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Insulin-like growth factor binding protein-7 induces activation and transdifferentiation of hepatic stellate cells in vitro 被引量:16
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作者 Li-Xin Liu Shuai Huang +4 位作者 Qian-Qian Zhang Yi Liu Dong-Mei Zhang Xiao-Hong Guo De-Wu Han 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2009年第26期3246-3253,共8页
AIM:To investigate the role of insulin-like growth factor binding protein-7 (IGFBP-7) in the activation and transdifferentiation of hepatic stellate cells (HSC) in vitro.METHODS:Rat HSC-T6 cells were cultured in separ... AIM:To investigate the role of insulin-like growth factor binding protein-7 (IGFBP-7) in the activation and transdifferentiation of hepatic stellate cells (HSC) in vitro.METHODS:Rat HSC-T6 cells were cultured in separate dishes and treated with various concentration of transforming growth factor (TGF)-β1,IGFBP-7 or antiIGFBP-7 antibody for 24 h.The supernatant or a cytoplasm suspension was obtained from cultured HSC,followed by transfer of cells to form cell-coated dishes.Immunocytochemistry and Western blotting were used to analyze the expression of IGFBP-7 induced by TGF-β1 and the level of fibronectin,collagen and α-smooth muscle actin (SMA).The pro-apoptotic effect of antiIGFBP-7 antibody was determined by flow cytometry.RESULTS:Immunocytochemistry and Western blotting revealed that the expression of IGFBP-7 in TGF-β1 treated HSC was significantly up-regulated compared to that in the control group.In addition,fibronectin,collagen and α-SMA also showed enhanced expression in accordance with the transdifferentiation process in a dose-dependent manner to some extent.Moreover,flow cytometry suggested that anti-IGFBP-7 antibody induced apoptosis of activated HSC,which is responsible for the development of liver fibrosis,and may represent a novel pathway and target for therapeutic intervention.CONCLUSION:IGFBP-7 showed increased expression in activated HSC and played an important role in the activation and transdifferentiation process of HSC.AntiIGFBP-7 antibody may ameliorate liver fibrogenesis. 展开更多
关键词 Insulin-like growth factor-binding protein-7 smooth muscle actin FIBRONECTINS Collagen type Hepatic stellate cells
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Pathological morphology alteration of the splanchnic vascular wall in portal hypertensive patients 被引量:6
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作者 杨镇 张黎 +1 位作者 李大鹏 裘法祖 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2002年第4期559-562,共4页
OBJECTIVE: To investigate the pathological morphology alteration of the splanchnic vascular wall in portal hypertensive patients. METHODS: Splenic arteries, veins and gastric coronary veins from portal hypertensive pa... OBJECTIVE: To investigate the pathological morphology alteration of the splanchnic vascular wall in portal hypertensive patients. METHODS: Splenic arteries, veins and gastric coronary veins from portal hypertensive patients (n = 50) were removed during esophagogastric devascularization with splenectomy and were observed under optic and electron microscopes. The expression of iNOS in the splenic artery wall was analysed with immunohistochemistry. RESULTS: The internal elastic membrane and medial elastic fibers of the splenic artery wall were broken and degenerated. Atrophy, apoptosis and phenotypic changes were seen in smooth muscle cells of splenic arteries. Positive staining for iNOS was seen in the cytoplasm of smooth muscle cells and iNOS activity was elevated compared with the non-cirrhotic patients (P 展开更多
关键词 Adult Female Humans Hypertension Portal IMMUNOHISTOCHEMISTRY Male Microscopy Electron Muscle smooth Vascular Nitric Oxide Synthase Nitric Oxide Synthase type II Splenic Artery Splenic Vein VEINS
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血管紧张素转换酶2基因转染抑制大鼠平滑肌细胞血管紧张素Ⅱ1型受体表达及下游转录激活子3信号通路 被引量:6
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作者 龚晶婧 卢卓强 +3 位作者 曹金龙 许昌声 王华军 晋学庆 《中华心血管病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期607-613,共7页
目的利用构建的血管紧张素转化酶(ACE)2慢病毒表达载体转染平滑肌细胞,探讨ACE2对血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)表达的影响。方法培养平滑肌细胞,并进行分组及干预:(1)空白对照组:仅加入无血清培养基。(2)慢病毒重组绿色荧光... 目的利用构建的血管紧张素转化酶(ACE)2慢病毒表达载体转染平滑肌细胞,探讨ACE2对血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)表达的影响。方法培养平滑肌细胞,并进行分组及干预:(1)空白对照组:仅加入无血清培养基。(2)慢病毒重组绿色荧光蛋白表达空载体(Lentiviral—GFP,GFP)组:加入感染复数(MOI)为10的Lentiviral—GFP空载体。(3)血管紧张素(Ang)Ⅱ组:加入终浓度为10^-2mol/L的AngU。(4)AngU+慢病毒重组ACE2表达载体(Lentiviral—ACE2,ACE2)组:同时加入浓度为10^-2mol/L的AngII和MOI为10的Lentiviral—ACE2。(5)AngⅡ+厄贝沙坦组:同时加入终浓度为10^-7mob/L的AngⅡ和厄贝沙坦。(6)AngⅡ+ACE2+厄贝沙坦组:同时加入终浓度为10。mol/L的AngⅡ和厄贝沙坦以及MOI为10的Lentiviral—ACE2。(7)ACE2组:仅加入MOI为10的Lentiviral—ACE2。将上述干预细胞提取RNA后运用实时PCR检测细胞ATlRmRNA的表达,Westernblot技术分别检测细胞ATlR蛋白表达,以及下游信号通路信号转导子和转录激活子3(STAT3)蛋白磷酸化水平。运用CCK-8试剂盒检测上述干预组的细胞增殖水平。结果(1)AnglI+ACE2组和AngⅡ+ACE2+厄贝沙坦组的ATIRmRNA表达均低于AngⅡ组(分别为0.39±0.02和0.24±0.01比I.80±0.08,P分别〈0.05和0.01)。(2)AngⅡ+ACE2组和AngⅡ+ACE2+厄贝沙坦组的ATIR蛋白表达均低于AngⅡ组(分别为0.83±0.07和0.52±0.07比1.10±0.13,P分别〈0.05和0.01)。(3)AngⅡ+ACE2组和AngⅡ+ACE2+厄贝沙坦组的STAT3蛋白磷酸化水平均低于AngⅡ组(分别为0.09±0.01和0.02±0.01比0.50±0.10,P分别〈0.05和0.01)。(4)AnglI+ACE2组和An如+ACE2+厄贝沙坦组的细胞增殖水平均低于Angll组(分别为0.84±0.08和0.77±0.10比1.16±0.11,P分别〈0.05和0.01)。结论ACE2通过抑制ATIR和下� 展开更多
关键词 肌细胞 平滑肌 肽基二肽酶A 受体 血管紧张素 1型 STAT3转录因子
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Quantitative proteomics analysis reveals the pathogenesis of obstructed defecation syndrome caused by abnormal expression of dystrophin
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作者 Wen-Zhe Li Yu Xiong +8 位作者 Tian-Kun Wang Yan-Yan Chen Song-Lin Wan Lu-Yao Li Meng Xu Jing-Jing Tong Qun Qian Cong-Qing Jiang Wei-Cheng Liu 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS 2024年第45期4817-4835,共19页
BACKGROUND Obstructed defecation syndrome(ODS)represents the most prevalent form of chronic constipation,affecting a diverse patient population,leading to numerous complications,and imposing a significant burden on he... BACKGROUND Obstructed defecation syndrome(ODS)represents the most prevalent form of chronic constipation,affecting a diverse patient population,leading to numerous complications,and imposing a significant burden on healthcare resources.Most ODS patients have insufficient rectal propulsion,but the exact mechanism underlying the pathogenesis of ODS remains unclear.AIM To explore the molecular mechanism underlying the pathogenesis of ODS.METHODS A total of 30 pairs of rectal samples were collected from patients with ODS(ODS group)or grade IV prolapsed hemorrhoids without constipation(control group)for quantitative proteomic and bioinformatic analysis.Subsequently,50 pairs of paraffin-embedded rectal specimens were selected for immunohistochemistry and immunofluorescence studies to validate the analysis results.Human intestinal smooth cell contractile function experiments and electrophysiological experiments were conducted to verify the physiological functions of target proteins.Cellular ultrastructure was detected using transmission electron microscopy.RESULTS In comparison to the control group,the expression level of dystrophin(DMD)in rectal specimens from ODS patients was markedly reduced.This finding was corroborated using immunohistochemistry and immunofluorescence techniques.The diminished expression of DMD compromised the contractile function of intestinal smooth muscle cells.At the molecular level,nucleoporin protein 153 and L-type voltage-gated calcium channel were found to be overexpressed in intestinal smooth muscle cells exhibiting downregulated DMD expression.Electrophysiological experiments confirmed an excessive influx of calcium ions into these cells.Moreover,vacuolar-like structures which may be associated with excessive calcium influx were observed in the cells by transmission electron microscopy.CONCLUSION Decreased DMD expression in intestinal smooth muscle may upregulate L-type voltage-gated calcium channel expression,leading to excessive calcium influx which may cause a decrease in rectal propul 展开更多
关键词 Obstructed defecation syndrome DYSTROPHIN smooth muscle CONTRACTION PROTEOMICS L-type voltage-gated calcium channel
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酸性环境对高磷诱导的大鼠血管平滑肌细胞钙化的影响及机制研究 被引量:3
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作者 张俊霞 徐金升 +4 位作者 冯雨 白亚玲 张胜雷 崔立文 张慧然 《中国心血管杂志》 2015年第6期455-460,共6页
目的探讨酸性环境对高磷诱导的大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)钙化的影响及可能机制。方法体外分离培养大鼠VSMCs,采用免疫细胞化学方法鉴定。将VSMCs按随机数字表法分为正常对照组、高磷+p H7.4、高磷+p H7.1和高磷+p H6.8(在高磷培养基的... 目的探讨酸性环境对高磷诱导的大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)钙化的影响及可能机制。方法体外分离培养大鼠VSMCs,采用免疫细胞化学方法鉴定。将VSMCs按随机数字表法分为正常对照组、高磷+p H7.4、高磷+p H7.1和高磷+p H6.8(在高磷培养基的基础上调整p H值为6.8、7.1和7.4三个亚组)。刺激4 d后,采用RT-PCR检测L型钙通道(LTCC)α_(1C)、β_2和β_3亚基,Runt相关转录因子2(Runx2)及Smad1基因的表达;应用钙离子探针Fluo-3/AM检测VSMCs胞外钙离子内流的效应变化。刺激14 d后,对各组细胞进行钙化染色、钙含量和碱性磷酸酶(ALP)活性测定。结果与正常对照组比较,高磷+p H7.4组钙含量、ALP活性、Runx2和Smad1mRNA的表达明显增高(88.26±6.43比22.39±3.19、94.33±3.08比20.39±1.18、0.37±0.02比0.01±0.00、0.65±0.05比0.07±0.01,均为P<0.05);与高磷+p H7.4组比较,高磷+p H7.1组和高磷+p H6.8组的钙含量、ALP活性、Runx2和Smad1mRNA的表达均降低(69.95±1.72和50.74±3.29、51.11±2.05和34.62±1.13、0.25±0.02和0.09±0.01、0.44±0.04和0.23±0.01,均为P<0.05)。与正常对照组比较,高磷+p H7.4组的LTCCβ_3亚基mRNA表达水平增加(0.80±0.01比0.34±0.13,P<0.01),高磷+p H7.1组和高磷+p H6.8组的LTCCβ_3亚基mRNA表达水平均下降(0.64±0.11和0.43±0.01,均为P<0.01)。各组之间LTCCα_(1C)和β_2亚基mRNA的表达差异无统计学意义(P=0.08和0.74)。与正常对照组比较,高磷+p H7.4组的VSMCs胞内钙离子浓度增加(438.33±7.50比149.54±20.89,P<0.05);高磷+p H7.1组和高磷+p H6.8组的VSMCs胞内钙离子浓度均降低(329.66±16.64和234.00±17.43,均为P<0.01)。结论酸性环境可以抑制高磷诱导的大鼠VSMCs钙化,其可能是通过抑制LTCCβ_3亚基表达,降低VSMCs钙离子内流,阻滞VSMCs发生表型转化来实现的。 展开更多
关键词 酸性环境 肌细胞 平滑肌 钙通道 L型 RUNX2
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血管紧张素Ⅱ与血管平滑肌细胞中自噬水平的关系及机制研究 被引量:3
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作者 陈哲 于康英 周鸣鸣 《安徽医药》 CAS 2020年第5期947-951,I0002,共6页
目的研究血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)是否能够引起血管平滑肌细胞(VSMC)自噬,探讨其相关作用机制。方法以VSMC为研究对象,设立组别分别为空白组、AngⅡ组、自噬抑制剂(3 MA)组、自噬促进剂雷帕霉素(Rap)组、血管紧张素Ⅱ(AT1)受体抑制剂(ARB)组... 目的研究血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)是否能够引起血管平滑肌细胞(VSMC)自噬,探讨其相关作用机制。方法以VSMC为研究对象,设立组别分别为空白组、AngⅡ组、自噬抑制剂(3 MA)组、自噬促进剂雷帕霉素(Rap)组、血管紧张素Ⅱ(AT1)受体抑制剂(ARB)组、3 MA+AngⅡ组、Rap+AngⅡ组、ARB+AngⅡ组,采用四唑盐(MTT)比色法检测细胞存活率,蛋白质免疫印迹法检测自噬相关蛋白脂化和膜相关蛋白(LC3Ⅱ)表达的变化,免疫荧光法检测自噬小体数目的变化。结果实验中空白组吸光度为(0.159±0.001),AngⅡ组吸光度为(0.151±0.003),相比空白组,加入AngⅡ药物对细胞存活率变化不明显,差异无统计学意义(P>0.05)。蛋白质免疫印迹结果显示加入AngⅡ促进VSMC的LC3 Ⅱ表达量增多,呈现时间依赖性、浓度依赖性,表明AngⅡ促进VSMC自噬发生。3 MA对AngⅡ(10-7 mol/L,24 h)引起的LC 3Ⅱ表达量增多起到抑制作用,Rap对AngⅡ(10-7 mol/L,24 h)引起的LC 3Ⅱ表达量增多起到叠加作用。ARB对AngⅡ(10-7 mol/L,24 h)引起的LC 3Ⅱ表达量增多起到抑制作用,表明自噬是由AngⅡ通过ATI受体引起的。结论AngⅡ通过AT1受体引起血管平滑肌细胞发生自噬。 展开更多
关键词 血管紧张素Ⅱ 肌细胞 平滑肌 自噬 受体 血管紧张素 2型 西罗莫司
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SIMILARITY TRANSFORMATION, THE STRUCTURE OF THE TRAVELING WAVES SOLUTION AND THE EXISTENCE OF A GLOBAL SMOOTH SOLUTION TO GENERALIZED KURAMOTO SIVASHINSKY TYPE EQUATIONS
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作者 郭柏灵 潘兴德 《Acta Mathematica Scientia》 SCIE CSCD 1991年第1期48-55,共8页
The existence of a global smooth solution for the initial value problem of generalized Kuramoto-Sivashinsky type equations have been obtained. Similarty siolutions and the structure of the traveling waves solution for... The existence of a global smooth solution for the initial value problem of generalized Kuramoto-Sivashinsky type equations have been obtained. Similarty siolutions and the structure of the traveling waves solution for the generalized KS equations are discussed and analysed by using the qualitative theory of ODE and Lie's infinitesimal transformation respectively. 展开更多
关键词 SIMILARITY TRANSFORMATION THE STRUCTURE OF THE TRAVELING WAVES SOLUTION AND THE EXISTENCE OF A GLOBAL smooth SOLUTION TO GENERALIZED KURAMOTO SIVASHINSKY type EQUATIONS
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胆囊收缩素对豚鼠结肠平滑肌及其细胞膜L-型钙电流和膜电位的影响 被引量:2
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作者 祝捷 罗和生 +2 位作者 陈玲 梁成柏 夏虹 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期840-844,共5页
目的 探讨胆囊收缩素8肽(CCK-8S)对豚鼠近端结肠平滑肌及细胞膜L-型钙电流和膜电位的电生理作用及其机制.方法 (1)采用RM6240多道生理信号采集处理系统记录CCK-8S对豚鼠近端结肠平滑肌肌条收缩的影响;(2)检测Fluo-2/AM标记的近端... 目的 探讨胆囊收缩素8肽(CCK-8S)对豚鼠近端结肠平滑肌及细胞膜L-型钙电流和膜电位的电生理作用及其机制.方法 (1)采用RM6240多道生理信号采集处理系统记录CCK-8S对豚鼠近端结肠平滑肌肌条收缩的影响;(2)检测Fluo-2/AM标记的近端结肠平滑肌细胞膜内钙离子浓度([Ca2+]i)变化;(3)用EPC-10膜片钳放大器测量全细胞模式下CCK-8S对近端结肠平滑肌细胞膜静息电位(RP)、动作电位(AP)和L-型钙通道电流(ICa-L)的影响.结果 CCK-8S(10-1mol/L)作用后:(1)豚鼠近端结肠平滑肌肌条收缩幅值和频率分别为对照组的(149±12)%和(132±13)%(均P<0.05);(2)近端结肠平滑肌细胞膜的[Ca2+]i为对照组的(738±24)%(P<0.05);(3)RP、AP峰值及AP快速复极时间分别为对照组的(52±9)%、(140±4)%和(61±13)%(均P<0.05),该效应可被预先加入的CCK1受体拮抗剂地伐西匹和(或)L-型钙通道阻断剂尼非地平阻断(n=8,均P<0.05),而预先向灌流液中加入CCK2受体拮抗剂CI 988后,CCK-8S对RP、AP峰值及AP快速复极时间的作用仍存在;(4)从-60 mV去极化至+10 mV,ICa-L为对照组的(138±7)%(P<0.05),但分别可被相应拮抗剂抑制;当向电极内液加入肝素(10-6 mol/L)或向细胞外液加入staurosporine(10-6 mol/L)后,CCK-8S对Ica-L均没有影响(2.9%±2.6%和1.9%±2.3%,均P>0.05).结论 CCK-8S通过CCK1受体促进近端结肠平滑肌自发性收缩频率和强度;其机制与激活1,4,5-三磷酸肌醇介导的蛋白激酶C途径进而促进L-型钙通道开放有关. 展开更多
关键词 胆囊收缩素 肌细胞 平滑肌 膜电位 钙通道 L型 受体
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光爆技术提升煤矿安全质量标准化水平 被引量:1
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作者 王洪亮 《煤炭技术》 CAS 北大核心 2009年第10期97-99,共3页
介绍利用光爆技术服务于生产,根据不同围岩情况,休整相关的光爆参数,现已初步形成了光爆的施工方法,提高了煤矿安全质量标准化水平。
关键词 光面爆破 类型 光爆原理
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新广义V-I致型多目标半无限规划ε-有效解的充分性 被引量:1
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作者 苏紫洋 王荣波 《延安大学学报(自然科学版)》 2019年第4期11-14,共4页
对于新广义一致V-I型不变凸函数的推广,借助Minch对称梯度,定义了新广义一致V-I s,ε型不变凸函数,并且得到了涉及这些广义凸性和新广义一致伪V-I s型、新广义一致拟伪V-I s型等非光滑多目标半无限规划的一些最优充分性条件。
关键词 非光滑 多目标半无限规划 广义一致V-I s ε型 新广义一致V-I型不变凸性 有效解
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High expression of type I inositol 1,4,5-trisphosphate receptor in the kidney of rats with hepatorenal syndrome
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作者 Jing-Bo Wang Ye Gu +6 位作者 Ming-Xiang Zhang Shun Yang Yan Wang Wei Wang Xi-Ran Li Yi-Tong Zhao Hai-Tao Wang 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS 2018年第29期3273-3280,共8页
AIM To detect the expression of typeⅠ inositol 1,4,5-trisphosphate receptor(IP3 RI) in the kidney of rats with hepatorenal syndrome(HRS).METHODS One hundred and twenty-five Sprague-Dawley rats were randomly divided i... AIM To detect the expression of typeⅠ inositol 1,4,5-trisphosphate receptor(IP3 RI) in the kidney of rats with hepatorenal syndrome(HRS).METHODS One hundred and twenty-five Sprague-Dawley rats were randomly divided into four groups to receive an intravenous injection of D-galactosamine(D-Gal N) plus lipopolysaccharide(LPS; group G/L, n = 50), D-Gal N alone(group G, n = 25), LPS alone(group L, n = 25), and normal saline(group NS, n = 25), respectively.At 3, 6, 9, 12, and 24 h after injection, blood, liver, and kidney samples were collected. Hematoxylineosin staining of liver tissue was performed to assess hepatocyte necrosis. Electron microscopy was used to observe ultrastructural changes in the kidney. Western blot analysis and real-time PCR were performed to detect the expression of IP3 RI protein and m RNA in the kidney, respectively.RESULTS Hepatocyte necrosis was aggravated gradually, which was most significant at 12 h after treatment with D-galactosamine/lipopolysaccharide, and was characterized by massive hepatocyte necrosis. At the same time, serum levels of biochemical indicators including liver and kidney function indexes were all significantly changed. The structure of the renal glomerulus and tubules was normal at all time points. Western blot analysis indicated that IP3 RI protein expression began to rise at 3 h(P < 0.05) and peaked at 12 h(P < 0.01). Real-time PCR demonstrated that IP3 RI m RNA expression began to rise at 3 h(P < 0.05) and peaked at 9 h(P < 0.01).CONCLUSION IP3 RI protein expression is increased in the kidney of HRS rats, and may be regulated at the transcriptional level. 展开更多
关键词 Hepatorenal syndrome type inositol 1 4 5-trisphosphate receptor Glomerular mesangial cells Vascular smooth muscle cells
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ITERATIVE APPROXIMATION OF FIXED POINTS FOR MULTIVALUED OPERATORS OF THE MONOTONE TYPE IN UNIFORMLY SMOOTH BANACH SPACES
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作者 曾六川 《Numerical Mathematics A Journal of Chinese Universities(English Series)》 SCIE 1999年第1期59-66,共8页
In this paper, let K be a nonempty subset of a uniformly smooth Banach space X, and T:K→2~k be a multivalued operator of the monotone type. The iterative sequence which converges strongly to the unique fixed point of... In this paper, let K be a nonempty subset of a uniformly smooth Banach space X, and T:K→2~k be a multivalued operator of the monotone type. The iterative sequence which converges strongly to the unique fixed point of T is given. Our results are the extension and improvements of the results obtained previously by several authors including Dunn, Chidume, Deng and Ding. 展开更多
关键词 Multivalued OPERATOR MONOTONE type UNIFORMLY smooth BANACH space.
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草莓移动栽培架的设计与试验 被引量:1
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作者 管春松 胡桧 +2 位作者 杨雅婷 高庆生 赵金元 《农机化研究》 北大核心 2017年第5期167-170,175,共5页
为提高设施温室内草莓栽培种植密度和棚室空间利用率,设计了一种平滑式移动栽培架。首先对总体设计要求进行阐述,在此基础上提出总体设计方案,然后对该装置的关键部件进行选型、设计与分析,最后对样机开展台架试验研究。结果表明:该移... 为提高设施温室内草莓栽培种植密度和棚室空间利用率,设计了一种平滑式移动栽培架。首先对总体设计要求进行阐述,在此基础上提出总体设计方案,然后对该装置的关键部件进行选型、设计与分析,最后对样机开展台架试验研究。结果表明:该移动架总成能实现多组架体单元同时左右平动,各项参数达到设计要求,操作简单,省力轻便,能够满足草莓栽培生产实际需求。 展开更多
关键词 移动栽培架 草莓栽培 平滑式
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不同药物对晚孕鼠子宫平滑肌及左心室心肌细胞电压依赖性钙通道-L亚型mRNA表达的影响 被引量:1
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作者 张卫社 陈亮香 +1 位作者 伍招娣 刘绛仙 《中华妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期1-4,共4页
目的 探讨缩宫素、米索前列醇及尼莫地平 3种药物对晚孕鼠子宫平滑肌与左心室心肌细胞电压依赖性钙通道 L亚型 (VDCC L)mRNA表达的影响。方法 应用半定量逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)技术分别测定自然分娩鼠 (自然分娩组 )、缩宫素... 目的 探讨缩宫素、米索前列醇及尼莫地平 3种药物对晚孕鼠子宫平滑肌与左心室心肌细胞电压依赖性钙通道 L亚型 (VDCC L)mRNA表达的影响。方法 应用半定量逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)技术分别测定自然分娩鼠 (自然分娩组 )、缩宫素诱导分娩鼠 (缩宫素组 )、米索前列醇诱导分娩鼠 (米索前列醇组 )及尼莫地平作用 48h后分娩鼠 (尼莫地平组 )的子宫平滑肌与左心室心肌细胞VDCC Lα1、β2 亚单位mRNA的表达。结果  (1)自然分娩组、缩宫素组、米索前列醇组及尼莫地平组孕鼠的子宫平滑肌细胞VDCC Lα1mRNA的相对表达量依次为 0 .80 0 3± 0 .165 9、0 .863 1±0 .192 1、0 .812 0± 0 .173 4及 0 .742 6± 0 .182 6,缩宫素组与米索前列醇组虽高于自然分娩组及尼莫地平组 ,但 4组之间比较 ,差异均无显著性 (P >0 .0 5 ) ;VDCC Lβ2 mRNA的相对表达量依次为 0 .64 69± 0 .13 0 4、0 .5 0 62± 0 .1472、0 .5 0 0 5± 0 .13 5 6及 0 .492 9± 0 .12 76,自然分娩组虽高于其他用药的 3组 ,但差异无显著性 (P >0 .0 5 )。 (2 )自然分娩组、缩宫素组、米索前列醇组及尼莫地平组孕鼠的左心室心肌细胞VDCC Lα1mRNA相对表达量依次为 0 .662 5± 0 .180 1、0 .63 65± 0 .15 78、0 .5 917± 0 .1413及 0 .5 42 展开更多
关键词 晚孕鼠 子宫平滑肌 左心室心肌细胞 电压依赖性钙通道-L亚型 MRNA 药物
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内脏脂肪素在大鼠结肠平滑肌收缩障碍中的作用及其机制研究 被引量:1
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作者 张灵 俞汀 +3 位作者 汤玉蓉 丁雨 王艳 林琳 《胃肠病学》 2019年第5期274-278,共5页
背景:肥胖与多种功能性胃肠病相关,肥胖者常存在胃肠动力障碍,且血清脂肪细胞因子内脏脂肪素(VF)水平明显升高。既往研究显示VF可抑制子宫、血管平滑肌收缩。目的:探讨VF对大鼠结肠平滑肌收缩的影响及其可能机制。方法:取正常Sprague-Da... 背景:肥胖与多种功能性胃肠病相关,肥胖者常存在胃肠动力障碍,且血清脂肪细胞因子内脏脂肪素(VF)水平明显升高。既往研究显示VF可抑制子宫、血管平滑肌收缩。目的:探讨VF对大鼠结肠平滑肌收缩的影响及其可能机制。方法:取正常Sprague-Dawley(SD)大鼠远端结肠制备成0.3cm×0.8cm的肌条,使用生物信号分析系统记录VF对肌条收缩活动的影响。体外培养SD乳大鼠结肠平滑肌细胞,予VF干预,以蛋白质印迹法检测肌球蛋白轻链(MLC)磷酸化水平和钙通道Cav1.2(α1亚基)表达;以激光共聚焦显微镜观察细胞外有或无Ca^2+的情况下乙酰胆碱刺激引起的细胞内Ca^2+浓度变化。结果:在肌条收缩实验中,VF(200ng/mL)可显著减弱正常大鼠结肠平滑肌肌条的收缩张力(P<0.05)。在结肠平滑肌细胞实验中,VF(200ng/mL)可下调Cav1.2通道表达,降低细胞内Ca^2+浓度和MLC磷酸化水平(P<0.05)。结论:VF可能通过下调结肠平滑肌细胞膜Cav1.2通道表达降低细胞内Ca^2+浓度,引起结肠平滑肌收缩障碍,从而参与结肠动力障碍的发生。 展开更多
关键词 内脏脂肪素 肥胖症 结肠 平滑肌 肌收缩 钙通道 L型
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一株由粗糙型向光滑型转变的肠炎沙门菌的鉴定
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作者 高海英 周品众 李玲 《中国卫生检验杂志》 CAS 2016年第18期2641-2642,2645,共3页
目的对一株有自凝现象的可疑沙门菌进行生化反应,swarm传代,血清学鉴定及荧光PCR检测分析。方法采用培养基生长特征、革兰染色镜检、肠杆菌生化鉴定板条ID32E经ATB1525全自动生化鉴定系统鉴定、swarm琼脂传代、血清学凝集试验、荧光PCR... 目的对一株有自凝现象的可疑沙门菌进行生化反应,swarm传代,血清学鉴定及荧光PCR检测分析。方法采用培养基生长特征、革兰染色镜检、肠杆菌生化鉴定板条ID32E经ATB1525全自动生化鉴定系统鉴定、swarm琼脂传代、血清学凝集试验、荧光PCR检测。结果该菌株通过用培养基生长特征、革兰染色镜检、ATB1525全自动生化鉴定系统、荧光PCR确定为沙门菌;血清学凝集试验该菌株为粗糙型,生理盐水有自凝现象(++),经沙门菌血清学鉴定用培养基swarm琼脂传代7次后,消除自凝现象,生理盐水凝集(-),菌株由粗糙型(R)向光滑型(S)转变,符合肠炎沙门菌血清型(9,12∶g,m∶-)。结论该菌是一株粗糙型肠炎沙门菌,经swarm琼脂传代由R向S转变为光滑型。 展开更多
关键词 沙门菌 粗糙型 光滑型 swarm琼脂
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脂多糖对小鼠子宫平滑肌细胞中T型钙通道Cav3.1及Cav3.2表达的影响
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作者 张丽娟 王林 +1 位作者 郑东明 刘彩霞 《山西医药杂志》 CAS 2016年第12期1369-1371,共3页
目的检测脂多糖(LPS)对小鼠子宫平滑肌细胞中T型钙通道Cav3.1、Cav3.2表达的影响,探讨LPS与T型钙通道在早产发动过程中的相关性。方法取孕鼠的子宫平滑肌组织进行细胞原代培养,予LPS干预细胞,检测干预前后T型钙通道Cav 3.1、Cav3.2mRNA... 目的检测脂多糖(LPS)对小鼠子宫平滑肌细胞中T型钙通道Cav3.1、Cav3.2表达的影响,探讨LPS与T型钙通道在早产发动过程中的相关性。方法取孕鼠的子宫平滑肌组织进行细胞原代培养,予LPS干预细胞,检测干预前后T型钙通道Cav 3.1、Cav3.2mRNA及蛋白的表达情况。结果 LPS干预孕鼠子宫平滑肌细胞6h后Cav3.1及Cav3.2 mRNA表达开始升高,12h后表达升高最明显,24h后升高略有下降。而0.9%氯化钠注射液组及正常对照组,Cav3.1及Cav3.2mRNA表达无明显变化。蛋白印迹法结果显示,LPS干预6h后Cav3.1及Cav3.2蛋白表达也同时升高,12h后升高较明显,Cav3.1表达在干预后12h达高峰,Cav3.2的表达在LPS干预24h后最高。结论 LPS能够上调T型钙通道的表达,证明了T型钙通道的表达变化可能参与了LPS诱导的小鼠早产的发生。 展开更多
关键词 脂多糖类 肌细胞 平滑肌 子宫 钙通道 T型
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镁通过L型钙通道α1C和α3亚基抑制高磷诱导的大鼠血管平滑肌细胞钙化
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作者 白亚玲 徐金升 +3 位作者 袁景霞 张俊霞 崔立文 张胜雷 《中华肾脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期759-765,共7页
目的探讨L型钙通道(L—type calcium channel,LTCC)α1C、β3亚基在镁抑制高磷诱导的大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)钙化中的作用。方法体外原代培养大鼠胸主动脉VSMC和血管环,用β-甘油磷酸盐(β—glycerophosphate,β—GP)诱导钙... 目的探讨L型钙通道(L—type calcium channel,LTCC)α1C、β3亚基在镁抑制高磷诱导的大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)钙化中的作用。方法体外原代培养大鼠胸主动脉VSMC和血管环,用β-甘油磷酸盐(β—glycerophosphate,β—GP)诱导钙化。将细胞、血管环分别分为4组培养7d:正常对照组、高磷组(10mmol/L β—GP)、镁干扰组(10mmol/L β-GP+3mmol/L MgSO4)、镁通道抑制剂(2-APB)组(10mmol/L β—GP+3mmol/L MgSO4+0.1mmol/L 2-APB)。采用茜素红染色、硝酸银染色分别检测各组VSMC、血管环的钙盐沉积情况,且用邻甲酚酞络合酮比色法检测钙含量。反转录PCR、Western印迹检测VSMC中LTCC α1C、β3亚基,Runx2的基因和蛋白表达。免疫组织化检测各组血管环中Runx2蛋白表达。ELISA测定VSMC碱性磷酸酶(ALP)活性,荧光探针法测定细胞内钙离子浓度。结果与正常对照组比较,高磷组VSMC钙含量,ALP活性,LTCCα1C、LTCCβ,和Runx2mRNA和蛋白的表达,胞内钙离子浓度均增加(均P〈0.05);与高磷组比较,镁干扰组VSMC钙含量,ALP活性,LTCCα1C、LTCCβ3和Runx2mRNA和蛋白的表达,钙离子浓度均降低(均P〈0.05)。镁干扰组血管环组织钙含量和Runx2蛋白表达均低于高磷组(均P〈0.05)。镁通道抑制剂组以上各项目与高磷组比较差异均无统计学意义。结论镁可以抑制高磷诱导的大鼠血管钙化,其可能是通过抑制LTCCα1C和β3亚基表达,阻滞VSMC钙离子内流,降低Runx2的表达,从而抑制VSMC发生表型转化实现的。 展开更多
关键词 肌细胞 平滑肌 钙质沉着症 钙通道 L型
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菟丝子水提物对肾间质纤维化大鼠肾组织保护作用的研究 被引量:23
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作者 徐瑜萍 向铮 +1 位作者 潘瑜 黄可新 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期2103-2108,共6页
目的探讨菟丝子水提物对大鼠单侧输尿管结扎诱导的肾间质纤维化的疗效。方法 SPF级SD大鼠随机分为3组:假手术组、模型组、菟丝子组。通过复制肾间质纤维化大鼠模型,检测模型大鼠血清肌酐和尿素氮水平,观察肾组织病理变化,并采用免疫组... 目的探讨菟丝子水提物对大鼠单侧输尿管结扎诱导的肾间质纤维化的疗效。方法 SPF级SD大鼠随机分为3组:假手术组、模型组、菟丝子组。通过复制肾间质纤维化大鼠模型,检测模型大鼠血清肌酐和尿素氮水平,观察肾组织病理变化,并采用免疫组化技术检测大鼠肾组织α-平滑肌动蛋白(α-SMA)、结缔组织生长因子(CTGF)、I型胶原(Col I)等表达情况。结果相比于模型组,菟丝子给药组大鼠血清肌酐和尿素氮水平显著降低,减少肾间质胶原沉积和肾组织α-SMA、CTGF、Col I表达。结论菟丝子水提物对肾间质纤维化大鼠肾组织有缓解保护作用。 展开更多
关键词 菟丝子水提物 肾间质纤维化 免疫组化 生化测试 平滑肌动蛋白 结缔组织生长因子 Ⅰ型胶原
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雷公藤内酯醇减少放射性肺纤维化中肌成纤维细胞活化与抑制TGF-β1/ERK/Smad3通路相关 被引量:23
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作者 张彦伟 张志强 +2 位作者 吴丽贤 张鲁榕 陈纯 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期630-636,共7页
目的通过体内外实验,观察雷公藤内酯醇(TPL)减少放射性肺纤维化中肌成纤维细胞(MFBs)活化与TGF-β1/ERK/Smad3通路的相关性。方法以TGF-β1刺激成纤维细胞建立体外MFBs活化模型,C57BL/6小鼠胸部照射形成体内MFBs活化、放射性肺纤维化模... 目的通过体内外实验,观察雷公藤内酯醇(TPL)减少放射性肺纤维化中肌成纤维细胞(MFBs)活化与TGF-β1/ERK/Smad3通路的相关性。方法以TGF-β1刺激成纤维细胞建立体外MFBs活化模型,C57BL/6小鼠胸部照射形成体内MFBs活化、放射性肺纤维化模型。MFBs活化状态通过检测小鼠成纤维细胞中α-SMA(RT-PCR、Western blot方法)和ColⅠ(RT-PCR、ELISA方法)的表达,通路活性采用Western blot法检测p-ERK、p-Smad3(Ser208)、p-Smad3(Ser423)的水平。ERK siRNA及Smad3 siRNA观察ERK、Smad3在MFBs活化中的地位。结果 TGF-β1激活p-ERK/p-Smad3(Ser208)及p-Smad3(Ser423),诱导成纤维细胞表达α-SMA,活化为MFBs,合成Col I明显增多;使用ERK siRNA及Smad3 siRNA确定了ERK及Smad3均参与α-SMA、ColⅠ的表达,其中ERK可能通过磷酸化Smad3连接区(Ser208)起相关作用。小鼠胸部照射可致肺组织中p-ERK、p-Smad3(Ser208)、p-Smad3(Ser423)的水平上调,α-SMA表达增加,显示多量MFBs活化。TPL对体内和体外实验中ERK、Smad3(Ser208)、Smad3(Ser423)的磷酸化活化均有明显抑制作用,可明显下调α-SMA表达及ColⅠ合成,减少MFBs的活化。结论 TPL可通过抑制TGF-β1/ERK/Smad3通路,减少肺部照射后MFBs活化,从而抑制放射性肺纤维化进展。 展开更多
关键词 雷公藤内酯醇 放射性肺纤维化 肌成纤维细胞 Α-平滑肌肌动蛋白 Ⅰ型胶原蛋白 转化生长因子β1 ERK SMAD3
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