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动物布鲁氏菌病疫苗应用现状及研究进展 被引量:50
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作者 丁家波 冯忠武 《生命科学》 CSCD 2013年第1期91-99,共9页
布鲁氏菌病(布病)是由布鲁氏菌引起的一种重要的人兽共患病,近几年在世界范围内呈反弹趋势,我国尤其严重,该病对畜牧业和人类健康均构成严重威胁。疫苗免疫是预防和控制布病的重要措施之一,选择和使用有效的布病疫苗关系到布病防控的成... 布鲁氏菌病(布病)是由布鲁氏菌引起的一种重要的人兽共患病,近几年在世界范围内呈反弹趋势,我国尤其严重,该病对畜牧业和人类健康均构成严重威胁。疫苗免疫是预防和控制布病的重要措施之一,选择和使用有效的布病疫苗关系到布病防控的成效。迄今国内外已有多个弱毒活疫苗在使用,其中使用最为广泛的有光滑型牛种S19株、羊种Rev.1株、猪种S2株,以及粗糙型牛种RB51株。不同疫苗各有其优缺点,科学家们正试图研发更理想的布病疫苗。目前人们正通过基因工程技术构建重组弱毒疫苗、分子标记疫苗、DNA疫苗以及亚单位疫苗。对布病疫苗的应用及新型疫苗的研究现状作一综述。 展开更多
关键词 布鲁氏菌病 重组疫苗 亚单位疫苗
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多房棘球绦虫ELP重组蛋白疫苗免疫Balb/c小鼠引起的免疫应答 被引量:30
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作者 王昌源 陈雅棠 +1 位作者 余登高 黄爱龙 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期285-288,292,共5页
目的 观察多房棘球绦虫ELP重组蛋白疫苗免疫Balb c小鼠引起的体液和细胞免疫应答。方法 在成功构建多房棘球绦虫elp基因原核表达载体 (pQ ELP)的基础上 ,以亲和层析法纯化重组蛋白 ,SDS PAGE鉴定 ,Bradford法进行定量。用ELP重组蛋白... 目的 观察多房棘球绦虫ELP重组蛋白疫苗免疫Balb c小鼠引起的体液和细胞免疫应答。方法 在成功构建多房棘球绦虫elp基因原核表达载体 (pQ ELP)的基础上 ,以亲和层析法纯化重组蛋白 ,SDS PAGE鉴定 ,Bradford法进行定量。用ELP重组蛋白 (A组 )及ELP重组蛋白加弗氏佐剂 (B组 )免疫Balb c小鼠 (10只 组 ) ,以生理盐水 (NS组 )作对照。ELISA方法检测免疫后不同时间产生的特异性IgG1,IgG2a和IgG2b水平。双抗体夹心ELISA试剂盒检测免疫鼠脾脏单个核细胞 (PMNC)在受到特异抗原刺激后 ,产生IL 4、IL 12和IFN γ的能力 ,3H TdR掺入法检测脾淋巴细胞的增殖能力。结果 本研究成功获得高纯度重组蛋白ELP。首次免疫后 2周 ,A、B组小鼠均产生了大量的特异IgG1抗体 ,B组还产生了少量的特异IgG2b抗体。除B组小鼠脾PMNC产生了微量IFN γ外 ,A组、NS组IFN γ及各组IL 4和IL 12均未检出。A、B组小鼠脾淋巴细胞增殖能力增高 ,其淋巴细胞CPM值分别为NS组的 2 .8和 10 .8倍 ,受到多房棘球绦虫抗原或刀豆素刺激时 ,A、B组淋巴细胞增殖更明显。结论 多房棘球绦虫ELP重组蛋白疫苗可引起很强的体液免疫应答和微弱的细胞免疫应答 。 展开更多
关键词 多房棘球绦虫 ELP重组蛋白 疫苗 免疫 BALB/C 小鼠 免疫应答
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猪流行性腹泻病毒重组腺病毒疫苗的构建及小鼠免疫试验 被引量:25
3
作者 焦茂兴 吴锋 +1 位作者 刘德辉 黄毓茂 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第2期11-16,共6页
通过RT-PCR和重组PCR技术扩增出猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)疫苗株sM、M、S基因,构建重组腺病毒穿梭质粒。穿梭质粒与BJ5183细菌同源重组构建同源重组腺病毒质粒,同源重组腺病毒质粒经PacⅠ酶切后转染AD-29... 通过RT-PCR和重组PCR技术扩增出猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)疫苗株sM、M、S基因,构建重组腺病毒穿梭质粒。穿梭质粒与BJ5183细菌同源重组构建同源重组腺病毒质粒,同源重组腺病毒质粒经PacⅠ酶切后转染AD-293细胞,获得3个含有目的基因的重组腺病毒。将3个具有感染能力的复制缺陷性重组腺病毒共同感染Vero细胞,细胞上清液进行小鼠免疫特性研究。结果表明,共同感染Vero细胞所得蛋白能诱导小鼠产生特异性体液免疫应答。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 重组腺病毒 疫苗 免疫
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传染性法氏囊病的研究进展 被引量:13
4
作者 高崧 刘秀梵 崔治中 《动物医学进展》 CSCD 2001年第3期44-49,共6页
本文综述了传染性法氏囊病病毒( IBDV)的分子结构与功能的关系。IBDV的抗原变异主要与病毒 VP2蛋白的 2个亲水区有关 ;分子流行病学调查结果显示 ,不同地区分离到超强毒株与欧洲的超强毒株间有相似的来源 ,超强毒株赖以产生的分子基础... 本文综述了传染性法氏囊病病毒( IBDV)的分子结构与功能的关系。IBDV的抗原变异主要与病毒 VP2蛋白的 2个亲水区有关 ;分子流行病学调查结果显示 ,不同地区分离到超强毒株与欧洲的超强毒株间有相似的来源 ,超强毒株赖以产生的分子基础尚不明确 ,且新的超强毒株不断出现。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病 抗原变异 毒力 重组疫苗 传染性法氏囊病病毒 基因组 衣壳蛋白
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重组日本血吸虫SjGST-Sj32蛋白诱导小鼠保护性免疫的研究 被引量:16
5
作者 蔡春 易新元 +2 位作者 曾宪芳 周金春 舒新华 《湖南医科大学学报》 CSCD 1999年第3期225-228,共4页
应用基因工程技术分别表达出SjGSTSj32,Sj32和SjGST,用于保护性免疫的动物实验及其体液免疫机制的初步探讨。结果:与对照组相比,重组SjGSTSj32组,Sj32组,Sj32+SjGST组均有明显的减... 应用基因工程技术分别表达出SjGSTSj32,Sj32和SjGST,用于保护性免疫的动物实验及其体液免疫机制的初步探讨。结果:与对照组相比,重组SjGSTSj32组,Sj32组,Sj32+SjGST组均有明显的减虫效果(P<0.05)。上述三组及SjGST组的肝脏虫卵计数均较对照组为少(P<0.01)。提示重组Sj32kD蛋白可诱导小鼠产生明显的抗日本血吸虫攻击感染的保护性免疫及抗生殖免疫效果,而SjGST仅表现出一定的抗生殖免疫效果。 展开更多
关键词 日本血吸虫 重组蛋白类 疫苗 免疫 小鼠
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两种重组乙型肝炎疫苗免疫儿童后的抗体应答和免疫持久性 被引量:14
6
作者 何鹏 吴晓音 +7 位作者 荆庆 杨超美 时景璞 李荣成 李艳萍 胡忠玉 李河民 梁争论 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2008年第6期522-523,526,共3页
目的比较5μg/剂重组乙型肝炎疫苗(酵母)和10μg/剂重组乙型肝炎疫苗(CHO细胞)免疫儿童后的抗体应答和免疫持久性。方法1151和996名6 ̄12岁儿童分别按0,1,6月免疫程序接种14批酵母疫苗和5批CHO疫苗,于第1针免后3(T3)、7(T7)、12(T12)、2... 目的比较5μg/剂重组乙型肝炎疫苗(酵母)和10μg/剂重组乙型肝炎疫苗(CHO细胞)免疫儿童后的抗体应答和免疫持久性。方法1151和996名6 ̄12岁儿童分别按0,1,6月免疫程序接种14批酵母疫苗和5批CHO疫苗,于第1针免后3(T3)、7(T7)、12(T12)、24(T24)、36(T36)、60(T60)月检测抗-HBs应答,分别对接种10批酵母、5批CHO,4批酵母、4批CHO,2批酵母和2批CHO疫苗的儿童进行首针免疫后T24、T36和T60的随访,采用放免法(RIA)检测抗-HBs水平。结果首针免疫后12个月内,接种两种疫苗的儿童抗体阳转率和抗体滴度差异均无显著意义;T24、T36时,接种CHO疫苗的儿童抗体阳转率显著高于酵母疫苗。结论应提高酵母疫苗免疫儿童现用剂量。 展开更多
关键词 乙型肝炎 重组疫苗 抗体应答 免疫持久性
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全球新型冠状病毒疫苗及治疗药物研发现状与趋势 被引量:11
7
作者 郑楠 赵明 +3 位作者 田晓鑫 陈頔 张亚同 金鹏飞 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期69-76,共8页
截至2021年5月,我国已附条件上市及获批紧急使用了6款新型冠状病毒疫苗(以下简称新冠疫苗)产品,其中包括4款新冠灭活疫苗产品、1款新冠腺病毒疫苗产品以及1款新冠重组疫苗产品。6款疫苗产品均在全球范围内进行了不同阶段的临床试验,临... 截至2021年5月,我国已附条件上市及获批紧急使用了6款新型冠状病毒疫苗(以下简称新冠疫苗)产品,其中包括4款新冠灭活疫苗产品、1款新冠腺病毒疫苗产品以及1款新冠重组疫苗产品。6款疫苗产品均在全球范围内进行了不同阶段的临床试验,临床研究结果在一定程度上证明了疫苗的安全性及预防新型冠状病毒肺炎(COVID-19)疫情的有效性。针对上述产品,本文深入总结了不同新冠疫苗产品的特点以及支持产品获批关键性证据的临床试验结果。此外,面对目前全球COVID-19疫情的严峻形势,分析了全球新冠疫苗及新冠治疗药物研发状况及挑战。 展开更多
关键词 灭活疫苗 腺病毒疫苗 重组疫苗 新冠疫苗临床试验
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Specific cellular immune responses in mice immunized with DNA,adeno-associated virus and adenoviral vaccines of Epstein-Barr virus-LMP2 alone or in combination 被引量:10
8
作者 WANG Zhan YANG SongMei +3 位作者 ZHOU Ling DU HaiJun MO WuNing ZENG Yi 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS 2011年第3期263-266,共4页
Cellular immune responses,particularly those associated with CD3+CD8+ cytotoxic T lymphocytes (CTL),are critical factors in controlling viral infection.Nasopharyngeal carcinoma (NPC) is closely associated with persist... Cellular immune responses,particularly those associated with CD3+CD8+ cytotoxic T lymphocytes (CTL),are critical factors in controlling viral infection.Nasopharyngeal carcinoma (NPC) is closely associated with persistent Epstein-Barr virus (EBV) infection.NPC vaccine studies have focused on enhancing specific antiviral CTL responses.In this study,three vaccines capable of expressing the EBV-latent membrane protein 2 (LMP2) (a DNA vector,an adeno-associated virus (AAV) vector,and a replication-defective adenovirus serotype 5 (Ad5) vector) were respectively used to immunize female Balb/c mice (4-6 weeks old) at weeks 0,2 and 4,either alone or in combination.Our results suggest that combined immunization with DNA,AAV,and adenovirus vector vaccines induced specific cellular immunity more effectively than any of these vectors alone or a combination of two of the three,constituting a sound vaccine strategy for the prevention and treatment of NPC. 展开更多
关键词 EBV-LMP2 DNA vaccine recombinant adenovirus vaccine recombinant adeno-associated virus vaccine combinatorial immunization specific cell-mediated immune responses
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重组乙型肝炎疫苗在健康人群中的免疫效果及安全性评价 被引量:12
9
作者 钟群 谌稳国 罗述斌 《实用预防医学》 CAS 2012年第10期1491-1493,共3页
目的分析常用的两种国产重组乙肝疫苗在健康人群中接种的免疫效果及安全性。方法选择2010年1月-2011年1月在本门诊接种乙肝疫苗的532例健康人群,按接种疫苗类别分为A组(酵母疫苗10μg)与B组(CHO疫苗20μg),观察两组间的不良反应发生率... 目的分析常用的两种国产重组乙肝疫苗在健康人群中接种的免疫效果及安全性。方法选择2010年1月-2011年1月在本门诊接种乙肝疫苗的532例健康人群,按接种疫苗类别分为A组(酵母疫苗10μg)与B组(CHO疫苗20μg),观察两组间的不良反应发生率和发生程度。于第2、3针接种前及3针全程接种后1月和1年时分别应用放射免疫法(RIA)检测血清HBsAb滴度水平,并比较两组抗体的阳性率。结果两组疫苗接种不良反应发生率差异无统计学意义(P>0.05)。全程接种后1月时,B组的HBsAbGMT峰值高于A组(P<0.05)。全程接种后1年B组抗体阳性率和HBsAb滴度均高于A组(P<0.05)。结论在可接受的、等同少而轻的接种不良反应基础上,应用20μg的CHO疫苗可使健康人群获得更大的保护效力。 展开更多
关键词 乙型肝炎 重组疫苗 不良反应 抗体应答
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鸡球虫病疫苗的研究进展 被引量:9
10
作者 韩红玉 林矫矫 黄兵 《中国兽医寄生虫病》 2007年第6期40-46,共7页
鸡球虫病是由艾美耳球虫感染鸡引起的一种危害极其严重的寄生原虫病。目前,控制球虫病主要还是依赖于药物,但由于球虫耐药株的频繁出现和人们对药物残留等问题的关注,使人们更加注重探讨从免疫预防的角度去控制球虫病。本文综述了鸡球... 鸡球虫病是由艾美耳球虫感染鸡引起的一种危害极其严重的寄生原虫病。目前,控制球虫病主要还是依赖于药物,但由于球虫耐药株的频繁出现和人们对药物残留等问题的关注,使人们更加注重探讨从免疫预防的角度去控制球虫病。本文综述了鸡球虫病活疫苗(强毒疫苗和弱毒疫苗)的研究和应用现状及重组疫苗(DNA疫苗和重组蛋白疫苗)的研究进展,同时介绍了新型疫苗佐剂的研究情况。 展开更多
关键词 鸡球虫病 活疫苗 重组疫苗 佐剂
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佐剂FCA与Quil A对rGST-Sj32的免疫增强作用的比较 被引量:7
11
作者 田明礼 易新元 +3 位作者 曾宪芳 彭先楚 曾庆仁 Larry McReynolds 《中国寄生虫病防治杂志》 CSCD 2001年第3期210-212,共3页
目的 比较弗氏完全佐剂 (FCA)与皂素的纯化物 Quil A的免疫增强作用 ,进一步提高重组抗原 r GST- Sj32的免疫效果。 方法 r GST- Sj32 +FCA或 Quil A免疫 NIH小鼠 3次 ,EL ISA法检测抗体水平 ,用减虫率及减卵率表示保护效果。 结果... 目的 比较弗氏完全佐剂 (FCA)与皂素的纯化物 Quil A的免疫增强作用 ,进一步提高重组抗原 r GST- Sj32的免疫效果。 方法 r GST- Sj32 +FCA或 Quil A免疫 NIH小鼠 3次 ,EL ISA法检测抗体水平 ,用减虫率及减卵率表示保护效果。 结果 与 PBS对照组比较 ,r GST- Sj32 +FCA免疫小鼠减虫率为 42 .9% ,每克肝卵 (L EPG)减少率 5 1.0 % ,每雌肝卵 (L EPF)减少率为 2 3.9% ,抗体滴度达 1∶ 2 5 6 0 0。r GST- Sj32 +Quil A免疫小鼠减虫率为 46 .0 % ,L EPG减少率39.4% ,L EPF减少率为 8.5 % ,抗体滴度达 1∶ 5 12 0 0。 结论 FCA和 Quil A均可增强 r GST- Sj32免疫小鼠的抗感染保护性免疫力 ;FCA亦可增强 r GST- Sj32诱导小鼠抗生殖免疫 ,Quil A无增强抗生殖免疫的作用。 展开更多
关键词 日本血吸虫 弗氏完全佐剂 QuilA 重组抗原 疫苗
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Immunization of Male Mice with a New Recombinant GnRH Fusion Protein Reduces the Testicular Function 被引量:8
12
作者 FANG Fu-gui YANG Ya-ping +5 位作者 LIU Ya ZHANG Yun-hai TAO Yong WANG Suo-lu PU Yong ZHANG Xiao-rong 《Agricultural Sciences in China》 CAS CSCD 2009年第3期380-385,共6页
The objective of the present study was to evaluate the effect of an immunogenic maltose-binding protein-gonadotropin releasing hormone (GnRH-6-MBP) using genetic engineering. The synthetic mammalian tandem repeated ... The objective of the present study was to evaluate the effect of an immunogenic maltose-binding protein-gonadotropin releasing hormone (GnRH-6-MBP) using genetic engineering. The synthetic mammalian tandem repeated GnRH hexamer gene was inserted into the expression plasmid pMAL-c2x. Recombinant GnRH-6-MBP protein was over- expressed in E.coli strain BL21. Amylose resin with affinity chromatograph was used to purify target protein. The reactiongenicity of fusion protein was identified by indirect enzyme linked immunosorbent assay (ELISA), and the antigenicity and biological effects of GnRH-6-MBP were tested in mice. In the experiment, 20 male Kunming white mice of 20 d old were randomly divided into treatment and control group. Ten mice were immunized with 100 μg GnRH-6-MBP administered subcutaneously (s.c.) thrice at 2-week intervals with GnRH-6-MBP. Mice were sacrificed after 3 weeks following the booster injection, the testis was removed, weighed and measured, and the histological structure was observed. The reactiongenicity of fusion protein to GnRH antibody was much higher than the control. Active immunization against GnRH-6-MBP reduced remarkably (P 〈 0.01) the length and weight of the testis, and shortened the girth and width of the testis (P 〈 0.05), and suppressed testicular spermatogenesis compared to the control mice. These results indicate that the recombinant GnRH-6-MBP acted as a strong immunogen and caused atrophy of the testis. 展开更多
关键词 GNRH recombinant vaccine maltose-binding protein (MBP) IMMUNOCASTRATION
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重组杆状病毒表达轮状病毒SA11毒株VP4蛋白 被引量:9
13
作者 孙茂盛 SusanaGiambiagi OscarBurrone 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第1期48-53,共6页
从培养的SA11病毒中提取病毒dsRNA作为模板,经逆转录、多聚酶链反应(RT-PCR)获得编码VP4蛋白的全基因,全长2362bp.完整的VP4基因克隆到杆状病毒转移载体pVL-1393中,转染Sf9细胞进行同源重组,用声、杂交法筛选出表达VP4蛋白的重组... 从培养的SA11病毒中提取病毒dsRNA作为模板,经逆转录、多聚酶链反应(RT-PCR)获得编码VP4蛋白的全基因,全长2362bp.完整的VP4基因克隆到杆状病毒转移载体pVL-1393中,转染Sf9细胞进行同源重组,用声、杂交法筛选出表达VP4蛋白的重组杆状病毒。表达的VP4蛋白能被抗轮状病毒抗体所识别,表达产量约占总蛋白的10%。用表达的VP4蛋白免疫动物后可产生高水平抗亲本SA11毒株中和抗体。抗体能阻断SA11病毒在MA104细胞上引起的细胞病变(CPE),免疫荧光和Westernblot也证实抗体可特异性识别轮状病毒抗原。结果表明,重组杆状病毒表达的VP4蛋白具有良好的抗原性和免疫原性,可望用VP4基因研制轮状病毒重组疫苗和亚单位疫苗。 展开更多
关键词 轮状病毒 VP4蛋白 重组 杆状病毒 疫苗
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枯草芽孢杆菌芽孢表面展示重组抗原疫苗研究进展 被引量:9
14
作者 张柯 宁德刚 徐卫东 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期134-137,共4页
枯草芽孢杆菌芽孢所具有的独特的理化特性及生理特征,使之成为新型的蛋白或酶类药物载体而倍受关注。简介了枯草芽孢杆菌芽孢结构特征,以及诱导机体产生的免疫反应,重点阐述了利用芽孢表面展示技术研制重组外源抗原疫苗,最后对芽孢表面... 枯草芽孢杆菌芽孢所具有的独特的理化特性及生理特征,使之成为新型的蛋白或酶类药物载体而倍受关注。简介了枯草芽孢杆菌芽孢结构特征,以及诱导机体产生的免疫反应,重点阐述了利用芽孢表面展示技术研制重组外源抗原疫苗,最后对芽孢表面展示外源抗原疫苗的应用前景进行了展望。 展开更多
关键词 芽孢 表面展示 重组疫苗
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日本血吸虫脂肪酸结合蛋白基因在家蚕细胞及幼虫中的表达 被引量:7
15
作者 刘金明 蔡学忠 +10 位作者 林矫矫 杨冠珍 沈小川 傅志强 施福恢 沈纬 李铭 苑纯秀 李浩 蔡幼民 吴祥甫 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期218-221,共4页
目的: 在家蚕细胞和幼虫中表达日本血吸虫脂肪酸结合蛋白( Sj14) 基因。方法: 将该基因克隆于昆虫病毒转移载体p Bac P A K His1 中, 再与修饰的家蚕核型多角体病毒( Bm N P V) 线性化 D N A 共转染家... 目的: 在家蚕细胞和幼虫中表达日本血吸虫脂肪酸结合蛋白( Sj14) 基因。方法: 将该基因克隆于昆虫病毒转移载体p Bac P A K His1 中, 再与修饰的家蚕核型多角体病毒( Bm N P V) 线性化 D N A 共转染家蚕细胞,经体内重组得重组病毒 Bm Sj14 , 再将 Bm Sj14 感染家蚕细胞和幼虫以表达 Sj14 , 用 Western blot 和间接 E L I S A测定表达产物的抗原性。结果: Bm Sj14 感染家蚕细胞和幼虫后 Sj14 获得较高表达; 表达产物r Sj14 ( His) 为18k Da 的融合蛋白, 在家蚕细胞中的产量约为100 μg/1 ×106 细胞, 在培养上清中产量为33 μg/ml; 在家蚕血淋巴中得量为4 mg/ml; 在家蚕幼虫组织的得量为46 mg/g 组织。 Western blot 和间接 E L I S A 显示r Sj14 ( His) 具有较高抗原性。结论: Sj14 在家蚕细胞和幼虫中获得高效表达且表达产物具有较高抗原性。 展开更多
关键词 日本血吸虫 脂肪酸结合蛋白 基因表达 疫苗
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弓形虫GRA4和SAG2基因重组BCG疫苗免疫保护性的比较研究 被引量:8
16
作者 李俊华 吴少庭 +7 位作者 翁亚彪 甘燕 刘洪波 刘茂玲 张仁利 高世同 黄达娜 耿艺介 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期217-221,共5页
目的比较弓形虫致密颗粒蛋白4(GRA4)基因和表面抗原2(SAG2)基因的重组卡介苗(BCG)对小鼠的免疫保护效果。方法108只SPF级雌性BALB/c小鼠随机分成6组:PBS组、BCG空白菌组、BCG-空白载体组、BCG-SAG2组、BCG-GRA4组和BCG-SAG2+GRA4组,每... 目的比较弓形虫致密颗粒蛋白4(GRA4)基因和表面抗原2(SAG2)基因的重组卡介苗(BCG)对小鼠的免疫保护效果。方法108只SPF级雌性BALB/c小鼠随机分成6组:PBS组、BCG空白菌组、BCG-空白载体组、BCG-SAG2组、BCG-GRA4组和BCG-SAG2+GRA4组,每组18只。每鼠分别注射对应液体/疫苗100μl,共2次,间隔2周。接种前尾静脉采血,接种后4、6、8周每组分别剖杀3只,取脾和眼眶血检测细胞因子、IgG与IgM抗体,T淋巴细胞亚群计数,淋巴细胞转化率等。末次免疫后3周,每组剩余小鼠分别腹腔接种RH株弓形虫速殖子50个进行攻击感染,观察各组小鼠存活时间。结果弓形虫SAG2和GRA4重组BCG疫苗均能诱导小鼠产生免疫应答。第4周时,BCG-GRA4+SAG2免疫组小鼠的CD3+CD4+/CD3+CD8+的比值最高,为14.06%±1.17%。第6周时,BCG-GRA4+SAG2免疫组小鼠的IgG抗体水平最高,为0.18±0.02。第8周时,BCG-SAG2免疫组小鼠的IgM抗体水平最高,为0.82±0.05;弓形虫速殖子攻击后,BCG-SAG2组平均存活8.61d,PBS对照组平均存活7.33d,3个免疫组小鼠比其他3组的平均存活时间长1d。结论弓形虫重组BCG疫苗具有一定的免疫保护性。 展开更多
关键词 弓形虫 致密颗粒蛋白4(GRA4) 表面抗原2(SAG2) 重组疫苗 卡介苗(BCG) 免疫效果
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免疫刺激序列增强日本血吸虫DNA疫苗的免疫保护作用 被引量:6
17
作者 赵松 朱荫昌 +7 位作者 D.A.Harn 司进 任建功 殷旭仁 何伟 梁幼生 徐明 许永良 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期1-5,共5页
目的 探讨免疫刺激序列在日本血吸虫Mr 2 3 0 0 0膜蛋白 (SjC2 3 )DNA疫苗诱导BALB/c小鼠抗血吸虫感染中的作用。 方法 将SjC2 3基因片段克隆到增加了免疫刺激序列的真核表达质粒 pcDNA3 1 CpG中 ,构建pcDNA3 1 SjC2 3 /CpG。 40... 目的 探讨免疫刺激序列在日本血吸虫Mr 2 3 0 0 0膜蛋白 (SjC2 3 )DNA疫苗诱导BALB/c小鼠抗血吸虫感染中的作用。 方法 将SjC2 3基因片段克隆到增加了免疫刺激序列的真核表达质粒 pcDNA3 1 CpG中 ,构建pcDNA3 1 SjC2 3 /CpG。 40只雌性BALB/c小鼠随机分为 4组 ,① pcDNA3 1对照组 ;②pcDNA3 1 SjC2 3组 ;③ pcD NA3 1 CpG组 ;④ pcDNA3 1 SjC2 3 /CpG组。每鼠经两侧股四头肌注射质粒DNA共 10 0 μg ,隔 2周加强免疫 1次 ,共 3次。末次免疫后 4周经腹部皮肤感染日本血吸虫尾蚴 45条 /鼠 ,45d后计数成虫及肝脏虫卵数。首次免疫前和感染前 2d分别经尾静脉采血 ,检测IgG及IgG1、IgG2a。末次免疫后 3周取小鼠脾细胞 ,检测经伴刀豆球蛋白和SjC2 3重组蛋白刺激后小鼠白细胞介素 2 (IL 2 )、白细胞介素 4(IL 4)和γ干扰素 (IFN γ)。用51Cr释放法检测经SjC2 3重组蛋白刺激后脾细胞对小鼠淋巴瘤细胞的杀伤作用。 结果 ②组和④组减虫率分别为 2 8 1%和 3 5 1% ,减卵率分别为 2 1 6%和 2 6 5 %。④组减虫率显著高于②组 (P <0 0 5 )。这两组均检测到特异性IgG ,IgG2a/IgG1比值分别为 10 1和 12 2。脾细胞经伴刀豆球蛋白和SjC2 3重组蛋白刺激后的IL 2水平 ,②组较①组、④组较③组均有升高。②组脾? 展开更多
关键词 免疫刺激序列 PCDNA3 脾细胞 DNA疫苗 日本血吸虫 免疫保护作用 小鼠 白刺 刀豆 成虫
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猪瘟伪狂犬病重组病毒SA215(A)株的构建及生物学特性研究 被引量:8
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作者 徐志文 郭万柱 +2 位作者 朱玲 王印 王晓玉 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期1033-1037,共5页
采用磷酸钙转染系统,将伪狂犬病三基因缺失疫苗SA215株DNA与PP63LacZE2 DNA共转染Vero细胞,获得SA215(A)1、SA215(A)2和SA215(A)3等12个重组病毒株。以光生物素标记的HCV E2基因为探针进行初步鉴定后,挑选SA215(A)1株作BamHI酶切和south... 采用磷酸钙转染系统,将伪狂犬病三基因缺失疫苗SA215株DNA与PP63LacZE2 DNA共转染Vero细胞,获得SA215(A)1、SA215(A)2和SA215(A)3等12个重组病毒株。以光生物素标记的HCV E2基因为探针进行初步鉴定后,挑选SA215(A)1株作BamHI酶切和southern转印杂交鉴定,结果表明构建是成功的,将其命名为SA215(A)。直接荧光抗体检测、SDS-PAGE电泳和western免疫印迹检测结果表明HCV E2基因在重组病毒内获得表达,产生大小约51 ku的囊膜糖蛋白。对SA215(A)株进行部分生物学特性研究,培养特性观察试验表明该毒株可适应Vero、BHK21和鸡胚成纤维细胞等多种细胞,但对不同细胞系表现有一定的差异。SA215(A)株105PFU/mL接种21日龄健康仔猪(伪狂犬病和猪瘟检测阴性),接种后28 d用106PFU的PRV Fa强毒株滴鼻攻毒,42 d用猪瘟SM株血毒1 mL(105MLD/mL)肌肉注射攻击,结果表明接种猪能抵御2次病毒攻击,表明SA215(A)株具有良好免疫原性,是一株优秀的猪瘟、伪狂犬病二价疫苗候选株。 展开更多
关键词 重组病毒 猪瘟 伪狂犬病 生物学特性 疫苗
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表达流感病毒神经氨酸酶基因的重组腺病毒的构建 被引量:5
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作者 赵小东 韩峰 +5 位作者 王艳 杨贵宾 应革 林勇平 王璇 吴淑华 《中国病毒学》 CSCD 2003年第3期213-216,共4页
通过RT-PCR方法扩增流感病毒神经氨酸酶基因,将其克隆到腺病毒穿梭载体pTrackCMV,此重组质粒与腺病毒DNA共转化大肠杆菌BJ5183,通过细菌内同源重组获得重组腺病毒DNA,将其转染293细胞获得重组腺病毒。经PCR证实目的基因已整合至腺病毒... 通过RT-PCR方法扩增流感病毒神经氨酸酶基因,将其克隆到腺病毒穿梭载体pTrackCMV,此重组质粒与腺病毒DNA共转化大肠杆菌BJ5183,通过细菌内同源重组获得重组腺病毒DNA,将其转染293细胞获得重组腺病毒。经PCR证实目的基因已整合至腺病毒基因组中,western blot检测到神经氨酸酶的表达。重组病毒经滴鼻和灌胃两种途径免疫小鼠,结果表明2次免疫后滴鼻组和灌胃组均产生明显的免疫应答反应,滴鼻组的免疫效果优于灌胃组。 展开更多
关键词 流感病毒 神经氨酸酶基因 重组腺病毒 疫苗
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表达流行性感冒病毒HA基因非复制型重组腺病毒的构建及免疫效果的研究 被引量:5
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作者 赵小东 韩峰 +3 位作者 应革 王璇 王艳 吴淑华 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期6-10,共5页
通过RT PCR扩增流行性感冒(流感)病毒HA基因,克隆至腺病毒穿梭载体pAdTrack CMV,该重组质粒与腺病毒DNA共转化E.coliBJ5183,通过细菌内同源重组获得重组腺病毒DNA,将其转染293细胞获得重组腺病毒。PCR证实HA基因已整合至腺病毒基因组中,... 通过RT PCR扩增流行性感冒(流感)病毒HA基因,克隆至腺病毒穿梭载体pAdTrack CMV,该重组质粒与腺病毒DNA共转化E.coliBJ5183,通过细菌内同源重组获得重组腺病毒DNA,将其转染293细胞获得重组腺病毒。PCR证实HA基因已整合至腺病毒基因组中,Westernblot结果检测到重组病毒感染293细胞中HA的表达。重组病毒经滴鼻和灌胃两种途径免疫小鼠,结果2次免疫后滴鼻组和灌胃组均产生明显的免疫应答,血清IgG抗体滴度分别为1∶10000和1∶1000。除血清IgG外,还在肺灌洗液中检测到分泌型IgA。滴鼻组的免疫效果强于灌胃组。经小剂量攻毒实验显示,重组腺病毒保护率为100%。该文成功构建了表达流感病毒HA基因的非复制型重组腺病毒,重组病毒免疫小鼠可产生较好的免疫效果。 展开更多
关键词 流行性感冒病毒 血凝素 重组腺病毒 疫苗 HA基因 非复制型重组腺病毒 RT-PCR
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