页

目的:探讨T细胞酶联免疫斑点试验(TSPOT.TB)在结核病诊断中的实际应用价值。方法:回顾性分析2020年10月-2021年10月在松江区中心医院就诊的疑似结核病病例,从中筛选出同时完成TSPOT.TB、TB-Ab、MTB涂片、MTB培养和GeneXpert的病例248份... 目的:探讨T细胞酶联免疫斑点试验(TSPOT.TB)在结核病诊断中的实际应用价值。方法:回顾性分析2020年10月-2021年10月在松江区中心医院就诊的疑似结核病病例,从中筛选出同时完成TSPOT.TB、TB-Ab、MTB涂片、MTB培养和GeneXpert的病例248份。比较这五种方法的敏感度和特异度,同时分析TSPOT.TB在菌阴性肺结核、菌阳性肺结核、活动性肺结核、潜伏性肺结核和陈旧性肺结核中的阳性率和斑点数差异。结果:这五种检测方法的敏感度分别为87.50%、29.17%、22.22%、37.50%、38.89%;这五种检测方法的特异度分别为82.95%、88.64%、100%、100%、99.43%。TSPOT.TB的敏感度高于其他四组,差异具有统计学意义(P<0.05)。TSPOT.TB特异度与TB-Ab比较,差异无统计学意义(P>0.05),但两者与MTB涂片、MTB培养、GeneXpert相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。TSPOT.TB在菌阴性肺结核和菌阳性肺结核中的阳性率及斑点数差异无统计学意义(P>0.05)。T-SPOT.TB在肺结核三个亚组中阳性率差异无统计学意义(P>0.05),活动性肺结核与陈旧性肺结核中斑点数差异有统计学意义(P<0.017),潜伏性肺结核斑点数与另外两组差异无统计学意义(P>0.017)。结论:T-SPOT.TB快速敏感具有极高的阴性预测价值,在结核病诊断中具有良好的应用前景,但T-SPOT.TB不能有效区分活动性、潜伏性以及陈旧性结核感染,因而需要进一步探索新的指标及试验或联合其他的方法分析。 展开更多

关键词 T细胞酶联免疫斑点试验 菌阴性肺结核 菌阳性肺结核 活动性肺结核 潜伏性肺结核

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外周血结核感染T细胞斑点试验及其不同界值水平在结核性胸膜炎中的诊断价值 被引量：3

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作者 梁大华 刘航 +1 位作者 韦彩周 蒋丽君 《中国临床新医学》 2017年第12期1171-1175,共5页

目的探讨外周血结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)及其不同界值水平在结核性胸膜炎及非结核胸腔积液患者的意义和诊断价值。方法观察40例结核性胸膜炎患者(包括16例病理确诊患者和24例临床诊断患者)及13例非结核胸腔积液患者,进行外周血... 目的探讨外周血结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)及其不同界值水平在结核性胸膜炎及非结核胸腔积液患者的意义和诊断价值。方法观察40例结核性胸膜炎患者(包括16例病理确诊患者和24例临床诊断患者)及13例非结核胸腔积液患者,进行外周血T-SPOT.TB测定,应用SPSS19.0对TSPOT.TB斑点形成细胞(SFC)(个/106)进行统计学分析。结果结核性胸膜炎组的外周血T-SPOT.TB阳性率为85.0%,显著高于非结核性胸腔积液组的23.1%(P<0.01);结核性胸膜炎组的外周血抗原A(ESAT-6抗原)和抗原B(CFP-10抗原)的SFC分别为[15.2(0~110)/106]和[52.0(0~200)/106],明显高于非结核胸腔积液组[分别为0.5(0~40)/106和1.0(0~52)/106](P均<0.05)。应用受试者工作特征(ROC)曲线对结核性胸膜炎组分析结果显示,ESAT-6抗原和CFP-10抗原的SFC数值在ROC曲线下面积(AUC)分别为0.842和0.880,AUC的95%可信区间分别为(0.782~0.967)和(0.771~0.977)(P均<0.05)。根据约登指数确定ESAT-6抗原和CFP-10抗原的诊断界值水平,将ESAT-6抗原为6/106<SFC<48.5/106时定义为弱阳性,其特异度为92.3%;将ESAT-6抗原的SFC≥48.5/106时定义为强阳性,其特异度可达100.0%;将CFP-10抗原为6/106<SFC<57/106时定义为弱阳性,其特异度为84.6%;当CFP-10抗原的SFC≥57/106时定义为强阳性,其特异度为100.0%。将临床诊断组与病理确诊组患者T-SPOT.TB的ESAT-6抗原和CFP-10抗原弱阳性率及强阳性率比较发现,两组抗原的弱阳性率比较差异均无统计学意义(P>0.05),而病理确诊组患者ESAT-6抗原和CFP-10抗原强阳性率均高于临床诊断组(P<0.05)。结论外周血T-SPOT.TB在结核性胸膜炎诊断中具有较高的阳性率和较好的诊断效率,ESAT-6抗原和(或)CFP-10抗原的SFC数值在高界值水平则强烈提示为活动性结核感染。观测外周血T-SPOT.TB的ESAT-6抗原和(或)CFP-10抗原的界值水平及SFC数值高低在结核性胸膜炎诊断中具有重要的价值和意义。 展开更多

关键词 结核 胸膜炎 胸腔积液 结核感染T细胞斑点试验 干扰素释放试验

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4种检测方法对结核病的诊断价值 被引量：3

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作者 兰小英 卢榕 练明建 《医疗装备》 2021年第5期47-49,共3页

目的评估结核菌素(PPD)试验、结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)、结核分枝杆菌抗体(TB-Ab)检测和抗酸染色涂片(AFS)4种检测方法在结核病诊断中的应用价值。方法选取2017年6月至2019年12月医院收治的198例结核病患者作为研究对象,另选... 目的评估结核菌素(PPD)试验、结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)、结核分枝杆菌抗体(TB-Ab)检测和抗酸染色涂片(AFS)4种检测方法在结核病诊断中的应用价值。方法选取2017年6月至2019年12月医院收治的198例结核病患者作为研究对象,另选取同期128例非结核病患者,比较PPD试验、T-SPOT.TB、TB-Ab检测和AFS 4种检测方法的灵敏度和特异度。结果198例确诊结核病患者中,PPD试验、T-SPOT.TB、TB-Ab检测和AFS的灵敏度分别为54.55%、83.33%、12.24%和12.12%;128例非结核病患者中,PPD试验、T-SPOT.TB、TB-Ab检测和AFS的特异度分别为78.13%、60.94%、92.19%和96.90%。T-SPOT.TB与其他3种检测方法相比,灵敏度最高,特异度最低;AFS与其他3种检测方法相比,特异度最高,灵敏度最低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论T-SPOT.TB与PPD试验、TB-Ab检测和AFS比较,具有简便、快速、灵敏度高等优点,是临床快速诊断结核病的有效检测方法,但由于特异度较低,需要与其他方法联合检测,以提高早期诊断结核病的价值。 展开更多

关键词 结核病 结核菌素试验 结核感染T细胞斑点试验 结核分枝杆菌抗体检测 抗酸染色涂片

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