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人胃癌侧群细胞的分离鉴定和生物学特性分析 被引量:6
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作者 吴婷 李锦毅 陆士新 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期264-268,共5页
目的检测和分选胃癌细胞系中具有干细胞特性的侧群(sP)细胞,分析其生物学特性。方法制备胃癌细胞株BGC-823悬液,经Hoeehst33342染色后,用荧光激活细胞分选技术分选出人胃癌sP和非SP(NSP)细胞,测定sP细胞亚群所占的比例。通过平... 目的检测和分选胃癌细胞系中具有干细胞特性的侧群(sP)细胞,分析其生物学特性。方法制备胃癌细胞株BGC-823悬液,经Hoeehst33342染色后,用荧光激活细胞分选技术分选出人胃癌sP和非SP(NSP)细胞,测定sP细胞亚群所占的比例。通过平板克隆实验检测sP细胞的克隆形成能力,无血清培养检测sP细胞的增殖能力。以不同浓度的氟尿嘧啶(5-Fu)处理BGC.823细胞后,检测sP细胞的耐药性,通过小鼠体内成瘤实验检测sP细胞的致瘤性。结果流式细胞仪分析结果表明,BGC-823细胞中含少量sP细胞,占0.9%~2.1%。SP细胞组克隆形成数量为(217.67±15.50)个/孔,高于NSP细胞组[(147.00±17.58)个/孔,P〈0.01];SP细胞组克隆形成率为(72.56±5.17)%,高于NSP细胞组[(49.00±5.86)%,P〈0.01],表明sP细胞较NSP细胞有较强的克隆形成能力。经2.5、5、10和25斗∥ml的5-Fu作用36h后,sP细胞所占比例分别为12.9%、9.9%、4.0%和2.1%,化疗药物对sP细胞的抑制作用随着药物浓度的递增而加强。体内成瘤实验显示,sP细胞组瘤体质量为(0.176±0.034)g,NSP细胞组瘤体质量仅为(0.045±0.046)g,两组细胞所致瘤体质量差异有统计学意义(P〈0.05)。结论人胃癌细胞BGC-823中存在具有干细胞特性的sP细胞,进一彤开展对人冒痛千纲晌毕物学特忡的研容.将百r能棍示冒癌新的诊断和治疗涂释. 展开更多
关键词 胃肿瘤 侧群细胞 肿瘤干细胞 流式细胞术 BGC-823细胞 小鼠
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基于SP细胞分选法初步鉴定卵巢癌干细胞表面标志 被引量:5
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作者 张弦 蒋翠莲 +4 位作者 王宝偲 刘蔷 左鹏飞 赵枫姝 窦骏 《东南大学学报(医学版)》 CAS 2009年第6期491-496,共6页
目的:基于侧群(SP)细胞分选方法,初步鉴定卵巢癌干细胞(CSC)表面标志,为临床靶向治疗卵巢癌提供靶分子。方法:检测、分离卵巢癌细胞株A2780中的SP细胞,并对SP与Non-SP细胞作细胞生物学鉴定,包括克隆形成能力、致瘤能力、耐药性、定量AT... 目的:基于侧群(SP)细胞分选方法,初步鉴定卵巢癌干细胞(CSC)表面标志,为临床靶向治疗卵巢癌提供靶分子。方法:检测、分离卵巢癌细胞株A2780中的SP细胞,并对SP与Non-SP细胞作细胞生物学鉴定,包括克隆形成能力、致瘤能力、耐药性、定量ATP结合框蛋白家族G2蛋白(ABCG2)检测等;进一步用免疫磁选方法筛出ABCG2+及ABCG2-细胞,同样作上述细胞生物学鉴定,探讨ABCG2分子能否作为卵巢CSC的表面标志。结果:卵巢癌A2780细胞株中的SP细胞在体外强克隆形成能力、裸鼠体内的高致瘤性、对化疗药物长春新碱较强耐受性及高表达ABCG2分子等生物学特性基本符合CSC的特征。ABCG2+细胞的克隆增殖能力略强于ABCG2-细胞;ABCG2+细胞的耐药性与SP细胞的耐药性一致。结论:A2780细胞株中的SP细胞基本符合CSC的生物学特征,其高表达的ABCG2分子参与维持SP细胞表型,特别是多药耐药性。ABCG2分子可作为靶向治疗CSC的靶分子,逆转肿瘤的多药耐药性。 展开更多
关键词 侧群细胞 卵巢癌 癌干细胞 ABCG2分子 靶向治疗
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MAGE-A3在人类膀胱癌干细胞中的表达 被引量:3
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作者 殷波 石武 +3 位作者 李明 王鹏 刘岗 宋永胜 《现代肿瘤医学》 CAS 2013年第10期2166-2168,共3页
目的:研究肿瘤相关抗原,黑色素瘤抗原家族A成员3(melanoma antigen family A,3;MAGE-A3),在人类膀胱癌干细胞中的表达情况,并探讨其意义。方法:采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术和Western blot技术检测MAGE-A3在人类膀胱癌细胞系T24... 目的:研究肿瘤相关抗原,黑色素瘤抗原家族A成员3(melanoma antigen family A,3;MAGE-A3),在人类膀胱癌干细胞中的表达情况,并探讨其意义。方法:采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术和Western blot技术检测MAGE-A3在人类膀胱癌细胞系T24细胞中及从其中分离出来的具有干细胞特性的T24侧群细胞中的表达情况;采用免疫荧光双标记技术检测MAGE-A3和膀胱癌干细胞的一个标志物CD133在T24侧群细胞中的共表达情况。结果:在mRNA和蛋白水平,MAGE-A3在具有癌干细胞特性的T24侧群细胞中的表达水平明显高于对应的母系T24细胞;MAGE-A3和膀胱癌干细胞标志物CD133在T24侧群细胞中有阳性共表达。结论:MAGE-A3在人类膀胱癌干细胞中有特异性的高表达,有望成为膀胱癌干细胞一个新的、特异性的标志物,及针对膀胱癌干细胞进行免疫治疗的一个新的靶点。 展开更多
关键词 黑色素瘤抗原家族A成员3 膀胱癌 癌干细胞 侧群细胞
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人结肠癌细胞系 SP 细胞 microRNA 表达谱的初步分析 被引量:2
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作者 夏忠胜 钟娃 +3 位作者 于涛 练国达 周慧敏 陈广成 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期1184-1191,共8页
目的:探讨结肠癌侧群(SP)细胞在结肠癌多药耐药性中的作用及其microRNA生物标志。方法:结肠癌SP细胞的分选采用流式细胞术,细胞活力的测定采用MTT法,microRNA表达谱的检测采用microRNA芯片,microRNA表达的验证采用实时荧光定量PCR。结果... 目的:探讨结肠癌侧群(SP)细胞在结肠癌多药耐药性中的作用及其microRNA生物标志。方法:结肠癌SP细胞的分选采用流式细胞术,细胞活力的测定采用MTT法,microRNA表达谱的检测采用microRNA芯片,microRNA表达的验证采用实时荧光定量PCR。结果:(1)HCT-15、HT-29及LoVo结肠癌细胞系中SP细胞的比例分别为16.75%、13.02%及9.52%。(2)化疗药(5-氟尿嘧啶、草酸铂及阿霉素)对3种结肠癌细胞系SP细胞的IC_(50)均明显高于对非SP细胞的IC_(50)(P<0.05)。(3)microRNA芯片检测表明miR-5000-3p、miR-5009-3p及miR-552在3种结肠癌细胞系的SP细胞中表达均上调,实时荧光定量PCR亦证实此结果。结论:miR-5000-3p、miR-5009-3p及miR-552在结肠癌细胞系的SP细胞中表达上调,有可能成为结肠癌SP细胞的潜在microRNA生物标志。 展开更多
关键词 结肠肿瘤 侧群细胞 微小RNA miR-5000-3p miR-5009-3p miR-552
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