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新城疫载体系统表达天蚕素AD抗菌肽及其抑菌效果
被引量：
1
1
作者
任项霏
冯贺龙
+11 位作者
徐英英
李丽
杨宏春
王鑫
商雨
阳柳君
周祖涛
李自力
刘梅
罗青平
胡思顺
温国元
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第9期1820-1827,共8页
为探究天蚕素AD抗菌肽是否能在新城疫病毒(NDV)载体系统中表达,且通过该种表达系统得到的CAD是否有生物活性。采用同源重组的方式将CAD插入至NDV载体pTS09-C中,并利用反向遗传操作系统成功拯救出重组病毒rTS-CAD,该重组病毒能在SPF鸡胚...
为探究天蚕素AD抗菌肽是否能在新城疫病毒(NDV)载体系统中表达,且通过该种表达系统得到的CAD是否有生物活性。采用同源重组的方式将CAD插入至NDV载体pTS09-C中,并利用反向遗传操作系统成功拯救出重组病毒rTS-CAD,该重组病毒能在SPF鸡胚中稳定增殖。通过生物学特性分析,在NDV TS09-C株的P和M基因之间插入CAD基因并未改变其的弱毒和增殖特性。间接免疫荧光试验证实重组病毒能在BHK-21细胞中稳定表达CAD抗菌肽。抑菌试验结果显示,NDV载体系统表达的CAD对金黄色葡萄球菌(G+)和大肠杆菌(G-)均有一定的抑制作用:在微孔板法抑菌试验中,重组病毒表达的CAD抗菌肽对金黄色葡萄球菌的抑制率为79.6%~91.7%,对大肠杆菌的抑制率为87.5%~89.8%;在与DF-1细胞共培养试验中,重组病毒表达的CAD抗菌肽对金黄色葡萄球菌的抑制率可以达到74.5%~77.7%,对大肠杆菌的抑制率为35.0%~45.0%。本研究表明,NDV载体系统能够成功表达出有活性的CAD抗菌肽,且有良好的抑菌效果。这一研究为探索NDV载体表达抗菌肽和进一步研究CAD的局部效应奠定了一定的理论基础。
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关键词
天蚕素AD
新城疫病毒载体
反向遗传操作系统
抗菌肽
原文传递
利用反向遗传操作技术拯救重组新城疫病毒
被引量：
2
2
作者
郝景波
吴云舟
+3 位作者
刘艾林
尹杰超
任桂萍
李德山
《东北农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第10期73-77,共5页
将新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)Anhinga株的全长cDNA的克隆质粒以及L、P、NP的表达质粒共转染稳定表达T7 RNA聚合酶的BSRT7/5细胞,得到拯救病毒。通过RT-PCR扩增、酶切鉴定、测序验证拯救病毒中分子标签的存在,并通过血凝...
将新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)Anhinga株的全长cDNA的克隆质粒以及L、P、NP的表达质粒共转染稳定表达T7 RNA聚合酶的BSRT7/5细胞,得到拯救病毒。通过RT-PCR扩增、酶切鉴定、测序验证拯救病毒中分子标签的存在,并通过血凝试验测定病毒的血凝效价、测定蚀斑形成单位确定病毒滴度,从而证明病毒拯救成功。新城疫病毒Anhinga株的拯救成功为该病毒进行结构基因研究和疫苗研制奠定了基础。
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关键词
新城疫病毒
病毒拯救
共转染
反向遗传操作系统
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职称材料
题名
新城疫载体系统表达天蚕素AD抗菌肽及其抑菌效果
被引量：
1
1
作者
任项霏
冯贺龙
徐英英
李丽
杨宏春
王鑫
商雨
阳柳君
周祖涛
李自力
刘梅
罗青平
胡思顺
温国元
机构
华中农业大学动物科学技术学院/动物医学院
湖北省农业科学院畜牧兽医研究所
农业农村部畜禽细菌病防治制剂创制重点实验室
畜禽病原微生物学湖北省重点实验室
湖北洪山实验室
湖北省预防兽医学重点实验室
出处
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第9期1820-1827,共8页
基金
国家现代农业产业技术体系专项资助项目(CARS-41-G13)
湖北省农业科技创新中心资助项目(2019-620-000-001-17)
+2 种基金
湖北省科技创新项目重大专项资助项目(2020ABA016)
湖北省农业科学院青年科学基金资助项目(2022NKYJJ10)
鸭源支原体分离鉴定及其灭活疫苗和亚单位疫苗研发横向课题资助项目(707121067)。
文摘
为探究天蚕素AD抗菌肽是否能在新城疫病毒(NDV)载体系统中表达,且通过该种表达系统得到的CAD是否有生物活性。采用同源重组的方式将CAD插入至NDV载体pTS09-C中,并利用反向遗传操作系统成功拯救出重组病毒rTS-CAD,该重组病毒能在SPF鸡胚中稳定增殖。通过生物学特性分析,在NDV TS09-C株的P和M基因之间插入CAD基因并未改变其的弱毒和增殖特性。间接免疫荧光试验证实重组病毒能在BHK-21细胞中稳定表达CAD抗菌肽。抑菌试验结果显示,NDV载体系统表达的CAD对金黄色葡萄球菌(G+)和大肠杆菌(G-)均有一定的抑制作用:在微孔板法抑菌试验中,重组病毒表达的CAD抗菌肽对金黄色葡萄球菌的抑制率为79.6%~91.7%,对大肠杆菌的抑制率为87.5%~89.8%;在与DF-1细胞共培养试验中,重组病毒表达的CAD抗菌肽对金黄色葡萄球菌的抑制率可以达到74.5%~77.7%,对大肠杆菌的抑制率为35.0%~45.0%。本研究表明,NDV载体系统能够成功表达出有活性的CAD抗菌肽,且有良好的抑菌效果。这一研究为探索NDV载体表达抗菌肽和进一步研究CAD的局部效应奠定了一定的理论基础。
关键词
天蚕素AD
新城疫病毒载体
反向遗传操作系统
抗菌肽
Keywords
cecropin
AD
Newcastle
disease
virus
vector
reverse
genetic manipulation
system
antimicrobial
peptides
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
原文传递
题名
利用反向遗传操作技术拯救重组新城疫病毒
被引量：
2
2
作者
郝景波
吴云舟
刘艾林
尹杰超
任桂萍
李德山
机构
东北农业大学生命科学学院
出处
《东北农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第10期73-77,共5页
基金
哈尔滨市科技创新人才发展计划资助项目(2006RFXXS002)
文摘
将新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)Anhinga株的全长cDNA的克隆质粒以及L、P、NP的表达质粒共转染稳定表达T7 RNA聚合酶的BSRT7/5细胞,得到拯救病毒。通过RT-PCR扩增、酶切鉴定、测序验证拯救病毒中分子标签的存在,并通过血凝试验测定病毒的血凝效价、测定蚀斑形成单位确定病毒滴度,从而证明病毒拯救成功。新城疫病毒Anhinga株的拯救成功为该病毒进行结构基因研究和疫苗研制奠定了基础。
关键词
新城疫病毒
病毒拯救
共转染
反向遗传操作系统
Keywords
Newcastle
disease
virus
virus
rescue
cotransfection
reverse
genetic manipulation
system
分类号
Q93 [生物学—微生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
新城疫载体系统表达天蚕素AD抗菌肽及其抑菌效果
任项霏
冯贺龙
徐英英
李丽
杨宏春
王鑫
商雨
阳柳君
周祖涛
李自力
刘梅
罗青平
胡思顺
温国元
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023
1
原文传递
2
利用反向遗传操作技术拯救重组新城疫病毒
郝景波
吴云舟
刘艾林
尹杰超
任桂萍
李德山
《东北农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010
2
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