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题名抗鹅细小病毒VP3蛋白单克隆抗体的制备及鉴定
被引量：3
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作者
郭鹭
荆志强
李俚
鞠环宇
马波
王君伟
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机构
东北农业大学动物医学学院
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出处
《中国兽医科学》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第2期169-173,共5页
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基金
黑龙江省教育厅重大项目(1054lz004)
黑龙江省攻关项目(GB01B503-02
GB04B504)
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文摘
利用已构建好的pET-30a重组菌E.coli Rosetta(DE3)表达鹅细小病毒(GPV)VP3重组蛋白,经Ni-NTA亲和层析纯化后作为免疫原,经腹膜腔接种4～6周龄BALB/c小鼠3次,末次免疫后第3d取小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合。用建立的间接ELISA方法进行筛选,经4次亚克隆,最终获得4株能稳定分泌抗GPVVP3单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为1F1、2A9、3B11和4A2。亚类鉴定结果显示,单抗1F1为IgG2b亚型,其余3株单抗为IgG1亚型,轻链均为κ链。经间接ELISA检测,单抗1F1、2A9、3B11和4A2的腹水效价分别为1:819200、1:1638400、1:409600和1:819200。Western-blot分析表明,获得的4株单克隆抗体均能特异性识别GPVVP3重组蛋白;间接免疫荧光试验证明,这4株单抗能够与天然GPV结合。
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关键词
鹅细小病毒
vp3重组蛋白
单克隆抗体
特性鉴定
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Keywords
goose parvovirus
recombinant vp3 protein
monoclonal antibody
specific identification
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分类号
S852.659.2
[农业科学—基础兽医学]
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