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Identification of global alternative splicing and sex-specific splicing via comparative transcriptome analysis of gonads of Chinese tongue sole(Cynoglossus semilaevis)
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作者 Yi-Fang Lu Qian Liu +4 位作者 Kai-Qiang Liu Hong-Yan Wang Cheng-Hua Li Qian Wang Chang-Wei Shao 《Zoological Research》 SCIE CAS CSCD 2022年第3期319-330,共12页
Chinese tongue sole(Cynoglossus semilaevis)is an economically important marine fish species with a ZZ/ZW sex determination mechanism,which can be influenced by temperature.Alternative splicing(AS)is an important mecha... Chinese tongue sole(Cynoglossus semilaevis)is an economically important marine fish species with a ZZ/ZW sex determination mechanism,which can be influenced by temperature.Alternative splicing(AS)is an important mechanism regulating the expression of genes related to sex determination and gonadal differentiation,but has rarely been reported in fish.In this study,to explore the molecular regulatory mechanisms of sex determination and gonadal differentiation,we combined isoform and RNA sequencing(Iso-Seq and RNA-Seq)to perform transcriptome profiling of male and female gonads in C.semilaevis.In total,81883 and 32341 full-length transcripts were obtained in males and females,respectively.A total of 8279 AS genes were identified,including 2639 genes showing differential AS(DAS)between males and females.Many intersecting DAS genes and differentially expressed genes(DEGs)were enriched in the meiotic cell cycle pathway,and genes related to gonadal differentiation,such as esrrb and wt1a,were found to have sex-specific isoforms.Thus,this study revealed AS events in the gonadal transcriptomes of male and female C.semilaevis,described the characteristics of active transcription in the testes,and identified candidate genes for studying the regulatory mechanisms of AS during gonadal differentiation. 展开更多
关键词 Gonadal differentiation Alternative splicing sex-specific splicing Cynoglossus semilaevis Iso-Seq RNA-SEQ
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番石榴实蝇性别决定基因Bcotra和Bcotra-2的克隆、序列特征及表达分析 被引量:1
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作者 刘桂清 武强 +3 位作者 和丹阳 张桂芬 李建伟 万方浩 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期516-525,共10页
【目的】对番石榴实蝇Bactrocera correcta(Bezzi)性别决定基因transformer和transformer 2的c DNA和基因组DNA序列进行克隆和分析,明确这2个基因的结构特征及其在不同发育阶段和雌、雄成虫不同组织中的表达模式,为进一步的功能研究和... 【目的】对番石榴实蝇Bactrocera correcta(Bezzi)性别决定基因transformer和transformer 2的c DNA和基因组DNA序列进行克隆和分析,明确这2个基因的结构特征及其在不同发育阶段和雌、雄成虫不同组织中的表达模式,为进一步的功能研究和番石榴实蝇遗传性别品系(genetic sexing strain,GSS)的建立奠定基础。【方法】利用PCR结合RACE技术克隆番石榴实蝇2个性别决定基因的c DNA全长和内含子序列,利用不同的生物信息学软件对序列进行结构预测、序列比对和进化树分析;利用半定量RT-PCR检测这2个基因在番石榴实蝇的不同发育阶段及雌、雄成虫不同组织(精巢、卵巢、中肠和脂肪体)中的表达分布。【结果】克隆得到番石榴实蝇transformer和transformer 2的c DNA全长序列,分别命名为Bcotra和Bcotra-2。Bcotra存在性别特异剪接,雌虫Bcotra的c DNA全长1 673 bp,其开放读码框(ORF)为1 242 bp,编码413个氨基酸(Gen Bank登录号为KP712876);雄虫Bcotra c DNA全长2 025 bp,比雌虫多2个外显子,但由于外显子上有多个终止密码子,因此,不能编码完整的有功能的Tra蛋白(Gen Bank登录号为KP712877)。Bcotra-2不存在性别特异剪接,c DNA全长1 458 bp,其开放读码框(ORF)为756bp,编码251个氨基酸,具有RNA结合蛋白的典型特征(Gen Bank登录号为KM658207)。Bcotra-2有8个外显子,7个内含子。氨基酸序列比对和系统进化关系表明,两个基因的系统发育关系一致,Tra-2与目前已报道的双翅目Tra-2具有很高的同源性,而Tra的保守性较Tra-2要低。半定量RT-PCR结果显示,Bcotra和Bcotra-2在番石榴实蝇的不同发育阶段及雌、雄成虫不同组织中都有表达。【结论】本研究明确了Bcotra和Bcotra-2的基因组DNA和c DNA结构特征,Bcotra和Bcotra-2在番石榴实蝇的不同发育阶段和成虫不同组织中均有表达,序列分析发现这两个性别决定基因均具有Tra/Tra-2结合位点、内含子剪接抑制序列位点,其 展开更多
关键词 番石榴实蝇 性别决定 TRANSFORMER TRANSFORMER 2 性别特异剪接 表达谱
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斯氏按蚊性别决定基因fruitless的鉴定及其性别可变剪接分析
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作者 王衍海 王欣玲 顾金保 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 2017年第3期245-248,共4页
目的 分离、鉴定和分析斯氏按蚊性别决定基因fruitless(Anstfru).方法 通过生物信息学方法与分子生物学方法获得了Anstfru基因的全长.通过RT-PCR方法验证Anstfru的性别可变剪接模式与时间表达特点.通过与已知物种FRU蛋白比较,分析斯... 目的 分离、鉴定和分析斯氏按蚊性别决定基因fruitless(Anstfru).方法 通过生物信息学方法与分子生物学方法获得了Anstfru基因的全长.通过RT-PCR方法验证Anstfru的性别可变剪接模式与时间表达特点.通过与已知物种FRU蛋白比较,分析斯氏按蚊FRU蛋白结构特点与分子进化特征.结果 分离并鉴定Anstfru基因全长,其在雌、雄蚊中通过可变剪切形成性别特异性mRNA.Anstfru在1~2龄阶段幼虫阶段开始表达,表达量随后逐渐升高,在成蚊中表达量最高.FRU蛋白具有保守的BTB与锌指功能结构域区.结论 Anstfru具有保守的昆虫性别决定基因fru表达特征与功能结构域,对其深入研究将为其最终应用于蚊虫雌雄分离技术,推动昆虫不育技术(Sterile insect technique,SIT)在蚊媒传染病防治上的应用. 展开更多
关键词 斯氏按蚊 FRUITLESS 性别决定基因 性别可变剪接分析
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