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传染性非典型肺炎的血清学诊断研究 被引量：46
1
作者 国家SARS防治紧急科技行动北京组 《中华结核和呼吸杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期339-342,共4页
目的　评估传染性非典型肺炎 (世界卫生组织又称严重急性呼吸综合征 ,SARS)血清病毒特异性抗体检测在SARS诊断中的实用价值 ,了解免疫荧光抗体法 (IFA )和酶联免疫吸附法(ELISA)对SARS病毒特异性抗体检测结果的一致性程度。方法　用IFA... 目的　评估传染性非典型肺炎 (世界卫生组织又称严重急性呼吸综合征 ,SARS)血清病毒特异性抗体检测在SARS诊断中的实用价值 ,了解免疫荧光抗体法 (IFA )和酶联免疫吸附法(ELISA)对SARS病毒特异性抗体检测结果的一致性程度。方法　用IFA和ELISA检测 2 6 7例不同病程SARS患者和 132例对照组血清SARS病毒特异性抗体 ,以敏感度、特异度、阳性预测值(PPV)、阴性预测值 (NPV)和准确度评价其诊断价值 ,并以Kappa值评价两种检测方法结果的一致性。结果以IFA检测的血清特异性IgM类和IgG类抗体阳性率在病程第 11天明显增高 ,病程≥ 11天者 ,IgM类抗体诊断SARS的敏感度为 6 5 6 % ,特异度 10 0 0 % ,PPV 10 0 0 % ,NPV 71 0 % ,准确度 81 3% ;IgG类抗体则分别为敏感度 91 1% ,特异度 97 0 % ,PPV 97 3% ,NPV 90 1% ,准确度93 8%。以ELISA方法所测结果与IFA结果相仿。对IFA和ELISA法检测的一致性检验示Kappa值分别为 0 6 4 0和 0 779。结论　血清病毒特异性抗体在SARS发病 10天以上者阳性率高 ,抗体检测有助于确立发病 10天以上SARS的血清学诊断。IFA和ELISA检测SARS病毒抗体的一致性较好。 展开更多
关键词 传染性非典型肺炎 血清学诊断 酶联免疫吸附法 免疫荧光抗体法
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猪链球菌病研究进展 被引量：43
2
作者 李军 牛钟相 《动物医学进展》 CSCD 2004年第3期31-33,共3页
链球菌是一种重要的猪病原菌并能感染人 ,它能引起猪的败血症、脑膜炎、肺炎、多发性关节炎和多发性浆膜炎。文章从流行病学、病原及其毒力因子等方面作了详细的综述 。
关键词 猪 链球菌病 流行病学 链球菌 毒力因子 诊断 防治
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重组结核分支杆菌38kD和16kD蛋白用于结核病血清学诊断的价值 被引量：38
3
作者 张小刚 庄玉辉 +5 位作者 何秀云 熊志红 董恩军 李书琳 张永胜 李昕 《中国防痨杂志》 CAS 北大核心 2001年第5期281-283,共3页
目的　探讨国产重组结核分支杆菌蛋白 38kD(rTPA38)和 16kD(rTPA16)用于结核病的诊断价值。方法　以rTPA38和rTPA16为抗原 ,PPD为对照 ,用ELISA法检测血清中特异性抗结核抗体。结果　 2 4 6例肺结核病组 ,rTPA38、rTPA16和PPD检测的灵... 目的　探讨国产重组结核分支杆菌蛋白 38kD(rTPA38)和 16kD(rTPA16)用于结核病的诊断价值。方法　以rTPA38和rTPA16为抗原 ,PPD为对照 ,用ELISA法检测血清中特异性抗结核抗体。结果　 2 4 6例肺结核病组 ,rTPA38、rTPA16和PPD检测的灵敏度分别为 66.3%、63.0 %和 72 .3%。健康献血组、非结核呼吸疾病组和卡介苗接种阳转组血清同时用rTPA38、rTPA16和PPD检测 ,rTPA38特异性分别为 97.6%、96.8%、86.0 %。rTPA16特异性分别为 94 .7%、93.1%、75 .0 %。PPD特异性为93.4 %、85 .7%、67.9%。统计分析显示 ,rTPA38蛋白和PPD检测非结核呼吸疾病组 ,其阳性率有显著性差异 (P <0 .0 5 )。两者检测卡介苗接种阳转组阳性率和血清抗体滴度有显著性差异 (P <0 .0 5 )。rTPA38和rTPA16同时检测 10 8例肺结核病组血清可提高 11.1%的阳性率。结论　rTPA38蛋白抗原有较好的灵敏度和较高特异性 ,是ELISA的可靠抗原 ,与rTPA16联用可提高灵敏度 ,对结核病血清学诊断有较高参考价值。 展开更多
关键词 结核分支杆菌 重组蛋白38kD 结核病 重组蛋白16kD ELISA 血清学诊断
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重组Sj26(rSj26)抗原免疫酶测定新方法诊断日本血吸虫病的研究 被引量：22
4
作者 谢可鸣 陈家旭 +5 位作者 刘述先 龚唯 胡永德 夏超明 宋光承 李允鹤 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 1995年第4期219-222,共4页
将日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)和重组Sj26(rSj26)抗原致敏的硝酸纤维素膜片(NCD)用于膜片免疫酶测定(D-IEA),分别检测同批日本血吸虫病人、卫氏并殖吸虫病人、华支睾吸虫病人和健康人血清104例的特异性抗体,同时用目测及光密度(OD)... 将日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)和重组Sj26(rSj26)抗原致敏的硝酸纤维素膜片(NCD)用于膜片免疫酶测定(D-IEA),分别检测同批日本血吸虫病人、卫氏并殖吸虫病人、华支睾吸虫病人和健康人血清104例的特异性抗体,同时用目测及光密度(OD)值测定两种方法判断反应结果。结果显示,分别采用上述两种抗原检测所获的阳性率或假阳性率间无显著性差异。此结果首次提示rSj26抗原的血清诊断效果与目前血吸虫病血清学方法常用抗原SEA相似。本文报告的免疫酶测定新方法,可同时采用两种方法判断结果,迄今尚未见到类似报道。试验结果均表明用D-IEA检测时显示高度的敏感性(92.1％—94.7％)和特异性(0.0％—2.9％),具有实用价值。 展开更多
关键词 日本血吸虫病 血清学诊断 膜片免疫酶测定法 重组Sj26抗原 可溶性血吸虫卵抗原
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国内外百日咳实验室诊断标准现状及血清学诊断的应用价值 被引量：16
5
作者 张雨笑 谌志筠 何秋水 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期560-564,共5页
尽管疫苗覆盖率很高，近年来百日咳全球发病率仍有所上升，在局部地区甚至出现暴发流行。青少年和成年中隐性感染率升高，成为婴幼儿发病的重要传染源。由于临床医生对百日咳非典型病例认识不足，需要结合实验室方法为疾病的诊断提供可... 尽管疫苗覆盖率很高，近年来百日咳全球发病率仍有所上升，在局部地区甚至出现暴发流行。青少年和成年中隐性感染率升高，成为婴幼儿发病的重要传染源。由于临床医生对百日咳非典型病例认识不足，需要结合实验室方法为疾病的诊断提供可靠的依据。百日咳实验室诊断方法包括细菌学方法、PCR和血清学检测法。因疫苗接种、标本采集和就诊时间等原因，不同诊断方法有其适用范围和局限性。在青少年和成年人中，血清学检测因其特异性和敏感性成为合适的检测方法。本文就国内外百日咳实验室诊断标准的现状及血清学诊断的应用价值进行综述。 展开更多
关键词 百日咳 实验室诊断 血清学诊断 诊断标准
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肺炎支原体血清学抗体检测现状与研究进展 被引量：15
6
作者 白晓晨 《国际儿科学杂志》 2017年第3期-,共5页
肺炎支原体(Mycoplasma pneumonia,Mp)是引起儿童社区获得性肺炎的常见病因,并可引起多种肺外并发症.因此快速、敏感的诊断方法对于Mp的早期诊断和治疗尤为重要.由于Mp生长缓慢、对营养和环境要求较高、培养过程受真菌和细菌影响较大,... 肺炎支原体(Mycoplasma pneumonia,Mp)是引起儿童社区获得性肺炎的常见病因,并可引起多种肺外并发症.因此快速、敏感的诊断方法对于Mp的早期诊断和治疗尤为重要.由于Mp生长缓慢、对营养和环境要求较高、培养过程受真菌和细菌影响较大,普通培养法不能满足临床快速诊断.PCR技术复杂,对操作人员的要求较高,不适合在基层医院推行实施;因此血清学诊断成为目前临床最常用诊断方法.该文就目前临床及科研中Mp不同血清学诊断方法、抗原成分以及不同感染时期抗体成分的检测的最新研究进展进行综述. 展开更多
关键词 肺炎支原体 血清学诊断 抗原 抗体检测
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结核分支杆菌重组38000蛋白的免疫原性特征 被引量：12
7
作者 何秀云 庄玉辉 +4 位作者 张晓刚 熊志红 董蒽军 史迎昌 昌增益 《中华结核和呼吸杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第8期485-488,共4页
目的　了解结核分支杆菌重组 380 0 0蛋白 (rMT38)诱发家兔产生抗体的能力及作为血清学诊断试剂的价值。方法　将家兔分为 6组 :PPD +生理盐水 (A组 ) ,rMT38+生理盐水 (B组 ) ,rMT38+佐剂 (C组 ) ,1/ 2rMT38+1/ 2rMT16 +生理盐水 (D组 ... 目的　了解结核分支杆菌重组 380 0 0蛋白 (rMT38)诱发家兔产生抗体的能力及作为血清学诊断试剂的价值。方法　将家兔分为 6组 :PPD +生理盐水 (A组 ) ,rMT38+生理盐水 (B组 ) ,rMT38+佐剂 (C组 ) ,1/ 2rMT38+1/ 2rMT16 +生理盐水 (D组 ) ,1/ 2rMT38+1/ 2rMT16 +佐剂 (E组 ) ,rMT16 +佐剂 (F组 ) )。用ELISA法测C、E两组血清是否与分支杆菌PPD有交叉反应。双向扩散和ELISA法检测rMT38免疫的血清反应。ELISA法检测 389份人血清 ,包括肺结核病人 145例、卡介苗接种阳转健康者 78例、健康献血者 10 5例、非结核呼吸道疾病 31例及脓肿分支杆菌感染者 30例。结果C、E两组血清用双向扩散和ELISA检测抗体滴度分别为 1∶16、1∶4和 1∶6 40 0、1∶32 0 0 ;双向扩散检测A、B、D、F组血清与rMT38均未见免疫沉淀线 ;ELISA检测A、F组血清 ,抗体为阴性 ,B、D组抗体滴度均为 1∶40 0。C组血清与所试分支杆菌PPD用ELISA检测均为阴性 ;E组血清与牛、结核分支杆菌PPD呈阳性反应。兔血清抗体效价结果显示 :5个月后 ,C、E组血清效价均下降 ,但仍能检测到抗体 ;B、D组血清 2个月抗体检测为阴性。肺结核病组rMT38和PPD检测敏感性分别为 6 9 0 %和 75 2 % ;健康组、非结核呼吸道疾病组。 展开更多
关键词 结核分支杆菌 重组38000蛋白 免疫原性 诊断
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血清Mplp抗原检测对艾滋病合并马尔尼菲蓝状菌病的诊断价值 被引量：14
8
作者 李凌华 肖赛银 +5 位作者 何艳 胡凤玉 陈万山 雷华丽 唐小平 蔡卫平 《中华传染病杂志》 CSCD 北大核心 2017年第3期157-160,共4页
目的探讨马尔尼菲蓝状菌特异性甘露糖蛋白Mplp抗原检测在诊断艾滋病合并马尔尼菲蓝状菌病中的应用价值。方法2012年1月至2015年6月广州市第八人民医院收治的艾滋病合并马尔尼菲蓝状菌病患者184例，经病原学检测均马尔尼菲蓝状菌阳性；... 目的探讨马尔尼菲蓝状菌特异性甘露糖蛋白Mplp抗原检测在诊断艾滋病合并马尔尼菲蓝状菌病中的应用价值。方法2012年1月至2015年6月广州市第八人民医院收治的艾滋病合并马尔尼菲蓝状菌病患者184例，经病原学检测均马尔尼菲蓝状菌阳性；对照组205例包括艾滋病未合并马尔尼菲蓝状菌病患者176例和健康对照者29名。使用双抗体夹心ELISA法和荧光免疫层析技术结合双抗体夹心法检测血清Mplp抗原，分析其对诊断艾滋病合并马尔尼菲蓝状菌病的灵敏度与特异度。统计学处理采用Х^2检验和t检验。结果艾滋病合并马尔尼菲蓝状菌病患者与对照组性别和年龄比较差异无统计学意义（Х^2=0．019，P—o．889；t=1．810，P=0．07）。双抗体夹心ELISA法和荧光免疫层析技术结合双抗体夹心法诊断艾滋病合并马尔尼菲蓝状菌病的灵敏度分别为82．07％（151／184）和83．15％（153／184），两种方法比较差异无统计学意义（Х^2=0．076，P=0．783）；特异度分别为93．17％（191／205）和92．68％（190／205），两种方法比较差异无统计学意义（Х^2=0．037，P=0．847）；准确度分别为87．92％（342／389）和88．17％（343／389），两种方法比较差异无统计学意义（Х^2=0．012，P=0．912）；假阳性率分别为6．83％（14／205）和7．32％（15／205），假阴性率分别为17．93％（33／184）和16．85％（31／184），两种方法比较差异无统计学意义（Х^2=0．049，P=0．829）；阳性预测值分别为91．52％（151／165）和91．07％（153／168），两种方法比较差异无统计学意义（Х^2=0．021，P=0．886）；阴性预测值分别为85．27％（191／224）和85．97％（190／221），两种方法比较差异无统计学意义（Х^2=0．045，P=0．832）；Kappa值分别为0．83和0．80。结论血清马尔尼菲蓝状菌Mplp抗原检测的特异度和敏感度较高，可用于早期 展开更多
关键词 获得性免疫缺陷综合征 马尔尼菲蓝状菌 甘露糖蛋白Mplp 血清学诊断
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深部真菌感染早期诊断的现况与策略 被引量：12
9
作者 桑军军 潘炜华 廖万清 《上海医药》 CAS 2014年第9期4-7,共4页
我国深部真菌感染的发病率明显上升,实验室检查是诊断真菌感染的重要依据,而目前实验室诊断水平远不能满足临床实际需求。本文对目前现有的实验室诊断技术进行了回顾,指出了目前我国深部真菌感染的早期诊断的难点及发展趋势,并立足现有... 我国深部真菌感染的发病率明显上升,实验室检查是诊断真菌感染的重要依据,而目前实验室诊断水平远不能满足临床实际需求。本文对目前现有的实验室诊断技术进行了回顾,指出了目前我国深部真菌感染的早期诊断的难点及发展趋势,并立足现有实验室检查技术及临床检查手段提出了深部真菌感染的早期诊断策略。 展开更多
关键词 深部真菌感染 早期诊断 血清学诊断 分子生物学诊断
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微波辐射ELISA诊断日本血吸虫病的初步研究 被引量：13
10
作者 顾启章 张宏莹 +1 位作者 朱善济 徐文娟 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期115-116,共2页
目的：探索高效快速的血吸虫病诊断方法。方法：用微波辐射ＥＬＩＳＡ和快速ＥＬＩＳＡ同步检测各期日本血吸虫病患者血清１１８份，健康人血清６１份，并殖吸虫病犬血清１２份。结果：两种方法的血吸虫病患者血清抗体阳性检出率分别为... 目的：探索高效快速的血吸虫病诊断方法。方法：用微波辐射ＥＬＩＳＡ和快速ＥＬＩＳＡ同步检测各期日本血吸虫病患者血清１１８份，健康人血清６１份，并殖吸虫病犬血清１２份。结果：两种方法的血吸虫病患者血清抗体阳性检出率分别为８８．１％（１０４／１１８）和９１．５％（１０８／１１８），无显著性差异。健康人血清抗体假阳性分别为２份（３．３％）和１份（１．６％），亦无显著性差异；交叉反应均无假阳性。结论：微波辐射ＥＬＩＳＡ具有与快速ＥＬＩＳＡ类似的敏感性和特异性，但前者具有快速获得检测结果的优点。 展开更多
关键词 血吸虫病 血清学诊断 抗体检测 ELISA
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新生儿及婴儿TORCH感染的临床及实验室资料分析 被引量：12
11
作者 孙素欣 储红颖 《安徽医药》 CAS 2007年第2期161-162,共2页
目的分析总结住院新生儿及婴儿TORCH感染的临床及TORCH特异性抗体检测的实验室资料。方法采用ELIAS法检测110例住院新生儿及婴儿血清TORCH特异性抗体。结果110例标本中,检出巨细胞病毒(CMV)特异性IgM 27例,IgG64例,风疹病毒(RV)特异性Ig... 目的分析总结住院新生儿及婴儿TORCH感染的临床及TORCH特异性抗体检测的实验室资料。方法采用ELIAS法检测110例住院新生儿及婴儿血清TORCH特异性抗体。结果110例标本中,检出巨细胞病毒(CMV)特异性IgM 27例,IgG64例,风疹病毒(RV)特异性IgM 1例,IgG56例,弓形体病毒(TOX)特异性IgM及IgG为0,单纯疱疹病毒(HSV)特异性IgM 0例,IgG 49例。TORCH的总感染率为24.55%(27/110)。TORCH检测IgM阳性者以肝炎综合征为主,其次是呼吸道感染、VitK缺乏。结论ELISA法检测TORCH血清特异性抗体,具有方法简单,特异性强,敏感性高、及时获得检测结果等优点。 展开更多
关键词 TORCH感染 血清学诊断 新生儿及婴儿
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用动物模型评估抗烯醇化酶抗体测定对系统性白念珠菌病的诊断价值 被引量：11
12
作者 孔小祥 李芳秋 +1 位作者 王仕钦 史利宁 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期69-71,共3页
目的建立系统性白念珠菌病(SC)家兔模型,考察免疫功能正常组和免疫功能低下组家兔产生特异性抗体的动力学,评估抗烯醇化酶抗体的诊断价值。方法新西兰大白兔随机分为A组(免疫功能正常组)和B组(免疫功能低下组,注射氢化可的松建模),每组4... 目的建立系统性白念珠菌病(SC)家兔模型,考察免疫功能正常组和免疫功能低下组家兔产生特异性抗体的动力学,评估抗烯醇化酶抗体的诊断价值。方法新西兰大白兔随机分为A组(免疫功能正常组)和B组(免疫功能低下组,注射氢化可的松建模),每组4只,静脉注射白念珠菌分生孢子,建立SC动物模型。每2d采血,用western blot检测血清抗白念珠菌非糖基化蛋白抗体谱、用ELISA法检测抗烯醇化酶抗体滴度。结果 western blot结果显示,感染后第16d,两组家兔血清均出现与非糖基化蛋白组分反应的抗体,以相对分子量(Mr)29000和48000蛋白的抗体反应最强,其中Mr 48000蛋白为烯醇化酶。ELISA结果显示,感染后第12d,所有家兔即可检出抗烯醇化酶抗体,且抗体滴度持续升高。结论免疫功能正常和免疫功能低下家兔罹患SC时,产生特异性抗体的动力学无显著差异;抗白念珠菌烯醇化酶抗体有望成为早期快速诊断SC的指标。 展开更多
关键词 系统性白念珠菌病 动物模型 抗烯醇化酶抗体 血清学诊断
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血吸虫病与并殖吸虫病患者血清学诊断的交叉反应 被引量：11
13
作者 张悟澄 陈翠娥 +1 位作者 曾庆仁 周金春 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1991年第4期278-280,共3页
25例急性、36例慢性日本血吸虫病患者及68例斯氏狸殖吸虫病患者血清,以血吸虫卵抗原(SEA)、虫卵及狸殖吸虫成虫抗原(PAA)、后尾蚴为抗原,用生物素-亲和素系统(BAS)、ELISA、环卵沉淀反应(COPT)及后尾蚴膜反应(MCMR)等方法,同时检测各类... 25例急性、36例慢性日本血吸虫病患者及68例斯氏狸殖吸虫病患者血清,以血吸虫卵抗原(SEA)、虫卵及狸殖吸虫成虫抗原(PAA)、后尾蚴为抗原,用生物素-亲和素系统(BAS)、ELISA、环卵沉淀反应(COPT)及后尾蚴膜反应(MCMR)等方法,同时检测各类血清与同种抗原的特异性阳性反应率及其与异种抗原的交叉反应率。结果显示,关于特异性阳性反应率:BAS及ELISA,对急血患者均为100％,慢血分别为100％及97.2％;对并殖吸虫病均为98.5％。关于交叉反应率:BAS、ELISA、MCMR对急血分别为76％、72％、20％;慢血分别为27.8％、22.2％、19.4％;BAS、ELISA、COPT对肺吸虫病血清分别为26.5％、30.9％、8.8％。结果表明,交叉反应阳性率的高低与检测方法的敏感性有关;急血患者用BAS或ELISA法的交叉反应率显著高于慢血;慢血患者的交叉反应率与感染度有关;同时采用多项检测方法,其交叉反应累积的阳性例数多于单用一种方法的例数,但如将多项方法均为交叉反应者才判为交叉反应的阳性例数,则其例数少于单用一项方法的例数,故对用一项检测出现交叉反应的患者,建议增加检测项目,并以所有项目均出现交叉反应者才判为交叉反应阳性病例,这样可降低交叉反应率。 展开更多
关键词 血清学诊断 血吸虫病 并殖吸虫病
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奶牛布鲁氏菌病不同血清学检测方法的比较研究 被引量：11
14
作者 李静茹 闫磊 +4 位作者 全清华 白雪利 张改平 郝慧芳 张震 《黑龙江畜牧兽医（下半月）》 北大核心 2016年第12期102-105,294,共5页
为了比较布鲁氏菌病不同血清学诊断方法的优缺点,试验采用虎红平板凝集试验(RBT)、快速诊断试纸卡、间接酶联免疫吸附试验(i ELISA)、竞争酶联免疫吸附试验(c ELISA)四种不同的血清学检测方法,同时对河南地区2 545头疑似布鲁氏菌病病牛... 为了比较布鲁氏菌病不同血清学诊断方法的优缺点,试验采用虎红平板凝集试验(RBT)、快速诊断试纸卡、间接酶联免疫吸附试验(i ELISA)、竞争酶联免疫吸附试验(c ELISA)四种不同的血清学检测方法,同时对河南地区2 545头疑似布鲁氏菌病病牛进行了布鲁氏菌的检测。结果表明:与i ELISA、c ELISA以及快速诊断试纸卡方法相比,RBT法操作简便、成本较低,且阳性检出率较高,但其特异性较低,容易出现假阳性结果;快速诊断试纸卡与i ELISA、c ELISA的阳性检出率、敏感性和特异性相互比较均无显著差异(P>0.05)。说明在实际应用中牧场应根据自己的条件与需要选择合适的检测方法。 展开更多
关键词 奶牛 布鲁氏菌病 血清学诊断 阳性检出率 敏感性 特异性
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肠道病毒71型重组VP1蛋白的表达和EV71型手足口病血清学诊断方法的建立 被引量：10
15
作者 周伯平 刘威龙 +5 位作者 谢靖婧 陈心春 徐六妹 谭艳 刘映霞 杨桂林 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期492-494,共3页
目的获得纯化的具有免疫活性的肠道病毒71型VPI蛋白，建立EV71感染早期、快速和准确的ELISA血清学诊断方法。方法通过PCR方法扩增出VPl基因，定向克隆到原核表达载体pET-21b（＋），阳性质粒转化入E．coliBI21（DE3）感受态细胞经IPTG... 目的获得纯化的具有免疫活性的肠道病毒71型VPI蛋白，建立EV71感染早期、快速和准确的ELISA血清学诊断方法。方法通过PCR方法扩增出VPl基因，定向克隆到原核表达载体pET-21b（＋），阳性质粒转化入E．coliBI21（DE3）感受态细胞经IPTG诱导，SDS-PAGE电泳和蛋白免疫印迹分析目的蛋白的表达水平。纯化的VPI蛋白用作包被抗原，建立手足口病（HFMD）患者抗。EV71-IgM和IgG的血清学诊断方法。结果成功表达和纯化了VP1重组蛋白，所表达的蛋白能被EV71型手足口病患者血清所识别。调查发现，与正常人和EV71阴性手足口病患儿比较，EV71阳性手足口病血清中抗-EV71-IgM和IgG中A值垃著升高，差异具有统计学意义（P〈0．05）。与RT-PCR结果比较，发现该方法IgM的诊断敏感性和特异性分别为73％和77％；该IgG诊断方法的敏感性和特异性分别为82％和83％。完成该试验仅需4h。结论利用pET原核表达系统成功克隆、表达和纯化了肠道病毒71型重组外壳蛋白VP1，且具有良好的抗原性。该抗原可用于研制EV71血清学诊断试剂盒。 展开更多
关键词 肠道病毒71型 人 重组蛋白 皿清学诊断 酶联免疫吸附测定
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结核分枝杆菌早期分泌蛋白MPT64的原核表达及其在结核病血清学诊断上的初步应用 被引量：10
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作者 屈蓉 吴康 +2 位作者 吴娟 范小勇 吕建新 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期566-570,共5页
目的原核表达、纯化结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)早期分泌蛋白MPT64,并初步评估其在结核病(tuberculosis,TB)血清学诊断中的价值。方法PCR扩增Mtb标准菌株H37Rv mpt64基因,克隆至原核表达载体pET28a(+),构建重组质粒pE... 目的原核表达、纯化结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)早期分泌蛋白MPT64,并初步评估其在结核病(tuberculosis,TB)血清学诊断中的价值。方法PCR扩增Mtb标准菌株H37Rv mpt64基因,克隆至原核表达载体pET28a(+),构建重组质粒pET28a-mpt64,转化大肠埃希菌BL21(DE3)后,进行重组蛋白的原核诱导表达及纯化。将600μg纯化的MPT64蛋白经皮下多点免疫新西兰大白兔,隔周免疫1次,共4次,末次免疫2周后,耳缘静脉采血分离血清,ELISA法检测血清效价,Western blot法鉴定抗原特异性。收集44例TB确诊患者(TB组)和36名健康对照人群[HC(healthy control)组]血清,间接ELISA法检测血清中MPT64抗原的特异性IgG、IgA抗体水平,抗原对照为Gro ES和Ag85A。结果重组表达质粒pET28a-mpt64经双酶切鉴定及测序证明构建正确;表达的重组MPT64蛋白主要以包涵体形式存在,部分以可溶性形式存在,经Ni2+-NTA亲和纯化后,纯度可达90%,蛋白浓度约2.0 mg/m L;MPT64兔多克隆抗血清效价达1∶2048000,纯化的MPT64蛋白可与其发生反应,在相对分子质量约24000处可见特异性蛋白条带;TB组血清中MPT64抗原特异性IgG和IgA水平均显著高于HC组(P<0.05),而Gro ES、Ag85A抗原特异性IgA和IgG水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论重组MPT64蛋白具有较好的血清学诊断效能,可作为TB血清学早期诊断的候选抗原之一。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 MPT64 免疫学诊断 血清学诊断
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肺炎支原体实验室诊断的研究进展 被引量：9
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作者 郭昱瑄 张盛玉 +2 位作者 王熙业 张晨曦 廉婷 《医学信息》 2019年第11期26-28,共3页
肺炎支原体(MP)是一种常见的呼吸系统感染病原体,约占儿童社区获得性肺炎病例的40%。MP不仅引起肺部病变,也能侵犯心、脑、肝、肾等其他器官,引起多种肺外表现。然而MP感染临床表现不具有特征性,临床上亦缺乏早期有效的诊断方法,容易和... 肺炎支原体(MP)是一种常见的呼吸系统感染病原体,约占儿童社区获得性肺炎病例的40%。MP不仅引起肺部病变,也能侵犯心、脑、肝、肾等其他器官,引起多种肺外表现。然而MP感染临床表现不具有特征性,临床上亦缺乏早期有效的诊断方法,容易和其他病毒、细菌所致的呼吸道感染相混淆。目前MP的实验室诊断方法不断推陈出新,但各种方法均有其优势与不足,本文对此作一简要综述。 展开更多
关键词 肺炎支原体 实验室诊断 血清学诊断 基因学诊断
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结核分枝杆菌MPT83的免疫原性及其奶牛结核病血清学检测方法的建立 被引量：10
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作者 孟闯 万婷 +4 位作者 徐正中 单法 范峰 陈祥 焦新安 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期220-226,共7页
【目的】利用大肠杆菌系统表达并纯化结核分枝杆菌MPT83蛋白,通过小鼠模型评价其免疫原性,建立血清学间接ELISA方法用于牛结核病临床检测,评价其应用潜能。【方法】构建p ET30a(+)-mpt83重组质粒,转化BL21(DE3)诱导表达并纯化,经细胞表... 【目的】利用大肠杆菌系统表达并纯化结核分枝杆菌MPT83蛋白,通过小鼠模型评价其免疫原性,建立血清学间接ELISA方法用于牛结核病临床检测,评价其应用潜能。【方法】构建p ET30a(+)-mpt83重组质粒,转化BL21(DE3)诱导表达并纯化,经细胞表面分子的流式细胞术(Flow Cytometry,FCM)分析、ELISPOT试验等分析其在小鼠中的免疫原性,建立间接ELISA方法,检测临床奶牛血样,评价其用于牛结核病血清学检测的潜能。【结果】SDS-PAGE显示目的蛋白成功表达,Western blot证实其对兔抗H37Rv多抗血清具有良好免疫反应性;FCM结果显示其下调树突状细胞表面CD80分子的表达,上调小鼠脾脏CD4+和CD8+T细胞表面CD69的表达,ELISPOT结果表明其诱导的特异性IL-4分泌细胞数显著高于IFN-γ分泌细胞数,表现为Th2型免疫应答;建立了ELISA方法,检测临床奶牛血样200份,与牛结核外周血γ-干扰素体外释放试验结果的阳性符合率和阴性符合率分别为48.6%和90%。【结论】在大肠杆菌系统中高效可溶性表达MPT83蛋白,其在小鼠模型中主要呈现Th2型免疫应答,并以该蛋白为抗原建立了牛结核病血清学检测的间接ELISA方法。 展开更多
关键词 牛结核病 MPT83蛋白 原核表达 免疫原性 血清学检测
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肝纤维化诊断方法Fibrotest与Fibroscan研究进展 被引量：9
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作者 袁利超 《中国实用内科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期493-495,共3页
关键词 肝纤维化 血清学诊断
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非酒精性脂肪性肝病血清学无创诊断的研究进展 被引量：10
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作者 桑潮 梁丹丹 +2 位作者 谢国祥 贾伟 陈天璐 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期112-117,共6页
随着肥胖和代谢综合征的流行,非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)已成为我国第一大慢性肝病。NAFLD可从单纯性脂肪肝发展为非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)、NASH相关肝纤维化和肝硬... 随着肥胖和代谢综合征的流行,非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)已成为我国第一大慢性肝病。NAFLD可从单纯性脂肪肝发展为非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)、NASH相关肝纤维化和肝硬化,甚至肝细胞癌。准确评估NAFLD并尽早进行干预有利于减轻疾病负担,控制疾病进展。肝穿刺活组织检查是诊断NAFLD的“金标准”,但有一定的局限性和显著的并发症,临床应用受限。血清学检测作为一种无创的检测方法,越来越受到研究者和临床工作者的关注。了解各种NAFLD血清学无创诊断方法和指标的优缺点和应用范围,有助于增加诊断途径、提高诊断效力、降低患者痛苦、节约医疗资源。文章对NAFLD血清学无创诊断研究进展作一综述。 展开更多
关键词 非酒精性脂肪性肝病 肝脂肪变 脂肪性肝炎 肝纤维化 血清学诊断
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