乳酸菌素生产菌的分离与鉴定 被引量：24

1

作者 刘长建 徐洪涛 +1 位作者 权春善 范圣第 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期26-30,共5页

对乳酸菌素产生菌进行分离,得到4株理想菌株。利用高效液相色谱检测其发酵液,初步确定4菌株均为乳酸菌,其中Ⅱ32菌株产乳酸最多,对各指示菌的抑制作用最显著,对该菌株作进一步的研究。Ⅱ32菌株在MRS培养基上可以生长,最适生长温度为28℃... 对乳酸菌素产生菌进行分离,得到4株理想菌株。利用高效液相色谱检测其发酵液,初步确定4菌株均为乳酸菌,其中Ⅱ32菌株产乳酸最多,对各指示菌的抑制作用最显著,对该菌株作进一步的研究。Ⅱ32菌株在MRS培养基上可以生长,最适生长温度为28℃,革兰氏染色呈阳性,无芽孢。通过API生化反应实验、16SrDNA测序可进一步确定该菌株是L·paraplantarum或L·paraplantarum。最终通过对recA-gen的PCR产物检测,鉴定菌株Ⅱ32为Lactobacillusparaplantarum(类植物乳杆菌)。牛津杯抑菌试验显示,该菌株的发酵液不仅对多数G+细菌的生长有较强的抑制作用,而且对大肠杆菌、沙门氏菌等Gˉ细菌的生长也具有明显的抑制作用,但对真菌没有活性。 展开更多

关键词 乳酸菌 分离鉴定 抑菌活性 reca-gene 乳酸菌素 LACTOBACILLUS 鉴定 分离 最适生长温度 生产菌

下载PDF 职称材料

洋葱伯克霍尔德氏菌株Lyc2的鉴定及对棉苗的防病促生作用 被引量：12

2

作者 于晓庆 郗丽君 +4 位作者 刘永光 李光伟 兰玉菲 竺晓平 李向东 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期426-432,共7页

从烟草根际土壤中分离到一株细菌菌株Lyc2,平皿对峙培养显示该菌可显著抑制多种植物病原真菌菌丝体的生长。温室盆栽试验表明,Lyc2对棉花苗期立枯病的防治效果达到48.8%;水培棉花苗试验表明,Lyc2能显著增加棉苗的鲜重和干重,但对株高的... 从烟草根际土壤中分离到一株细菌菌株Lyc2,平皿对峙培养显示该菌可显著抑制多种植物病原真菌菌丝体的生长。温室盆栽试验表明,Lyc2对棉花苗期立枯病的防治效果达到48.8%;水培棉花苗试验表明,Lyc2能显著增加棉苗的鲜重和干重,但对株高的影响不显著。该菌经形态、生理生化试验测定及16S rDNA和ITS序列分析,初步确定为洋葱伯克霍尔德氏菌(Burkholderia cepacia);进一步通过种特异的recA基因序列分析,证明Lyc2菌株属于B. cepacia复合物中基因型IX,B.pyrrocinia。 展开更多

关键词 植物根际促生菌 洋葱伯克霍尔德氏菌 16S RDNA 16S-23S rDNA转录单元内间隔区序列(ITS) reca基因

下载PDF 职称材料

16S rDNA和recA-gene对乳酸菌Ⅱ32的鉴定 被引量：7

3

作者 刘长建 权春善 范圣第 《大连民族学院学报》 CAS 2007年第1期50-52,共3页

对乳酸菌Ⅱ32进行了生化实验.以菌株Ⅱ32的总DNA为模板,采用细菌通用的引物,对其16S rDNA进行特异扩增,并进行序列测定,将测定结果与GenBank DNA数据库中已知菌种的16S rDNA序列通过BLAST软件进行分析比较,初步确定该菌株为戊糖乳酸菌... 对乳酸菌Ⅱ32进行了生化实验.以菌株Ⅱ32的总DNA为模板,采用细菌通用的引物,对其16S rDNA进行特异扩增,并进行序列测定,将测定结果与GenBank DNA数据库中已知菌种的16S rDNA序列通过BLAST软件进行分析比较,初步确定该菌株为戊糖乳酸菌、植物乳杆菌或类植物乳杆菌.采用recA-gene约300bp的特异扩增片段最终确定乳酸菌Ⅱ32为类植物乳杆菌. 展开更多

关键词 菌种鉴定 乳酸菌 16S RDNA reeA—gene

下载PDF 职称材料

四川牦牛奶和曲拉中九株乳酸菌的分子鉴定 被引量：11

4

作者 包秋华 吕嫱 +3 位作者 于洁 王宏梅 张和平 孙天松 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期396-401,共6页

为准确鉴定分离自我国四川鲜牦牛奶和曲拉中9株乳酸菌到种水平,作者运用16S rDNA序列分析、recA基因特异扩增和hsp60-RFLP等多种分子技术对分离自我国四川地区鲜牦牛奶和曲拉中的9株乳酸菌进行分类鉴定。结果证实,16S rDNA序列分析法可... 为准确鉴定分离自我国四川鲜牦牛奶和曲拉中9株乳酸菌到种水平,作者运用16S rDNA序列分析、recA基因特异扩增和hsp60-RFLP等多种分子技术对分离自我国四川地区鲜牦牛奶和曲拉中的9株乳酸菌进行分类鉴定。结果证实,16S rDNA序列分析法可将9株乳酸菌初步归类为植物乳杆菌群(4株),肠膜明串珠菌(4株),瑞士乳杆菌(1株)。由于16S rDNA序列分析法不能区分植物乳杆菌和戊糖乳杆菌,为了进一步鉴定植物乳杆菌群中的4株菌,继续采用recA基因特异扩增和hsp60-RFLP技术对其细分,结果表明recA基因特异扩增和hsp60-RFLP的方法均能很好地把植物乳杆菌群中的4株菌鉴定到种水平,且均为植物乳杆菌。 展开更多

关键词 乳酸菌 分类鉴定 16s RDNA reca基因 hsp60基因 RFLP

下载PDF 职称材料

遗传毒性检测生物传感细胞的灵敏度及稳定性研究 被引量：7

5

作者 宋一之 黄巍 +1 位作者 张旭 李广贺 《清华大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第11期1880-1884,1889,共6页

针对环境样品遗传毒性检测的高灵敏度和高稳定性需求,本研究通过染色体重组构建一株生物传感细胞ADP_recA,研究其对遗传毒物的检测灵敏度和遗传稳定性。在不动杆菌ADP1染色体上重组发光基因luxCDABE得到ADP_recA,以遗传毒物丝裂霉素C(mi... 针对环境样品遗传毒性检测的高灵敏度和高稳定性需求,本研究通过染色体重组构建一株生物传感细胞ADP_recA,研究其对遗传毒物的检测灵敏度和遗传稳定性。在不动杆菌ADP1染色体上重组发光基因luxCDABE得到ADP_recA,以遗传毒物丝裂霉素C(mitomycin C,MMC)为检测对象,研究其生长和发光对遗传毒物的响应,向ADP_recA及其突变体ADP1_δsalR_recA转化环状和线性DNA以研究ADP_recA的遗传稳定性。ADP_recA在暴露于MMC后3 h时单位发光强度最高,质量浓度0.5—5mg/L的MMC与单位发光强度存在S型剂量效应关系,对MMC的检出限为1μg/L。ADP1_δsalR_recA中质粒p WH1274转化效率约为1.6×10-7,线性salR转化效率为0。研究结果表明:ADP_recA能够在暴露3 h内评价遗传毒性,对MMC的检测灵敏度优于成熟的umu/SOS和SOSchrometest方法。ADP_recA丧失染色体进一步同源重组的能力,具有较高的遗传稳定性,在环境样品遗传毒性的高灵敏度迅速检测中具有广阔的前景。 展开更多

关键词 遗传毒性 生物传感 发光细菌 不动杆菌 reca基因

原文传递

质粒的复制特性和整合后在发动大肠杆菌染色体复制中对recA基因的依赖性的研究 被引量：4

6

作者 毛裕民 卢见微 盛祖嘉 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 1990年第1期53-62,共10页

大肠杆菌的温度敏感的DNA复制发动突变型dnaA46在42℃中不能生长而形成菌落,质粒或噬菌体的整合使它能生长。前文[2]报道了F质粒整合后所发动的染色体复制依赖于recA基因。本文报道5种质粒和2种噬菌体整合后所发动的染色体复制对recA基... 大肠杆菌的温度敏感的DNA复制发动突变型dnaA46在42℃中不能生长而形成菌落,质粒或噬菌体的整合使它能生长。前文[2]报道了F质粒整合后所发动的染色体复制依赖于recA基因。本文报道5种质粒和2种噬菌体整合后所发动的染色体复制对recA基因的依赖性的研究结果。实验结果说明,依赖与否和它们在游离状态中复制方向无关,从而否定了recA基因的作用是把质粒或噬菌体的游离状态的单向复制发动机构改变为整合状态的双向复制发动饥构这一假设。 展开更多

关键词 质粒 复制 整合 大肠杆菌 reca基因

下载PDF 职称材料

牛分枝杆菌特异性基因的PCR扩增及二联PCR反应的建立 被引量：3

7

作者 王春芳 姜秀云 钱爱东 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期949-952,共4页

为了研究牛结核病的PCR诊断方法,本研究以牛分枝杆菌(M.bovis) Vallee111株染色体DNA为模板,以RecA和Pps1基因特异性引物进行PCR扩增,获得约860bp和430bp的DNA片段。将PCR纯化产物进行测序,通过BLAST序列分析,与GenBank中登录的M.bovis ... 为了研究牛结核病的PCR诊断方法,本研究以牛分枝杆菌(M.bovis) Vallee111株染色体DNA为模板,以RecA和Pps1基因特异性引物进行PCR扩增,获得约860bp和430bp的DNA片段。将PCR纯化产物进行测序,通过BLAST序列分析,与GenBank中登录的M.bovis AF2122/97 RecA基因和Pps1基因的核苷酸序列同源性均达到99%。在同一PCR反应中同时加入RecA和Pps1基因特异性引物建立RecA-Pps1二联PCR反应。同时,RecA和Pps1PCR扩增的敏感性分别达到585fg和195fg,特异性均达到100%,为进一步研究RecA和Pps1基因以及其在牛结核病诊断中的应用奠定了基础。 展开更多

关键词 牛分枝杆菌 reca基因 Pps1基因 二联PCR

下载PDF 职称材料

死胚中鲍曼不动杆菌的分离鉴定及其致病性和耐药性分析 被引量：3

8

作者 张琰杰 唐宁 +4 位作者 刘靖森 任慧英 张灿 尹燕博 刘文华 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第24期86-89,93,共5页

为了了解山东省某肉种鸡孵化场死胚中鲍曼不动杆菌的感染情况及其致病性和耐药性,试验对6个不同批次种蛋孵化后随机抽检的174枚啄壳未出壳死胚的卵黄液和胎粪利用4种不同培养基进行了细菌的分离,对分离细菌进行了鲍曼不动杆菌碳氢霉烯酶... 为了了解山东省某肉种鸡孵化场死胚中鲍曼不动杆菌的感染情况及其致病性和耐药性,试验对6个不同批次种蛋孵化后随机抽检的174枚啄壳未出壳死胚的卵黄液和胎粪利用4种不同培养基进行了细菌的分离,对分离细菌进行了鲍曼不动杆菌碳氢霉烯酶OXA-51基因的测序鉴定。6个批次各取1株鲍曼不动杆菌分离株进行生化试验、小鼠攻毒试验、药敏试验和同源性分析。结果表明:在174枚死胚的卵黄和胎粪中分离得到鲍曼不动杆菌,分离率分别为9.8%和10.9%。检测的6株鲍曼不动杆菌分离株对氨苄西林、氟苯尼考、林可霉素和阿莫西林均100%耐药,所有菌株均表现为多重耐药现象。6株鲍曼不动杆菌分离株对小鼠均表现出较强的致病性。基于recA基因的序列分析表明,鲍曼不动杆菌分离株同源性存在一定差异。说明鲍曼不动杆菌在死胚中分离率较高,并具有高度耐药性和较强致病性。 展开更多

关键词 死胚 鲍曼不动杆菌 reca基因 致病性 耐药性 系统进化分析

原文传递

哈氏弧菌(Vibrio harveyi)recA基因的克隆与原核表达 被引量：3

9

作者 常云胜 周维 +1 位作者 高增鸿 丁燏 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期1947-1954,共8页

SOS反应不仅能够促使细菌本身产生耐药性,而且与细菌耐药基因的水平转移密切相关。rec A是细菌SOS反应的重要基因,影响SOS反应的开启和关闭。本研究以水产养殖经济动物的条件致病菌哈氏弧菌ZJ0603基因组DNA为模板,设计同源引物克隆出SO... SOS反应不仅能够促使细菌本身产生耐药性,而且与细菌耐药基因的水平转移密切相关。rec A是细菌SOS反应的重要基因,影响SOS反应的开启和关闭。本研究以水产养殖经济动物的条件致病菌哈氏弧菌ZJ0603基因组DNA为模板,设计同源引物克隆出SOS基因rec A（recombinase A）,并对rec A基因进行了生物信息学分析。并构建了rec A基因的原核表达载体PGEX-rec A,在大肠杆菌BL21（DE3）中成功诱导表达,对Rec A蛋白的诱导温度、时间、IPTG浓度等条件进行了优化。结果表明,rec A基因的开放阅读框为693 bp,编码230个氨基酸,Rec A蛋白理论分子量为25.29 k D。重组蛋白表达的优化条件为37℃、0.04 mmol/L IPTG诱导6 h。 展开更多

关键词 哈氏弧菌 reca 基因克隆 原核表达

原文传递

BAC介导的含97kb人β类珠蛋白基因簇转基因鼠模型的建立 被引量：2

10

作者 沈伟 黄粤 +4 位作者 唐毅 刘德培 刘光 吴敏 梁植权 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期117-121,共5页

目的 利用RecA蛋白介导的同源重组的方法,修饰含全长人β珠蛋白基因簇及一段IL-11受体α链基因的(?)C(细菌人工染色体)克隆,建立只包括全长人β珠蛋白基因簇的转基因鼠模型。方法 分别在待删除片段上、下游用PCR合成500 bp左右的两段同... 目的 利用RecA蛋白介导的同源重组的方法,修饰含全长人β珠蛋白基因簇及一段IL-11受体α链基因的(?)C(细菌人工染色体)克隆,建立只包括全长人β珠蛋白基因簇的转基因鼠模型。方法 分别在待删除片段上、下游用PCR合成500 bp左右的两段同源序列,共同克隆人构建载体pBV的HindⅢ和XbaⅠ位点之间,然后以SalⅠ酶切后将此1 kb的插入片段再克隆入温度敏感型穿梭载体pSV-RecA中,转化含B5-BAC DNA的感受态大肠杆菌DH10B,经氯霉素正筛选和镰孢菌酸(FA)负筛选,获得发生两次同源重组后只含修饰后的BACDNA而穿梭载体已丢失的菌株。经脉冲场凝胶电泳鉴定后,纯化修饰的BAC DNA,经显微注射受精卵制备转基因鼠,分析其中的人β珠蛋白基因簇整合和表达状况。结果 利用RecA蛋白介导的同源重组的方法,获得了IL-11受体α链基因被定位删除的含完整人β珠蛋白基因簇的BAC克隆(命名为βD-BAC),建立了3株独立的转基因鼠株系。结论 新的BAC介导的转基因鼠中的人β珠蛋白基因簇显示正确的表达模式和水平。 展开更多

关键词 β类珠蛋白 基因簇 转基因鼠模型 reca蛋白 细菌人工染色体

下载PDF 职称材料

牛分枝杆菌三重PCR检测方法的建立 被引量：1

11

作者 钱爱东 王建 王春芳 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期479-482,共4页

为建立快速检测牛分枝杆菌(M.bovis)的三重PCR方法,本研究以M.bovis ValleeⅢ株染色体DNA为模板,分别以其recA、IS6110、IS1081基因特异性引物进行PCR扩增,建立检测M.bovis的recA-IS6110-IS1081三重PCR反应。通过PCR扩增获得大小约为860... 为建立快速检测牛分枝杆菌(M.bovis)的三重PCR方法,本研究以M.bovis ValleeⅢ株染色体DNA为模板,分别以其recA、IS6110、IS1081基因特异性引物进行PCR扩增,建立检测M.bovis的recA-IS6110-IS1081三重PCR反应。通过PCR扩增获得大小约为860 bp、520 bp和340 bp的DNA片段。BLAST序列分析表明,这3个基因片段与GenBank中登录的相关基因的核苷酸序列同源性均达到99%。同时,recA、IS6110和IS1081PCR扩增的敏感性分别达到585 fg、19.5 fg和19.5 fg。特异性较强,只有M.bovis和人结核临床分离株扩增反应为阳性,为进一步研究recA、IS6110和IS1081基因以及其在牛结核病诊断中的应用奠定了基础。 展开更多

关键词 牛分枝杆菌 reca基因 IS6110基因 IS1081基因 三重PCR

下载PDF 职称材料

云南省景洪市鼠类及媒介蜱中伯氏疏螺旋体感染状况调查 被引量：2

12

作者 段存娟 郭英 +4 位作者 侯学霞 董珊珊 张琳 郝琴 王鹏 《疾病监测》 CAS 2019年第3期246-250,共5页

目的了解云南省景洪市鼠类及媒介蜱中伯氏疏螺旋体的感染状况及其携带的病原体特征。方法 2018年3月在景洪市景讷和大渡岗2个乡镇7个调查点采集蜱标本,在勐罕、勐养、嘎洒、景讷4个乡镇4个调查点采集鼠的肾脏、膀胱标本,提取样本DNA;采... 目的了解云南省景洪市鼠类及媒介蜱中伯氏疏螺旋体的感染状况及其携带的病原体特征。方法 2018年3月在景洪市景讷和大渡岗2个乡镇7个调查点采集蜱标本,在勐罕、勐养、嘎洒、景讷4个乡镇4个调查点采集鼠的肾脏、膀胱标本,提取样本DNA;采用实时定量PCR进行伯氏疏螺旋体recA基因检测;对recA基因阳性样本用巢式PCR扩增5S～23S rRNA基因间隔区,并对扩增产物进行测序及序列同源性比较。结果共采集牛、羊寄生蜱724只,经鉴定均为微小牛蜱;35只鼠均为黄胸鼠;524只蜱及35份鼠标本伯氏疏螺旋体培养结果均为阴性。对200份蜱recA基因检测发现阳性3份;35份鼠标本均为阴性。对3份阳性标本的5S～23S rRNA序列同源性进行分析,初步判定其为伽氏疏螺旋体。结论云南省景洪市蜱中存在伽氏疏螺旋体感染,微小牛蜱很可能是其传播媒介,应加强对当地人群、宿主及媒介的调查和监测。 展开更多

关键词 伯氏疏螺旋体 reca基因 微小牛蜱 黄胸鼠 伽氏疏螺旋体

原文传递

快速检测洋葱伯克霍尔德菌巢式荧光定量PCR法建立 被引量：2

13

作者 林丽英 邓穗燕 郭旭光 《分子诊断与治疗杂志》 2020年第4期437-440,458,共5页

目的建立能直接快速应用于临床检测洋葱伯克霍尔德菌的巢式荧光定量PCR法。方法根据洋葱伯克霍尔德菌recA基因序列设计用于普通PCR扩增的外引物,同时设计用于荧光定量PCR的内引物。分别以洋葱伯克霍尔德菌等细菌的标准株为模板,以外引... 目的建立能直接快速应用于临床检测洋葱伯克霍尔德菌的巢式荧光定量PCR法。方法根据洋葱伯克霍尔德菌recA基因序列设计用于普通PCR扩增的外引物,同时设计用于荧光定量PCR的内引物。分别以洋葱伯克霍尔德菌等细菌的标准株为模板,以外引物进行第一轮PCR扩增;所得PCR产物为模板,以内引物进行染料法荧光定量PCR检测recA基因表达水平,评估巢式荧光定量PCR法的特异性。同时将洋葱伯克霍尔德菌的菌液和基因组DNA进行浓度梯度稀释,继续进行巢式荧光定量PCR,确定此方法的灵敏度。最后用巢式荧光定量PCR法和Vitek 2 Compact仪器分别鉴定35例临床标本,比较两者的检出能力。结果巢式荧光定量PCR法只针对洋葱伯克霍尔德菌有扩增曲线,而对其他菌株无检测信号。同时,巢式荧光定量PCR法的检测下限是1×10^1 CFU/mL的菌液和1×10^⁃5 ng/μL的基因组DNA,具有较高的灵敏度。巢式荧光定量PCR法能有效检测出14例临床标本存在洋葱伯克霍尔德菌感染(检出率为40.0%),而Vitek 2 Compact仪器仅检测出10例(检出率为28.6%),其中4例无法识别。结论巢式荧光定量PCR法具有有效、快速和直接应用于临床检测的优点,并且特异、灵敏和准确等特点,值得在临床推广。 展开更多

关键词 洋葱伯克霍尔德菌 reca基因 巢式荧光定量PCR 临床检测

下载PDF 职称材料

实时荧光定量PCR法鉴定发酵乳中嗜热链球菌 被引量：2

14

作者 王青龙 貌达 +6 位作者 周燕霞 刘凯 李爽 杨霞 王雨婷 王军红 蔡雪凤 《中国酿造》 CAS 北大核心 2022年第7期149-154,共6页

该研究通过系统发育树分析确定目标基因,根据目的基因设计特异性引物和探针,建立一种能够快速准确鉴定发酵乳中嗜热链球菌的实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-fqPCR)法,通过特异性、灵敏性和抗干扰实验对所建立方法进行验证,并使用该方法... 该研究通过系统发育树分析确定目标基因,根据目的基因设计特异性引物和探针,建立一种能够快速准确鉴定发酵乳中嗜热链球菌的实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-fqPCR)法,通过特异性、灵敏性和抗干扰实验对所建立方法进行验证,并使用该方法对市售的60份标识含有嗜热链球菌的发酵乳样品进行检测。结果表明,recA基因具有种间特异性,种间差异率>10%,以其为目的基因建立的RT-fqPCR方法能够特异性的检测嗜热链球菌;绝对灵敏度达1 pg/μL,相对灵敏度达10^(3) CFU/mL;在培养物水平和基因组水平抗干扰能力良好。采用该方法从60份标识含有嗜热链球菌的发酵乳样品中均能检测出嗜热链球菌,说明实时荧光定量PCR方法能够快速、准确的对发酵乳中嗜热链球菌进行检测。 展开更多

关键词 实时荧光定量PCR 嗜热链球菌 reca基因 发酵乳 分子鉴定技术

下载PDF 职称材料

“RecA蛋白-互补单链DNA探针”生物信号放大系统用于压电基因传感器的研究 被引量：2

15

作者 吴蓉 府伟灵 陈鸣 《重庆医学》 CAS CSCD 2004年第8期1132-1134,共3页

目的　利用“RecA蛋白 互补单链DNA探针”与固定的肽核酸 (bis PNA)探针相结合 ,摸索最适的液相反应条件 ,以提高压电基因传感器基因传感表面的质量负载 ,从而提高传感器的灵敏度。方法　基因传感器阵列固定上针对乙肝病毒的bis PNA探... 目的　利用“RecA蛋白 互补单链DNA探针”与固定的肽核酸 (bis PNA)探针相结合 ,摸索最适的液相反应条件 ,以提高压电基因传感器基因传感表面的质量负载 ,从而提高传感器的灵敏度。方法　基因传感器阵列固定上针对乙肝病毒的bis PNA探针 ,加入靶DNA与之反应 ,然后加入预先处理过的不同浓度 (0 .5～ 6mg/ml)的“RecA蛋白 互补单链DNA探针”。结果　当RecA蛋白浓度为 3mg/ml时 ,ATPγS浓度为 1 2 .5 μM ,所引起的频率变化最显著。 结论　在反应体系中加入“RecA蛋白 互补单链DNA探针” 。 展开更多

关键词 基因传感器 压电 肽核酸 reca蛋白 灵敏度

下载PDF 职称材料

16S rRNA和recA、groEL基因分类鉴定乳酸乳球菌乳酸亚种和乳脂亚种的比较 被引量：1

16

作者 徐海燕 吕嫱 +4 位作者 孙志宏 于洁 张家超 孟和毕力格 张和平 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期2237-2245,共9页

【目的】比较16S rRNA和recA、groEL基因部分序列用于乳酸乳球菌乳酸亚种和乳脂亚种分类鉴定的效果。【方法】对已鉴定的8株分离自传统发酵乳的乳酸乳球菌,选取recA和groEL基因片段,通过PCR扩增、测序,将测序得到的序列比对后构建系统... 【目的】比较16S rRNA和recA、groEL基因部分序列用于乳酸乳球菌乳酸亚种和乳脂亚种分类鉴定的效果。【方法】对已鉴定的8株分离自传统发酵乳的乳酸乳球菌,选取recA和groEL基因片段,通过PCR扩增、测序,将测序得到的序列比对后构建系统发育树,并与16S rRNA基因序列分析技术进行比较。【结果】比较分析不同菌株16S rRNA和recA、groEL基因的亲缘关系,recA、groEL基因可以准确地完成乳酸乳球菌乳酸亚种和乳脂亚种的区分和鉴定。【结论】recA和groEL基因序列分析可以实现乳酸乳球菌乳酸亚种和乳脂亚种的区分,因其具有快速、准确、稳定的特点,可适合于乳酸乳球菌乳酸亚种和乳脂亚种间的快速分类鉴定。 展开更多

关键词 乳酸乳球菌乳酸亚种 乳酸乳球菌乳脂亚种 reca基因 groEL基因 分类鉴定

原文传递

基于16S rRNA基因与相关基因序列分析格氏乳球菌亲缘关系

17

作者 陈明 徐海燕 +2 位作者 于洁 孟和毕力格 张和平 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2013年第5期15-18,60,共5页

通过PCR扩增7株分离自传统发酵乳制品中的格氏乳球菌的dnaA、rpoB、recA基因,将扩增产物测序,测得的序列构建系统发育树,进行分类鉴定。同时,比较了这三个基因位点与16S rRNA基因揭示的格氏乳球菌种内菌株间以及其与乳酸乳球菌种间的亲... 通过PCR扩增7株分离自传统发酵乳制品中的格氏乳球菌的dnaA、rpoB、recA基因,将扩增产物测序,测得的序列构建系统发育树,进行分类鉴定。同时,比较了这三个基因位点与16S rRNA基因揭示的格氏乳球菌种内菌株间以及其与乳酸乳球菌种间的亲缘关系的远近。结果表明,dnaA、rpoB、recA基因能够有效的鉴定出格氏乳球菌,且比16S rRNA基因更清晰地揭示了格氏乳球菌菌株间以及其与乳酸乳球菌种间的亲缘关系,特别是将3个管家基因联合起来,亲缘关系更明确,验证了多个管家基因是研究细菌亲缘关系的有力工具。 展开更多

关键词 格氏乳球菌 dnaA基因 RPOB基因 reca基因 亲缘关系

下载PDF 职称材料

绿脓杆菌外毒素ArecA基因的融合及融合蛋白的表达 被引量：1

18

作者 刘晓明 朱平 +2 位作者 刘子 马从林 冯书章 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第2期135-139,共5页

将绿脓杆菌ｒｅｃＡ基因克隆到ｐＵＣ１８中，构建了中间载体ｐＵＣＲ１８；然后以正确的向位及阅读框架将ｒｅｃＡ基因亚克隆到毒性基因缺失的绿脓杆菌外毒素Ａ（ＰＥＡ）基因中，构建了ＰＥＡ－ｒｅｃＡ融合基因质粒ｐＥＲＡ；融合基... 将绿脓杆菌ｒｅｃＡ基因克隆到ｐＵＣ１８中，构建了中间载体ｐＵＣＲ１８；然后以正确的向位及阅读框架将ｒｅｃＡ基因亚克隆到毒性基因缺失的绿脓杆菌外毒素Ａ（ＰＥＡ）基因中，构建了ＰＥＡ－ｒｅｃＡ融合基因质粒ｐＥＲＡ；融合基因经ＢａｍＨＩ及ＥｃｏＲＩ酶切，以正确阅读框架插入带有Ｔ７表达启动子的质粒ｐＥＴ－１７ｂ，构建了可表达ＰＥＡ－ｒｅｃＡ融合基因的质粒ｐＥＲＡ－１７ｂ。经酶切分析及ＰＣＲ扩增检测证明，绿脓杆菌ｒｅｃＡ已插入ＰＥＡ毒性基因中。ｐＥＲＡ－１７ｂ转化到ＤＥ３溶原态大肠杆菌ＨＭＳ１７４中，经ＩＰＴＧ诱导，表达了ＰＥＡ－ＲｅｃＡ蛋白。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和凝胶薄层扫描ＰＥＡ－ＲｅｃＡ蛋白，表明ＰＥＡ－ＲｅｃＡ的分子量约为９００００，与理论推算相符，表达率占菌体总蛋白量３．４２９％，用ＰＥＡ抗血清和抗ＲｅｃＡ单克隆抗体作免疫印迹分析。 展开更多

关键词 绿脓杆菌外毒素A reca 基因融合 融合蛋白

下载PDF 职称材料

2株禽源鲍曼不动杆菌recA及16S rRNA基因的序列分析 被引量：1

19

作者 马文昭 迪力拜尔.阿木提 +3 位作者 姚惠霞 王川庆 王新卫 刘慧敏 《扬州大学学报（农业与生命科学版）》 CAS 北大核心 2018年第3期46-49,57,共5页

为了解禽源鲍曼不动杆菌与已知同种异源菌株的差异性,基于管家基因recA (同源重组因子A基因)并结合16SrRNA基因对2株禽源鲍曼不动杆菌分离株进行系统发育分析。结果表明:分离株序列同源性与鲍曼不动杆菌的同源性最高,高达92.0%～99.9%,... 为了解禽源鲍曼不动杆菌与已知同种异源菌株的差异性,基于管家基因recA (同源重组因子A基因)并结合16SrRNA基因对2株禽源鲍曼不动杆菌分离株进行系统发育分析。结果表明:分离株序列同源性与鲍曼不动杆菌的同源性最高,高达92.0%～99.9%,且与人源鲍曼不动杆菌遗传距离最近,证实了recA基因与16SrRNA基因在鉴定鲍曼不动杆菌属菌种上的正确性。这一研究提示,分离自禽的鲍曼不动杆菌在基因演化上可能源自于人类。 展开更多

关键词 鲍曼不动杆菌 reca基因 16S RRNA 种系发育分析

下载PDF 职称材料

鸭疫里默氏杆菌recA基因突变对其生长及DNA损伤反应的影响

20

作者 吉果 陈启伟 +2 位作者 宫晓炜 刘永生 郑福英 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期2553-2560,共8页

DNA损伤反应(SOS response)是细菌应对基因组DNA损伤的一种重要的保护机制。RecA蛋白在许多细菌中对SOS反应的诱导都起关键调控作用,其同源蛋白广泛存在于各种生物体中。本研究对鸭疫里默氏杆菌RecA蛋白是否调控其SOS反应进行探索。构建... DNA损伤反应(SOS response)是细菌应对基因组DNA损伤的一种重要的保护机制。RecA蛋白在许多细菌中对SOS反应的诱导都起关键调控作用,其同源蛋白广泛存在于各种生物体中。本研究对鸭疫里默氏杆菌RecA蛋白是否调控其SOS反应进行探索。构建recA基因缺失株和回复株,检测亲本株、缺失株和回复株在紫外线辐照损伤下的生长能力、recA基因的转录水平以及SOS反应。结果表明,成功构建了recA基因缺失株ΔrecA和回复株cΔrecA;recA基因灭活对鸭疫里默氏杆菌RA-GD株的生长速率无明显影响;在紫外线辐照损伤下,亲本株recA基因的转录水平明显升高,缺失株的存活能力及其基因组的完整性都显著低于亲本株和回复株。本研究证实RecA蛋白参与鸭疫里默氏杆菌的SOS反应。 展开更多

关键词 鸭疫里默氏杆菌 reca基因 生长 SOS反应

下载PDF 职称材料