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C57BL/6J小鼠耳蜗钾离子转运蛋白KCNQ1和NKCC1的年龄相关性表达及其与听力的关系 被引量:5
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作者 李建玲 褚汉启 +7 位作者 周良强 熊浩 王燕 陈请国 陈金 李志勇 刘云 崔永华 《中华耳鼻咽喉头颈外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期139-143,共5页
目的观察钾离子转运蛋白KCNQ1和Na-K-2C1联合转运子1(Na—K-2C1CO—transporter1,NKCC1)在C57BL/6J小鼠耳蜗侧壁的年龄相关.陛表达,探讨这两种转运蛋白在年龄相关性听力减退发病中的作用。方法通过听性脑干反应(ABR)检测C57BL... 目的观察钾离子转运蛋白KCNQ1和Na-K-2C1联合转运子1(Na—K-2C1CO—transporter1,NKCC1)在C57BL/6J小鼠耳蜗侧壁的年龄相关.陛表达,探讨这两种转运蛋白在年龄相关性听力减退发病中的作用。方法通过听性脑干反应(ABR)检测C57BL/6J小鼠各年龄段(4、8、14、24、40周龄)的听力变化。应用免疫组化法确定KCNQ1和NKCC1在C57BL/6J小鼠耳蜗中的表达定位,并检测各年龄段小鼠耳蜗中两种转运蛋白含量随着年龄增加的表达变化。采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测KCNQ1和NKCC1的mRNA在不同鼠龄小鼠耳蜗中的表达水平。结果随着C57BL/6J小鼠年龄的增加,其ABR反应阈值逐渐升高,4周龄小鼠的短声(click)和4kHz、8kHz的ABR反应阈值与8周龄小鼠相比,差异均无统计学意义(P值均〉0.05);14周龄后,三种刺激声的ABR反应阈逐渐升高,与低龄组小鼠相比其差异均具有统计学意义(P值均〈0.05)。KCNQ1蛋白主要表达于耳蜗血管纹的边缘细胞顶膜,而NKCC1蛋白主要表达于血管纹边缘细胞、螺旋韧带的Ⅱ型纤维细胞及螺旋缘下的纤维细胞。随着年龄的增加,血管纹KCNQ1和NKCC1蛋白的表达逐渐减少。KCNQ1和NKCC1mRNA的表达量也随着年龄的增加呈现减少的趋势。结论C57BL/6J小鼠随着年龄的增加其听力逐渐下降。KCNQ1和NKCC1两种钾离子转运蛋白随着小鼠年龄的增加逐渐减少;KCNQ1和NKCC1mRNA表达水平亦呈现随年龄增加而逐渐减少的趋势。耳蜗侧壁KCNQ1和NKCC1可能在年龄相关性听力减退的发生中起一定作用。 展开更多
关键词 老年性聋 KCNQ1钾通道 钠钾氯化物协同转运子 诱发电位 听觉 脑干 小鼠 近交C57BL
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电针对紫杉醇诱导大鼠神经病理性疼痛的影响
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作者 欧阳杰 赵海倩 +3 位作者 孔云 牛钦 陈莹 思永玉 《天津医药》 CAS 2024年第11期1141-1146,共6页
目的观察电针(EA)对紫杉醇诱导神经病理性疼痛大鼠脊髓背角NKCC1、KCC2表达和小胶质细胞活化的影响及其可能机制。方法将48只雄性SD大鼠随机分为溶媒组(Vehicle组)、紫杉醇组(PTX组)、紫杉醇+电针组(PTX+EA组)、紫杉醇+假电针组(PTX+Sha... 目的观察电针(EA)对紫杉醇诱导神经病理性疼痛大鼠脊髓背角NKCC1、KCC2表达和小胶质细胞活化的影响及其可能机制。方法将48只雄性SD大鼠随机分为溶媒组(Vehicle组)、紫杉醇组(PTX组)、紫杉醇+电针组(PTX+EA组)、紫杉醇+假电针组(PTX+Sham EA组),每组12只。采用腹腔注射PTX的方法建立PTX诱导的神经病理性疼痛大鼠动物模型,建模完成后,PTX+EA组给予“足三里”、“阳陵泉”电针刺激,连续7 d。于紫杉醇注射前2 d和注射后第1、3、5、7、14、21天进行机械撤足阈值和热缩足潜伏期痛行为学测试。利用免疫荧光染色技术和Western blot技术检测脊髓背角组织中钠钾氯联合转运蛋白1(NKCC1)、钾氯联合转运蛋白2(KCC2)和小胶质细胞标志物离子钙结合衔接分子1(Iba1)表达的变化。结果与Vehicle组比较,PTX组大鼠出现双后足机械和热痛觉过敏,脊髓背角组织中NKCC1表达升高和活化的小胶质细胞数增加。与PTX组比较,PTX+EA组大鼠在第14、21天的机械和热痛觉过敏得到显著改善,脊髓背角组织中NKCC1和Iba1表达量降低,4组间KCC2表达差异无统计学意义。结论电针可有效缓解紫杉醇诱导的神经病理性疼痛,其机制可能与抑制大鼠脊髓背角组织中NKCC1表达和小胶质细胞活化有关。 展开更多
关键词 电针 紫杉醇 神经痛 脊髓背角 小神经胶质细胞 钠钾氯化物协同转运子 神经病理性疼痛
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耳蜗血管纹钾钠氯化合物协同转运子对年龄相关性听力下降的影响 被引量:2
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作者 褚汉启 熊浩 +5 位作者 崔永华 黄孝文 韩方 吴振恭 周良强 孔维佳 《中华老年医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期219-223,共5页
目的 观察具有年龄相关性听力下降(age-related hearing loss,AHL)特点的不同周龄C57BL/6J鼠和钾钠氯化合物协同联合转运子-1(Na-K-2Cl cotransporter-1,NKCC1)基因敲除鼠年龄相关性听力改变与耳蜗血管纹NKCC1表达的情况,并检... 目的 观察具有年龄相关性听力下降(age-related hearing loss,AHL)特点的不同周龄C57BL/6J鼠和钾钠氯化合物协同联合转运子-1(Na-K-2Cl cotransporter-1,NKCC1)基因敲除鼠年龄相关性听力改变与耳蜗血管纹NKCC1表达的情况,并检测不同龄的NKCC1^+/-杂合子小鼠耳蜗NKCC1蛋白表达及耳蜗扫描电镜形态变化,研究血管纹NKCC1在老年性聋发病中的作用。方法 应用听性脑于反应(ABR)分别检测4、8、16、32、48、60周龄组C57BL/6J小鼠和两种基因型NKCC1小鼠的听力,采用免疫组化法观察其血管纹NKCC1表达的变化,同时采用免疫印迹杂交(Western Blot)检测不同周龄小鼠耳蜗的NKCC1蛋白的含量,扫描电镜观察不同周龄小鼠的耳蜗基底膜结构。结果 C57BL/6J小鼠随鼠龄增加而出现听力下降,自16周龄时ABR阈值出现显著性增高(P〈0.05);血管纹NKCC1蛋白表达也呈现随鼠龄增加而逐步减低,其灰度值自16周龄时显著增高(P〈0.01)。NKCC1^+/-杂合子鼠的听力随鼠龄增长而逐渐下降,老龄小鼠的ABR阈值与其低龄时相比,阈值显著性升高(P〈0.05)。老龄小鼠的耳蜗NKCC1蛋白含量低于低龄小鼠,老龄NKCC1^+/-小鼠的耳蜗底回外毛细胞(OHC)出现散在性点状缺失。结论 AHL小鼠血管纹NKCC1蛋白表达随年龄增长而减少,显示与AHL相关,老年性聋的发病可能与血管纹NKCC1通道蛋白的遗传特性及功能有关。 展开更多
关键词 耳蜗 老年性聋 钾钠氯化合物协同转运子
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氯离子转运通道在人视网膜色素上皮细胞吞噬过程中的作用
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作者 梁巍 郑雅娟 辛华 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期1-4,F0002,共5页
目的:探讨丁脲胺或DNDS作用下视网膜色素上皮(RPE)细胞顶端膜和基底膜上氯离子转运通道对RPE吞噬功能的影响,阐明氯离子转运通道参与PRE吞噬作用的机制。方法:利用微孔滤膜培养系统体外培养极性化单层RPE细胞,以荧光包被的乳胶株作为吞... 目的:探讨丁脲胺或DNDS作用下视网膜色素上皮(RPE)细胞顶端膜和基底膜上氯离子转运通道对RPE吞噬功能的影响,阐明氯离子转运通道参与PRE吞噬作用的机制。方法:利用微孔滤膜培养系统体外培养极性化单层RPE细胞,以荧光包被的乳胶株作为吞噬标记物,建立RPE细胞吞噬模型,分别以1、5、10、50、100、500和1000μmol.L-1丁脲胺,以及0.01、0.10、0.50、1.00、3.00、5.00和10.00mmol.L-1DNDS作用RPE细胞6h后,应用流式细胞仪定量检测RPE细胞吞噬指数。结果:不同浓度丁脲胺作用于RPE细胞顶端膜或基底膜,RPE细胞对乳胶株的吞噬指数与对照组比较差异无显著性(P>0.05);0.01和0.10μmol.L-1DNDS作用于RPE细胞基底膜,RPE细胞对乳胶株的吞噬指数与对照组比较差异无显著性(P>0.05),而0.50、1.00、3.00、5.00、10.00mmol.L-1的DNDS作用于RPE细胞基底膜,RPE细胞对乳胶株的吞噬指数降低(P<0.05或P<0.01),并随着浓度的增加,吞噬指数逐渐降低;但同样浓度的DNDS作用于RPE细胞顶端膜,RPE细胞对乳胶株的吞噬指数无明显改变(P>0.05)。结论:顶端膜的丁脲胺敏感性Na+-K+-2Cl-协同转运载体不参与RPE吞噬乳胶株的过程,而基底膜的DNDS敏感性Cl-/HCO3-交换蛋白及氯离子通道在DNDS作用后,对人RPE细胞非特异性吞噬过程发挥抑制作用。 展开更多
关键词 视网膜色素上皮细胞 吞噬作用 钠钾氯化物协同转运子 阴离子交换蛋白 离子通道
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