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毒蕈样乙酰胆碱受体基因在大鼠胃粘膜表达的检测
1
作者 陈学清 潘国宗 +1 位作者 张万岱 周殿元 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 1998年第1期17-19,共3页
目的：检测了毒蕈样乙酰胆碱Ⅰ（ＭＲ１）和Ⅲ型受体（ＭＲ３）基因在大鼠胃粘膜的表达情况。方法：ｐＳＰ７３和ｐＳＰ７２质粒分别含有ＭＲ１和ＭＲ３ｃＤＮＡ，其用ＥｃｏＲⅠ或ＨｉｎｄⅢ线性化后，加入逆转录反应体系中制备地高辛... 目的：检测了毒蕈样乙酰胆碱Ⅰ（ＭＲ１）和Ⅲ型受体（ＭＲ３）基因在大鼠胃粘膜的表达情况。方法：ｐＳＰ７３和ｐＳＰ７２质粒分别含有ＭＲ１和ＭＲ３ｃＤＮＡ，其用ＥｃｏＲⅠ或ＨｉｎｄⅢ线性化后，加入逆转录反应体系中制备地高辛标记的ｃＲＮＡ受体探针。胃粘膜ＭＲ１和ＭＲ３ｍＲＮＡ的定位检测采用原位杂交免疫组织化学方法。结果：ＭＲ１和ＭＲ３ｍＲＮＡ仅在大鼠胃粘膜固有层细胞表达，粘膜上皮细胞（腺体细胞）上无阳性的ＭＲ１和ＭＲ３ｍＲＮＡ杂交信号表达。结论：提示，胃粘膜上皮细胞（包括壁细胞和主细胞）可能缺乏乙酰胆碱受体，乙酰胆碱对胃酸分泌的刺激调节作用。 展开更多
关键词 毒蕈样乙酰胆碱 受体 胃粘膜 免疫组织化学 检测
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M受体-G蛋白信号转导途径研究进展 被引量：7
2
作者 孙科 郭政东 《国际药学研究杂志》 CAS 2008年第2期87-91,共5页
毒蕈碱乙酰胆碱受体(mAChR)是G蛋白偶联受体超家族中的一员,具有该家族特征性的结构和信号转导方式。GTP结合蛋白(G protein)是一类具有GTP酶活性的蛋白质,由α、β和γ三个亚基构成。mAChR可以与G蛋白偶联,引起GTP与α亚基结合,导致Gα... 毒蕈碱乙酰胆碱受体(mAChR)是G蛋白偶联受体超家族中的一员,具有该家族特征性的结构和信号转导方式。GTP结合蛋白(G protein)是一类具有GTP酶活性的蛋白质,由α、β和γ三个亚基构成。mAChR可以与G蛋白偶联,引起GTP与α亚基结合,导致Gα与Gβγ分离。近年来发现,不但Gα-GTP可以调节效应分子,Gβγ也可以调节许多效应分子如腺苷酸环化酶、磷脂酶C、K+通道、Ca2+通道、MAPK和受体激酶等,介导一系列的生物学效应,在信号转导过程中发挥重要的作用。 展开更多
关键词 受体 毒蕈碱 GTP结合蛋白 信号转导 效应分子
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风湿性心脏病心力衰竭患者抗心脏β_1和M_2受体自身抗体的研究 被引量：8
3
作者 孟宪敏 张麟 +2 位作者 李莉 赵荣瑞 刘力生 《临床心血管病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第11期499-501,共3页
目的：探讨抗心脏Ｇ－蛋白偶联型β１ 和Ｍ２ 受体的自身抗体是否与风湿性心脏病（ＲＶＨＤ）心力衰竭有关。方法：以心脏Ｇ－蛋白偶联受体β１ 和Ｍ２ 细胞外第二环表位肽段序列的合成肽作为抗原，应用酶联免疫吸附测定（ＥＬＩＳＡ）... 目的：探讨抗心脏Ｇ－蛋白偶联型β１ 和Ｍ２ 受体的自身抗体是否与风湿性心脏病（ＲＶＨＤ）心力衰竭有关。方法：以心脏Ｇ－蛋白偶联受体β１ 和Ｍ２ 细胞外第二环表位肽段序列的合成肽作为抗原，应用酶联免疫吸附测定（ＥＬＩＳＡ）技术检测５０ 例ＲＶＨＤ患者和４１ 例正常人血清中抗心脏β１ 和Ｍ２ 受体的自身抗体。结果：５０ 例ＲＶＨＤ心力衰竭患者中有２０ 例存在抗心脏β１ 受体自身抗体（４０．０％ ），正常组仅５ 例（１２．２％ ）；前组又有２４ 例存在抗心脏Ｍ２ 受体自身抗体（４８．０％ ），正常组仅４ 例（９．８％ ）。ＲＶＨＤ组β１ 和Ｍ２ 自身抗体的滴度分别为１∶１０４ 与１∶１１７，正常组为１∶４０ 与１∶２４（Ｐ＜ ０．０５）；心功能Ⅱ～Ⅲ级的阳性率及抗体滴度也明显高于心功能Ⅳ级。结论：抗心脏β１ 和Ｍ２ 受体的自身抗体与ＲＶＨＤ有关，这两种自身抗体可能参与ＲＶＨＤ心力衰竭的病理改变。 展开更多
关键词 β1肾上腺素能 风湿性心脏病 心力衰竭 自身抗体
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基于钙激活氯离子通道靶向M_(3)受体的药物筛选细胞模型的建立
4
作者 肖云萍 解宇浩 +2 位作者 张嘉琪 郝峰 王国庆 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期715-722,共8页
目的建立一种基于钙激活氯离子通道(calcium-activated chloride channel,CaCC)靶向M3受体(cholinergic receptor muscarinic 3,Chrm3)高效敏感的药物细胞筛选模型和方法。方法RT-PCR、免疫荧光技术及Western blot检测Chrm3在FRT细胞中... 目的建立一种基于钙激活氯离子通道(calcium-activated chloride channel,CaCC)靶向M3受体(cholinergic receptor muscarinic 3,Chrm3)高效敏感的药物细胞筛选模型和方法。方法RT-PCR、免疫荧光技术及Western blot检测Chrm3在FRT细胞中的表达情况;构建共表达钙激活氯离子通道蛋白1(anoctamin 1,ANO1)和YFP-H148Q/I152L的Fischer大鼠甲状腺滤泡上皮(Fischer rat thyroid,FRT)细胞模型,倒置荧光显微镜和荧光淬灭动力学实验鉴定CaCC细胞模型有效性;Fura-2荧光探针法检测加入Chrm3激活剂后胞浆内的钙浓度,荧光淬灭动力学实验验证细胞模型可筛选Chrm3调节剂;Z'因子评估该细胞模型是否适用于高通量筛选。结果FRT细胞在mRNA及蛋白水平均内源性表达Chrm3;成功构建了稳定共表达ANO1和YFP-H148Q/I152L的FRT细胞模型;该细胞模型可敏感检测细胞内钙浓度,相对荧光强度变化值与Chrm3调节剂浓度成剂量依赖关系,可用于Chrm3调节剂的筛选;该模型的Z'因子值为0.678,满足高通量筛选的要求。结论此细胞模型通过敏感检测钙信号实现了对Chrm3调节剂的高通量筛选,也可应用于对其他与钙离子信号相关G蛋白偶联受体(G-protein-coupled receptor,GPCR)靶点的筛选。 展开更多
关键词 M_(3)受体 钙激活氯离子通道 细胞模型 高通量筛选 钙浓度
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