丹参对家兔实验性动脉粥样硬化预防作用的研究 被引量：74

1

作者 孟振行 朱甫祥 +6 位作者 韩彩丽 刘锦丰 孙志华 吕少玮 秦树存 孙仁俊 吴淑敏 《心肺血管病杂志》 CAS 1995年第2期101-104,共4页

丹参预防组主动脉斑块面积占主动脉总面积的百分比为（１９．８５±１１．７９％），明显小于动脉粥样硬化（ＡＳ）模型组（３７．７９±１０．８０％），Ｐ＜０．０５。丹参有显著保护超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性和清除脂质... 丹参预防组主动脉斑块面积占主动脉总面积的百分比为（１９．８５±１１．７９％），明显小于动脉粥样硬化（ＡＳ）模型组（３７．７９±１０．８０％），Ｐ＜０．０５。丹参有显著保护超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性和清除脂质过氧化物中间产物丙二醛（ＭＤＡ）的作用。丹参能明显抑制在高脂条件下３Ｈ－ＴｄＲ掺入培养的平滑肌（ＳＭＣ），抑制ＳＭＣ、ＤＮＡ合成。本研究初步探讨了丹参抑制家兔实验性ＡＳ病变发生发展的作用机制。 展开更多

关键词 丹参 动脉粥样硬化 超氧化物歧化酶 药理

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人、猪、鼠血管内皮及平滑肌细胞培养与纯化方法的改进 被引量：21

2

作者 满国彤 凤志慧 +1 位作者 张同琳 周孝思 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2001年第2期128-133,共6页

对培养和纯化猪主动脉内皮细胞、人脐静脉内皮细胞、猪和鼠主动脉平滑肌细胞的方法进行改进。对其鉴定方法进行了讨论。用胶原酶或胰酶消化法 ,或机械法分别从猪主动脉、人脐静脉、鼠主动脉获得内皮细胞和平滑肌细胞进行培养 ,用光学相... 对培养和纯化猪主动脉内皮细胞、人脐静脉内皮细胞、猪和鼠主动脉平滑肌细胞的方法进行改进。对其鉴定方法进行了讨论。用胶原酶或胰酶消化法 ,或机械法分别从猪主动脉、人脐静脉、鼠主动脉获得内皮细胞和平滑肌细胞进行培养 ,用光学相差显微镜、免疫组化的方法进行鉴定。结果显示 ,相差显微镜观察 :人脐静脉内皮细胞接种后 2～ 3小时贴壁 ,继而铺开生长。在视野内形成散在细胞团。细胞呈铺路石样排列的单层。随着传代次数增多 ,可见核分裂、双核及多核。猪血管内皮细胞呈鹅卵石样 ,多角形 ,生长分裂旺盛时可见两个或多个核。猪和鼠的平滑肌细胞在相差显微镜下外观为长梭形 ,细胞生长致密时排列成束 ,相互平行 ,并且重叠生长 ,表现为典型的“波峰”与“浪谷”状。猪血管内皮细胞 Di I- Ac- L DL 染色 ,在荧光显微镜下显示特征性的黄绿色荧光。人 因子抗原免疫组化检测人脐静脉内皮细胞 ,显微镜下可见核周胞浆呈现阳性反应。免疫组织化学法进行平滑肌细胞 α-肌动蛋白染色 ,显微镜下见细胞浆内着色。本文介绍的培养及纯化猪血管内皮细胞、猪平滑肌细胞。 展开更多

关键词 人 猪 鼠 血管内皮 平滑肌细胞 纯化方法 改进 内皮细胞 细胞培养

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成人及家兔阴茎海绵体平滑肌细胞培养和鉴定 被引量：18

3

作者 陈斌 黄旭元 +3 位作者 童菊芳 陈海戈 王益鑫 黄翼然 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2004年第4期282-286,共5页

目的 :探索阴茎海绵体平滑肌细胞 (CCSM)体外培养及鉴定方法。　方法 :采用勃起功能正常的成年男子及新西兰家兔的新鲜阴茎标本 ,经处理后采用原代细胞培养法 ,对阴茎海绵体组织块进行培养 ,获得CCSM后用光镜、透射电镜和免疫组化等多... 目的 :探索阴茎海绵体平滑肌细胞 (CCSM)体外培养及鉴定方法。　方法 :采用勃起功能正常的成年男子及新西兰家兔的新鲜阴茎标本 ,经处理后采用原代细胞培养法 ,对阴茎海绵体组织块进行培养 ,获得CCSM后用光镜、透射电镜和免疫组化等多种方法从细胞形态学及CCSM生长特性等不同侧面对培养的人及新西兰家兔的CCSM进行鉴定 ,并测定CCSM在体外培养时的细胞增殖情况。　结果 :经 2 4h潜伏期 ,体外培养的CCSM进入指数增长期 ,维持约 96h后进入平台期 ;从接种组织块至长成单层细胞约需 15～ 2 0d ,传代后约 4～ 7d后长成单层 ;传代后的细胞增殖旺盛 ,成束状生长 ,并呈现层叠排列及“峰 谷”现象 ;CCSM在体外可稳定传 7～ 12代 ,传代期间其形态及增殖活性变化不明显 ;各种检测鉴定均证实所获细胞为CCSM。　结论 :CCSM原代细胞培养法简便、稳定、可靠 ,对研究阴茎的勃起机制及勃起功能障碍的发生、发展、调控及其治疗药物筛选有重要理论及现实意义。 展开更多

关键词 阴茎海绵体 平滑肌细胞 勃起功能障碍 细胞培养 人 家兔

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剪切力条件下血管内皮细胞与平滑肌细胞的相互作用 被引量：18

4

作者 任长辉 刘肖 +1 位作者 康红艳 邓小燕 《医用生物力学》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第2期185-191,共7页

血管内皮细胞(endothelial cells,ECs)与平滑肌细胞(smooth muscle cells,SMCs)是血管壁的主要细胞,它们之间的相互作用在维持血管正常的生理功能以及心血管疾病的发生发展过程中至关重要。为真实模拟ECs与SMCs体内条件下的位置关系与... 血管内皮细胞(endothelial cells,ECs)与平滑肌细胞(smooth muscle cells,SMCs)是血管壁的主要细胞,它们之间的相互作用在维持血管正常的生理功能以及心血管疾病的发生发展过程中至关重要。为真实模拟ECs与SMCs体内条件下的位置关系与生长状态,人们建立了多种共培养系统。介绍当前几种常用的能够加载流动剪切力的共培养系统,并分别比较其优势与不足;简要总结剪切力条件下ECs与SMCs相互作用对ECs与SMCs表型与分布、SMCs生长与迁移、ECs表面相关黏附分子表达的影响。研究表明,一氧化氮(NO)、细胞因子、microRNA等可以作为信号分子介导ECs与SMCs之间的相互作用。 展开更多

关键词 内皮细胞 平滑肌细胞 细胞培养 相互作用 剪切力

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槟榔碱促结肠平滑肌细胞收缩及对胞内钙离子浓度的影响 被引量：14

5

作者 梁宁霞 衣兰娟 +3 位作者 田琳 胡凡 刘翠萍 魏睦新 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2006年第7期676-681,共6页

目的:观察氢溴酸槟榔碱(Ah)促进培养的结肠平滑肌细胞收缩作用及对胞内游离Ca2+浓度的影响．方法:培养大鼠结肠平滑肌细胞,分为4组:正常对照组、Ah刺激组、乙酰胆碱(Ach)刺激组、阿托品预处理组．应用特异性Ca2+荧光批示剂Fluo-3／AM负... 目的:观察氢溴酸槟榔碱(Ah)促进培养的结肠平滑肌细胞收缩作用及对胞内游离Ca2+浓度的影响．方法:培养大鼠结肠平滑肌细胞,分为4组:正常对照组、Ah刺激组、乙酰胆碱(Ach)刺激组、阿托品预处理组．应用特异性Ca2+荧光批示剂Fluo-3／AM负载细胞,激光共聚焦显微镜检测游离Ca2+浓度和细胞收缩率．结果:正常对照组细胞未发生自主性收缩,因指示剂的衰减,荧光强度(FI)有递减的趋势; Ah刺激组在加药后短时间内胞内钙离子浓度迅速升高,出现一个波峰,FI平均基础值与峰值有差异(P<0．05),而后胞内钙离子浓度再缓慢攀升,在484．0±47．6 s达到高峰,而后有一个较长时间的平台期,在1 400 s左右恢复至静息水平,FI基础值与峰值有显著差异 (P<0．01),细胞收缩百分数为20．70％±0．07％; Ach刺激组在加药后胞内钙离子浓度升高,形成一个小波峰,FI基础值和峰值差异有显著性(P<0．01)．随后胞内钙离子浓度缓慢攀升, 在600 s左右达到高峰,而后有一个较长时间的平台期．FI基础值与峰值差异有显著性 (P<0．001);经阿托品预孵育处理后的细胞,加入Ah后,其收缩效应被完全抑制．结论:Ah可引起结肠平滑肌细胞收缩,升高细胞内游离Ca2+浓度．其收缩效应可以被M受体阻断剂阿托品所抑制． 展开更多

关键词 结肠 平滑肌细胞 细胞培养 槟榔碱 钙离子 激光共聚焦显微镜

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切应力与血管平滑肌细胞对内皮细胞增殖的影响及TGFβ1与p-Akt信号通路在其中的作用 被引量：13

6

作者 姜晓华 姚庆苹 +3 位作者 姜隽 纪素英 齐颖新 姜宗来 《医用生物力学》 EI CAS CSCD 2010年第5期316-320,351,共6页

目的探讨切应力与血管平滑肌细胞(VSMCs)对内皮细胞(ECs)增殖功能的影响及其一些分子机制。方法应用平行平板流动腔系统对单独培养的ECs以及与VSMCs联合培养的ECs施加15dyn/cm2(1dyn=10-5N)的正常切应力;Western blot技术检测反映细胞... 目的探讨切应力与血管平滑肌细胞(VSMCs)对内皮细胞(ECs)增殖功能的影响及其一些分子机制。方法应用平行平板流动腔系统对单独培养的ECs以及与VSMCs联合培养的ECs施加15dyn/cm2(1dyn=10-5N)的正常切应力;Western blot技术检测反映细胞增殖能力的分子—增殖细胞核抗原(PCNA)的表达及细胞内信号转导分子Akt的磷酸化水平。静态条件下,以单独培养ECs为对照组,将ECs与VSMCs隔开培养,并应用TGFβ1封闭性抗体,观察TGFβ1在VSMCs诱导ECs增殖中的作用。结果正常切应力抑制了ECs增殖及p-Akt表达,VSMCs在与ECs联合培养及隔开培养时均明显促进ECs增殖及p-Akt表达。正常切应力部分逆转了联合培养VSMCs诱导的ECs增殖和p-Akt表达,而TGFβ1封闭性抗体能够拮抗隔开培养VSMCs诱导的ECs增殖和p-Akt表达。结论正常切应力可视为血管的保护因子,抑制ECs增殖;VSMCs通过旁分泌作用诱导了ECs增殖;TGFβ1及PI3/Akt信号分子参与了其调节过程。 展开更多

关键词 切应力 血管平滑肌细胞 血管内皮细胞 细胞增殖 细胞培养

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糖尿病大鼠血管平滑肌细胞体外培养方法的探讨 被引量：9

7

作者 李艳平 李新荣 +2 位作者 邓湘蕾 李震 缪峰 《东南大学学报（医学版）》 CAS 2005年第3期186-189,共4页

目的:对糖尿病大鼠血管平滑肌细胞体外培养方法进行探讨,建立糖尿病大鼠血管平滑肌细胞模型,为糖尿病慢性血管并发症研究奠定基础。方法:建立糖尿病大鼠模型,用组织贴壁法体外培养胸主动脉血管平滑肌细胞。结果:糖尿病大鼠造模成功。用... 目的:对糖尿病大鼠血管平滑肌细胞体外培养方法进行探讨,建立糖尿病大鼠血管平滑肌细胞模型,为糖尿病慢性血管并发症研究奠定基础。方法:建立糖尿病大鼠模型,用组织贴壁法体外培养胸主动脉血管平滑肌细胞。结果:糖尿病大鼠造模成功。用贴壁法培养糖尿病大鼠血管平滑肌细胞,3d后相差显微镜下可见细胞游出,培养7～10d左右细胞重叠生长达多层,高低起伏呈“峰—谷”状。平滑肌细胞actin免疫组织化学染色鉴定为平滑肌细胞。结论:糖尿病大鼠血管平滑肌细胞增殖速度快,培养条件要求严格,在形态学上与正常大鼠平滑肌细胞相同。 展开更多

关键词 糖尿病大鼠 体外培养方法 主动脉血管平滑肌细胞 慢性血管并发症 免疫组织化学 组织贴壁法 ACTIN 细胞模型 大鼠模型 显微镜下 染色鉴定 增殖速度 培养条件 正常大鼠 形态学

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3种细胞裂解液提取总蛋白在Western blot中的效果分析 被引量：8

8

作者 庞雅湘 聂启昊 +3 位作者 刘晓宁 王帅 冯琦 牛洪琳 《河北医科大学学报》 CAS 2019年第3期263-267,共5页

目的寻找一种适用于培养血管平滑肌细胞总蛋白提取的细胞裂解液配方,以更好地应用于Westernblot分析。方法采用3种常用的细胞裂解液(Ⅰ液,Ⅱ液和Ⅲ液),提取总蛋白后Bradford法测定蛋白含量,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离提取的蛋白,Wester... 目的寻找一种适用于培养血管平滑肌细胞总蛋白提取的细胞裂解液配方,以更好地应用于Westernblot分析。方法采用3种常用的细胞裂解液(Ⅰ液,Ⅱ液和Ⅲ液),提取总蛋白后Bradford法测定蛋白含量,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离提取的蛋白,Western blot检测PDGFR-β、Akt、GAPDH和SM22α等不同分子量的蛋白表达情况。结果 3种细胞裂解液得到的蛋白含量差异无统计学意义(P>0.05)。小分子量蛋白(<50 000),细胞裂解液Ⅱ和细胞裂解液Ⅲ得到的光密度值高于细胞裂解液Ⅰ(P<0.05);中等分子量蛋白(50 000～80 000),细胞裂解液Ⅱ和细胞裂解液Ⅲ得到的光密度值高于细胞裂解液Ⅰ,细胞裂解液Ⅲ得到的光密度值高于细胞裂解液Ⅱ(P<0.05);高分子量蛋白(>80 000),细胞裂解液Ⅲ得到的光密度值高于细胞裂解液Ⅰ(P<0.05)。Western blot结果显示:PDGFR-β,细胞裂解液Ⅱ和细胞裂解液Ⅲ所检测到的条带光密度值显著高于细胞裂解液Ⅰ(P<0.05);Akt,细胞裂解液Ⅱ和细胞裂解液Ⅲ所检测到的条带光密度值显著高于细胞裂解液Ⅰ,细胞裂解液Ⅲ所检测到的条带光密度值显著高于细胞裂解液Ⅱ(P<0.05);GAPDH,细胞裂解液Ⅱ所检测到的条带光密度值显著高于细胞裂解液Ⅰ和细胞裂解液Ⅲ(P<0.05);SM22α,细胞裂解液Ⅱ所检测到的条带光密度值显著高于细胞裂解液Ⅰ和细胞裂解液Ⅲ(P<0.05)。结论确定了一种裂解效果更好、能满足对不同分子量蛋白进行Western blot检测的裂解液配方,为以Western blot为主的蛋白检测相关研究提供了一定的参考。 展开更多

关键词 肌细胞 平滑肌 细胞培养技术 细胞裂解液

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大鼠脑基底动脉平滑肌细胞培养及功能鉴定 被引量：8

9

作者 丘钦英 周家国 +1 位作者 刘玉洁 关永源 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期1531-1533,共3页

目的探讨大鼠脑基底动脉平滑肌细胞的培养方法,了解生长特性。方法用组织贴块法培养大鼠脑基底动脉平滑肌,用免疫细胞化学法鉴定细胞,用RF-5000荧光分光光度计观察细胞内Ca2+浓度的动态变化来检测其活性。结果培养5d后可见组织块周围有... 目的探讨大鼠脑基底动脉平滑肌细胞的培养方法,了解生长特性。方法用组织贴块法培养大鼠脑基底动脉平滑肌,用免疫细胞化学法鉴定细胞,用RF-5000荧光分光光度计观察细胞内Ca2+浓度的动态变化来检测其活性。结果培养5d后可见组织块周围有平滑肌细胞长出,2wk后可融合传代,经平滑肌特异性肌动蛋白α-actin鉴定,确定为平滑肌细胞。钙离子通道激动剂可诱导细胞Fura-2荧光比值(F340/F380)上升,细胞活性良好。结论组织贴块法是大鼠脑基底动脉平滑肌细胞培养简单、高效、经济的实验方法,为脑血管疾病发病机制的研究提供了理想的细胞模型。 展开更多

关键词 大鼠 脑基底动脉 平滑肌细胞 细胞培养

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射麻止喘液对哮喘大鼠气道平滑肌细胞作用研究 被引量：8

10

作者 周宇 刘建博 +2 位作者 张玉芳 黄桂南 郭敏 《辽宁中医药大学学报》 CAS 2011年第1期76-78,共3页

目的:探讨哮喘大鼠模型建立及其气道平滑肌细胞培养方法,了解其生长特性,通过研究射麻止喘液中药血清对气道平滑肌细胞增殖效应,为研究哮喘病预防及治疗提供理论及实验支持。方法:制作慢性哮喘大鼠模型,用酶联法培养哮喘大鼠气道平滑肌... 目的:探讨哮喘大鼠模型建立及其气道平滑肌细胞培养方法,了解其生长特性,通过研究射麻止喘液中药血清对气道平滑肌细胞增殖效应,为研究哮喘病预防及治疗提供理论及实验支持。方法:制作慢性哮喘大鼠模型,用酶联法培养哮喘大鼠气道平滑肌细胞,倒置相差显微镜观察其生长情况,MTT检测生长曲线。结果:以酶联法培养7天可见细胞贴壁,14天左右融合90%左右。传代后细胞"谷峰"生长明显。结论:本实验提供了一种常见简单的哮喘模型,培养的细胞为平滑肌细胞,射麻止喘液血清具有抑制哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖作用,低剂量药物血清组相对于中高剂量组抑制作用更强。 展开更多

关键词 大鼠 哮喘 气道平滑肌 细胞培养 射麻止喘液

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体外分离培养兔阴茎海绵体平滑肌细胞的纯度分析 被引量：7

11

作者 宋鲁杰 徐月敏 +4 位作者 傅强 李超 许小林 胡晓勇 崔磊 《中国男科学杂志》 CAS CSCD 2007年第11期1-5,共5页

目的比较和评价不同条件下体外培养兔阴茎海绵体平滑肌细胞的纯度。方法应用胶原酶消化法和组织贴块法分离培养幼兔海绵体平滑肌细胞。差速贴壁法纯化海绵体平滑肌细胞。采用α-平滑肌肌动蛋白(α-SM-actin)和肌球蛋白(Myosin)免疫荧光... 目的比较和评价不同条件下体外培养兔阴茎海绵体平滑肌细胞的纯度。方法应用胶原酶消化法和组织贴块法分离培养幼兔海绵体平滑肌细胞。差速贴壁法纯化海绵体平滑肌细胞。采用α-平滑肌肌动蛋白(α-SM-actin)和肌球蛋白(Myosin)免疫荧光鉴定海绵体平滑肌细胞,波形蛋白(Vimentin)衬染检测成纤维细胞。流式细胞仪检测海绵体细胞表达α-SM-actin的阳性率,比较不同培养条件下海绵体平滑肌细胞的纯度。结果体外培养的海绵体来源细胞在荧光显微镜下对α-SM-actin和Myosin仅有少量表达,随传代次数的增加,细胞表达α-SM-actin和Myosin的阳性率进一步降低。流式细胞仪检测酶消化法和贴块法原代培养的海绵体平滑肌细胞的纯度分别为16.91%和11.13%。经差速贴壁纯化后第1代海绵体平滑肌细胞的纯度分别提高到26.88%和21.98%。Vimentin免疫荧光检测到大量阳性表达。结论目前常规方法体外分离、培养的海绵体平滑肌细胞纯度较低,大量海绵体间质来源的成纤维细胞混杂生长,差速贴壁法可在一定范围内提高海绵体平滑肌细胞的纯度。 展开更多

关键词 肌细胞 平滑肌 成纤维细胞 细胞培养技术 细胞纯度 阴茎

原文传递

改良组织块贴壁法培养大鼠主动脉平滑肌细胞及鉴定 被引量：4

12

作者 王倩 舒茂琴 +2 位作者 江明宏 李建涛 康振峻 《新乡医学院学报》 CAS 2007年第6期541-544,共4页

目的以简捷、高效的方法获取原代和传代的大鼠血管平滑肌细胞(VSMC),为进一步的科学研究提供实验材料。方法采用改良的组织块贴壁法培养原代大鼠VSMC,2.5 g.L-1胰蛋白酶消化传代,并用相差显微镜、电镜、荧光显微镜及激光共聚焦显微镜对... 目的以简捷、高效的方法获取原代和传代的大鼠血管平滑肌细胞(VSMC),为进一步的科学研究提供实验材料。方法采用改良的组织块贴壁法培养原代大鼠VSMC,2.5 g.L-1胰蛋白酶消化传代,并用相差显微镜、电镜、荧光显微镜及激光共聚焦显微镜对细胞进行鉴定。结果95%的组织块接种成活,相差显微镜下细胞呈典型的"峰-谷"状生长,胞体长梭形;电镜下可见粗、细肌丝沿细胞长轴平行排列;荧光显微镜及激光共聚焦显微镜检测α-肌动蛋白可见细胞胞浆内呈阳性显色,细胞核不显色。结论本方法培养VSMC简便、易操作,获得的细胞纯度和成活率较高。 展开更多

关键词 大鼠 血管平滑肌细胞 细胞培养 主动脉

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新西兰兔尿道海绵体平滑肌细胞的原代培养及鉴定 被引量：4

13

作者 张金明 黄红军 何涛 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期1051-1052,共2页

目的为构建新西兰兔组织工程尿道提供种子细胞。方法取新西兰兔阴茎头,用含10%胎牛血清的高糖DMEM作体外原代培养,并行免疫组织化学法鉴定。结果经10～14d培养后,培养瓶底铺满梭状细胞,免疫组织化学法鉴定确认为兔尿道海绵体平滑肌细胞... 目的为构建新西兰兔组织工程尿道提供种子细胞。方法取新西兰兔阴茎头,用含10%胎牛血清的高糖DMEM作体外原代培养,并行免疫组织化学法鉴定。结果经10～14d培养后,培养瓶底铺满梭状细胞,免疫组织化学法鉴定确认为兔尿道海绵体平滑肌细胞。结论兔阴茎头平滑肌细胞可在体外条件下生长传代、扩增,可作为构建组织工程尿道的种子细胞。 展开更多

关键词 平滑肌 尿道海绵体 细胞培养 兔 体外原代培养 平滑肌细胞 新西兰兔 鉴定 免疫组织化学法 构建组织工程

原文传递

内皮细胞和平滑肌细胞在微孔聚碳酸酯膜上共培养模型方法 被引量：2

14

作者 薛军辉 张作明 郭群 《第四军医大学学报》 北大核心 2002年第5期390-393,共4页

目的　探讨主动脉内皮细胞 (EC)和平滑肌细胞(SMC)共培养模型 ,为下一步研究两者之间的电生理活动提供基础 .方法　采用微孔聚碳酸酯膜 (polycarbonate filtermem brane)作为载体 ,将 EC和 SMC接种于微孔膜的两侧 ,建立 EC和 SMC联合培... 目的　探讨主动脉内皮细胞 (EC)和平滑肌细胞(SMC)共培养模型 ,为下一步研究两者之间的电生理活动提供基础 .方法　采用微孔聚碳酸酯膜 (polycarbonate filtermem brane)作为载体 ,将 EC和 SMC接种于微孔膜的两侧 ,建立 EC和 SMC联合培养模型 ,模拟血管壁 EC和 SMC间的结构关系 ,采用倒置显微镜和透射电镜进行观察 .结果　共培养的 EC和 SMC组织结构关系类似于体内 ,EC呈单层生长 ,而 SMC呈多层生长 ,同类和异类细胞间都有缝隙连接形成 ,缝隙连接的形成与培养的时间有关 ,在 SMC接种后 2 4 h,EC可以通过微孔与 SMC形成缝隙连接 .结论　此种 EC和SMC共培养模型模拟了在体时 EC和 SMC之间的结构关系 。 展开更多

关键词 血管内皮细胞 平滑肌细胞 细胞培养 缝隙连接 电生理活动

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自发性高血压大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞培养及鉴定 被引量：4

15

作者 马福年 姜睿 《泸州医学院学报》 2013年第1期10-14,共5页

目的:探讨自发性高血压大鼠(SHR)阴茎海绵体平滑肌(CCSM)细胞体外培养的方法、生物学性状及与WKY大鼠CCSM细胞培养的区别。方法:采用组织块培养法并应用差速贴壁法进行纯化,倒置相差显微镜观察其形态,免疫荧光与流式细胞仪法进行鉴定。... 目的:探讨自发性高血压大鼠(SHR)阴茎海绵体平滑肌(CCSM)细胞体外培养的方法、生物学性状及与WKY大鼠CCSM细胞培养的区别。方法:采用组织块培养法并应用差速贴壁法进行纯化,倒置相差显微镜观察其形态,免疫荧光与流式细胞仪法进行鉴定。结果:镜下可见平滑肌细胞呈梭形生长、平行排列及部分区域峰-谷现象,免疫荧光显示胞浆α-肌动蛋白染色呈阳性。WKY大鼠CCSM细胞第4d开始从组织块边缘游离出,SHR大鼠CCSM细胞第8 d开始游离出。WKY与SHR大鼠CCSM细胞经纯化一次后纯度(%):WKY=97.00±1.03,SHR=84.90±5.99,差异具有统计学意义(P<0.01);WKY与SHR大鼠CCSM细胞经两次纯化后纯度(%):WKY=98.24±1.05,SHR=96.92±1.06,其差异无统计学意义(P>0.05)。结论:SHR与WKY大鼠CCSM细胞的原代培养在生长时间及纯化上存在显著差异,但可通过适当方式缩小其差异并在短期内获得大量高纯度SHR大鼠CCSM细胞,为高血压性勃起功能障碍的研究奠定基础。 展开更多

关键词 阴茎海绵体 平滑肌细胞 细胞培养 大鼠

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胎兔动脉导管平滑肌细胞氧敏感性钾通道mRNA的表达 被引量：4

16

作者 余忠琴 李涛 《武汉大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2009年第1期21-23,51,I0002,共5页

目的:建立胎兔动脉导管平滑肌细胞的体外培养方法,并检测其细胞膜氧敏感性钾通道亚型(Kv1.5)mRNA的表达。方法:采用组织块改良贴壁法(玻片压迫组织块贴壁方法)进行胎兔动脉导管平滑肌细胞的体外原代培养,并行免疫组织化学法对培养的细... 目的:建立胎兔动脉导管平滑肌细胞的体外培养方法,并检测其细胞膜氧敏感性钾通道亚型(Kv1.5)mRNA的表达。方法:采用组织块改良贴壁法(玻片压迫组织块贴壁方法)进行胎兔动脉导管平滑肌细胞的体外原代培养,并行免疫组织化学法对培养的细胞进行鉴定,用RT-PCR的方法检测其细胞膜氧敏感性钾通道亚型(Kv1.5)的表达。结果:经10-14 d培养后,培养皿底及盖玻片上铺满梭状细胞,免疫组织化学法鉴定确认为胎兔动脉导管平滑肌细胞,其细胞膜存在Kv1.5基因表达。结论:植块改良贴壁法可以成功的进行胎兔动脉导管平滑肌细胞的体外培养,且本法简便、可靠,短时间内可以获得大量细胞,从而为动脉导管未闭发病机制的研究奠定了实验基础。同时,动脉导管平滑肌细胞膜上存在氧敏感性钾通道mRNA的表达,从而为从氧敏感性钾通道层面来研究动脉导管未闭的发生机制提供了实验基础。 展开更多

关键词 氧敏感性钾通道(Kv1.5)mRNA 平滑肌细胞 动脉导管 细胞培养 胎兔

原文传递

大鼠肺动脉平滑肌细胞的培养 被引量：1

17

作者 李智 张庆利 +1 位作者 丛华 郭政东 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 1996年第3期221-224,共4页

大鼠肺动脉壁薄，平滑肌细胞数少，经人工继代培养后细胞往往显示与在体内时不同的反应，故用荧光分光光度计检测该处细胞内钙难于实现。共焦激光显微钝可以测试一个细胞内钙浓度的动态变化，要求所测试细胞必须是非收缩细胞，且较牢固... 大鼠肺动脉壁薄，平滑肌细胞数少，经人工继代培养后细胞往往显示与在体内时不同的反应，故用荧光分光光度计检测该处细胞内钙难于实现。共焦激光显微钝可以测试一个细胞内钙浓度的动态变化，要求所测试细胞必须是非收缩细胞，且较牢固地粘附在培养皿上。本法应用０．２％Ｃｏｌｌａｇｅｎａｓｅ，０．０１２５％Ｅ－ｌａｓｔａｓｅ，０．１２５％Ｔｒｙｐｓｉｎ分离大鼠肺动脉平滑肛细胞进行原代培养，经间接荧光抗体染色法证明９５％以上为平滑肌细胞。此法培养的细胞可用于共焦激光显微镜测试细胞内Ｃａ（２＋）等浓度的动态变化。 展开更多

关键词 肺动脉 平滑肌细胞 荧光抗体染色 细胞培养

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兔子宫平滑肌细胞的原代培养与鉴定 被引量：3

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作者 曾润清 刘庚贵 +2 位作者 刘惠萍 李冰凌 王若光 《实用预防医学》 CAS 2007年第2期267-269,共3页

目的研究子宫平滑肌细胞(MSMC)的培养方法及一些生物学特性。方法运用酶消化后组织贴块法及胶原酶Ⅰ消化法进行兔子宫平滑肌细胞的培养,并用倒置生物显微镜、HE染色进行形态学观察和用免疫组化对培养细胞进行鉴定。结果运用此两种方法... 目的研究子宫平滑肌细胞(MSMC)的培养方法及一些生物学特性。方法运用酶消化后组织贴块法及胶原酶Ⅰ消化法进行兔子宫平滑肌细胞的培养,并用倒置生物显微镜、HE染色进行形态学观察和用免疫组化对培养细胞进行鉴定。结果运用此两种方法成功培养了兔子宫平滑肌细胞,培养的细胞呈典型“峰-谷”样生长,HE染色观察细胞呈梭形,胞浆丰富,核大圆形或椭圆形。免疫组化S-P法检测a-平滑肌肌动蛋白单克隆抗体(a-SMActin)表达强阳性。经传代纯化,纯度达99%以上,细胞生长特性未见异常改变。结论酶消化后组织贴块法及胶原酶Ⅰ消化法培养的兔子宫平滑肌细胞生长稳定性好,培养与纯化能同步进行,方法简便,经济。 展开更多

关键词 兔 子宫平滑肌细胞 细胞培养 鉴定 原代培养 传代培养

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动脉内膜损伤模型中合成型平滑肌细胞的培养 被引量：2

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作者 姚玉宇 冷静 +1 位作者 尹航 黄峻 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 2000年第1期5-6,共2页

目的　建立更接近在体情况的合成型血管平滑肌细胞 (VSMC)的培养体系。方法　培养细胞取材于兔动脉内膜损伤后的增生内膜。结果　培养细胞 10天后光镜下表现典型的“峰”、“谷”样排列 ,免疫组化证实是 VSMC,电镜下细胞表现有合成型细... 目的　建立更接近在体情况的合成型血管平滑肌细胞 (VSMC)的培养体系。方法　培养细胞取材于兔动脉内膜损伤后的增生内膜。结果　培养细胞 10天后光镜下表现典型的“峰”、“谷”样排列 ,免疫组化证实是 VSMC,电镜下细胞表现有合成型细胞的特点。结论　直接对合成型 VSMC的培养优于单纯中膜 VSMC培养。 展开更多

关键词 血管平滑肌细胞 细胞培养 动脉内膜损伤

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SD大鼠阴茎平滑肌细胞的获取和体外培养 被引量：3

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作者 黄晓军 年建华 吕伯东 《中国男科学杂志》 CAS CSCD 2009年第9期21-24,共4页

目的研究SD大鼠阴茎平滑肌细胞体外培养方法和生物学特性。方法采用贴壁组织块培养法和酶消化培养法,对SD大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞进行活细胞观察。结果 (1)SD大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞为梭形,呈长轴平行排列,具有明显的方向性;体外贴... 目的研究SD大鼠阴茎平滑肌细胞体外培养方法和生物学特性。方法采用贴壁组织块培养法和酶消化培养法,对SD大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞进行活细胞观察。结果 (1)SD大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞为梭形,呈长轴平行排列,具有明显的方向性;体外贴壁快,生长迅速,体外培养的阴茎海绵体平滑肌细胞在合适的传代条件和比例下能够生存并保持其稳定的生物学特性。(2)酶消化培养法获得细胞的纯度高,接种后细胞生长快。贴壁组织块培养法操作简单易于掌握。结论贴壁组织块培养法和酶消化培养法均可以获得平滑肌细胞,方法均方便可行。我们可根据实验的需要选择不同的方法。 展开更多

关键词 阴茎海绵体 平滑肌细胞 体外培养 SD大鼠

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