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Increased CD163 expression is associated with acute-on-chronic hepatitis B liver failure 被引量:13
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作者 Hong Ye Li-Yuan Wang +1 位作者 Jing Zhao Kai Wang 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS 2013年第18期2818-2825,共8页
AIM: To assess CD163 expression in plasma and peripheral blood and analyze its association with disease in acute-on-chronic hepatitis B liver failure (ACHBLF) patients. METHODS: A retrospective study was conducted fro... AIM: To assess CD163 expression in plasma and peripheral blood and analyze its association with disease in acute-on-chronic hepatitis B liver failure (ACHBLF) patients. METHODS: A retrospective study was conducted from January 1, 2011 to January 1, 2012. Forty patients with ACHBLF (mean age 44.48 ± 12.28 years, range 18-69 years), 40 patients with chronic hepatitis B (CHB) (mean age 39.45 ± 12.22 years, range 21-57 years) and 20 ageand sex-matched healthy controls (mean age 38.35 ± 11.97 years, range 28-60 years) were included in this study. Flow cytometry was used to analyze the frequency of CD163+ peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) and surface protein expression of CD163. Real-time transcription-polymerase chain re-action was performed to assess relative CD163 mRNA levels in PBMCs. Plasma soluble CD163 (sCD163) levels were measured by enzyme-linked immunosorbent assay. Clinical variables were also recorded. Comparisons between groups were analyzed by Kruskal-Wallis H test and Mann-Whitney U test. Statistical analyses were performed using SPSS 15.0 software and a P value < 0.05 was considered statistically significant. RESULTS: Flow cytometry showed that the population of CD163+ PBMCs was significantly greater in ACHBLF patients than in CHB patients and healthy controls (47.9645% ± 17.1542%, 32.0975% ± 11.0215% vs 17.9460% ± 6.3618%, P < 0.0001). However, there were no significant differences in mean fluorescence intensity of CD163+ PBMCs within the three groups (27.4975 ± 11.3731, 25.8140 ± 10.0649 vs 20.5050 ± 6.2437, P = 0.0514). CD163 mRNA expression in ACHBLF patients was significantly increased compared with CHB patients and healthy controls (1.41 × 10 -2 ± 2.18 × 10 -2 , 5.10 × 10 -3 ± 3.61 × 10 -3 vs 37.0 × 10 -4 ± 3.55 × 10 -4 , P = 0.02). Plasma sCD163 levels in patients with ACHBLF were significantly increased compared with CHB patients and healthy controls (4706.2175 ± 1681.1096 ng/mL, 1089.7160 ± 736.8395 ng/mL vs 435.9562 ± 440.8329 ng/mL, P < 0.0001). In ACHBLF patient 展开更多
关键词 Acute-on-chronic hepatitis B LIVER failure Model for END-STAGE LIVER disease CD163 Soluble CD163 real-time transcription-polymerase chain reaction
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Notch1在GES-1和其他胃癌细胞中表达差异性的比较 被引量:6
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作者 贾桂枝 李红 勾朝阳 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期426-427,430,共3页
目的探讨Notch 1在GES-1、AGS、SGC-7901和BGC-823中的表达差异性。方法采用real time RT-PCR技术和Western blot方法研究Notch 1在GES-1、AGS、SGC-7901和BGC-823细胞mRNA和蛋白质水平上的表达。结果与GES-1相比较,Notch 1 mRNA和NOTC... 目的探讨Notch 1在GES-1、AGS、SGC-7901和BGC-823中的表达差异性。方法采用real time RT-PCR技术和Western blot方法研究Notch 1在GES-1、AGS、SGC-7901和BGC-823细胞mRNA和蛋白质水平上的表达。结果与GES-1相比较,Notch 1 mRNA和NOTCH 1蛋白在AGS,SGC-7901和BGC-823中表达显著降低,差异均具有显著性(P<0.01)。结论Notch 1在胃癌的发生中可能作为抑癌基因起作用。 展开更多
关键词 胃癌 实时定量-PCR 蛋白免疫印迹法 NOTCH1基因
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Expression of interleukin 6 in brain and colon of rats with TNBS-induced colitis 被引量:3
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作者 Wang, Kai Yuan, Chuan-Ping +7 位作者 Wang, Wei Yang, Zhan-Qing Cui, Wei Mu, Lian-Zhi Yue, Zhan-Peng Yin, Xiu-Ling Hu, Zhong-Ming Liu, Ju-Xiong 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2010年第18期2252-2259,共8页
AIM:To characterise expression of interleukin 6(IL-6),a potent proinflammatory cytokine,in the occurrence and development of inflammatory bowel disease(IBD) and investigate its effect on neuroimmunomodulation and immu... AIM:To characterise expression of interleukin 6(IL-6),a potent proinflammatory cytokine,in the occurrence and development of inflammatory bowel disease(IBD) and investigate its effect on neuroimmunomodulation and immune homeostasis regulation.METHODS:In this study,rats with colitis induced by trinitrobenzene sulfonic acid(TNBS) were sacrificed on days 3,7,14,21 and 28 after induction.In the controls,the TNBS was just replaced by equivalent amount of phosphate buffered solution(PBS,0.01 mol/L).IL-6 mRNA expression in brain and colon tissues in each phase was evaluated by real-time reverse transcriptionpolymerase chain reaction,and cellular localisation and protein level of IL-6 was determined by immunohistochemistry.RESULTS:At day 7,mRNA expression of IL-6 was significantly higher in the colon and brain of IBD rats than that of the controls.The protein level was also significantly higher in colon,hypothalamus and cerebral cortex of IBD rats compared with the controls.So there are similar temporal trends in IL-6 mRNA expression and protein levels in all positions with a persistent increase to a peak at day 7,followed by a decline and gradual return to normal levels.CONCLUSION:These results revealed that changes in IL-6 expression in brain and colon tissues occur in different phases of IBD.Therefore,we propose that the nerve centre regulates and controls the occurrence and development of IBD via IL-6. 展开更多
关键词 Inflammatory bowel disease Interleukin 6 NEUROIMMUNOMODULATION real-time transcription-polymerase chain reaction Immunohistochemistry
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水稻GA20ox-2基因mRNA的TaqMan荧光定量RT-PCR检测 被引量:4
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作者 高东 何霞红 +2 位作者 王云月 李成云 朱有勇 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期309-314,共6页
成功建立了一项基于TaqMan实时荧光定量的RT-PCR技术,定量分析水稻半矮化关键基因之一GA20ox-2转录水平。该技术体系中重组质粒标准品的制备方法具有很好的实用性;质粒标准品对基因GA20ox-2表达的实时定量准确、可靠、便捷。标准曲线表... 成功建立了一项基于TaqMan实时荧光定量的RT-PCR技术,定量分析水稻半矮化关键基因之一GA20ox-2转录水平。该技术体系中重组质粒标准品的制备方法具有很好的实用性;质粒标准品对基因GA20ox-2表达的实时定量准确、可靠、便捷。标准曲线表明,所建立的GA20ox-2基因mRNA表达实时荧光定量PCR检测方法,特异性好,灵敏度高,可达102拷贝;线性范围广,可达102~107拷贝;扩增效率高(E=100.3%);稳定性、重复性好,可靠性高,批内和批间变异系数仅分别为0.12%~0.31%和0.21%~0.34%;循环阈值与PCR体系中起始模板量的对数值之间有着良好的线性关系(r=0.999),可对GA20ox-2基因表达进行准确实时定量。 展开更多
关键词 水稻 矮秆基因 基因表达 实时定量 逆转录-聚合酶链式反应 探针
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新布尼亚病毒核酸检测实时荧光RT-PCR方法的评价 被引量:3
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作者 吕惠荣 杨云惠 +1 位作者 杜燕华 黄学勇 《中国卫生检验杂志》 北大核心 2013年第5期1186-1188,共3页
目的:对发热伴血小板减少综合征新布尼亚病毒核酸检测方法进行评价,为今后检测试剂的选择提供帮助与参考。方法:用实时荧光RT-PCR和RT-PCR方法对58例信阳市发热伴血小板减少综合征病例和河南省疾病预防控制中心发热待查门诊100例病例进... 目的:对发热伴血小板减少综合征新布尼亚病毒核酸检测方法进行评价,为今后检测试剂的选择提供帮助与参考。方法:用实时荧光RT-PCR和RT-PCR方法对58例信阳市发热伴血小板减少综合征病例和河南省疾病预防控制中心发热待查门诊100例病例进行检测,对比试验结果。结果:58例标本中,实时荧光RT-PCR方法检出阳性38例,阴性20例,阳性率65.52%;RT-PCR方法检出阳性37例,阴性21例,阳性率63.79%;100例非发热伴血小板减少综合征的发热待查病例荧光RT-PCR方法实验结果均为阴性,与临床检测结果一致。相对于RT-PCR方法,实时荧光RT-PCR检测方法的灵敏度为97.36%,特异度为100%。结论:实时荧光RT-PCR方法,具有较好的灵敏度和特异性,在发热伴血小板减少综合征早期检测和临床诊断治疗上具有重要意义。 展开更多
关键词 新布尼亚病毒 实时荧光RT-PCR RT-PCR
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耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌外排泵AdeABC的研究 被引量:20
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作者 马真 蔡绍曦 +2 位作者 佟万成 阮世冲 王辉 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期1378-1381,共4页
目的从外排泵表型和基因型两个方面探讨外排泵系统在鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗生素耐药机制中所起的作用。方法外排泵抑制剂羰基氰氯苯腙(CCCP)对138株鲍曼不动杆菌的外排泵进行表型检测;荧光定量PCR测定外排泵adeABC在51株鲍曼不动... 目的从外排泵表型和基因型两个方面探讨外排泵系统在鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗生素耐药机制中所起的作用。方法外排泵抑制剂羰基氰氯苯腙(CCCP)对138株鲍曼不动杆菌的外排泵进行表型检测;荧光定量PCR测定外排泵adeABC在51株鲍曼不动杆菌中的表达情况。结果泵抑制剂羰基氰氯苯腙(CCCP)和美罗培南协同实验的结果显示:138株临床分离菌中,CCCP抑制实验共筛选出泵阳性菌株28株,其中对美罗培南耐药的39株菌中有15株即38.4%的菌株为泵阳性株,对美罗培南敏感的99株菌中有13株即13.1%的菌株为泵阳性株。经卡方检验统计学分析,差异有显著意义(χ2=12.477b,P=0.01);荧光定量PCR检测菌株的adeB和16s rRNA后,根据检测结果计算出adeB表达量差异。经t检验统计学分析结果显示碳青霉烯类抗生素敏感组的adeB的表达量是0.899±1.172,耐药组的表达量是21.101±21.443,敏感组的表达量显著低于耐药组的表达量,差异有统计学意义(t=4.403,P=0.000)。结论主动外排泵机制在临床分离的鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗生素的耐药机制中起作用。adeB基因或者adeABC外排泵机制可能在临床菌株对碳青霉烯类抗生素的耐药机制中起作用。 展开更多
关键词 鲍曼不动杆菌 外排泵 碳青酶烯类 实时定量PCR
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miR-21在上皮性卵巢癌组织中的表达及临床意义 被引量:14
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作者 娄艳辉 杨兴升 +2 位作者 王福玲 钱金花 黄煜 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期608-610,613,共4页
目的探讨微小RNA-21(miR-21)在上皮性卵巢癌组织中的表达及其与临床病理特征间的关系。方法采用茎环实时荧光逆转录聚合酶链反应(real-timeRT-PCR)检测48例上皮性卵巢癌组织、24例良性上皮性卵巢肿瘤及15例正常卵巢组织标本中miR-21表... 目的探讨微小RNA-21(miR-21)在上皮性卵巢癌组织中的表达及其与临床病理特征间的关系。方法采用茎环实时荧光逆转录聚合酶链反应(real-timeRT-PCR)检测48例上皮性卵巢癌组织、24例良性上皮性卵巢肿瘤及15例正常卵巢组织标本中miR-21表达。结果茎环real-timeRT-PCR检测miR-21表达的敏感性和特异性良好;miR-21在卵巢癌组织中的相对表达量(4.849±1.813)显著高于良性卵巢肿瘤(1.133±0.291)及正常卵巢组织(P<0.01),后两组间miR-21表达无明显差异。miR-21表达随卵巢癌的临床分期和组织分级的进展呈上升趋势,而且在有淋巴结转移组明显高于无淋巴结转移组(P均<0.01)。结论miR-21在上皮性卵巢癌组织中的表达升高,提示其可能在卵巢癌的发生发展中发挥致癌基因的作用,并且与卵巢癌的演进及不良预后密切相关。 展开更多
关键词 上皮性卵巢癌 微小RNA-21 real-time RT-PCR
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北京市市售贝类、蔬菜、浆果、即食海产品中诺如病毒污染状况检测及检测方法探析 被引量:13
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作者 骆海朋 高飞 +4 位作者 于海瑶 仝伟健 任秀 余文 崔生辉 《中国食品卫生杂志》 2017年第2期218-222,共5页
目的对北京市市售贝类(牡蛎、贻贝、扇贝、文蛤、毛蚶)、蔬菜(苗菜、生菜)、浆果(草莓、蓝莓)、即食海产品(三文鱼、即食虾)进行诺如病毒检测。方法贝类、蔬菜、浆果类样品参照ISO/TS 15216-1方法进行前处理,虾类检测参照贝类、三文鱼... 目的对北京市市售贝类(牡蛎、贻贝、扇贝、文蛤、毛蚶)、蔬菜(苗菜、生菜)、浆果(草莓、蓝莓)、即食海产品(三文鱼、即食虾)进行诺如病毒检测。方法贝类、蔬菜、浆果类样品参照ISO/TS 15216-1方法进行前处理,虾类检测参照贝类、三文鱼参照蔬菜的方法并进行改良。病毒RNA提取参照罗氏High pure viral RNA Kit试剂盒方法对样品前处理后的提取液进行提取。实时荧光逆转录聚合酶链反应(实时荧光RT-PCR)的检测使用罗氏Light Mixnoroviurus GI-GII于Lightcycler480 II进行检测,并进行GI-GII分型。诺如病毒阳性样品,参照SN/T2626—2010《国境口岸诺如病毒检测方法》,使用JV12、JV13进行扩增,将获得的DNA扩增片段进行测序并分型。结果经罗氏试剂盒检测贝类食品478份(40份阳性)、蔬菜62份(1份阳性)、浆果84份(0份阳性)和即食海产品51份(1份阳性)。有42份为GI-GII,其中37份为GII型,4份为GI型。在42份阳性样品中,有29份GII型阳性样品对RNA聚合酶区域扩增成功,通过序列分析,27份为GII.17,1份为GII.12,1份为Hawaii.calicivirus。结论通过对北京市市售食品样品中诺如病毒检测发现,贝类食品呈现较明显的季节分布,在冬季检出率较高,贝类食品是诺如病毒污染率最高的食品。 展开更多
关键词 诺如病毒 贝类 浆果 即食海产品 实时荧光RT-PCR 食品污染物 检测
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实时荧光RT-PCR在人感染H7N9禽流感病毒检测中的应用 被引量:11
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作者 华哲云 褚维 +3 位作者 宋黎黎 王宇 高淑娜 劳宝法 《检验医学》 CAS 2013年第9期755-757,共3页
目的评估实时荧光逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测H7N9禽流感病毒的应用效果,为人感染H7N9禽流感监测和防控提供可靠的实验室检测数据。方法采集各级医疗单位人感染H7N9禽流感监测及可疑病例标本137例,同时使用4种实时荧光RT-PCR试剂分... 目的评估实时荧光逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测H7N9禽流感病毒的应用效果,为人感染H7N9禽流感监测和防控提供可靠的实验室检测数据。方法采集各级医疗单位人感染H7N9禽流感监测及可疑病例标本137例,同时使用4种实时荧光RT-PCR试剂分别检测上呼吸道标本和下呼吸道标本中H7N9禽流感病毒核酸。结果 H7N9禽流感病毒核酸阳性率为3.65%(5/137);H7N9禽流感病毒核酸阳性标本中上呼吸道标本检出率为60%(3/5),下呼吸道标本检出率为100%(3/3)。4种试剂符合率为100%。结论实时荧光RT-PCR能有效检出H7N9禽流感病毒核酸,检测下呼吸道标本有助于提高阳性检出率。 展开更多
关键词 H7N9禽流感病毒 人类感染 实时荧光逆转录聚合酶链反应 下呼吸道标本
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胃癌术中腹腔游离癌细胞检测方法的对比研究 被引量:11
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作者 刘振芳 韩晓鹏 +2 位作者 刘宏斌 朱万坤 苏琳 《中国普外基础与临床杂志》 CAS 2010年第8期803-807,共5页
目的探讨检测腹腔游离癌细胞的方法及临床意义。方法应用细胞学检查(PLC)、流式细胞术(FCM)、实时荧光定量RT-PCR分别检测50例胃癌患者术中腹腔冲洗液(腹水)中游离癌细胞、CK20蛋白和CK20mRNA表达阳性率,比较三种方法对腹腔游离癌细胞... 目的探讨检测腹腔游离癌细胞的方法及临床意义。方法应用细胞学检查(PLC)、流式细胞术(FCM)、实时荧光定量RT-PCR分别检测50例胃癌患者术中腹腔冲洗液(腹水)中游离癌细胞、CK20蛋白和CK20mRNA表达阳性率,比较三种方法对腹腔游离癌细胞检测的敏感度。结果 50例胃癌患者腹腔冲洗液(腹水)中,PLC检测腹腔游离癌细胞阳性率为20.0%(10/50),FCM检测CK20蛋白表达阳性率为36.0%(18/50),实时荧光定量RT-PCR检测CK20mRNA表达阳性率为58.0%(29/50);实时荧光定量RT-PCR检测腹腔冲洗液(腹水)中CK20mRNA表达阳性率高于FCM检测CK20蛋白表达阳性率及PLC检测腹腔游离癌细胞阳性率(P<0.05或P<0.001);FCM检测腹腔冲洗液(腹水)中CK20蛋白表达阳性率与PLC检测游离癌细胞阳性率相比较,差异无统计学意义(P>0.05)。腹腔冲洗液(腹水)中检测CK20mRNA表达阳性率与肿瘤浸润深度、分化程度、TNM分期和淋巴结转移有关(P<0.05)。结论实时荧光定量RT-PCR检测CK20mRNA表达是检测腹腔游离癌细胞的有效方法。 展开更多
关键词 胃癌 腹腔冲洗液 细胞学检测 流式细胞术 实时荧光定量RT-PCR
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不同核酸提取方法SARS-CoV-2核酸检测性能比较 被引量:10
11
作者 张云丽 王鑫 +2 位作者 邵玲 曲波 赵鸿梅 《检验医学》 CAS 2021年第5期530-534,共5页
目的比较磁珠吸附法和样本释放剂法对严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)核酸检测结果的符合率、重复性及检出限,优选出提取效率高、耗时短、成本低的核酸提取方法。方法采用2种核酸提取方法的3种商品化核酸提取试剂,分别对阴性... 目的比较磁珠吸附法和样本释放剂法对严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)核酸检测结果的符合率、重复性及检出限,优选出提取效率高、耗时短、成本低的核酸提取方法。方法采用2种核酸提取方法的3种商品化核酸提取试剂,分别对阴性样本、阳性样本及不同浓度(稀释度20~28)的SARSCoV-2 RNA标准品进行RNA提取及实时荧光逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测,以Ct值评价不同核酸提取方法的性能。结果3种核酸提取试剂的阴性和阳性样本结果符合率均为100%。使用磁珠吸附法进行核酸提取的变异系数(CV)(CV为0.89%~1.58%)低于样本释放剂法,样本释放剂B的CV(CV为0.83%~2.73%)次之,样本释放剂A的CV最大(CV为1.62%~4.90%)。磁珠吸附法及样本释放剂B提取核酸的检出限均为156.3拷贝/mL,样本释放剂A的检出限为625.0拷贝/mL。结论磁珠吸附法核酸提取试剂核酸提取效率高、重复性好,适合大批量样本的集中操作。 展开更多
关键词 严重急性呼吸综合征冠状病毒2 核酸检测 核酸提取 实时逆转录荧光聚合酶链反应
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抑癌基因WWOX在肝外胆管癌中的表达 被引量:6
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作者 顾军 王梅 +3 位作者 王雅杰 李咏梅 袁杨 薛春燕 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2007年第11期1302-1305,共4页
目的:检测WWOX mRNA及其编码蛋白在肝外胆管癌中的表达,分析其临床病理学意义.方法:用Real Time RT-PCR方法定量分析21例胆管癌组织WWOX mRNA表达情况,5例肝移植的正常胆管组织作为对照;采用UIP法染色检测相应病理切片的蛋白表达情况,... 目的:检测WWOX mRNA及其编码蛋白在肝外胆管癌中的表达,分析其临床病理学意义.方法:用Real Time RT-PCR方法定量分析21例胆管癌组织WWOX mRNA表达情况,5例肝移植的正常胆管组织作为对照;采用UIP法染色检测相应病理切片的蛋白表达情况,并比较mRNA和蛋白在不同分级组织中的表达差异.结果:WWOX mRNA在肝外胆管癌中的表达显著低于正常胆管组织(8.936×10^(-7)±3.253×10^(-7) vs 1.079×10^(-6)±1.735×10^(-7),P<0.001),47%表达缺失;蛋白表达的缺失频率为57%,其mRNA及蛋白表达与组织学分级有显著相关(r=-0.583,-0.840,P<0.001),而年龄、性别、术前肝功能及临床分期无显著相关性.低分化胆管癌组织中的表达显著低于分化较好的肿瘤组织(P±<0.05).结论:WWOX表达改变参与胆管癌的发病,可作为预测肝外胆管癌生物侵袭性的有效指标. 展开更多
关键词 肝外胆管癌 WWOX 实时RT—PCR 免疫组织化学
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EZH2在子宫内膜癌中表达的意义 被引量:6
13
作者 李全香 刘君 +1 位作者 王志芳 贾云昀 《中国妇幼保健》 CAS 北大核心 2009年第10期1403-1406,共4页
目的:探讨EZH2基因在增生子宫内膜、非典型增生子宫内膜、子宫内膜癌中的表达及其与子宫内膜癌发生、发展及预后的关系。方法:采用RT-PCR方法检测21例增生子宫内膜、27例子宫内膜不典型增生及46例子宫内膜癌组织中EZH2 mRNA的表达,并对... 目的:探讨EZH2基因在增生子宫内膜、非典型增生子宫内膜、子宫内膜癌中的表达及其与子宫内膜癌发生、发展及预后的关系。方法:采用RT-PCR方法检测21例增生子宫内膜、27例子宫内膜不典型增生及46例子宫内膜癌组织中EZH2 mRNA的表达,并对结果进行统计学分析。结果:EZH2 mRNA在增生子宫内膜、不典型增生子宫内膜、子宫内膜癌组织中的表达分别为0.326±0.163、0.548±0.291、0.817±0.126,呈逐渐增高趋势,统计学分析显示各组间差异有统计学意义(P<0.05);子宫内膜癌组中EZH2表达水平与临床各病理参数密切相关,随着组织分化程度降低、肌层浸润加深和手术-病理分期增高EZH2表达逐渐增加(P<0.05);与淋巴结转移无关(P>0.05)。结论:EZH2在子宫内膜腺癌的发生、发展过程中起一定作用,EZH2的过表达促进了肿瘤的发生,它的检测对子宫内膜腺癌的早期诊断、恶性程度的判定有积极意义。 展开更多
关键词 EZH2基因 子宫内膜癌 实时荧光定量RT—PCR
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实时荧光定量检测肝细胞肝癌SATB1 mRNA的表达及其临床意义 被引量:6
14
作者 彭正奎 杨定华 +5 位作者 李湘竑 黄毓 张国强 钟克波 毕民平 李光辉 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期1207-1211,1215,共6页
目的探讨肝癌中核基质结合区结合蛋白-1的表达及其临床意义。方法用TRIZOL提取102例肝癌组织及对应的癌旁组织,并将其逆转录为cDNA。用实时荧光定量PCR方法检测肝细胞肝癌中SATB1mRNA的表达,并分析SATB1基因的表达程度与患者临床病理参... 目的探讨肝癌中核基质结合区结合蛋白-1的表达及其临床意义。方法用TRIZOL提取102例肝癌组织及对应的癌旁组织,并将其逆转录为cDNA。用实时荧光定量PCR方法检测肝细胞肝癌中SATB1mRNA的表达,并分析SATB1基因的表达程度与患者临床病理参数、术后复发与转移的关系。结果肝细胞肝癌组织中SATB1的表达是癌旁组织的3.27倍(P<0.001),有统计学差异。癌组织中SATB1mRNA表达的高低与肝硬化、AFP、肿瘤大小、癌栓、病理分化、TNM分级、术后复发转移有关系(P<0.05)。与性别、年龄、乙型肝炎表面抗原、丙型肝炎抗体、肿瘤的数目、包膜无关(P>0.05)。SATB1mRNA显著高表达组、高表达组、低表达组的复发率分别为82.68%,0,0;而三组的一年累计生存率分别为0,52.63%,100%。结论 SATB1mRNA的表达与肝癌的复发转移有关,SATB1有望成为肝癌复发与转移的一个新的预后指标。 展开更多
关键词 肝细胞肝癌 核基质结合区结合蛋白-1信使RNA 实时荧光定量RT-PCR
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非酒精性脂肪肝大鼠肝脏硬脂酰CoA去饱和酶-1表达与ATP浓度之间的关系 被引量:7
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作者 陆元善 范建高 +2 位作者 方继伟 丁晓东 杨兆瑞 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2006年第36期3450-3456,共7页
目的:研究非酒精性脂肪肝大鼠肝脏SCD-1表达及ATP含量之间的关系.方法:SD大鼠30只分成正常组、高脂组,在实验的第8,16和24周分批处死,观察肝脏组织学改变,荧光素酶-荧光素法测定肝脏ATP含量,RT-PCR实时荧光分析大鼠肝SCD-1mRNA与β-acti... 目的:研究非酒精性脂肪肝大鼠肝脏SCD-1表达及ATP含量之间的关系.方法:SD大鼠30只分成正常组、高脂组,在实验的第8,16和24周分批处死,观察肝脏组织学改变,荧光素酶-荧光素法测定肝脏ATP含量,RT-PCR实时荧光分析大鼠肝SCD-1mRNA与β-actinmRNA的比值.结果:肝组织HE染色显示高脂组大鼠肝脏内有弥漫性肝细胞脂肪变性,8wk达到脂肪肝诊断标准.8wk表现为单纯性脂肪肝,16-24wk进展为脂肪性肝炎.电镜下发现实验组与对照组相比,肝细胞线粒体肿胀、增大,部分内膜嵴粒脱落,16wk发现线粒体内有类圆形结晶样物质沉积.实验组肝SCD-1mRNA表达下降,8,16和24wk的测定值分别为0.39±0.18vs0.83±0.28(P<0.05)、0.44±0.17vs0.81±0.30(P<0.05)和0.47±0.23vs0.88±0.22(P<0.01);每克肝匀浆ATP含量(10-8μmol/L)减低(2.40±0.54vs2.96±0.43,P>0.05,2.26±0.55vs3.00±0.42,P<0.05和1.74±0.45vs2.79±0.40,P<0.01).肝SCD-1mRNA表达与ATP含量呈正相关(r=0.46,P<0.05).结论:长期高脂饮食引起肝SCD-1的表达下调,促使脂肪在肝内蓄积形成非酒精性脂肪肝.同时使肝细胞内饱和游离脂肪酸增加,线粒体结构和功能受损,使ATP的合成和储存下降,加重氧化应激对肝细胞的打击和肝脏的炎症反应. 展开更多
关键词 非酒精性脂肪肝 硬脂酰COA去饱和酶-1 三磷酸腺苷 实时荧光RT—PCR
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蓝舌病的研究进展 被引量:6
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作者 张胜男 常建华 +2 位作者 韩明浩 吕建华 吴树清 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第10期57-60,共4页
蓝舌病是由蓝舌病病毒以库蠓作为传播媒介引起的一种主要侵害家饲和野生反刍兽的传染病。目前,蓝舌病病毒有26个血清型分布世界各地,且型与型之间不发生交叉免疫,主要感染绵羊、山羊、牛、鹿等反刍兽,可引起不同程度的临床症状,甚至导... 蓝舌病是由蓝舌病病毒以库蠓作为传播媒介引起的一种主要侵害家饲和野生反刍兽的传染病。目前,蓝舌病病毒有26个血清型分布世界各地,且型与型之间不发生交叉免疫,主要感染绵羊、山羊、牛、鹿等反刍兽,可引起不同程度的临床症状,甚至导致反刍兽死亡。检测蓝舌病病毒的方法有很多种,主要以血清学及分子生物学为主。文章综述了蓝舌病的流行分布情况、病原特性、传播媒介、发病机理与临床症状、诊断技术与疫苗等方面的研究进展。 展开更多
关键词 蓝舌病 流行病学 库蠓 发病机理 realtime RT—PCR 疫苗
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基于RT-qPCR方法对新冠病毒4种基因型鉴定的可行性研究
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作者 杨潇雨 牛培华 +8 位作者 田晓灵 王衍海 夏百成 赵一鸣 燕鸽 程平 郑丽舒 马学军 王佶 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期266-273,共8页
严重急性呼吸道综合征冠状病毒2(Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)的广泛传播强调了对该病毒进行持续监测的紧迫性,以便早发现并采取预防措施。虽然全基因组测序(Whole genome sequencing, WGS)作为SARS-Co... 严重急性呼吸道综合征冠状病毒2(Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)的广泛传播强调了对该病毒进行持续监测的紧迫性,以便早发现并采取预防措施。虽然全基因组测序(Whole genome sequencing, WGS)作为SARS-CoV-2检测的金标准,但是其专业性和昂贵成本限制了其在各种情境下的广泛应用。在资源匮乏的地区,迫切需要一种低成本高效率的替代方法。实时荧光定量PCR(Real-timereverse transcription quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)提供了一种经济、快速的方法,同时有效补充了WGS方法。本研究旨在验证SARS-CoV-2 Omicron BF.7/BA.5.2/XBB/BQ.1及亚分支变异株单重核酸检测试剂盒(RT-qPCR法)的性能,并通过对101例SARS-CoV-2阳性临床样本进行评估,验证其在实际应用中的可行性。研究结果显示,该试剂盒与“野生型”SARS-CoV-2、Alpha、Beta、Delta变异株和甲型流感病毒参考株之间无交叉反应,最低检测限为100拷贝/mL。在101例新冠病毒核酸阳性样本中,该试剂盒对Omicron BF.7/BA.5.2/XBB/BQ.1及亚分支变异的检测结果与WGS检出结果完全一致。因此,该RT-qPCR试剂盒为SARS-CoV-2 Omicron变异株亚型的快速鉴定提供了一种简单、经济且高效的方法,可作为WGS的有效补充方案。 展开更多
关键词 SARS-CoV-2 Omicron BF.7/BA.5.2/XBB/BQ.1及亚分支变异株 实时荧光定量PCR 应用评价
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两种实时定量RT-PCR方法检测miRNAs表达的技术分析 被引量:6
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作者 闵自信 杜小云 +5 位作者 宁启兰 钟楠楠 郑悦雯 韩燕 吕社民 张蕊 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期258-262,共5页
目的比较两种实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)方法检测microRNAs(miRNAs)表达含量的技术差异,优化不同实验目的和条件下研究miRNAs表达的技术方法。方法取21d和42d两个时间点的SD大鼠关节软骨组织,采用Trizol法提取总RNA备用。选取... 目的比较两种实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)方法检测microRNAs(miRNAs)表达含量的技术差异,优化不同实验目的和条件下研究miRNAs表达的技术方法。方法取21d和42d两个时间点的SD大鼠关节软骨组织,采用Trizol法提取总RNA备用。选取rno-miR-15b、rno-miR-16、rno-miR-195、rno-miR-497作为研究对象,分别用茎环引物和试剂公司提供的试剂盒方法反转录总RNA,并应用实时定量PCR方法检测这些miRNAs的表达量。提取人血浆中总RNA,用上述两种RT-qPCR方法实时定量检测has-miR-16的表达量。结果两种方法检测这些miRNAs表达量,在大鼠21d和42d这两个时间点其表达量变化趋势相同,都呈现增高的趋势,这与我们前期Solexa测序结果相同。在血浆中的结果显示,其中茎环引物反转录方法灵敏度相对较高。结论茎环引物法在少量几个重要的miRNAs检测中具有优势,而试剂盒方法适用于大量miRNAs的筛查。 展开更多
关键词 MIRNAS 茎环引物 实时定量反转录聚合酶链反应 软骨 血浆
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亚慢性氟中毒对大鼠骨组织Runx2 mRNA表达的影响 被引量:4
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作者 郭晓英 吴思思 +1 位作者 何杨 孙贵范 《中国工业医学杂志》 CAS 北大核心 2011年第2期86-88,F0003,共4页
目的观察亚慢性氟中毒对大鼠骨组织中转录因子Runx2 mRNA表达的影响,探讨Runx2在氟骨症发生中的可能作用。方法 40只Wistar大鼠按体重随机分成4组,染氟组大鼠饮用含氟50、100、150 mg/L的自来水,对照组大鼠饮用自来水;3个月后测定大鼠... 目的观察亚慢性氟中毒对大鼠骨组织中转录因子Runx2 mRNA表达的影响,探讨Runx2在氟骨症发生中的可能作用。方法 40只Wistar大鼠按体重随机分成4组,染氟组大鼠饮用含氟50、100、150 mg/L的自来水,对照组大鼠饮用自来水;3个月后测定大鼠血清及骨组织氟含量,并采用SYBR Green Real-time RT-PCR法检测骨组织中Runx2 mRNA表达情况,同时观察骨组织病理学改变。结果 HE染色显示染氟组大鼠呈现骨皮质增厚、骨小梁增多等骨硬化表现;染氟组大鼠骨组织中Runx2 mRNA表达显著高于对照组,且随染毒剂量升高,表达亦逐渐升高。结论过量的氟可能通过增加骨组织Runx2基因表达水平来促进间充质干细胞向成骨细胞系分化,使骨形成增加。 展开更多
关键词 氟中毒 转录因子Runx2 实时定量反转录聚合酶连锁反应(real-time RT-PCR)
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变异链球菌gtfs在不同pH条件下表达的差异性 被引量:2
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作者 陆玉 刘天佳 杨锦波 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期667-669,共3页
目的检测具有不同产胞外多糖(EPS)能力的变异链球菌菌株在不同pH条件下产EPS的能力及其与gtfA、gtfB、gtfC、gtfD表达变化的关系。方法选取变异链球菌(血清型c)临床分离株502(高产糖株)和参考株UA159(低产糖株),以实时定量逆转录聚合酶... 目的检测具有不同产胞外多糖(EPS)能力的变异链球菌菌株在不同pH条件下产EPS的能力及其与gtfA、gtfB、gtfC、gtfD表达变化的关系。方法选取变异链球菌(血清型c)临床分离株502(高产糖株)和参考株UA159(低产糖株),以实时定量逆转录聚合酶链反应(real-timeRT-PCR)方法检测在不同pH条件下与变异链球菌产糖能力密切相关的毒力因子gtfA、gtfB、gtfC、gtfD的表达变化。结果在pH5.5条件下,高产糖株和低产糖株gtfA、gtfB、gtfD的表达均有不同程度的升高,而gtfC略降低,高产糖株gtfB、gtfC的表达水平高于低产糖株。结论gtfs的表达水平与变异链球菌的致龋力密切相关。 展开更多
关键词 变异链球菌 葡萄糖基转移酶 实时定量逆转录聚合酶链反应
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