期刊文献+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
共找到6篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
应用重组信号蛋白14-3-3间接ELISA诊断日本血吸虫病 被引量：16
1
作者 罗庆礼 王志成 +4 位作者 李敏 郑美娟 余轶婧 罗飞 沈继龙 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期231-235,共5页
目的探讨重组日本血吸虫信号蛋白14-3-3(rSj14-3-3)间接ELISA用于血吸虫病免疫诊断的价值。方法表达并利用纯化的rSj14-3-3与成虫抗原(SjAWA)间接ELISA法分别检测51份急性和49份慢性日本血吸虫病患者和50份正常人血清,以上血清标本同时... 目的探讨重组日本血吸虫信号蛋白14-3-3(rSj14-3-3)间接ELISA用于血吸虫病免疫诊断的价值。方法表达并利用纯化的rSj14-3-3与成虫抗原(SjAWA)间接ELISA法分别检测51份急性和49份慢性日本血吸虫病患者和50份正常人血清,以上血清标本同时用SEA致敏的间接血凝试验(SEA-IHA)检测。再以3种方法检测30份华支睾吸虫感染者、24份卫氏并殖吸虫感染者和31份钩虫感染者血清,分析其交叉反应性。结果51份急性和49份慢性血吸虫病患者血清的rSj14-3-3抗体阳性率分别为98.0%和91.8%;SjAWA的检出率分别为96.1%和90.0%;IHA的阳性率分别为98.0%和93.9%。经统计学分析,以上结果无显著性差异(P>0.05)。Sj14-3-3间接ELISA、SjAWA间接ELISA和SEA-IHA对于30份华支睾吸虫感染者的交叉反应性分别为13.3%、20.0%和16.7%,24份卫氏并殖吸虫感染者分别为8.3%、12.5%和12.5%,31份钩虫感染者分别为12.9%、16.1%和12.9%。经统计学分析结果也无显著性差异(P>0.05)。结论rSj14-3-3抗原间接ELISA法诊断日本血吸虫病,具有高度的敏感性和特异性,可用于血吸虫病的免疫诊断。 展开更多
关键词 日本血吸虫病 14-3-3蛋白 免疫诊断 ELISA间接血凝试验
下载PDF
弓形虫信号转导蛋白14-3-3基因的克隆与表达 被引量：5
2
作者 都建 沈继龙 +1 位作者 汪学龙 王维 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期279-281,共3页
目的　体外扩增弓形虫RH株信号转导蛋白 14 3 3 (Toxo 14 3 3 )基因编码序列 ,构建原核表达质粒 ,并表达Toxo 14 3 3。　方法　收集、纯化弓形虫RH株速殖子 ,提取RNA ,在设计合成的引物中引入EcoRI和XhoI酶切位点。应用RT PCR扩增... 目的　体外扩增弓形虫RH株信号转导蛋白 14 3 3 (Toxo 14 3 3 )基因编码序列 ,构建原核表达质粒 ,并表达Toxo 14 3 3。　方法　收集、纯化弓形虫RH株速殖子 ,提取RNA ,在设计合成的引物中引入EcoRI和XhoI酶切位点。应用RT PCR扩增Toxo 14 3 3基因片段 ,插入原核表达质粒 pET2 8a中 ,重组子双酶切、PCR和测序鉴定 ,转化大肠杆菌BL2 1并以异丙基 β D 硫代半乳糖苷 (IPTG)诱导表达。　 结果　从弓形虫RH株RNA中扩增出 80 3bp的Toxo14 3 3基因片段 ,构建重组质粒 pET2 8a/14 3 3 ;IPTG诱导 ,SDS PAGE显示表达产物的大小约 3 0 .7kDa ,Western印迹鉴定为Toxo 14 3 3。　结论　成功地从弓形虫RH株基因组DNA中获取了 14 3 3基因 ,构建了 pET2 8a/Toxo 14 3 3重组质粒 ,并获得高效表达。 展开更多
关键词 弓形虫 信号转导蛋白 14-3-3基因 克隆 表达
下载PDF
弓形虫信号转导蛋白14-3-3的高效表达及免疫学诊断的初探 被引量：3
3
作者 都建 沈继龙 +4 位作者 王维 李小月 胡元生 钟政荣 刘淼 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2005年第1期12-15,共4页
目的　构建弓形虫信号转导蛋白 14 -3- 3基因的重组质粒 ,并在E .coli中高效表达 ,用于免疫学诊断。方法　以限制性内切酶EcoRI和XhoI双酶切质粒pGEM T/Toxo 14 - 3- 3,获得弓形虫信号转导蛋白 14 - 3 -3编码基因片段 ,插入载体pET2 8a ... 目的　构建弓形虫信号转导蛋白 14 -3- 3基因的重组质粒 ,并在E .coli中高效表达 ,用于免疫学诊断。方法　以限制性内切酶EcoRI和XhoI双酶切质粒pGEM T/Toxo 14 - 3- 3,获得弓形虫信号转导蛋白 14 - 3 -3编码基因片段 ,插入载体pET2 8a ,转化E .coliBL2 1,IPTG诱导表达 ,在非变性条件下纯化融合的表达产物 ,通过Westernblot和ELISA检测其特异的免疫反应性。结果　所构建的弓形虫信号转导蛋白 14 -3 -3(rToxo 14 - 3- 3)在原核系统中的重组表达质粒 ,以 6个His融合蛋白的形式得到高效表达 ,其表达量占细菌裂解液中总蛋白量的 4 9 .2 %。该重组抗原经纯化能被弓形虫感染的人血清所识别。用rToxo 14- 3 -3作为抗原 ,ELISA检测弓形虫病具有高度的敏感性和特异性。结论　rToxo 14 - 3- 3在大肠杆菌中已得到高效表达 ,该重组抗原能有效检测弓形虫的感染 ,可用于弓形虫病诊断试剂盒的研制。 展开更多
关键词 弓形虫 信号转导蛋白 免疫学诊断 重组抗原 E.COLI ET ELISA检测 高效表达 诱导表达 纯化
下载PDF
抗Sj14-3-3特异性IgY的制备及其诊断日本血吸虫病循环抗原的价值 被引量：2
4
作者 罗庆礼 周银娣 沈继龙 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2012年第9期1011-1014,共4页
目的制备抗重组日本血吸虫信号转导蛋白14-3-3(Sj14-3-3)的鸡卵黄免疫球蛋白(IgY),建立双抗体夹心ELISA诊断体系(IgY-ELISA),探讨用于日本血吸虫病的诊断价值。方法利用Sj14-3-3制备并纯化卵黄抗体IgY和兔多克隆IgG抗体;以IgG为捕获抗体... 目的制备抗重组日本血吸虫信号转导蛋白14-3-3(Sj14-3-3)的鸡卵黄免疫球蛋白(IgY),建立双抗体夹心ELISA诊断体系(IgY-ELISA),探讨用于日本血吸虫病的诊断价值。方法利用Sj14-3-3制备并纯化卵黄抗体IgY和兔多克隆IgG抗体;以IgG为捕获抗体,IgY为检测抗体建立双抗体夹心ELISA诊断方法,检测72例急性血吸虫病患者、128例慢性血吸虫病患者、132例正常人、42例肺吸虫患者、60例华支睾吸虫患者和46例钩虫感染者血清。探讨基于IgY的循环抗原检测的应用价值。结果成功制备并鉴定了抗Sj14-3-3特异性IgY和IgG抗体,建立了双抗体夹心ELISA检测体系;检测急性血吸虫病患者和慢性血吸虫病患者血清的阳性率分别为73.6%和48.4%,正常人血清的阴性率为94.7%;与肺吸虫患者、华支睾吸虫患者、钩虫感染者血清的交叉反应分别为7.1%、6.7%、6.5%。结论建立了基于IgY的双抗体夹心ELISA检测体系,用于日本血吸虫病患者血清的检测具有较高的敏感性和特异性,可用于日本血吸虫病的辅助诊断。 展开更多
关键词 日本血吸虫病 循环抗原 14-3-3蛋白 卵黄抗体
下载PDF
日本血吸虫GST蛋白和14-3-3蛋白的研究进展 被引量：1
5
作者 刘文 徐振山 宋礼华 《生物学杂志》 CAS CSCD 2011年第3期80-83,共4页
血吸虫病是严重危害人类健康的人兽共患病之一,在全球范围内,血吸虫病曾在76个国家和地区流行,有超过2亿人感染了血吸虫病。目前,世界上采取了一些人畜同步治疗等综合防治措施,虽取得了一定的成效,但仍面临着成本高、再感染率高等一系... 血吸虫病是严重危害人类健康的人兽共患病之一,在全球范围内,血吸虫病曾在76个国家和地区流行,有超过2亿人感染了血吸虫病。目前,世界上采取了一些人畜同步治疗等综合防治措施,虽取得了一定的成效,但仍面临着成本高、再感染率高等一系列问题。因此,寻找新的治疗药物、疫苗候选分子以及开发高度特异且敏感的标准化免疫诊断试剂是当前日本血吸虫病基础研究的重要内容。主要对WHO提出的最具潜力的疫苗候选分子血吸虫GST蛋白以及参与血吸虫许多生物学功能的14-3-3蛋白的最新研究进展进行一些阐述。 展开更多
关键词 日本血吸虫谷胱甘肽-S-转移酶融合蛋白(SjGST) Sj14-3-3蛋白 日本血吸虫(Schistosoma japonicum)
下载PDF
抗日本血吸虫14-3-3蛋白单克隆抗体5C6抗原识别表位的鉴定 被引量：4
6
作者 钱春艳 宋丽君 +5 位作者 余传信 殷旭仁 王玠 张伟 金一 柯雪丹 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 2012年第1期45-49,共5页
目的采用噬菌体展示肽技术鉴定抗日本血吸虫14-3-3蛋白单克隆抗体5C6的抗原识别表位。方法将纯化的抗日本血吸虫14-3-3蛋白单克隆抗体5C6作为固相配基筛选噬菌体随机展示12肽库,按照吸附-洗脱-扩增的淘洗过程进行3轮生物淘洗,富集特异... 目的采用噬菌体展示肽技术鉴定抗日本血吸虫14-3-3蛋白单克隆抗体5C6的抗原识别表位。方法将纯化的抗日本血吸虫14-3-3蛋白单克隆抗体5C6作为固相配基筛选噬菌体随机展示12肽库,按照吸附-洗脱-扩增的淘洗过程进行3轮生物淘洗,富集特异性结合的噬菌体颗粒。随机挑取第3轮洗脱的独立噬菌体克隆,分别依次进行噬菌体扩增、基因组DNA抽提和DNA序列分析。选择外源性插入DNA序列完全相同或高度相似的同源性噬菌体,采用ELISA及免疫印迹分析对其免疫反应性作进一步鉴定,以确定单克隆抗体5C6的抗原识别表位。结果第3轮淘洗物中33个独立噬菌体克隆的DNA测序结果显示,其中25个噬菌体编码外源性插入肽的核酸序列均为5′-CCACCTAGTAGCAGACCGATTCT-CAGTCGAAGGAAA-3′,其对应的演绎氨基酸序列为PPSSRPILSRRK,该肽与日本血吸虫信号蛋白14-3-3及自然界其他已知蛋白的氨基酸序列均无同源性。免疫印迹试验证实此短肽可被自然感染的日本血吸虫病人血清所识别,而不与健康人血清反应。结论本研究成功鉴定了抗日本血吸虫14-3-3蛋白单克隆抗体5C6所识别的模拟抗原表位,并证明该表位为空间构像表位。 展开更多
关键词 日本血吸虫 信号传导蛋白14-3-3 单克隆抗体 噬菌体随机展示肽库 模拟表位 生物淘洗
原文传递
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
上一页 1 下一页 到第 页
使用帮助 返回顶部