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无机砷对肝细胞转录因子Nrf2及其调控蛋白表达影响 被引量：5
1
作者 刘丹 李冰 +4 位作者 董丹丹 邢晓越 王欣 李昕 孙贵范 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1188-1190,共3页
目的探讨不同时间和不同浓度亚砷酸钠(NaAsO2)暴露对Chang肝细胞株NF-E2相关因子2(Nrf2)、及其调控的下游抗氧化酶NAD(P)H:醌氧化还原酶1(NQO1)和血红素单加氧酶-1(HO-1)蛋白表达的影响。方法25μmol/L NaAsO2作用Chang肝细胞2、4、6、1... 目的探讨不同时间和不同浓度亚砷酸钠(NaAsO2)暴露对Chang肝细胞株NF-E2相关因子2(Nrf2)、及其调控的下游抗氧化酶NAD(P)H:醌氧化还原酶1(NQO1)和血红素单加氧酶-1(HO-1)蛋白表达的影响。方法25μmol/L NaAsO2作用Chang肝细胞2、4、6、12和24 h;或不同浓度的NaAsO2(10、25和50μmol/L)作用Chang肝细胞6 h,免疫印迹法(western blot)检测细胞内Nrf2、NQO1和HO-1的蛋白表达情况。结果 25μmol/L的NaAsO2可以明显诱导Chang肝细胞Nrf2、NQO1和HO-1的蛋白表达(P<0.01);Nrf2蛋白2 h开始明显诱导,4 h表达水平最高,此后随暴露时间的延长虽然表达有所下降,但持续至24 h仍明显高于对照组;NQO1的蛋白表达水平也从4 h开始增加并持续至24 h;HO-1的蛋白表达则从6 h开始明显诱导,且随暴露时间的继续延长表达持续上升,具有明显的时间-效应关系;10、25和50μmol/L NaAsO2染毒6 h,Nrf2、NQO1和HO-1的蛋白表达均随染毒剂量的增加而大量诱导,具有明显的剂量-效应关系(P<0.01)。结论 NaAsO2暴露能够诱导Chang肝细胞Nrf2、NQO1和HO-1蛋白表达增强,且具有一定的剂量-效应关系。 展开更多
关键词 Chang肝细胞株 亚砷酸钠(naaso2) 转录因子Nrf2 血红素单加氧酶-1(HO-1) NAD(P)H:醌氧化还原酶1(NQO1)
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亚砷酸钠所致L-02人肝细胞损伤与p14ARF表达下调及MDM2、 p53表达增加有关 被引量：4
2
作者 王甜 赵哲仪 +2 位作者 穆银贵 谢婷婷 罗昭逊 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期507-512,共6页
目的研究亚砷酸钠(NaAsO2)致L-02人肝细胞损伤过程中p14可变读框(p14ARF)、鼠双微基因2(MDM2)和p53的表达变化。方法用(0、5、10、15、20、25)μmol/L NaAsO2分别处理L-02细胞48 h,相差显微镜观察细胞形态变化,CCK-8法检测细胞增殖,异... 目的研究亚砷酸钠(NaAsO2)致L-02人肝细胞损伤过程中p14可变读框(p14ARF)、鼠双微基因2(MDM2)和p53的表达变化。方法用(0、5、10、15、20、25)μmol/L NaAsO2分别处理L-02细胞48 h,相差显微镜观察细胞形态变化,CCK-8法检测细胞增殖,异硫氰酸荧光素标记的膜联素Ⅴ/碘化丙啶(annexinⅤ-FITC/PI)双标记结合流式细胞术检测细胞凋亡,实时荧光定量PCR和Western blot法分别检测p14ARF、MDM2和p53 mRNA及蛋白表达。结果与对照组相比,随着NaAsO2浓度增加,染砷组L-02肝细胞增殖活性逐渐降低,细胞凋亡率逐渐升高,p14ARF mRNA及蛋白水平逐渐降低,MDM2 mRNA及蛋白水平逐渐升高,p53 mRNA水平变化不明显,p53蛋白水平逐渐升高。结论NaAsO2所致L-02肝细胞损伤可能与p14ARF表达下调及p53、MDM2表达的上调有关。 展开更多
关键词 亚砷酸钠(naaso2) L-02肝细胞 p14可变读框(p14ARF) 鼠双微基因2(MDM2) P53
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低剂量长期砷暴露对HaCat细胞周期及周期蛋白影响 被引量：3
3
作者 刘世宜 李昕 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期1190-1192,共3页
目的探讨低剂量长期砷暴露对人皮肤角质形成细胞系HaCat细胞周期及周期蛋白D1(cyclin D1)和p21影响。方法 HaCat细胞暴露于浓度为0、0.05、0.1μmol/L的NaAsO215周后,用流式细胞仪测定10 000个细胞的细胞周期分布;用western blot法检测... 目的探讨低剂量长期砷暴露对人皮肤角质形成细胞系HaCat细胞周期及周期蛋白D1(cyclin D1)和p21影响。方法 HaCat细胞暴露于浓度为0、0.05、0.1μmol/L的NaAsO215周后,用流式细胞仪测定10 000个细胞的细胞周期分布;用western blot法检测细胞cyclin D1和p21的蛋白表达水平。结果与对照组比较,NaAsO2染毒组细胞的G0/G1期细胞数明显增高,S期细胞数明显降低,而G2/M期无明显变化;0.05、0.1μmol/L砷染毒组细胞内cyclin D1表达水平分别为(152.40±8.17)%、(145.59±2.89)%,与对照组[(99.99±1.13)%]比较,均明显增高;0.05、0.1μmol/L砷染毒组细胞内p21表达水平分别为(64.06±1.62)%、(39.57±1.82)%,均明显低于对照组的(99.9±2.83)%,呈剂量效应关系(P<0.05)。结论长期低剂量砷暴露可诱导HaCat细胞周期异常,cyclin D1表达上升,p21表达下降。 展开更多
关键词 亚砷酸钠(naaso2) HaCat细胞株 细胞周期 周期蛋白D1(cyclin D1) p21
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低剂量长期砷暴露对HaCat细胞增殖及凋亡水平的影响 被引量：2
4
作者 刘世宜 李昕 《中国地方病防治》 2013年第1期1-3,共3页
目的探讨低剂量长期砷暴露对HaCat细胞增殖及凋亡水平的影响。方法 HaCat细胞暴露于浓度为0、0.05、0.10μmol/L的NaAsO215周后,用直接细胞计数法计数对照组及染砷组细胞数,检测细胞增殖水平;用流式细胞仪测定10 000个细胞的细胞凋亡发... 目的探讨低剂量长期砷暴露对HaCat细胞增殖及凋亡水平的影响。方法 HaCat细胞暴露于浓度为0、0.05、0.10μmol/L的NaAsO215周后,用直接细胞计数法计数对照组及染砷组细胞数,检测细胞增殖水平;用流式细胞仪测定10 000个细胞的细胞凋亡发生水平。结果各染砷组细胞增殖速率与对照组相比均显著增高(P<0.05),且0.10μmol/L组细胞增殖率(245.00±8.66)%显著高于0.05μmol/L组(165.00±15.00)%(P<0.05),细胞增殖水平与染砷剂量间呈显著剂量-效应关系;0.05μmol/L组(0.28±0.08)%及0.10μmol/L组(0.34±0.09)%细胞凋亡率均明显低于对照组(0.74±0.18)%(P<0.05)。结论长期低剂量砷暴露可使HaCat细胞的增殖能力明显增强,并诱导细胞凋亡率显著降低。 展开更多
关键词 亚砷酸钠(naaso2) HaCat细胞株 细胞增殖 细胞凋亡
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亚砷酸钠诱导SH-SY5Y细胞凋亡及硫化氢的干预作用 被引量：2
5
作者 潘际刚 吴昌学 +3 位作者 齐晓岚 范海琼 李成 朱卫 《贵州医科大学学报》 CAS 2020年第11期1255-1259,共5页
目的:探讨亚砷酸钠(NaAsO 2)对SH-SY5Y细胞凋亡的影响,同时观察硫化氢(H 2S)的干预作用。方法:将SH-SY5Y细胞按24 h、48 h各分为对照组、NaAsO 2(20μmol/L)组、NaAsO 2(40μmol/L)组、NaHS(400μmol/L)组、NaHS+NaAsO 2(20μmol/L)组及... 目的:探讨亚砷酸钠(NaAsO 2)对SH-SY5Y细胞凋亡的影响,同时观察硫化氢(H 2S)的干预作用。方法:将SH-SY5Y细胞按24 h、48 h各分为对照组、NaAsO 2(20μmol/L)组、NaAsO 2(40μmol/L)组、NaHS(400μmol/L)组、NaHS+NaAsO 2(20μmol/L)组及NaHS+NaAsO 2(40μmol/L)组,采用Hoechst33342/PI双染法、流式细胞术和Western blot检测各组细胞形态、细胞凋亡及相关蛋白改变。结果:荧光显微镜观察发现,与对照组比较,20和40μmol/L NaAsO 2暴露24 h或48 h均剂量依赖性增加细胞凋亡率,20或40μmol/L NaAsO 2仅暴露48 h增加的凋亡率可被NaHS所拮抗(P<0.05),而20或40μmol/L NaAsO 2暴露24 h对凋亡的增长却不被NaHS所拮抗(P>0.05);流式细胞术检测显示,与对照组比较,20、40μmol/L NaAsO 2预处理24或48 h均诱导SH-SY5Y细胞发生凋亡,且呈浓度依赖性效应(P<0.05),20或40μmol/L NaAsO 2仅作用48 h所诱导的凋亡可被NaHS所逆转(P<0.05),而20或40μmol/L NaAsO 2暴露24 h对凋亡的增长却不被NaHS所拮抗(P>0.05);Western blot提示,20或40μmol/L NaAsO 2暴露24 h能够剂量依赖性增加cleaved Caspase-12蛋白表达、且该作用被NaHS所拮抗(P<0.05),NaAsO 2可以降低Caspase-12蛋白表达、但不被NaHS所逆转(P>0.05)。结论:外源性H 2S能抑制NaAsO 2诱导的细胞凋亡,可能与降低激活的Caspase-12蛋白表达有关。 展开更多
关键词 硫化氢 细胞凋亡 亚砷酸钠 细胞形态 蛋白表达
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MST过表达及亚砷酸钠对SH-SY5Y细胞的影响 被引量：2
6
作者 潘际刚 吴昌学 +3 位作者 齐晓岚 范海琼 李成 朱卫 《贵州医科大学学报》 CAS 2020年第11期1265-1269,共5页
目的:探讨亚砷酸钠(NaAsO 2)、巯基丙酮酸硫转移酶(MST)基因过表达对SH-SY5Y细胞的作用及机制。方法:将空载体转染细胞、MST过表达细胞各分为对照组、NaAsO 2组、TUDCA(内质网应激阻断剂)组、NaAsO 2联合TUDCA组,采用MTT、Western blot... 目的:探讨亚砷酸钠(NaAsO 2)、巯基丙酮酸硫转移酶(MST)基因过表达对SH-SY5Y细胞的作用及机制。方法:将空载体转染细胞、MST过表达细胞各分为对照组、NaAsO 2组、TUDCA(内质网应激阻断剂)组、NaAsO 2联合TUDCA组,采用MTT、Western blot和酶活性检测等方法观察细胞活力、Bax、Bcl-2凋亡相关蛋白表达及Caspase-3活性。结果:50μmoL/L NaAsO 2暴露24 h显著降低空转组细胞活力和Bcl-2蛋白水平(P<0.01),增加Bax蛋白表达及Caspase-3活性(P<0.01);TUDCA预处理可以逆转以上变化,Bcl-2的蛋白表达则在MST基因过表达细胞砷暴露后发生显著增加,但可被TUDCA所拮抗(P<0.01)。结论:内质网应激可能参与砷、内源性H 2S对SH-SY5Y细胞损伤的影响。 展开更多
关键词 硫化氢 亚砷酸钠 巯基丙酮酸硫转移酶 细胞活力 蛋白表达
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急性砷暴露小鼠尿砷甲基化代谢的研究
7
作者 董丹丹 王欣 +3 位作者 赵朔 段晓旭 李炜 李冰 《中国地方病防治》 2013年第1期7-10,共4页
目的探讨急性砷暴露小鼠尿砷排泄及其甲基化代谢模式。方法健康雌性昆明种小鼠一次性灌胃染毒亚砷酸钠(NaAsO2),染毒剂量为2.5、5.0、10.0、20.0 mg/kg,染毒时间为12、24、48、72 h。染毒结束前一天将小鼠放入代谢笼并收集24 h尿样(12 ... 目的探讨急性砷暴露小鼠尿砷排泄及其甲基化代谢模式。方法健康雌性昆明种小鼠一次性灌胃染毒亚砷酸钠(NaAsO2),染毒剂量为2.5、5.0、10.0、20.0 mg/kg,染毒时间为12、24、48、72 h。染毒结束前一天将小鼠放入代谢笼并收集24 h尿样(12 h组收集12 h尿样)。采用超低温捕集-氢化物发生-原子吸收分光光度法分别测定尿中的无机砷(inorganic arsenic,iAs)、一甲基砷(monomethylated arsenic,MMA)和二甲基砷(dimethylated arsenic,DMA)含量,并计算iAs%、MMA%、DMA%、一甲基化率(primary methylation index,PMI)和二甲基化率(secondary methylation index,SMI)。结果急性砷暴露小鼠,随着染砷剂量增加,尿总砷(T-As)含量、iAs%、MMA%明显增加,DMA%和SMI逐渐降低,PMI基本保持不变;而一次性砷染毒后,随时间的延长,尿T-As含量、iAs%、MMA%逐渐降低,DMA%、PMI和SMI明显增加。24 h内尿砷大部分排泄,其百分含量及甲基化率都基本在同一水平,48 h和72 h的尿砷排泄量很少,其百分含量及甲基化率都基本一致。结论急性砷暴露小鼠尿砷排泄具有明显的剂量-效应和时间-效应关系;高砷暴露可以抑制砷的甲基化代谢;24 h内尿砷含量可作为判断急性砷中毒体内砷负荷的指标。 展开更多
关键词 亚砷酸钠(naaso2) 尿 甲基化
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白藜芦醇对妊娠期至性成熟期亚砷酸钠暴露子代小鼠学习记忆和脑氧化应激损伤的保护作用 被引量：1
8
作者 韩晶卓 牛泽华 +2 位作者 耿梦尧 王欢 王艳 《中国工业医学杂志》 CAS 2022年第3期212-215,243,共5页
目的 研究白藜芦醇(RES)对妊娠期至性成熟期亚砷酸钠(NaAsO_(2))暴露子代小鼠发育早期学习记忆和脑氧化应激的影响,探讨砷暴露所致学习记忆受损的可能机制及防治措施。方法 将36只妊娠小鼠分为对照组(12只)及染砷组(24只,饮用含60 mg/L ... 目的 研究白藜芦醇(RES)对妊娠期至性成熟期亚砷酸钠(NaAsO_(2))暴露子代小鼠发育早期学习记忆和脑氧化应激的影响,探讨砷暴露所致学习记忆受损的可能机制及防治措施。方法 将36只妊娠小鼠分为对照组(12只)及染砷组(24只,饮用含60 mg/L NaAsO_(2)水),其子代小鼠在断乳后至实验结束以饮水方式染砷。仔鼠出生后28 d饮水染砷同时给予RES灌胃干预:来自对照组窝别的仔鼠随机分为对照组和50 mg/kg RES组,来自染砷组的仔鼠随机分为NaAsO_(2)组、NaAsO_(2)+(25、50、100 mg/kg)RES组,每组6只。RES灌胃干预4周,进行水迷宫实验,取各组仔鼠血清和脑组织测定还原型谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)和丙二醛(MDA)水平。结果 从训练第4天起,NaAsO_(2)组仔鼠寻找平台潜伏期显著长于对照组,NaAsO_(2)+RES组仔鼠寻找平台潜伏期显著短于NaAsO_(2)组(P<0.05);空间探索时NaAsO_(2)组仔鼠在目标象限停留时间显著短于对照组,NaAsO_(2)+(25、50 mg/kg)RES组仔鼠在目标象限停留时间显著长于NaAsO_(2)组(P<0.05)。与对照组相比,NaAsO_(2)组仔鼠血清和脑组织中SOD和GSH活性显著下降,LDH和MDA水平明显升高;与NaAsO_(2)组相比,NaAsO_(2)+RES组血清及脑组织中SOD和GSH活性显著升高,LDH和MDA水平显著下降;差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 RES可改善砷暴露子代小鼠的氧化应激损伤,从而可能改善砷所致学习记忆能力损伤。 展开更多
关键词 亚砷酸钠(naaso_(2)) 白藜芦醇(RES) 氧化应激 小鼠
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亚砷酸钠对小鼠肝细胞AML12损伤的作用机制 被引量：1
9
作者 赵哲仪 王正蓉 +3 位作者 方兴艳 王甜 罗昭逊 谢婷婷 《贵州医科大学学报》 CAS 2022年第1期1-6,共6页
目的探讨亚砷酸钠(NaAsO_(2))对小鼠肝细胞AML12损伤作用的机制。方法取对数生长期的小鼠正常肝细胞AML12,设置6个NaAsO_(2)浓度[0(对照)、10、15、20、25及30μmol/L]组,分别用相应浓度的NaAsO_(2)处理AML12细胞24 h;采用化学比色法和... 目的探讨亚砷酸钠(NaAsO_(2))对小鼠肝细胞AML12损伤作用的机制。方法取对数生长期的小鼠正常肝细胞AML12,设置6个NaAsO_(2)浓度[0(对照)、10、15、20、25及30μmol/L]组,分别用相应浓度的NaAsO_(2)处理AML12细胞24 h;采用化学比色法和油红O染色法检测各组AML12细胞内丙二醛(MDA)和脂质含量水平,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blot法分别检测各组小鼠AML12细胞内法尼醇X受体(FXR)、小异二聚体伴侣(SHP)mRNA和FXR、SHP、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白的表达。结果与对照组相比,10-30 μmol/L NaAsO_(2)组小鼠AML细胞内MDA含量升高、但FXR和SHP mRNA及FXR蛋白相对表达量下降(P<0.05),2-33 pmol/L NaAsO_(2)组小鼠AML细胞内脂滴含量增加(P<0.05),20-30 μmol/L NaAsO_(2)组小鼠AML细胞内SHP蛋白相对表达量降低(P<0.05),25-30 μmol/L NaAsO_(2)组小鼠AML细胞内BAX蛋白相对表达量增高(P<0.05)。结论NaAsO_(2)可致小鼠肝细胞AML12损伤,其机制可能与FXR-SHP信号通路的失调有关。 展开更多
关键词 细胞凋亡 亚砷酸钠 小鼠肝细胞AML12 氧化应激 脂肪变性 法尼醇X受体 小异二聚体伴侣
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亚砷酸钠对小鼠肝细胞AML12氧化应激、凋亡及MST1、MST2蛋白表达的影响
10
作者 赵哲仪 王正蓉 +3 位作者 方兴艳 王甜 罗昭逊 谢婷婷 《贵州医科大学学报》 CAS 2022年第1期7-12,共6页
目的探讨亚砷酸钠(NaAsO_(2))对小鼠肝细胞AML12氧化应激、凋亡及哺乳动物不育系20样激酶1(MST1)、MST2蛋白表达的影响。方法取对数生长期的小鼠正常肝细胞AML12,分为对照组(不含NaAsO_(2))及实验组(10、15、20、25及30μmol/L NaAsO_(2... 目的探讨亚砷酸钠(NaAsO_(2))对小鼠肝细胞AML12氧化应激、凋亡及哺乳动物不育系20样激酶1(MST1)、MST2蛋白表达的影响。方法取对数生长期的小鼠正常肝细胞AML12,分为对照组(不含NaAsO_(2))及实验组(10、15、20、25及30μmol/L NaAsO_(2)处理24 h),采用荧光探针染色法和化学比色法分别检测各组小鼠AML12细胞内活性氧(ROS)含量和超氧化物歧化(SOD)活性水平,采用Western blot检测各组小鼠AML12细胞的MST1、MST2、磷酸化MST1/2(p-MST1/2)及半胱氨酸蛋白酶3剪接体(c-caspase 3)蛋白相对表达量。结果与对照组相比,随着NaAsO_(2)浓度的增加,各实验组小鼠AML12细胞内ROS含量逐渐升高(P<0.05),SOD活性逐渐降低(P<0.05);与对照组相比,各实验组小鼠AML12细胞内p-MST1/2蛋白相对表达量升高(P<0.05),20-30μmol/L NaAsO_(2)组小鼠AML12细胞内为MST1蛋白相对表达量降低、c-caspase 3蛋白相对表达量升高(P<0.05),15-30μmol/L NaAsO_(2)组小鼠AML12细胞内MST1蛋白相对表达量升高(P<0.05)。结论NaAsO_(2)可促进小鼠肝细胞AML12发生氧化应激、凋亡及p-MST1/2、MST1、MST2蛋白表达异常。 展开更多
关键词 细胞凋亡 亚砷酸钠 肝细胞AML12 氧化应激 哺乳动物不育系20样激酶1 哺乳动物不育系20样激酶2
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