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补阳还五汤对脊髓损伤大鼠脊髓组织血小板活化因子含量的影响 被引量:22
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作者 张继平 王志彬 +3 位作者 林爱华 李蜀光 文凤妮 姚晖 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2011年第11期46-48,共3页
目的观察补阳还五汤对脊髓损伤(SCI)大鼠脊髓组织血小板活化因子(PAF)含量的影响并探讨其机制。方法选取SPF级Wistar大鼠,采用Allen’s打击法制作中度SCI模型,参照改良Tarlov评分标准,选择后肢运动功能障碍评分为2~3分的模型大鼠48只,... 目的观察补阳还五汤对脊髓损伤(SCI)大鼠脊髓组织血小板活化因子(PAF)含量的影响并探讨其机制。方法选取SPF级Wistar大鼠,采用Allen’s打击法制作中度SCI模型,参照改良Tarlov评分标准,选择后肢运动功能障碍评分为2~3分的模型大鼠48只,分为模型组、补阳还五汤组、金纳多组。补阳还五汤组给予40 g/kg体质量补阳还五汤水溶液灌胃,金纳多组给予45.5 mg/kg体质量金钠多水溶液灌胃,正常组及模型组给予相同体积的蒸馏水。用药2周后,采用酶联免疫吸附法检测SCI大鼠脊髓组织中PAF含量。结果补阳还五汤组与金纳多组评分随时间变化差异无统计学意义(P>0.05),与模型组及正常组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。补阳还五汤及金纳多均可明显降低SCI大鼠脊髓组织PAF含量,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.01),且补阳还五汤组明显低于金纳多组,两者比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论补阳还五汤改善SCI大鼠后肢运动功能和体质量降低,与其降低脊髓组织PAF含量、减轻PAF对脊髓组织的继发性损伤有关。 展开更多
关键词 补阳还五汤 脊髓损伤 脊髓组织 血小板活化因子 大鼠
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补阳还五汤对脊髓损伤大鼠脊髓组织病理学的影响 被引量:21
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作者 张继平 王志彬 +3 位作者 林爱华 李蜀光 文凤妮 姚晖 《中国中西医结合外科杂志》 CAS 2014年第3期274-277,共4页
目的:探讨补阳还五汤对脊髓损伤(SCI)大鼠脊髓组织病理学结构的影响。方法:SPF级Wistar大鼠制作中度SCI模型,参照改良Tarlov评分标准分为模型组、补阳还五汤组、金纳多组、正常组;2周后取SCI大鼠脊髓组织HE染色制片,进行病理组织学观察... 目的:探讨补阳还五汤对脊髓损伤(SCI)大鼠脊髓组织病理学结构的影响。方法:SPF级Wistar大鼠制作中度SCI模型,参照改良Tarlov评分标准分为模型组、补阳还五汤组、金纳多组、正常组;2周后取SCI大鼠脊髓组织HE染色制片,进行病理组织学观察。结果:模型组出现脊髓组织出血、组织疏松、水肿,细胞胞浆外渗、变性,呈空泡状,神经元细胞核游离、固缩等严重损伤现象;补阳还五汤组和金纳多组上述变化均有不同程度的恢复,其中以空泡变性减轻,神经细胞形态恢复,细胞核分布排列趋于完整尤为明显,与模型组比较改善明显;脊髓组织修复趋势补阳还五汤组>金纳多组>模型组。Tarlov评分比较,在0~3周内,补阳还五汤组与金纳多组评分随时间变化差异无统计学意义(P>0.05),与模型组及正常组比较差异有统计学意义(P<0.05);各时间点组间比较结果:造模后3 d,模型组大鼠评分显著降低,与正常组比较差异有显著性统计学意义(P<0.01);补阳还五汤组大鼠后肢运动功能恢复明显,与模型组同时间点比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:补阳还五汤能有效改善SCI损伤大鼠脊髓组织的组织结构损伤,营养神经元细胞,促进神经纤维的修复。 展开更多
关键词 补阳还五汤 脊髓损伤 脊髓组织 组织病理学
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补阳还五汤对脊髓损伤大鼠脊髓组织超微结构的影响 被引量:13
3
作者 张继平 王志彬 +3 位作者 林爱华 李蜀光 文凤妮 姚晖 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期153-157,共5页
目的探讨补阳还五汤(BYHWD)对脊髓损伤(SCI)大鼠脊髓组织超微结构的影响,从微观角度探讨脊髓损伤的病理机制。方法应用SPF级Wistar大鼠,采用Allens’打击法制作中度SCI模型,参照改良Tarlov评分标准,分为模型组、BYHWD组、金纳多组,正常... 目的探讨补阳还五汤(BYHWD)对脊髓损伤(SCI)大鼠脊髓组织超微结构的影响,从微观角度探讨脊髓损伤的病理机制。方法应用SPF级Wistar大鼠,采用Allens’打击法制作中度SCI模型,参照改良Tarlov评分标准,分为模型组、BYHWD组、金纳多组,正常组不造模;用药2周结束实验后,取SCI大鼠脊髓组织制片行透射电子显微镜超微结构观察。结果正常组大鼠胞内与灰质内均未观察到空泡;模型组大鼠脊髓损伤严重,大部分的线粒体嵴丢失,形成空泡,内质网重度扩张,与其他组别比较有明显差异,差异有统计学意义(P<0.01);BYHWD组与模型组和金纳多组比较有明显好转,差异有统计学意义(P<0.01)。大鼠后肢运动功能Tarlov评分结果:在0 d~3周内,正常组大鼠后肢运动功能Tarlov评分无明显变化;BYHWD组与金纳多组评分随时间变化差异无统计学意义(P>0.05),与模型组及正常组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 BYHWD能有效保护损伤脊髓组织的组织结构继发性损伤,营养神经元细胞,促进神经纤维的修复。 展开更多
关键词 补阳还五汤 脊髓损伤 脊髓组织 超微结构 大鼠
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葛根汤干预脊髓型颈椎病模型大鼠神经炎症反应和凋亡的作用
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作者 吴迪友 黄家俊 +4 位作者 陶广义 赵宇 黄俊卿 杨彬 薛云 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2025年第20期4249-4257,共9页
背景:炎症和细胞凋亡在脊髓型颈椎病病理过程中起着关键作用。既往研究表明葛根汤对脊髓型颈椎病有着良好的治疗效果。目的:探讨葛根汤对脊髓型颈椎病大鼠神经炎症反应和细胞凋亡的影响及作用机制。方法:60只SD大鼠随机分为正常组、假... 背景:炎症和细胞凋亡在脊髓型颈椎病病理过程中起着关键作用。既往研究表明葛根汤对脊髓型颈椎病有着良好的治疗效果。目的:探讨葛根汤对脊髓型颈椎病大鼠神经炎症反应和细胞凋亡的影响及作用机制。方法:60只SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、葛根汤低、中、高剂量组,采用吸水膨胀材料压迫脊髓的方法构建脊髓型颈椎病模型,术后2周给予4.86,9.72,19.44 g/kg葛根汤灌胃,其余组则灌胃生理盐水,每日1次,持续4周。在给药后第1,7,14,21,28天对大鼠进行运动功能评价(BBB评分);在给药4周后采用苏木精-伊红染色观察脊髓组织病理形态变化,免疫荧光双染检测脊髓组织小胶质细胞极化情况,荧光定量PCR检测脊髓组织中白细胞介素6和白细胞介素1β mRNA表达,Western blot法检测脊髓组织中p-NF-κB p65、NF-κB p65、NLRP3、ASC、Cleaved Caspase-1、Bax、Bcl-2、Cleaved Caspase-3、NOX4、p-Drp1、Drp1和Mfn2蛋白表达,TUNEL法检脊髓组织细胞凋亡情况,DHE染色检测脊髓组织中活性氧水平。结果与结论:(1)与正常组、假手术组比较,模型组大鼠BBB评分降低(P <0.05),脊髓神经元皱缩畸形,呈空泡样改变;与模型组比较,葛根汤低、中、高剂量组大鼠BBB评分升高(P <0.05),且脊髓神经元损伤明显改善;(2)与正常组、假手术组比较,模型组脊髓组织中Iba-1和诱导型一氧化氮合酶蛋白表达升高(P <0.05),白细胞介素6和白细胞介素1β mRNA表达升高(P <0.05);与模型组比较,葛根汤低、中、高剂量组脊髓组织中Iba-1、诱导型一氧化氮合酶、p-NF-κB、NLRP3、ASC和cleaved Caspase-1蛋白表达以及白细胞介素6和白细胞介素1βmRNA表达降低(P <0.05);(3)与正常组、假手术组比较,模型组脊髓组织中TUNEL阳性细胞率以及Bax、Cleaved Caspase-3蛋白表达升高(P <0.05),而Bcl-2蛋白表达降低(P <0.05);与模型组比较,葛根汤低、中、高剂量组上述指标显著� 展开更多
关键词 葛根汤 脊髓型颈椎病 脊髓组织 小胶质细胞 细胞凋亡 炎症 NOX4 活性氧 Drp1 工程化组织构建
外源性血管内皮生长因子对损伤脊髓的作用 被引量:1
5
作者 关永林 李盛华 +2 位作者 李晨旭 杨永清 郑祖根 《兰州大学学报(医学版)》 CAS 2011年第3期15-19,共5页
目的研究外源性血管内皮生长因子(VEGF)局部应用对大鼠损伤脊髓神经组织的作用。方法采用改良Allen氏重量打击法大鼠急性脊髓损伤模型。脊髓打击性损伤后,将模型大鼠随机分组,并依组别在蛛网膜下腔分别给药。A组:生理盐水10μL,B组:Matr... 目的研究外源性血管内皮生长因子(VEGF)局部应用对大鼠损伤脊髓神经组织的作用。方法采用改良Allen氏重量打击法大鼠急性脊髓损伤模型。脊髓打击性损伤后,将模型大鼠随机分组,并依组别在蛛网膜下腔分别给药。A组:生理盐水10μL,B组:Matrigel蛋白胶10μL,C组:重组人VEGF_(165) 0.2μg+Matrigel蛋白胶10μL。脊髓损伤后1、2、3、4周对损伤脊髓组织进行病理组织学研究,观察脊髓灰质神经元数量。结果在损伤后1~4周,VEGF治疗组动物脊髓损伤区残留组织多,残留组织增加。脊髓灰质神经元数量明显优于同期对照组。结论外源性VEGF局部应用,能够保护大鼠损伤后的脊髓组织。 展开更多
关键词 脊髓损伤 血管内皮生长因子 脊髓组织
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姜黄素通过调控TLRs/NF-κB信号通路对EAE小鼠凋亡的影响及其机制 被引量:2
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作者 刘梦兰 谢阳 +1 位作者 曾春蓉 李作孝 《海南医学院学报》 CAS 2021年第20期1527-1533,共7页
目的:探讨姜黄素通过调控TLRs/NF-κB信号通路对实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)小鼠的抗凋亡作用及其机制。方法:将45只C57BL/6雌性小鼠随机分为空白组、EAE组、姜黄素组,每组15只。空白组... 目的:探讨姜黄素通过调控TLRs/NF-κB信号通路对实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)小鼠的抗凋亡作用及其机制。方法:将45只C57BL/6雌性小鼠随机分为空白组、EAE组、姜黄素组,每组15只。空白组不做处理。EAE组及姜黄素组通过经典造模法建立EAE模型。自造模当日起空白组与EAE组腹腔注射生理盐水1mL·kg^(-1)·d^(-1),姜黄素组予以100mg·kg^(-1)·d^(-1)连续腹腔注射姜黄素提取物。以Benson 5评分标准每天对小鼠进行神经功能障碍评分,EAE组及姜黄素组小鼠于发病高峰期进行处死取材,空白组和其余未发病小鼠在饲养4周后处死并取出脊髓组织,取腰膨大段组织,通过HE染色、TUNEL染色观察姜黄素对EAE小鼠脊髓组织病理变化的影响以并计算其凋亡细胞数表达;免疫荧光双标染色观察凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax与脊髓组织中凋亡细胞分布情况及共聚集现象;WesternBlot检测各组小鼠脊髓组织TLR4、NF-κBp65、MyD88蛋白表达水平。结果:与空白组相比,EAE组TUNEL染色提示脊髓组织凋亡细胞数增加(P<0.05),凋亡相关蛋白Bcl-2的表达下降,Bax的表达上升,Westernblot检测可见小鼠脊髓组织TLR4、NF-κBp65、MyD88蛋白表达水平上升(P<0.05);与EAE组相比,姜黄素组TUNEL染色脊髓组织凋亡细胞数减少(P<0.05),凋亡相关蛋白Bcl-2的表达上升,Bax蛋白表达下降,Westernblot检测可见小鼠脊髓组织TLR4、NF-κBp65、MyD88蛋白表达水平下降(P<0.05)。结论:姜黄素对EAE小鼠具有抗凋亡作用,其机制可能与其抑制TLRs/NF-κB信号通路,从而减少凋亡蛋白产生有关。 展开更多
关键词 姜黄素 实验性自身免疫性脑脊髓炎 脊髓组织 TLRs/NF-κB 信号通路 细胞凋亡
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慢病毒介导siRNA对大鼠脊髓组织细胞外信号调节激酶1/2及核因子E2相关因子2基因的影响
7
作者 李维朝 姚绍平 +2 位作者 孙先润 孟增东 刘伟 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2015年第9期912-917,共6页
目的评价慢病毒介导细胞外信号调节激酶1/2(extracellular-signal-regulated kinase 1/2,ERK1/2)-si RNA及核因子(nuclear factor,NF)E2相关因子2(NF-E2-related factor 2,Nrf2)-si RNA进入大鼠局部脊髓组织的转染效果。方法采用NYU撞... 目的评价慢病毒介导细胞外信号调节激酶1/2(extracellular-signal-regulated kinase 1/2,ERK1/2)-si RNA及核因子(nuclear factor,NF)E2相关因子2(NF-E2-related factor 2,Nrf2)-si RNA进入大鼠局部脊髓组织的转染效果。方法采用NYU撞击法构建SD大鼠脊髓损伤模型(模型组),使用微量注射器将含荧光慢病毒载体(LV-Nrf2-RNAi和LV-ERK1/2-RNAi)稀释液注射至其脊髓T10水平背侧深约0.8 mm处,荧光显微镜下观察不同时间点(12 h、24 h、72 h、7 d及14 d)转染效果。以只切除椎板,不打击脊髓的大鼠作为假手术组,在模型组和假手术组中同时设转染组和未转染组。取大鼠脊髓组织,采用RT-PCR及Western blot法检测转染后7 d时ERK1/2及Nrf2基因m RNA转录及蛋白表达水平。结果与假手术组相比,模型组大鼠脊髓组织在慢病毒转染后各时间点均有较强的荧光表达,病毒转染7 d以内,荧光强度与时间呈正相关,在转染7 d后达到高峰。转染7 d后,假手术组与模型组中ERK1/2及Nrf2基因m RNA转录及蛋白表达水平均较未转染组明显降低(P均<0.05)。结论慢病毒介导si RNA转染大鼠脊髓组织,能够有效沉默ERK1/2及Nrf2基因的表达。 展开更多
关键词 慢病毒 RNA干扰 细胞外信号调节激酶1/2 核因子E2相关因子2基因 脊髓组织
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脊髓康联合电针夹脊穴对脊髓损伤大鼠诱发电位及脊髓组织结构的影响 被引量:7
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作者 殷杰 邵阳 +2 位作者 张旭斌 王善付 王建伟 《中医学报》 CAS 2021年第11期2395-2400,共6页
目的:观察脊髓康联合电针夹脊穴对脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)大鼠诱发电位及脊髓组织结构的影响,探讨此针药并举模式对SCI大鼠神经修复的作用。方法:120只SD大鼠随机分为4组,假手术组、模型组、脊髓康组、脊髓康联合电针组。除... 目的:观察脊髓康联合电针夹脊穴对脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)大鼠诱发电位及脊髓组织结构的影响,探讨此针药并举模式对SCI大鼠神经修复的作用。方法:120只SD大鼠随机分为4组,假手术组、模型组、脊髓康组、脊髓康联合电针组。除假手术组外,其余组大鼠建立脊髓损伤模型。模型建立成功后,给予相应药物干预(每日2次)及电针刺激(每日1次),假手术组和模型组大鼠给予等体积生理盐水灌胃,每日2次,连续14d。采用肌电诱发电位仪检测大鼠术前及干预1d、3d、7d、14d后的体感诱发电位(somatosensory evoked potential,SEP)、运动诱发电位(motor evoked poten-tial,MEP),观察两种电位的潜伏期与波幅的变化;HE染色及Nissl染色观察SCI大鼠脊髓神经结构的变化。结果:干预14d后,与模型组比较,脊髓康组及脊髓康联合电针组大鼠的SEP及MEP潜伏期明显缩短(P<0.05),波幅明显提高(P<0.05);与脊髓康组比较,脊髓康联合电针组大鼠SEP及MEP的波幅明显提高(P<0.05),SEP潜伏期明显缩短(P<0.05)。与模型组比较,脊髓康组及脊髓康联合电针组大鼠的脊髓损伤显著减轻,其中脊髓康联合电针组效果最为显著。结论:脊髓康联合电针夹脊穴可明显改善SCI大鼠诱发电位和脊髓组织病理变化。 展开更多
关键词 脊髓康 电针 针药并举 脊髓损伤 诱发电位 脊髓组织结构 大鼠
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针灸-创伤性脊髓损伤治疗与康复简况 被引量:3
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作者 张姗姗 谭继鸿 +4 位作者 黄彬洋 柯晓华 陈莎莎 袁青 张安仁 《实用中医内科杂志》 2016年第6期114-115,共2页
创伤性脊髓损伤严重影响身心健康和生存质量,针灸作为创伤性脊髓损伤治疗与康复辅助手段,作用机理尚不明确,选穴标准缺乏统一。实验研究提示针灸(电针)可产生电流刺激、脊髓诱发电位,改善脊髓组织结构,调整脊髓酶、脊髓活性物质、脊髓... 创伤性脊髓损伤严重影响身心健康和生存质量,针灸作为创伤性脊髓损伤治疗与康复辅助手段,作用机理尚不明确,选穴标准缺乏统一。实验研究提示针灸(电针)可产生电流刺激、脊髓诱发电位,改善脊髓组织结构,调整脊髓酶、脊髓活性物质、脊髓血流量;有临床报告选穴督脉、夹脊穴、病灶上下各一对夹脊穴、损伤平面下神经丛和神经干周穴位等参与创伤性脊髓损伤治疗与康复。 展开更多
关键词 创伤性脊髓损伤 针灸 电针 实验研究 电流刺激 脊髓诱发电位 脊髓组织结构 脊髓酶 脊髓活性物质 脊髓血流 临床报告 督穴 夹脊穴 治疗 康复
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异育银鲫(Carassius auratus gibelio)脊髓组织细胞系的建立及对CyHV-2的敏感性 被引量:7
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作者 魏钰娟 潘晓艺 +7 位作者 蔺凌云 姚嘉赟 郝贵杰 曹铮 夏焱春 尹文林 刘忆瀚 沈锦玉 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期1232-1238,共7页
鲫造血器官坏死病是近些年来危害养殖鲫鱼最为严重的传染性疾病,其病原为鲤疱疹病毒Ⅱ型(Cyprinid herpesvirus 2, CyHV-2)。本研究以异育银鲫(Carassius auratus gibelio)脊髓组织为材料,进行组织细胞体外培养,构建对鲤疱疹病毒Ⅱ型敏... 鲫造血器官坏死病是近些年来危害养殖鲫鱼最为严重的传染性疾病,其病原为鲤疱疹病毒Ⅱ型(Cyprinid herpesvirus 2, CyHV-2)。本研究以异育银鲫(Carassius auratus gibelio)脊髓组织为材料,进行组织细胞体外培养,构建对鲤疱疹病毒Ⅱ型敏感的异育银鲫脊髓细胞系(Spinalcordtissuecell lines of Carassius auratus gibelio, CSC)。采用组织块移植法,进行异育银鲫脊髓细胞的原代培养,并进行传代,已传代至第128代次,获得稳定传代的细胞系后,采用低渗法进行细胞染色体核型分析,并进行鲤疱疹病毒Ⅱ型的敏感性测试与传代。结果表明,以含10%胎牛血清的L-15培养基,在24℃恒温条件下,可稳定传代培养异育银鲫脊髓细胞,传代细胞呈成纤维样或纺锤状;核型分析显示,染色体数为156±2条,该细胞为三倍体细胞。通过对CyHV-2敏感性的测试,CSC细胞感染CyHV-2后产生典型的细胞病变,感染第7天的病变细胞液的TCID50达到109.33/mL,CyHV-2病毒可在CSC细胞上稳定传代;通过对病变细胞的电镜观察,可见大量直径为128-134nm大小的疱疹样病毒颗粒。以上研究结果表明,本研究构建的异育银鲫脊髓细胞系对CyHV-2敏感,并在细胞上能进行稳定传代,传代病毒具有较高病毒滴度,这为鲤疱疹病毒Ⅱ型的深入研究及疫苗开发奠定了重要的基础。 展开更多
关键词 异育银鲫(Carassius auratus gibelio) 脊髓组织细胞系 鲤疱疹病毒Ⅱ型
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同种胚胎脊髓移植物对成年大鼠损伤脊髓组织形态与功能的修复作用 被引量:6
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作者 赵刚 廖维宏 +1 位作者 蔡锦方 张亚彬 《中华器官移植杂志》 CAS CSCD 1997年第2期98-100,共3页
探讨大鼠胚胎脊髓组织移植物对成年大鼠损伤脊髓组织形态与功能的修复作用。在半切洞损伤的成年大鼠脊髓内,植入大鼠胚胎脊髓组织,术后行联合行为记分、诱发电位及组织学检查。结果:移植物能在宿主脊髓损伤部位存活,并能生长、分化... 探讨大鼠胚胎脊髓组织移植物对成年大鼠损伤脊髓组织形态与功能的修复作用。在半切洞损伤的成年大鼠脊髓内,植入大鼠胚胎脊髓组织,术后行联合行为记分、诱发电位及组织学检查。结果:移植物能在宿主脊髓损伤部位存活,并能生长、分化、修复宿主脊髓的组织损伤,诱导宿生神经纤维联系的重建,改善宿主损伤脊髓的神经传导,促进功能恢复。以上结果提示:胚胎脊髓移植物对成年大鼠损伤脊髓组织形态与功能均具有修复作用。 展开更多
关键词 脊髓移植 胚胎脊髓组织 脊髓损伤与修复
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神经干细胞与脊髓脱细胞支架体外共培养的可行性 被引量:1
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作者 漆国栋 江琼 +3 位作者 伍亚民 申开琴 杨琴 漆伟 《中国康复理论与实践》 CSCD 北大核心 2021年第1期71-78,共8页
目的观察大鼠神经干细胞(NSCs)在脊髓脱细胞支架(SCAS)上黏附、生长和分化情况,评价其构建脊髓组织工程的可行性。方法新生Sprague-Dawley大鼠大脑皮质来源NSCs传代培养并鉴定;Sprague-Dawley雌性大鼠脊髓组织改良物理振荡结合化学萃取... 目的观察大鼠神经干细胞(NSCs)在脊髓脱细胞支架(SCAS)上黏附、生长和分化情况,评价其构建脊髓组织工程的可行性。方法新生Sprague-Dawley大鼠大脑皮质来源NSCs传代培养并鉴定;Sprague-Dawley雌性大鼠脊髓组织改良物理振荡结合化学萃取法制备SCAS,并行基础评估;将第三代NSCs种植在SCAS上,体外共培养,免疫荧光、免疫组化和扫描电镜观察支架上细胞形态。结果共培养的细胞为能增殖、分化的NSCs。制备的SCAS孔隙率、含水率、酶解率都明显高于正常脊髓(|t|>4.679,P<0.01);SCAS基质结构呈疏松网络状,基质上可见极少量残留细胞核。NSCs在SCAS上黏附、生长良好,可分化为神经元和神经胶质细胞。结论制备的SCAS脱细胞较彻底,具有多通道空间结构,适合NSCs黏附、生长和分化,可用于脊髓组织工程。 展开更多
关键词 脊髓损伤 神经干细胞 脊髓脱细胞支架 体外共培养 脊髓组织工程
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种子细胞与生物支架在脊髓组织工程中的实验研究进展 被引量:1
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作者 漆国栋 江琼 +1 位作者 伍亚民 漆伟 《中国康复理论与实践》 CSCD 北大核心 2021年第6期677-686,共10页
目的以脊髓组织工程中的种子细胞和生物支架存在的问题为切入点,综述近期实验研究进展。方法检索建库至2021年3月中国知网、万方、PubMed和Web of Science数据库中的相关文献,并对种子细胞、生物支架和种子细胞-生物支架复合的问题及进... 目的以脊髓组织工程中的种子细胞和生物支架存在的问题为切入点,综述近期实验研究进展。方法检索建库至2021年3月中国知网、万方、PubMed和Web of Science数据库中的相关文献,并对种子细胞、生物支架和种子细胞-生物支架复合的问题及进展进行综述。结果种子细胞的问题在于致癌性、免疫排斥、伦理道德和移植后低存活率与分化率,现研究多集中于探索新细胞种类、基因转染、多细胞共移植和移植前预处理。生物支架的问题在于单一材料选择无法同时满足不同需求,且传统工艺也无法更好地模拟脊髓内部结构,因此,新型复合材料与新工艺成为研究热点。种子细胞-生物支架复合的核心问题在于不同种子细胞与生物支架复合的效果不一,现研究多致力于持续探索适宜的新复合模式,并尝试引入生物制剂等因素。结论脊髓组织工程有潜力彻底改变脊髓损伤治疗路径,现阶段实验研究主要以解决脊髓组织工程中的种子细胞与生物支架各自问题作为基础,进而深入探索二者适宜的复合模式,以此为临床应用提供更多基础证据。 展开更多
关键词 脊髓组织工程 脊髓损伤 种子细胞 生物支架 实验研究 综述
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夹脊电针对脊髓损伤大鼠脊髓病理形态及死亡受体6表达的影响
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作者 梁雪松 阎路达 +3 位作者 王舢泽 张瑜 周鹏 符文彬 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2023年第5期1681-1688,共8页
目的观察夹脊电针对脊髓损伤(SCI)大鼠脊髓病理形态及死亡受体6表达变化的影响,分析夹脊电针改善SCI的机制。方法健康成年SD雌性大鼠分为假手术组(Sham组)、假手术+电针组(Sham+EA组)、模型组(Model组)、模型+电针组(Model+EA组),每组6... 目的观察夹脊电针对脊髓损伤(SCI)大鼠脊髓病理形态及死亡受体6表达变化的影响,分析夹脊电针改善SCI的机制。方法健康成年SD雌性大鼠分为假手术组(Sham组)、假手术+电针组(Sham+EA组)、模型组(Model组)、模型+电针组(Model+EA组),每组6只。采用钳夹方式制作SCI模型,给予相应干预方式,各组大鼠一同捆绑,常规饲养,假手术组:仅打开椎板;Sham+EA组:仅打开椎板,给予电针干预;Model组:按手术操作造模。Model+EA组:按手术操作造模,同时给予电针干预,治疗7天。采用运动功能评分(Basso,Beattie&Bresnahan,BBB)对大鼠后肢运动功能进行评分;肉眼及HE染色观察脊髓组织形态和病理变化;采取蛋白免疫印迹(Western blot)检测各组大鼠脊髓组织中死亡受体6(DR6)蛋白及少突胶质细胞标志蛋白CNpase表达差异;采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测各组大鼠脊髓组织中DR6 mRNA表达水平差异。结果BBB评分结果示:与Sham组比较,Model组BBB评分显著降低(P<0.05),与Model组比较,Model+EA组BBB评分升高(P<0.05)。肉眼及HE染色观察脊髓形态结果示:Model组脊髓组织损伤段可见大面积淤血现象,组织结构破坏严重;光镜下可见Model组脊髓组织疏松严重,灰白质界限隐约可见,存在部分出血灶,大量炎症浸润,胶质细胞增生,灰质内有神经元残存,核浓缩,体积变小甚至消失,白质内可见大量空泡细胞。Model+EA组脊髓组织损伤段淤血面积及结构破坏程度明显轻于Model组,光镜下出血点减少,淋巴细胞浸润少于Model组,神经细胞出现修复,出现一定量髓鞘再生。Western blot检测脊髓组织DR6表达变化结果示:Model组大鼠脊髓组织DR6蛋白表达显著升高(P<0.05)。经治疗7天后,Model+EA组DR6蛋白表达低于Model组(P<0.05);Model组大鼠脊髓组织CNpase蛋白表达显著降低(P<0.05)。经治疗7天后,Model+EA组CNpase蛋白表达高于Model组(P<0.05);Real-time PCR检测脊髓组织DR6 mRNA表达� 展开更多
关键词 脊髓损伤 夹脊电针 脊髓病理形态 死亡受体6
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胚胎脊髓组织移植促进成年宿主损伤脊髓功能恢复的研究 被引量:1
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作者 赵刚 蔡锦方 +1 位作者 张亚彬 廖维宏 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第2期170-171,共2页
目的探讨胚胎脊髓组织移植促进成年宿主损伤脊髓功能恢复的作用。方法采用成年大鼠脊髓半切洞损伤模型,移植胚胎大鼠脊髓组织,术后进行联合行为计分(CBS)、体感诱发电位(SEP)、运动诱发电位(MEP)和性行为及生育机能检查。结果移植组CBS... 目的探讨胚胎脊髓组织移植促进成年宿主损伤脊髓功能恢复的作用。方法采用成年大鼠脊髓半切洞损伤模型,移植胚胎大鼠脊髓组织,术后进行联合行为计分(CBS)、体感诱发电位(SEP)、运动诱发电位(MEP)和性行为及生育机能检查。结果移植组CBS与对照组比较相差显著(P<0.05),移植术后4周以内两者相差非常显著(P<0.0l);移植组SEP、MEP早期反应的峰潜伏时恢复优于对照组(P<0.05);术后4~12周75%的雌鼠阴道涂片检出精子并能正常生育。结论胚胎脊髓移植能促进成年宿主损伤脊髓的功能恢复。 展开更多
关键词 胚胎脊髓组织移植 成年 宿主 脊髓功能 脊髓损伤
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绿荧光蛋白基因修饰的大鼠骨髓间充质干细胞复合聚丙交酯-乙交酯膜的形态学观察 被引量:2
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作者 刘文革 林海淋 《中国综合临床》 2010年第6期620-623,共4页
目的 观察绿荧光蛋白(GFP)基因修饰的大鼠骨髓间充质干细胞(rMSCa)与聚丙交酯-乙交酯(PLGA)膜材料复合培养,为后续种子细胞.基因-支架材料-神经营养因子复合方法构建组织工程化脊髓的可行性提供依据.方法 GFP的过表达慢病毒载体(... 目的 观察绿荧光蛋白(GFP)基因修饰的大鼠骨髓间充质干细胞(rMSCa)与聚丙交酯-乙交酯(PLGA)膜材料复合培养,为后续种子细胞.基因-支架材料-神经营养因子复合方法构建组织工程化脊髓的可行性提供依据.方法 GFP的过表达慢病毒载体(lv-GFP)转染的rMSCs-GFP按8000个细胞/cm2与PLGA膜材料复合培养,以普通培养板上的rMSC-GFP作为对照;荧光显微镜下观察细胞的形态学特性,噻唑蓝法测定每天细胞的生长增殖情况;流式细胞仪测定PLGA膜材料上第3天rMSCs-GFP的细胞周期,用FTTC标记的抗体CD34、CD90和用PE标记的抗CD44、CD106、CD45、CD11b对在膜材料上培养的第3天rMSCs-GFP进行流式细胞鉴定.结果 rMSCs-GFP在PLGA膜上贴壁生长,绝大多数MSCs可见绿色荧光,为成纤维细胞样形态,散在分布,第3天时细胞增多,开始变为多角形,第7天时细胞基本铺满膜,多为多角形和短梭形,与普通培养板上细胞相似,细胞的生长增殖在PLGA膜上与培养板上大致相同,细胞周期也大致相同[G1期细胞占89.7%,132期细胞占3.3%,S期细胞占7.0%,差异无统计学意义(P〉0.05)],细胞在PLGA膜上高表达CDg0(99.48%)、CD44(95.25%)、CDl06(77.12%).结论 骨髓间充质干细胞是脊髓组织工程适宜的种子细胞,重组GFP的过表达慢病毒感染的后的MSCs与PLGA膜材料具有良好的组织相容性,可进一步复合方法体外构建组织工程脊髓. 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 绿荧光蛋白 聚丙交酯-乙交酯 脊髓组织工程
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人端粒酶反转录酶重组绿色荧光表达载体转染椎间盘正常髓核细胞 被引量:1
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作者 吴劲风 叶冬平 +1 位作者 戴丽冰 梁伟国 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2013年第2期259-263,共5页
背景:椎间盘髓核细胞分离培养困难,老化较快,迫切需要一种标准细胞株用于实验研究。目的:探讨人端粒酶反转录酶重组绿色荧光表达载体的构建及其转染正常髓核细胞构建永生化细胞的可行性研究。方法:通过目的基因克隆、真核表达质粒中目... 背景:椎间盘髓核细胞分离培养困难,老化较快,迫切需要一种标准细胞株用于实验研究。目的:探讨人端粒酶反转录酶重组绿色荧光表达载体的构建及其转染正常髓核细胞构建永生化细胞的可行性研究。方法:通过目的基因克隆、真核表达质粒中目的基因序列测定、目的基因真核表达质粒的构建、转染人端粒酶反转录酶表达检测等步骤进行实验。结果与结论:构建出人端粒酶反转录酶重组绿色荧光表达载体,成功转染正常髓核细胞并在细胞中稳定表达。结果表明运用人端粒酶反转录酶转染椎间盘髓核细胞构建永生化细胞是一种可行的方法。 展开更多
关键词 组织构建 脊柱组织构建 髓核细胞 人端粒酶反转录酶基因 DH5α感受态大肠肝菌 转染 永生化 目的基因 髓核细胞转染退行性椎间盘病 省级基金 组织构建图片文章
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一种直接破坏蟾蜍(蛙)脑和脊髓的新方法 被引量:1
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作者 常燕琴 高洪波 +3 位作者 王兴宇 应康 王立军 宋芳 《包头医学院学报》 CAS 2021年第11期104-106,共3页
破坏蟾蜍(蛙)脑和脊髓方法是机能实验学课程中常用的基本实验操作技能之一,其传统法是通过枕骨大孔先后破坏脑和脊髓组织达到处死蟾蜍(蛙)目的,此种方法很大程度上凭感觉和经验才能一次成功,对于初学者来说,往往一次成功率很低。本文介... 破坏蟾蜍(蛙)脑和脊髓方法是机能实验学课程中常用的基本实验操作技能之一,其传统法是通过枕骨大孔先后破坏脑和脊髓组织达到处死蟾蜍(蛙)目的,此种方法很大程度上凭感觉和经验才能一次成功,对于初学者来说,往往一次成功率很低。本文介绍的直接法可一次性直接将脑和脊髓完全破坏,简单易行,成功率高,适于教学中推广应用。 展开更多
关键词 机能实验 破坏脑和脊髓 处死蟾蜍(青蛙)
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T10脊髓损伤后T10~L2脊髓组织中差异表达蛋白的生物信息学分析
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作者 唐丽亚 瞿启睿 +6 位作者 吴霞 龙轶映 许明 张泓 刘琼 艾坤 周璐 《湖南中医药大学学报》 CAS 2022年第8期1289-1299,共11页
目的利用TMT标记定量蛋白质组学技术筛选出T10脊髓损伤后T10~L2脊髓组织的差异表达蛋白(differentially expressed proteins,DEPs)并对其进行生物信息学分析,以期挖掘出T10脊髓损伤后膀胱颈功能障碍(bladder neck dysfunction,BND)的潜... 目的利用TMT标记定量蛋白质组学技术筛选出T10脊髓损伤后T10~L2脊髓组织的差异表达蛋白(differentially expressed proteins,DEPs)并对其进行生物信息学分析,以期挖掘出T10脊髓损伤后膀胱颈功能障碍(bladder neck dysfunction,BND)的潜在治疗靶点。方法40只大鼠采用随机数字表法分为假手术组(12只)和造模组(28)只,造模组28只大鼠采用Hassan Shaker脊髓横断法制备T10脊髓损伤模型,从符合要求的模型大鼠中随机抽取12只作为模型组。所有大鼠行尿流动力学检测和HE染色,采用TMT检测出T10~L2脊髓组织中表达的蛋白质,将差异倍数(fold change,FC)>1.2或<1/1.2、P<0.05、unique peptide≥2的蛋白质定义为DEPs,使用KOBAS 3.0对DEPs进行京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析。利用STRING及Cytoscape软件构建蛋白质-蛋白质相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络,利用cytoHubba插件及DEPs的度(Degree)值筛选出排名前35位的关键DEPs,并通过GluGO插件对35个关键DEPs所参与的生物过程进行分析。结果与假手术组相比,模型组大鼠漏尿点压力和最大膀胱容量明显增大(P<0.01);HE染色结果显示,模型组膀胱颈组织中出现炎细胞浸润,平滑肌壁增厚;模型组T10~L2脊髓组织出现神经元崩解,坏死后空洞形成,神经胶质细胞增生。TMT结果显示,在T10~L2脊髓组织中共筛选出了151个DEPs,其中84个蛋白上调、67个蛋白下调;KEGG分析发现151个DEPs,主要参与趋化因子信号通路、NOD-样受体信号通路、细胞坏死、细胞凋亡、多巴胺能神经突触和谷氨酸能突触等16条信号通路。35个关键DEPs主要参与了巨噬细胞活化、神经胶质细胞的激活、小胶质细胞的激活和神经炎症反应等生物过程。结论T10脊髓损伤后,T10~L2脊髓组织中C1qa、Clu、Snca、Pycard、Glul、Capn1、Ctsz和Ctsd可能是降低脊髓继发性损伤风险的潜在治疗靶点;T10~L2脊髓 展开更多
关键词 脊髓损伤 T10~L2脊髓组织 膀胱颈功能障碍 TMT标记定量蛋白质组学 生物信息学 差异表达蛋白 多巴胺能突触 谷氨酸能突触
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骨髓间充质干细胞移植对正己烷中毒大鼠脊髓神经组织的修复作用
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作者 李思 孙经淞 《大连医科大学学报》 CAS 2023年第2期106-112,共7页
目的探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对正己烷中毒大鼠脊髓神经组织的修复作用。方法将健康成年雄性SD大鼠随机分成5组,每组20只。分别为:对照组(control)、干细胞对照组(BMSCs)、染毒组(HD)、自身修复组(HD+NS)和干细胞干预染毒组(HD+... 目的探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对正己烷中毒大鼠脊髓神经组织的修复作用。方法将健康成年雄性SD大鼠随机分成5组,每组20只。分别为:对照组(control)、干细胞对照组(BMSCs)、染毒组(HD)、自身修复组(HD+NS)和干细胞干预染毒组(HD+BMSCs)。对照组腹腔注射生理盐水,10周后处死动物。BMSCs组腹腔注射生理盐水5周后,行尾静脉干细胞移植术,5周后处死动物。HD组按400 mg/kg剂量,对大鼠腹腔注射2,5-己二酮(2,5-hexanedione,HD),每周1次,持续注射5周后,处死动物。HD+NS组对大鼠腹腔注射HD 5周后,经尾静脉注射生理盐水1 mL,5周后处死动物。HD+BMSCs组对大鼠腹腔注射HD 5周后,经尾静脉行干细胞移植,5周后处死动物。实验5周后观察大鼠的一般状态并进行步态评分。透射电镜观察处死后大鼠脊髓神经组织超微结构。MAP-2和SMI312双标记免疫荧光染色和LFB染色观察大鼠脊髓神经组织轴突和髓鞘变化。结果HD+NS组大鼠一般状态差、精神萎靡、无法站立、呈瘫痪状,步态评分为(4±0.38)分,属严重异常。HD+BMSCs组大鼠在BMSCs移植2周后,大鼠精神状态明显提升、摄食量升高,随着移植时间的延长,大鼠步态逐渐改善。电镜结果显示,HD中毒大鼠移植BMSCs后,脊髓神经组织可见新生轴突。SMI312和MAP2免疫荧光双染可见,BMSCs移植后神经元的SMI312免疫荧光强度明显增强。髓鞘LFB染色结果显示HD中毒大鼠脊髓组织髓鞘脱失、板层疏松,而BMSCs移植后,大鼠脊髓神经组织髓鞘结构趋于正常。结论BMSCs移植可显著改善HD中毒大鼠的神经行为、修复HD中毒大鼠脊髓神经组织受损的轴突和髓鞘。 展开更多
关键词 正己烷 间充质干细胞 脊髓神经组织 移植
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