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基于核酸识体的滚环DNA扩增反应用于PDGF-BB的检测
1
作者 周龙 欧丽娟 陈珂 《化学传感器》 CAS 2006年第4期12-17,共6页
该文提出了一种新颖的、高灵敏的基于抗体-抗原-核酸识体夹心法和DNA滚环扩增(RCA)的方法用于血小板源生长因子BB(PDGF-BB)的检测。在核酸识体的3'端连接RCA反应的引物,在29DNA聚合酶、脱氧核糖核苷酸及环形模板存在下,经过滚环扩... 该文提出了一种新颖的、高灵敏的基于抗体-抗原-核酸识体夹心法和DNA滚环扩增(RCA)的方法用于血小板源生长因子BB(PDGF-BB)的检测。在核酸识体的3'端连接RCA反应的引物,在29DNA聚合酶、脱氧核糖核苷酸及环形模板存在下,经过滚环扩增反应后,可得到一条与环形DNA模板互补的重复序列的DNA单链,利用生物素标记的互补寡核苷酸探针与扩增产物杂交,再用亲和素标记的碱性磷酸酶与之反应,将反应后的产物在底物溶液中进行银沉积反应,最后用电化学方法检测电极表面沉积的银量,通过检测银量来达到检测PDGF-BB的目的。考察了抗体固定化浓度、RCA反应时间和其它蛋白质对测定信号的影响。结果表明,RCA扩增反应能显著的提高检测的灵敏度,降低检测下限。PDGF-BB在0.5pg/mL～8000pg/mL范围内呈良好的线性关系,检测下限为0.2pg/mL。该方法在蛋白质的检测和医学诊断等方面有很大的应用前景。 展开更多
关键词 核酸识体 血小板源生长因子BB 滚环dna扩增 银沉积
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滚环DNA扩增的原理、应用和展望 被引量：3
2
作者 肖乐义 祁自柏 +1 位作者 姜俊 张子宽 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 2004年第9期33-38,共6页
滚环DNA扩增 (rollingcircleDNAamplification ,RCA)是一种等温信号扩增方法 ,其线性扩增倍数为 1 0 5,指数化扩增能力大于 1 0 9,产生的扩增产物连接在固相支持物 (如玻片、微孔板等 )表面的DNA引物或抗体上。RCA是一种适合在芯片上 (o... 滚环DNA扩增 (rollingcircleDNAamplification ,RCA)是一种等温信号扩增方法 ,其线性扩增倍数为 1 0 5,指数化扩增能力大于 1 0 9,产生的扩增产物连接在固相支持物 (如玻片、微孔板等 )表面的DNA引物或抗体上。RCA是一种适合在芯片上 (on chip)进行信号扩增的新技术 ,它既能提供研究分析的敏感性和特异性 ,又能保持立体分析的多元性。RCA亦是一种痕量的分子检测方法 。 展开更多
关键词 dna扩增 dna引物 RCA 微孔板 抗体 生物标志 特异性 生物大分子 玻片 扩增产物
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滚环DNA扩增的原理、应用和展望(英文) 被引量：1
3
作者 肖乐义 祁自柏 +2 位作者 薛歧庚 董建军 杨占清 《河南科学》 2004年第4期469-476,共8页
滚环DNA扩增(RollingcircleDNAamplification,RCA)是一种等温信号扩增方法,其线性扩增倍数为105,指数化扩增能力大于109,产生的扩增产物连接在固相支持物(如玻片、微孔板等)表面的DNA引物或抗体上(适宜作生物芯片研究)。RCA是一种适合... 滚环DNA扩增(RollingcircleDNAamplification,RCA)是一种等温信号扩增方法,其线性扩增倍数为105,指数化扩增能力大于109,产生的扩增产物连接在固相支持物(如玻片、微孔板等)表面的DNA引物或抗体上(适宜作生物芯片研究)。RCA是一种适合在芯片上(on-chip)进行信号扩增的新技术,它既能提供研究分析的敏感性和特异性,又能保持立体分析的多元性。RCA亦是一种痕量的分子检测方法,可用于极其微量的生物大分子和生物标志的检测与研究。 展开更多
关键词 滚环dna扩增 PHI 29 dna聚合酶 微阵列 痕量检测
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