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几种乳酸菌S-层蛋白的普查以及slp基因的克隆与序列分析 被引量:5
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作者 双杰 包秋华 +3 位作者 永胜 王艳霞 张和平 格日勒图 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2010年第8期8-10,31,共4页
从内蒙古传统发酵乳制品中分离的几种乳酸菌,包括干酪乳杆菌、乳酸乳球菌、发酵乳杆菌、植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌、双歧乳杆菌和嗜酸乳杆菌标准株(L.acidophilus ATCC4356)等为实验材料,应用SDS-PAGE方法和PCR方法分别进行S-层蛋白(S-lay... 从内蒙古传统发酵乳制品中分离的几种乳酸菌,包括干酪乳杆菌、乳酸乳球菌、发酵乳杆菌、植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌、双歧乳杆菌和嗜酸乳杆菌标准株(L.acidophilus ATCC4356)等为实验材料,应用SDS-PAGE方法和PCR方法分别进行S-层蛋白(S-layers pro-tein,SLP)的普查和slp基因的检测。结果表明:在各种乳酸菌中,经SDS-PAGE电泳方法检测,只有植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌和其标准菌株的样品中出现膜外蛋白的可疑条带,大小为44~66ku之间,与文献报道的slp基因表达产物大小范围是一致;经PCR方法检测,只有嗜酸乳杆菌和其标准菌株L.acidophilus ATCC4356中扩增出slp基因可疑条带,其大小约为1 300 bp。并对嗜酸乳杆菌slp基因进行克隆、基因序列测序和分析。 展开更多
关键词 嗜酸乳杆菌 S-层蛋白 slp基因 克隆与序列分析
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乳杆菌表层蛋白对菌株表面特性和益生特性的影响 被引量:2
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作者 李佳珣 张秋香 +1 位作者 王瑞 赵建新 《现代食品科技》 CAS 北大核心 2021年第11期43-49,33,共8页
为评估乳杆菌表层蛋白对菌株特性的影响,该研究通过序列比对筛选出含slp基因的乳杆菌,之后用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对其中部分菌的slp基因表达情况进行鉴定,并测定了表层蛋白去除前后菌体生长的吸光度值、自聚集... 为评估乳杆菌表层蛋白对菌株特性的影响,该研究通过序列比对筛选出含slp基因的乳杆菌,之后用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对其中部分菌的slp基因表达情况进行鉴定,并测定了表层蛋白去除前后菌体生长的吸光度值、自聚集率、自成膜量、与致病菌共聚集率等特性。结果表明,4株嗜酸乳杆菌、30株卷曲乳杆菌、3株瑞士乳杆菌、30株鼠李糖乳杆菌都含有slp基因,经过SDS-PAGE鉴定了四种菌的部分菌株均表达表层蛋白,且其表层蛋白与菌株的特性密切相关。比如,在生长方面,瑞士乳杆菌去除表层蛋白前后生长能力差异很大,但氯化锂溶液和蛋白酶K两种溶液处理的吸光度值差距较小,差值仅在0.2以内;在与致病菌共聚集方面,大部分菌株在不同处理过程中没有较大差异,有趣的是,本身自聚能力弱的鼠李糖乳杆菌3-1表现出来的与致病菌极强的共聚能力,这株菌的在口腔方面的防龋潜力值得进一步探究。该研究丰富了人们对乳杆菌表层蛋白的了解,为深入探究表层蛋白的功能和应用奠定理论基础。 展开更多
关键词 乳杆菌 表层蛋白 表面特性 序列比对 slp基因
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短小乳杆菌内蒙古分离株S-层蛋白的普查、鉴定和基因分析
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作者 兰丽 魏建民 +3 位作者 王艳霞 王敏 满达 格日勒图 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第8期26-30,共5页
S-层蛋白(S-layers protein)是位于某些细菌表面的高度有序的具有超微结构的一种外膜蛋白。本试验以蒙古族传统乳制品中分离的短小乳杆菌(Lactobacillus brevis)为材料,应用SDS-PAGE技术对若干乳杆菌进行S-层蛋白的普查,并应用PCR方法... S-层蛋白(S-layers protein)是位于某些细菌表面的高度有序的具有超微结构的一种外膜蛋白。本试验以蒙古族传统乳制品中分离的短小乳杆菌(Lactobacillus brevis)为材料,应用SDS-PAGE技术对若干乳杆菌进行S-层蛋白的普查,并应用PCR方法克隆出L.brevis的slp基因,对该slp基因进行测序及序列分析。试验结果表明,SDS-PAGE电泳结果显示L.brevis样品在44~55 ku之间出现目的条带,与文献报道的S-层蛋白大小范围一致;PCR方法正确扩增出大小约为1300 bp的slp基因,经DNAStar软件遗传分析发现该基因与鸡乳酸杆菌株(GenBank登录号:AY597266.1)的亲缘关系和遗传距离最近,与其他种类乳酸菌遗传距离也非常相近;经Genetyx生物软件推导出的S-层蛋白大小理论值约为47 ku,具有显著的外膜蛋白的特性。本试验为后续遗传改造等研究工作奠定基础。 展开更多
关键词 短小乳杆菌 S-层蛋白 slp基因 克隆与序列分析
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Slp2基因的差异表达与肺癌的分化和转移 被引量:11
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作者 苏雷 张建 +3 位作者 魏秀琴 支修益 许庆生 刘芝华 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2005年第12期678-680,共3页
目的:探讨Slp2基因在肺癌组织中的差异表达与肺癌组织分化和转移的相关性。方法:通过提取52例肺癌患者的肺癌组织和正常配对组织以及4个肺癌细胞系的总RNA,用逆转录-聚合酶链反应检测Slp2基因的表达,结合肺癌患者的临床资料进行分析。结... 目的:探讨Slp2基因在肺癌组织中的差异表达与肺癌组织分化和转移的相关性。方法:通过提取52例肺癌患者的肺癌组织和正常配对组织以及4个肺癌细胞系的总RNA,用逆转录-聚合酶链反应检测Slp2基因的表达,结合肺癌患者的临床资料进行分析。结果:52例肺癌组织中38例Slp2基因的表达明显增强。其中低年龄、低分化、纵隔淋巴结转移、Ⅲa期肺癌患者Slp2基因的差异表达更为明显(P<0.05);Slp2基因在4个肺癌细胞系中均呈阳性表达。结论:Slp2基因在肺癌组织的表达明显高于正常对照组织,而且与肺癌组织的分化程度、是否发生纵隔淋巴结转移以及临床分期密切相关。 展开更多
关键词 slp2基因 肺癌 临床分期 肺癌组织分化 淋巴结转移
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下调SLP-2基因表达抑制脑胶质瘤细胞增殖及诱导凋亡的机制研究 被引量:10
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作者 陈小忠 王培 +2 位作者 谢明祥 赵洪新 吴海涛 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期55-59,共5页
目的:探讨下调人Stomatin like protein 2(SLP-2)基因表达对脑胶质瘤细胞增殖凋亡的影响。方法:SLP-2的靶向siRNA序列转染人脑胶质瘤U251细胞(SLP-2敲低组),另设空白组(细胞未做任何处理)和阴性对照组(细胞转染无义siRNA序列),转染48 h... 目的:探讨下调人Stomatin like protein 2(SLP-2)基因表达对脑胶质瘤细胞增殖凋亡的影响。方法:SLP-2的靶向siRNA序列转染人脑胶质瘤U251细胞(SLP-2敲低组),另设空白组(细胞未做任何处理)和阴性对照组(细胞转染无义siRNA序列),转染48 h后Western blot检测各组细胞中SLP-2、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、Notch1、Hes1的蛋白表达;CCK8检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡。结果:阴性对照组SLP-2的蛋白表达与空白组差异无统计学意义(P>0.05),而SLP-2敲低组SLP-2的蛋白表达显著低于空白组(P<0.05);阴性对照组细胞存活率、细胞凋亡率、IL-6和TNF-α的mRNA表达及Bcl-2、Bax、Notch1、Hes1蛋白表达与空白组差异无统计学意义(P>0.05),而SLP-2敲低组细胞存活率、IL-6和TNF-α的mRNA表达及Bcl-2、Notch1、Hes1的蛋白表达显著低于空白组,细胞凋亡率及Bax蛋白表达显著高于空白组(P>0.05)。结论:下调SLP-2基因表达可显著抑制脑胶质瘤细胞增殖及诱导细胞的凋亡,下调炎症细胞因子IL-6和TNF-α的表达,其机制与抑制Notch1信号通路有关。 展开更多
关键词 slp-2基因 脑胶质瘤 增殖 凋亡 Notch1信号通路
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slp-76基因在肝癌及其他消化系统肿瘤中的差异表达分析 被引量:1
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作者 李鑫 卢联合 +2 位作者 李文东 赵红心 丁芳 《中国肝脏病杂志(电子版)》 CAS 2008年第2期4-6,共3页
目的分析slp-76基因在肝癌、食管癌、贲门癌、胃癌、结肠癌及其癌旁组织中的表达情况。方法应用微阵列技术筛选出slp-76基因在肝癌组织中高表达,以逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术对上述消化系统肿瘤组织及其癌旁组织中的slp-76基因表... 目的分析slp-76基因在肝癌、食管癌、贲门癌、胃癌、结肠癌及其癌旁组织中的表达情况。方法应用微阵列技术筛选出slp-76基因在肝癌组织中高表达,以逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术对上述消化系统肿瘤组织及其癌旁组织中的slp-76基因表达进行检测;应用Northern blot技术对肝癌组织及其癌旁组织中的slp-76基因表达进行检测。结果 RT-PCR证实slp-76在79.3%(24/29)的肝癌组织中高表达(P=0.005);在73.3%(22/30)的食管癌组织中高表达(P=0.005);在75%(21/28)的贲门癌组织中高表达(P=0.014);在75%(15/20)胃癌组织中高表达(P=0.005);在72.2%(13/18)结肠癌组织中高表达(P=0.008);Northern blot证实slp-76基因在肝癌组织中呈高水平表达。结论 slp-76基因在消化系统肿瘤中高表达,slp-76与上述消化系统肿瘤生长关系密切;在RNA水平,该基因在上述肿瘤间的表达无显著性差异(P=0.968)。 展开更多
关键词 消化系统肿瘤 slp-76基因 差异表达
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SLP-76基因在消化道肿瘤中的表达差异分析
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作者 李鑫 陆佳韵 +6 位作者 赵立群 王秀琴 刘桂林 刘忠 周传农 刘芝华 吴旻 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2003年第6期551-552,共2页
目的 分析SLP 76基因在食管癌、贲门癌、胃癌、结肠癌及其癌旁组织中的差异表达。方法 依据微阵列技术筛选出SLP 76基因在食管癌组织中高表达的结果 ,应用逆转录 聚合酶链式反应 (RT PCR) ,对上述消化道肿瘤组织及其癌旁组织中的SLP... 目的 分析SLP 76基因在食管癌、贲门癌、胃癌、结肠癌及其癌旁组织中的差异表达。方法 依据微阵列技术筛选出SLP 76基因在食管癌组织中高表达的结果 ,应用逆转录 聚合酶链式反应 (RT PCR) ,对上述消化道肿瘤组织及其癌旁组织中的SLP 76基因表达进行检测。结果 SLP 76在 73 .3 % (2 2 / 3 0 )的食管癌组织中高表达 (P =0 .0 0 5) :在 75% (9/ 12 )的贲门癌组织中高表达(P =0 .0 14 ) ;在 75% (12 / 16)胃癌组织中高表达 (P =0 .0 0 5) ;在 72 .2 % (13 / 18)结肠癌组织中高表达 (P =0 .0 0 8)。结论 在RNA水平 ,SLP 76基因在上述肿瘤之间的表达无显著性差异 (P =0 .9684)。但该基因在消化道肿瘤中高表达 ,SLP 76与上述消化道肿瘤生长关系密切 ; 展开更多
关键词 slp-76基因 消化道肿瘤 基因表达 微阵列技术 RT-PCR
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日本血吸虫鞘脂激活蛋白样蛋白的基因克隆表达与免疫原性分析 被引量:1
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作者 张纯 戴洋 +4 位作者 王晓婷 鲁飞 唐建霞 赵松 朱荫昌 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期228-232,共5页
目的克隆并表达日本血吸虫鞘脂激活蛋白样蛋白(SLP),并对其免疫原性进行分析。方法根据华支睾吸虫鞘脂激活蛋白样蛋白序列,采用tblastn法比对,在基因库中找出与之同源的日本血吸虫EST片段,并经过DNAStar、Sig-nalP3.0分析获得Sj-SLP基... 目的克隆并表达日本血吸虫鞘脂激活蛋白样蛋白(SLP),并对其免疫原性进行分析。方法根据华支睾吸虫鞘脂激活蛋白样蛋白序列,采用tblastn法比对,在基因库中找出与之同源的日本血吸虫EST片段,并经过DNAStar、Sig-nalP3.0分析获得Sj-SLP基因序列,经PCR扩增从日本血吸虫cDNA中获得的目的基因克隆入原核表达载体pET15b,转化至大肠埃希菌BL21,异丙基巯基半乳糖诱导表达并纯化;采用Westernblot分析其抗原性;用纯化的SLP重组蛋白免疫兔,ELISA检测免疫原性。结果 PCR扩增获得Sj-SLP基因,约296bp,并成功地进行了原核表达,纯化的表达产物重组Sj-SLP(rSj-SLP)能被感染兔血清识别,而不能被正常兔血清识别。rSj-SLP免疫兔可产生1∶12800的特异性抗体。结论日本血吸虫存在鞘脂激活蛋白样蛋白,rSj-SLP具有较强的免疫原性和抗原性。 展开更多
关键词 日本血吸虫 鞘脂激活蛋白样蛋白 基因 抗原性
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