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实时荧光定量PCR构建BIM基因表达标准品质粒和标准曲线
被引量：
1
1
作者
付文卓
潘博
+4 位作者
吴英婷
隋雷鸣
王利勇
武文琦
邹林樾
《黑龙江畜牧兽医》
CAS
北大核心
2015年第1期39-42,213,共5页
为了能够快速、准确定量BIM基因的mRNA,试验构建了小鼠BIM基因的标准品质粒和标准曲线,根据Gen Bank中鼠基因编码区保守序列,设计特异性引物,从N2a细胞中提取总RNA,利用RT-PCR技术扩增该基因122 bp的核苷酸片段,经纯化、连接和转化后,...
为了能够快速、准确定量BIM基因的mRNA,试验构建了小鼠BIM基因的标准品质粒和标准曲线,根据Gen Bank中鼠基因编码区保守序列,设计特异性引物,从N2a细胞中提取总RNA,利用RT-PCR技术扩增该基因122 bp的核苷酸片段,经纯化、连接和转化后,提取质粒并进行酶切、测序鉴定,然后将阳性重组质粒10倍递减稀释作为标准模板,通过SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法,建立了BIM标准曲线及直线回归方程。结果表明:产物熔解曲线峰值单一,引物特异性高;标准曲线相关系数r2=0.998,线性关系好。说明成功构建了目的基因BIM的标准品质粒和标准曲线。
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关键词
BIM
实时荧光定量
pcr
标准品质粒
标准曲线
原文传递
荷瘤小鼠MDSCs中TRIM25和PTEN的表达
2
作者
宋格
赵耀
+1 位作者
陆薇
王胜军
《江苏大学学报（医学版）》
CAS
2019年第4期333-338,共6页
目的:探讨荷瘤小鼠肿瘤组织来源的髓源抑制性细胞(myeloid derived suppressor cells,MDSCs)中三基序蛋白25(tripartite motif containing 25,TRIM25)和人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(phosphatase and tensin homologue...
目的:探讨荷瘤小鼠肿瘤组织来源的髓源抑制性细胞(myeloid derived suppressor cells,MDSCs)中三基序蛋白25(tripartite motif containing 25,TRIM25)和人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(phosphatase and tensin homologue deleted on chromosome ten,PTEN)的表达水平及其意义。方法:构建小鼠CT26结肠癌移植瘤模型,采用实时荧光定量PCR(real time fluorescene quantitative PCR,qRT-PCR)技术检测荷瘤小鼠肿瘤组织来源MDSCs和野生型小鼠脾脏来源MDSCs中TRIM25、PTEN的表达情况。结果:在小鼠CT26结肠癌移植瘤模型中,与野生型小鼠脾脏来源的MDSCs相比,荷瘤小鼠肿瘤组织来源MDSCs中TRIM25表达水平明显升高(P <0. 001),PTEN表达水平显著下降(P <0. 001)。结论:荷瘤小鼠肿瘤组织来源MDSCs中TRIM25的表达升高,PTEN表达下降,提示两者或许参与调控MDSCs。
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关键词
荷瘤小鼠
髓源抑制性细胞
TRIM25
PTEN
肿瘤微环境
肿瘤免疫
实时荧光定量
pcr
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职称材料
题名
实时荧光定量PCR构建BIM基因表达标准品质粒和标准曲线
被引量：
1
1
作者
付文卓
潘博
吴英婷
隋雷鸣
王利勇
武文琦
邹林樾
机构
首都医科大学医学实验与测试中心
军事医学科学院微生物流行病所国家重点实验室
中国农业大学动物医学院国家海绵状脑病实验室
出处
《黑龙江畜牧兽医》
CAS
北大核心
2015年第1期39-42,213,共5页
文摘
为了能够快速、准确定量BIM基因的mRNA,试验构建了小鼠BIM基因的标准品质粒和标准曲线,根据Gen Bank中鼠基因编码区保守序列,设计特异性引物,从N2a细胞中提取总RNA,利用RT-PCR技术扩增该基因122 bp的核苷酸片段,经纯化、连接和转化后,提取质粒并进行酶切、测序鉴定,然后将阳性重组质粒10倍递减稀释作为标准模板,通过SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法,建立了BIM标准曲线及直线回归方程。结果表明:产物熔解曲线峰值单一,引物特异性高;标准曲线相关系数r2=0.998,线性关系好。说明成功构建了目的基因BIM的标准品质粒和标准曲线。
关键词
BIM
实时荧光定量
pcr
标准品质粒
标准曲线
Keywords
Bcl
-2
interacting
mediator
of
cell
death（BIM）
real
-
time
fluorescene
quantitative pcr
standard
plasmid
standard
curve
分类号
S813.3 [农业科学—畜牧学]
Q754 [农业科学—畜牧兽医]
原文传递
题名
荷瘤小鼠MDSCs中TRIM25和PTEN的表达
2
作者
宋格
赵耀
陆薇
王胜军
机构
江苏大学医学院检验医学研究所
出处
《江苏大学学报（医学版）》
CAS
2019年第4期333-338,共6页
基金
江苏省科技计划项目临床医学专项(BL2014065)
江苏大学大学生科研立项项目(15A332)
文摘
目的:探讨荷瘤小鼠肿瘤组织来源的髓源抑制性细胞(myeloid derived suppressor cells,MDSCs)中三基序蛋白25(tripartite motif containing 25,TRIM25)和人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(phosphatase and tensin homologue deleted on chromosome ten,PTEN)的表达水平及其意义。方法:构建小鼠CT26结肠癌移植瘤模型,采用实时荧光定量PCR(real time fluorescene quantitative PCR,qRT-PCR)技术检测荷瘤小鼠肿瘤组织来源MDSCs和野生型小鼠脾脏来源MDSCs中TRIM25、PTEN的表达情况。结果:在小鼠CT26结肠癌移植瘤模型中,与野生型小鼠脾脏来源的MDSCs相比,荷瘤小鼠肿瘤组织来源MDSCs中TRIM25表达水平明显升高(P <0. 001),PTEN表达水平显著下降(P <0. 001)。结论:荷瘤小鼠肿瘤组织来源MDSCs中TRIM25的表达升高,PTEN表达下降,提示两者或许参与调控MDSCs。
关键词
荷瘤小鼠
髓源抑制性细胞
TRIM25
PTEN
肿瘤微环境
肿瘤免疫
实时荧光定量
pcr
Keywords
tumor-bearing
mice
myeloid-derived
suppressor
cells
TRIM25
PTEN
tumor
microenvironment
tumor
immunology
real
time
fluorescene
quantitative pcr
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
实时荧光定量PCR构建BIM基因表达标准品质粒和标准曲线
付文卓
潘博
吴英婷
隋雷鸣
王利勇
武文琦
邹林樾
《黑龙江畜牧兽医》
CAS
北大核心
2015
1
原文传递
2
荷瘤小鼠MDSCs中TRIM25和PTEN的表达
宋格
赵耀
陆薇
王胜军
《江苏大学学报（医学版）》
CAS
2019
0
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