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抗人肺腺癌单链抗体的构建及在大肠杆菌中的表达
被引量：
1
1
作者
吴朝伟
张屹
+7 位作者
张明生
黄浩旻
林晴
俞小淙
陈艾
黄华梁
李新元
王登顺
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
1999年第2期125-130,共6页
目的:构建抗肺腺癌的单链抗体(scFv),研究其表达条件,为将这一小分子抗体应用于临床奠定基础.方法:将抗人肺腺癌单克隆抗体的重链及轻链可变区基因插入表达载体pFUW80、pTH、pTF,分别在大肠杆菌XL1-Blue、Top10、GI698/GI724中诱导表达...
目的:构建抗肺腺癌的单链抗体(scFv),研究其表达条件,为将这一小分子抗体应用于临床奠定基础.方法:将抗人肺腺癌单克隆抗体的重链及轻链可变区基因插入表达载体pFUW80、pTH、pTF,分别在大肠杆菌XL1-Blue、Top10、GI698/GI724中诱导表达,得到噬菌体抗体或包涵体.用SDS-PAGE和ELISA鉴定检测活性.结果:SDS-PAGE的结果表明,在pTH和pTF的表达产物中,有一条43kD的特异条带,其分子量与预期相符,单链抗体以包涵体形式出现,其表达量达细菌总蛋白的18.6%.ELISA的结果表明,噬菌体抗体和经复性处理的包涵体具有与亲本单抗相同的特异性.结论:成功地构建和在大肠杆菌中表达了抗肺腺癌单链抗体.
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关键词
肺腺癌
单链抗体
噬菌体
抗体
ELISA
下载PDF
职称材料
日本血吸虫未成熟卵单链抗体库的构建、筛选及初步应用
被引量：
13
2
作者
何卓
汪世平
+4 位作者
肖小芹
曾少华
刘明社
李林
周帅锋
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2008年第8期921-928,共8页
运用噬菌体展示技术构建日本血吸虫未成熟虫卵可溶性抗原(SIEA)单链抗体(scFv)表达文库,以天然分子候选疫苗SIEA26～28ku为靶抗原筛选SIEA单链抗体库,获得特异性单链抗体.并将该scFv基因亚克隆至原核高效表达载体PET32a,诱导SIEA26～28k...
运用噬菌体展示技术构建日本血吸虫未成熟虫卵可溶性抗原(SIEA)单链抗体(scFv)表达文库,以天然分子候选疫苗SIEA26～28ku为靶抗原筛选SIEA单链抗体库,获得特异性单链抗体.并将该scFv基因亚克隆至原核高效表达载体PET32a,诱导SIEA26～28ku特异性scFv大量表达.随后以此为探针筛选日本血吸虫尾蚴cDNA文库,以期获得SIEA26～28ku天然分子候选疫苗相关的编码基因.结果显示,所获得的SIEA26～28ku特异性scFv,表达量高,采用该探针初步筛选出相关基因核糖体蛋白S4.SIEA26～28ku特异性scFv的获得,为进一步筛选、分析鉴定抗日本血吸虫病天然分子候选疫苗SIEA26～28ku的编码基因奠定了基础.
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关键词
日本血吸虫
未成熟虫卵可溶性抗原(SIEA)
单链抗体(
scfv
)
噬菌体展示抗体库
CDNA文库
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职称材料
单链抗体的构建及其在医学上的应用
被引量：
8
3
作者
汪希雅
余平
《中国病原生物学杂志》
CSCD
2009年第10期790-792,共3页
基因工程抗体在疾病诊断、治疗及医学研究等方面都有着广泛的应用。近几年来,国内外学者对抗体的研究已迈入基因工程抗体阶段,其中单链抗体(single chain Fv,scFv)因其具有分子质量小、穿透力强、体内循环半衰期短及排除了Fc段所致的免...
基因工程抗体在疾病诊断、治疗及医学研究等方面都有着广泛的应用。近几年来,国内外学者对抗体的研究已迈入基因工程抗体阶段,其中单链抗体(single chain Fv,scFv)因其具有分子质量小、穿透力强、体内循环半衰期短及排除了Fc段所致的免疫复合物反应等优点,成为基因工程抗体探索领域中的研究热点。尤其是将scFv应用于医学的研究已取得突破性进展,现就scFv的构建及其在医学上的应用综述如下。
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关键词
单链抗体
构建
应用
综述
原文传递
猪蛔虫卵可溶性抗原单链抗体库的构建及初步筛选
4
作者
何光志
周颖
+5 位作者
安传伟
张太华
熊文康
崔小东
罗成松
谢波
《贵州农业科学》
CAS
北大核心
2011年第12期178-182,共5页
为进一步研制抗猪蛔虫的高特异性、高亲和力的基因工程抗体奠定基础,以猪蛔虫未成熟虫卵可溶性抗原免疫BALB/C小鼠,提取小鼠脾脏总RNA,以RT-PCR技术分别扩增出H链和L链可变区基因,以SOE-PCR法将VH和VL片段随机拼接成ScFv片段,然后将ScF...
为进一步研制抗猪蛔虫的高特异性、高亲和力的基因工程抗体奠定基础,以猪蛔虫未成熟虫卵可溶性抗原免疫BALB/C小鼠,提取小鼠脾脏总RNA,以RT-PCR技术分别扩增出H链和L链可变区基因,以SOE-PCR法将VH和VL片段随机拼接成ScFv片段,然后将ScFv片段克隆至pCANTAB-5E载体,并转化至感受态TG1菌,经辅助噬菌体M13K07拯救,构建猪蛔虫卵可溶性抗原噬菌体展示单链抗体库,结果从20个噬菌体克隆中筛选到15个阳性克隆。
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关键词
蛔虫
可溶性抗原
单链抗体库
构建与筛选
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职称材料
题名
抗人肺腺癌单链抗体的构建及在大肠杆菌中的表达
被引量：
1
1
作者
吴朝伟
张屹
张明生
黄浩旻
林晴
俞小淙
陈艾
黄华梁
李新元
王登顺
机构
中国科学院遗传研究所
中国人民解放军总装备部医院
出处
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
1999年第2期125-130,共6页
文摘
目的:构建抗肺腺癌的单链抗体(scFv),研究其表达条件,为将这一小分子抗体应用于临床奠定基础.方法:将抗人肺腺癌单克隆抗体的重链及轻链可变区基因插入表达载体pFUW80、pTH、pTF,分别在大肠杆菌XL1-Blue、Top10、GI698/GI724中诱导表达,得到噬菌体抗体或包涵体.用SDS-PAGE和ELISA鉴定检测活性.结果:SDS-PAGE的结果表明,在pTH和pTF的表达产物中,有一条43kD的特异条带,其分子量与预期相符,单链抗体以包涵体形式出现,其表达量达细菌总蛋白的18.6%.ELISA的结果表明,噬菌体抗体和经复性处理的包涵体具有与亲本单抗相同的特异性.结论:成功地构建和在大肠杆菌中表达了抗肺腺癌单链抗体.
关键词
肺腺癌
单链抗体
噬菌体
抗体
ELISA
Keywords
human
lung
adenocarcinoma
single
chain
fv
antibody
(
scfv
)
phage
antibody
ELISA
inclusion
body
renaturation
分类号
R734.205 [医药卫生—肿瘤]
R730.51 [医药卫生—临床医学]
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职称材料
题名
日本血吸虫未成熟卵单链抗体库的构建、筛选及初步应用
被引量：
13
2
作者
何卓
汪世平
肖小芹
曾少华
刘明社
李林
周帅锋
机构
中南大学湘雅医学院寄生虫学系
湖南师范大学第三附属医院
山西省长治医学院寄生虫学教研室
出处
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2008年第8期921-928,共8页
基金
国家重点基础研究发展计划(973)(2007CB513108)
国家高技术研究发展计划(863)(2004AA2Z3530)
+1 种基金
湖南省"十一.五"重大专项(2006SK1001)
湖南省"十一.五"重点学科建设专项经费(07-985-2)联合资助项目~~
文摘
运用噬菌体展示技术构建日本血吸虫未成熟虫卵可溶性抗原(SIEA)单链抗体(scFv)表达文库,以天然分子候选疫苗SIEA26～28ku为靶抗原筛选SIEA单链抗体库,获得特异性单链抗体.并将该scFv基因亚克隆至原核高效表达载体PET32a,诱导SIEA26～28ku特异性scFv大量表达.随后以此为探针筛选日本血吸虫尾蚴cDNA文库,以期获得SIEA26～28ku天然分子候选疫苗相关的编码基因.结果显示,所获得的SIEA26～28ku特异性scFv,表达量高,采用该探针初步筛选出相关基因核糖体蛋白S4.SIEA26～28ku特异性scFv的获得,为进一步筛选、分析鉴定抗日本血吸虫病天然分子候选疫苗SIEA26～28ku的编码基因奠定了基础.
关键词
日本血吸虫
未成熟虫卵可溶性抗原(SIEA)
单链抗体(
scfv
)
噬菌体展示抗体库
CDNA文库
Keywords
Schistosoma
japonicum,
soluble
immature
egg
antigen
（SIEA）,
single
-
chain
fv
antibody
（
scfv
）,
phage
display
antibody
library,
cDNA
library
分类号
R383 [医药卫生—医学寄生虫学]
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职称材料
题名
单链抗体的构建及其在医学上的应用
被引量：
8
3
作者
汪希雅
余平
机构
中南大学湘雅医学院免疫学系
出处
《中国病原生物学杂志》
CSCD
2009年第10期790-792,共3页
基金
湖南省大学生创新性实验计划资助项目(No.081053373)
文摘
基因工程抗体在疾病诊断、治疗及医学研究等方面都有着广泛的应用。近几年来,国内外学者对抗体的研究已迈入基因工程抗体阶段,其中单链抗体(single chain Fv,scFv)因其具有分子质量小、穿透力强、体内循环半衰期短及排除了Fc段所致的免疫复合物反应等优点,成为基因工程抗体探索领域中的研究热点。尤其是将scFv应用于医学的研究已取得突破性进展,现就scFv的构建及其在医学上的应用综述如下。
关键词
单链抗体
构建
应用
综述
Keywords
single
-
chain
fv
antibody
（
scfv
）
construction
application
review
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
原文传递
题名
猪蛔虫卵可溶性抗原单链抗体库的构建及初步筛选
4
作者
何光志
周颖
安传伟
张太华
熊文康
崔小东
罗成松
谢波
机构
贵阳中医学院基础部
思南县动物疾病预防控制中心
贵阳中医学院时珍学院
出处
《贵州农业科学》
CAS
北大核心
2011年第12期178-182,共5页
基金
贵州省2011年社会发展科技攻关项目"IL-4R单链抗体制备及其与竹叶青蛇毒LAAO融合蛋白靶向抗胰腺癌的研究"[黔科合SY字(2011)3020]
文摘
为进一步研制抗猪蛔虫的高特异性、高亲和力的基因工程抗体奠定基础,以猪蛔虫未成熟虫卵可溶性抗原免疫BALB/C小鼠,提取小鼠脾脏总RNA,以RT-PCR技术分别扩增出H链和L链可变区基因,以SOE-PCR法将VH和VL片段随机拼接成ScFv片段,然后将ScFv片段克隆至pCANTAB-5E载体,并转化至感受态TG1菌,经辅助噬菌体M13K07拯救,构建猪蛔虫卵可溶性抗原噬菌体展示单链抗体库,结果从20个噬菌体克隆中筛选到15个阳性克隆。
关键词
蛔虫
可溶性抗原
单链抗体库
构建与筛选
Keywords
Ascaris
suum
soluble
immature
antigen（SIEA）
single
-
chain
fv
antibody
（
scfv
）
construction
and
screening
分类号
S858.28 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
抗人肺腺癌单链抗体的构建及在大肠杆菌中的表达
吴朝伟
张屹
张明生
黄浩旻
林晴
俞小淙
陈艾
黄华梁
李新元
王登顺
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
1999
1
下载PDF
职称材料
2
日本血吸虫未成熟卵单链抗体库的构建、筛选及初步应用
何卓
汪世平
肖小芹
曾少华
刘明社
李林
周帅锋
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2008
13
下载PDF
职称材料
3
单链抗体的构建及其在医学上的应用
汪希雅
余平
《中国病原生物学杂志》
CSCD
2009
8
原文传递
4
猪蛔虫卵可溶性抗原单链抗体库的构建及初步筛选
何光志
周颖
安传伟
张太华
熊文康
崔小东
罗成松
谢波
《贵州农业科学》
CAS
北大核心
2011
0
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职称材料
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