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小麦叶片cDNA-AFLP扩增反应体系的优化 被引量：4
1
作者 李剑峰 张跃强 +4 位作者 樊哲儒 王岩军 王浩 曲延英 范玲 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期489-494,共6页
【目的】建立并优化小麦叶片cDNA-AFLP扩增反应体系,进行cDNA-AFLP分析,挖掘新春6号相关抗旱基因。【方法】在盆栽小麦苗期水分胁迫下叶片cDNA-AFLP的试验中,分别对20μL预扩增和选择性扩增反应体系中的4种反应条件影响因子进行不同梯... 【目的】建立并优化小麦叶片cDNA-AFLP扩增反应体系,进行cDNA-AFLP分析,挖掘新春6号相关抗旱基因。【方法】在盆栽小麦苗期水分胁迫下叶片cDNA-AFLP的试验中,分别对20μL预扩增和选择性扩增反应体系中的4种反应条件影响因子进行不同梯度优化的研究,包括引物、dNTP、Mg2+及TaqDNA聚合酶的用量。【结果】PCR预扩增20μL反应体系中,引物(40 mM)1.0μLd、NTP(2.5 mM)1.8μL、Mg2+(25 mM)2.2μL、TaqDNA聚合酶(5U)0.5μL时预扩增效果较好;PCR选择性扩增20μL反应体系中,引物(40 mM)0.6μL、dNTP(2.5 mM)2.0μL、Mg2+(25 mM)1.6μL、TaqDNA聚合酶(5U)0.4μL时,可得到更多清晰可辨的TDFs(transcriptderived fragments)。【结论】试验通过对引物、dNTP、Mg2+、TapDNA聚合酶用量等因子进行筛选,获得较为理想的预扩增和选择性扩增体系,得到了更多有效的条带,为利用cDNA-AFLP研究小麦抗旱相关基因的分离及其克隆奠定了良好的基础。 展开更多
关键词 小麦叶片 cDNA—AFLP 预扩增 选择性扩增 体系优化
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基于高阶受激布里渊散射的高频微波信号产生技术 被引量：13
2
作者 沈颖 王荣 蒲涛 《光学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第6期1571-1575,共5页
对受激布里渊散射(SBS)信号产生的过程及原理进行了分析,提出了一种利用环腔多次放大产生多级布里渊散射信号的方法,并通过实验产生了较为稳定的1～6阶散射信号。在此基础上,提出了一种利用环腔所产生的四阶布里渊散射信号对经马赫-曾... 对受激布里渊散射(SBS)信号产生的过程及原理进行了分析,提出了一种利用环腔多次放大产生多级布里渊散射信号的方法,并通过实验产生了较为稳定的1～6阶散射信号。在此基础上,提出了一种利用环腔所产生的四阶布里渊散射信号对经马赫-曾德尔调制器(MZM)调制产生的四阶边带信号进行选择放大,而后将被放大了的高阶边带信号与载波信号进行拍频,从而获得高频微波信号的简单方法。该方法仅需要一个掺铒光纤放大器(EDFA)就可以产生高达n(1≤n≤6)倍于11GHz的微波信号,具有器件成本低、倍频效率高的优点。仿真和实验结果证实该方法是可行的。 展开更多
关键词 微波光子学 微波信号产生 受激布里渊散射 选择放大
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低温变性下复合PCR技术及其应用 被引量：2
3
作者 梁卉 陈国杰 +1 位作者 于燕 熊礼宽 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期227-236,共10页
低温变性下复合PCR(co-amplification at lower denaturation temperature-polymerase chain reaction,COLDPCR)是一种在高丰度野生型序列背景下选择性变性和扩增低丰度突变型序列的方法,可将突变型序列富集10~100倍。基于突变片段Tm值... 低温变性下复合PCR(co-amplification at lower denaturation temperature-polymerase chain reaction,COLDPCR)是一种在高丰度野生型序列背景下选择性变性和扩增低丰度突变型序列的方法,可将突变型序列富集10~100倍。基于突变片段Tm值的改变和异源双链DNA分子的形成,COLD-PCR可富集扩增片段中所有类型和位置的突变,也可富集未知突变,具有敏感、特异、精确、廉价和易操作等优点。COLD-PCR及其衍生方法被应用于肿瘤、微生物、产前筛查和动植物等领域,对疾病的早期诊断、病程和治疗监控、药物选择、预后判断和植物育种等均有积极的作用。本文就COLD-PCR的原理、关键技术、衍生方法及其应用进行综述。 展开更多
关键词 低温变性下复合PCR 精确的变性温度 选择性富集 低丰度突变 检测阈值
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荔枝SSR标记的研究 被引量：21
4
作者 李明芳 郑学勤 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期911-916,共6页
以无核荔枝A4号为实验材料 ,应用选择性扩增微卫星 (SAM)法分离、克隆了 10 0个简单序列重复 (SSR)序列 ,其中 88个非重复 ,可用。加上搜索数据库所获得的 1个SSR序列 ,一共 89个序列用于特异引物的设计。仅从71个序列的 82个基因座设... 以无核荔枝A4号为实验材料 ,应用选择性扩增微卫星 (SAM)法分离、克隆了 10 0个简单序列重复 (SSR)序列 ,其中 88个非重复 ,可用。加上搜索数据库所获得的 1个SSR序列 ,一共 89个序列用于特异引物的设计。仅从71个序列的 82个基因座设计出特异引物。合成 4 1条特异引物 (与 5′锚定简并引物配对 ,个别相互配对 ) ,对其中的 39个基因座进行检测。其中 15对引物扩增出相应大小的片段 ,另外 11对引物扩增出非预期片段。最后 ,以 37个荔枝种质的基因组DNA为模板 ,从 2 6对出带的引物中 ,筛选出多态性引物 2 1对 ,获得了 2 展开更多
关键词 荔枝 SSR标记 SAM法 种质
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电磁超声换能器的微弱信号检测 被引量：20
5
作者 王淑娟 康磊 翟国富 《无损检测》 北大核心 2007年第10期591-595,共5页
电磁超声换能器的换能效率很低,得到的接收信号十分微弱。为了改善接收信号质量,采用了基于谐振理论的选频放大技术、基于互相关理论的锁相放大技术以及平均技术3种方法对电磁超声接收信号进行处理。实验表明,所设计的选频放大电路和锁... 电磁超声换能器的换能效率很低,得到的接收信号十分微弱。为了改善接收信号质量,采用了基于谐振理论的选频放大技术、基于互相关理论的锁相放大技术以及平均技术3种方法对电磁超声接收信号进行处理。实验表明,所设计的选频放大电路和锁相放大电路均能将微弱的电磁超声接收信号从强噪声背景中分离,而平均技术则能够有效改善接收信号的信噪比。最后给出了电磁超声系统联调的实验波形,并对3种检测技术的优缺点进行了分析。 展开更多
关键词 电磁超声换能器 微弱信号检测 选频放大 锁相放大 平均技术
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基于PCR的SSR标记分离方法综述 被引量：15
6
作者 何琳 王群 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期775-782,共8页
SSR分子标记是目前应用最广泛的第二代共显性分子遗传标记。SSR标记具有物种特异性,要应用该方法需要提前开发相应物种的特异SSR标记,而获得微卫星标记的经典方法是通过构建基因组片段文库和特殊标记SSR探针杂交法获取,这些方法经济成... SSR分子标记是目前应用最广泛的第二代共显性分子遗传标记。SSR标记具有物种特异性,要应用该方法需要提前开发相应物种的特异SSR标记,而获得微卫星标记的经典方法是通过构建基因组片段文库和特殊标记SSR探针杂交法获取,这些方法经济成本相对较高且耗时耗力。近年来,该领域的研究中积累了很多研究成果和技术改进,发展起来几种基于PCR简便易操作且节约成本的SSR标记分离方法,例如基于RAPD的微卫星分离方法、基于ISSR抑制PCR扩增法、序列标签微卫星分析法、选择性扩增微卫星分析法以及荧光ISSR-PCR分离微卫星和微卫星扩增文库法等。本文主要对这些方法逐一进行综述,旨在为各个物种SSR标记的开发提供参考。 展开更多
关键词 简单序列重复(SSR) RAPD随机扩增微卫星分离(PIMA) 序列标签微卫星分析(STMP) 选择性扩增微卫星分析(SAM) 荧光ISSR-PCR(FISSR) 微卫星扩增文库法(MAL)
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甜樱桃SSR标记的选择性扩增微卫星(SAM)法筛选(英文) 被引量：9
7
作者 艾呈祥 余贤美 +6 位作者 张力思 魏海蓉 辛力 苑克俊 金松南 孙清荣 刘庆忠 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期311-316,共6页
以甜樱桃‘红灯’为试材,应用选择性扩增微卫星(SAM)法分离、克隆了100个SSR序列,其中81个非重复,可用。加上搜索数据库所获得的1个SSR序列,一共82个序列用于特异引物的设计。仅从69个序列的77个基因座设计出特异引物。合成38对特异引物... 以甜樱桃‘红灯’为试材,应用选择性扩增微卫星(SAM)法分离、克隆了100个SSR序列,其中81个非重复,可用。加上搜索数据库所获得的1个SSR序列,一共82个序列用于特异引物的设计。仅从69个序列的77个基因座设计出特异引物。合成38对特异引物,对其中的36个基因座进行检测。其中19对引物扩增出相应大小的片段,另外8对引物扩增出非预期片段。最后,以27个甜樱桃种质的基因组DNA为模板,从27对可扩增出带的引物中,筛选出多态性引物24对,获得了24个甜樱桃基因座特异性SSR标记。 展开更多
关键词 甜樱桃 种质 SSR标记 SAM法
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基于SAMPL的一种微卫星筛选方法在中国明对虾中的尝试
8
作者 张留所 孔晓瑜 +2 位作者 喻子牛 孔杰 相建海 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期1-4,共4页
微卫星的发展主要受限于微卫星及其旁侧特异引物区的分离,在中国明对虾(Fenner-openaeus chinensis)中建立了选择性扩增多态微卫星位点(SAMPL,selective amplified mic-rosatellite polymorphic loci)技术体系,并初步尝试了基于SAMPL的... 微卫星的发展主要受限于微卫星及其旁侧特异引物区的分离,在中国明对虾(Fenner-openaeus chinensis)中建立了选择性扩增多态微卫星位点(SAMPL,selective amplified mic-rosatellite polymorphic loci)技术体系,并初步尝试了基于SAMPL的一种微卫星筛选方法。通过5′端锚定引物引入微卫星序列,对传统SAMPL技术加以改进并以期富集简单重复序列。从测序胶上随机选择5条SAMPL条带(分别命名为S11,S13,S14,S22,S24)克隆测序,大小分别为161,157,147,152,298。其中S11,S13,S14,S22四个片段两端引物分别为AFLP选择性引物和SAMPL引物,S13和S22含微卫星序列重复,S24两端引物均为传统的AFLP引物,在此片断中有一(AG)39重复。 展开更多
关键词 选择性扩增多态微卫星位点(SAMPL) 中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis) 微卫星
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利用改进的SAM法分离小黄李中的微卫星
9
作者 张慧蓉 薛华柏 +2 位作者 乔玉山 曹尚银 张建伟 《经济林研究》 2009年第3期90-93,共4页
对选择性扩增微卫星法进行了改进,应用于分离中国李中的微卫星,共分离出17个中国李特异微卫星位点,相应设计了17条引物,并分别与对应的5′锚定简并微卫星引物配对应用于5个中国李品种的基因组PCR扩增。结果表明:除PCA 04、PCA 07、PCA 1... 对选择性扩增微卫星法进行了改进,应用于分离中国李中的微卫星,共分离出17个中国李特异微卫星位点,相应设计了17条引物,并分别与对应的5′锚定简并微卫星引物配对应用于5个中国李品种的基因组PCR扩增。结果表明:除PCA 04、PCA 07、PCA 11 3条引物没有扩增产物外,其余14条引物在5个受试中国李品种中均有扩增产物。 展开更多
关键词 小黄李 SAM法 SSR标记
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