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Development of New Submergence Tolerant Rice Variety for Bangladesh Using Marker-Assisted Backcrossing
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作者 Khandakar Md IFTEKHARUDDAULA Helal Uddin AHMED +3 位作者 Sharmistha GHOSAL Zakiah Rahman MONI Al AMIN Md Shamsher ALI 《Rice science》 SCIE CSCD 2015年第1期16-26,共11页
Submergence tolerant high yielding rice variety was developed using BR11 as a recipient parent applying foreground, phenotypic and background selection approaches. Recombinant selection was found essential to minimize... Submergence tolerant high yielding rice variety was developed using BR11 as a recipient parent applying foreground, phenotypic and background selection approaches. Recombinant selection was found essential to minimize linkage drag by BC2F2 generation. Without recombinant selection, the introgression size in the backcross recombinant lines (BRLs) was approximately 15 Mb on the carrier chromosome. The BRLs were found submergence tolerance compared to the check varieties under complete submergence for two weeks at Bangladesh Rice Research Institute, and produced higher yield compared to the isogenic Subl-line under controlled submerged condition. The BRL IR85260-66-654-Gaz2 was released as BRRI dhan52 in 2010, which was the first high yielding submergence tolerant variety in Bangladesh. BRRI dhan52 produced grain yield ranging from 4.2 to 5.2 t/hm2 under different flash flood prone areas of Bangladesh in three consecutive seasons. The study demonstrated the efficiency of recombinant selection and better adaptability of the newly released submergence tolerant high yielding variety in flash flood prone different areas of the country with respect to submergence tolerance and yield potential. 展开更多
关键词 backcross recombinant line marker-assisted backcrossing recombinant selection rice submergence tolerance
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重组蛋白药物生产用哺乳动物细胞系构建中筛选标记的应用现状及审评思考 被引量:1
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作者 崔颖 白玉 程速远 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期2989-2993,共5页
对于重组蛋白药物开发,短时间内构建筛选高表达稳定的单克隆细胞株是工业界最主要的挑战。筛选标记是质粒载体中的关键元件,在生产细胞系的构建和筛选中发挥重要作用,通过设计筛选标记提高筛选严谨性,以获得稳定高产细胞株,是一种改进... 对于重组蛋白药物开发,短时间内构建筛选高表达稳定的单克隆细胞株是工业界最主要的挑战。筛选标记是质粒载体中的关键元件,在生产细胞系的构建和筛选中发挥重要作用,通过设计筛选标记提高筛选严谨性,以获得稳定高产细胞株,是一种改进细胞株开发工艺的有效手段。本文以中华仓鼠卵巢(Chinese hamaster overy,CHO)细胞为例,介绍筛选标记在重组蛋白药物生产用哺乳动物细胞系构建中的应用,设计筛选标记以提高筛选严谨性的方法,以及细胞基质稳定性及筛选标记安全性的审评思考,以期为药物研发机构高效开发重组蛋白药物提供参考。 展开更多
关键词 重组蛋白药物 中华仓鼠卵巢细胞 筛选标记 筛选严谨性 细胞基质稳定性 筛选标记安全性
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cosmid克隆筛选的体内同源重组法——一个含有小鼠t复合体连锁DNA顺序的cosmid克隆的分离 被引量:1
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作者 柴建华 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 1990年第1期38-45,共8页
一个从cosmid分子克隆库中筛选特别基因顺序的遗传学方法——体内同源重组(invlvo homologous recombination)法。即使探针DNA与分子克隆库中带有与探针同源顺序的克隆发生体内重组,然后以遗传学方法进行筛选。cosmid分子克隆库构建在re... 一个从cosmid分子克隆库中筛选特别基因顺序的遗传学方法——体内同源重组(invlvo homologous recombination)法。即使探针DNA与分子克隆库中带有与探针同源顺序的克隆发生体内重组,然后以遗传学方法进行筛选。cosmid分子克隆库构建在rec宿主细胞内,经体内包装(in vivo Packaging)成λ噬菌体颗粒,把该噬菌体颗粒转入带有探针DNA的rec^+细胞内,探针是已被克隆在与cosmid载体没有同源顺序的质粒(如PUC8或PUC9)内的。经过一段时间(1—3小时),待重组发生后,把cosmid进行体内包装。此时探针DNA连同质粒已整合入cosmid基因组内,因此它带有原为两个载体所分别带有的双重抗性——Amp^r(氨苄青霉素,PUC8或PUC9)和Kan^r(卡那霉素,cosmid)。这种双重抗性菌落可在含有这2种抗菌素的培养平皿上选出,该重组cosmid借助于λ切除酶的作用将已被整合的探针质粒重新切除,再经体内包装后,该cosmid被还原并纯化,然后可用一含有Xgal的培皿识别和选出。本文用此法以有关DNA探针从cosmid分子克隆库中分离得到含有与小鼠t复合体连锁的基因组顺序的克隆,并对该克隆作了物理图谱分析。 展开更多
关键词 重组DNA 体内同源重组 基因筛选
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猪2型圆环病毒与O型口蹄疫病毒二联重组鸡痘病毒的构建和筛选 被引量:3
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作者 秦晓冰 金宁一 牛晋国 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期959-963,共5页
以pUTA2LacZ为真核表达载体,以中国流行株O型口蹄疫病毒(FMDV)NY00株结构蛋白前体P1基因、猪2型圆环病毒内蒙株的衣壳蛋白和复制蛋白基因为目的基因,构建了2个重组质粒作为中间转移质粒,标记为pUTALP1-ORF2和pUTALP1-ORF2ORF1。将这2个... 以pUTA2LacZ为真核表达载体,以中国流行株O型口蹄疫病毒(FMDV)NY00株结构蛋白前体P1基因、猪2型圆环病毒内蒙株的衣壳蛋白和复制蛋白基因为目的基因,构建了2个重组质粒作为中间转移质粒,标记为pUTALP1-ORF2和pUTALP1-ORF2ORF1。将这2个重组转移质粒分别酶切鉴定后,与鸡痘病毒野毒(FPV)282E4株共转染鸡胚成纤维细胞。结果显示,重组核酸质粒构建正确,并能进行表达。经5-溴-2-脱氧尿苷(BrdU)加压筛选,挑取单个蚀斑,3次纯化,获得2株重组毒vpUTALP1-ORF2ORF1和vpUTALP1-ORF2。结果表明,这2株重组鸡痘毒在电镜下可形成完整的病毒粒子。 展开更多
关键词 重组转移质粒 构建 重组鸡痘毒 筛选
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广东省重组人凝血因子Ⅷ药物评价与遴选专家共识
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作者 广东省药学会药物警戒专业委员会 陈娟 郑萍 《中国医院用药评价与分析》 2024年第4期385-389,395,共6页
重组人凝血因子Ⅷ为众多权威指南推荐的血友病A首选替代治疗药物。重组人凝血因子Ⅷ各品种能够暂时替代患者体内缺失的凝血因子Ⅷ,具有相同的药物作用机制,但在经济性、药学特性及其他属性等方面存在差异。为此,广东省药学会药物警戒专... 重组人凝血因子Ⅷ为众多权威指南推荐的血友病A首选替代治疗药物。重组人凝血因子Ⅷ各品种能够暂时替代患者体内缺失的凝血因子Ⅷ,具有相同的药物作用机制,但在经济性、药学特性及其他属性等方面存在差异。为此,广东省药学会药物警戒专业委员会组织药学与临床专家共同制定了《广东省重组人凝血因子Ⅷ药物评价与遴选专家共识》,对我国已上市的6种重组人凝血因子Ⅷ从药学特性、有效性、安全性、经济性及其他属性等五大方面进行多维度评价,为医疗机构药品遴选及临床合理用药提供参考依据。 展开更多
关键词 血友病A 重组人凝血因子Ⅷ 药物评价 遴选 专家共识
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表达新城疫病毒F基因重组鸡痘病毒的筛选 被引量:3
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作者 张体银 孙蕾 +1 位作者 梁萍 刘秀梵 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期20-23,共4页
将转移载体P11SF和PN11SF分别与282E4株鸡痘病毒(282E4strain fowlpox virus,282E4FPV)和大空斑株鸡痘病毒(large plaque strain fowlpox virus.LP FPV)共转染鸡胚成纤维细胞,通过蓝斑筛选,得到4株重组鸡痘病毒rFPV282E4-SFA、rFPVLP-SF... 将转移载体P11SF和PN11SF分别与282E4株鸡痘病毒(282E4strain fowlpox virus,282E4FPV)和大空斑株鸡痘病毒(large plaque strain fowlpox virus.LP FPV)共转染鸡胚成纤维细胞,通过蓝斑筛选,得到4株重组鸡痘病毒rFPV282E4-SFA、rFPVLP-SFA、rFPV282E4-SFB和rFPVLP-SFB,通过PCR和间接免疫荧光鉴定均为阳性,另外将各重组病毒分别传20代,测其遗传稳定性,结果显示均具有良好的稳定性。对SPF鸡进行免疫效力试验,攻毒后均100%保护,而对于商品鸡,保护率分别为64%、60%、52%和88%。 展开更多
关键词 新城疫病毒 F基因 重组鸡痘病毒 筛选 免疫效力
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用免疫蚀斑方法筛选重组痘苗病毒疫苗株
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作者 谷淑燕 董温平 朱秋屏 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第2期129-134,共6页
用间接免疫酶方法在硝酸纤维膜上检查、筛选和回收重组痘苗病毒。作为人用疫苗株的筛选,此法较核酸杂交方法更简便、直观和准确,在筛选重组病毒的同时确定了病毒在感染细胞上的表达。构建了含痘苗病毒7.5k启动子和EB病毒膜抗原... 用间接免疫酶方法在硝酸纤维膜上检查、筛选和回收重组痘苗病毒。作为人用疫苗株的筛选,此法较核酸杂交方法更简便、直观和准确,在筛选重组病毒的同时确定了病毒在感染细胞上的表达。构建了含痘苗病毒7.5k启动子和EB病毒膜抗原基因的转移载体,从转染细胞的病毒混合液中用特异性McAb和间接免疫酶方法直接筛选表达EB病毒膜抗原的重组痘苗病毒,并从阳性酶斑中回收具感染性病毒。 展开更多
关键词 重组痘苗病毒 疫苗株 筛选方法 免疫蚀斑法
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