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牙鲆血清中免疫球蛋白M的分离及其测定 被引量:9
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作者 王先磊 张培军 +1 位作者 李军 徐永立 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期8-12,共5页
通过提取健康养殖牙鲆(Paralichthys olivaceus)血清中的免疫球蛋白(Ig),并测定其相对分子质量,其中重链(H链)的相对分子质量为74.2 ku,轻链(L链)的相对分子质量为23.8 ku。用纯化的牙鲆血清中的Ig作抗原,制备多克隆抗体,确立牙鲆血... 通过提取健康养殖牙鲆(Paralichthys olivaceus)血清中的免疫球蛋白(Ig),并测定其相对分子质量,其中重链(H链)的相对分子质量为74.2 ku,轻链(L链)的相对分子质量为23.8 ku。用纯化的牙鲆血清中的Ig作抗原,制备多克隆抗体,确立牙鲆血清中免疫球蛋白的最佳测定方法。 展开更多
关键词 牙鲆 血清 免疫球蛋白M IGM ELISA 抗原 多克隆抗体
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大鼠抗人β-catenin多克隆抗体的制备与鉴定 被引量:5
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作者 牛夏忆 李淼 +2 位作者 张倩 陈云雨 刘晓平 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第16期1992-1998,共7页
目的:原核表达和分离纯化人β-catenin(138-781 aa)蛋白并制备特异性大鼠抗人β-catenin多克隆抗体。方法:利用PCR扩增β-catenin基因片段并克隆至pET-30a(+)表达载体构建重组质粒。将重组质粒转化到大肠杆菌Escherichia coli Rosetta(D... 目的:原核表达和分离纯化人β-catenin(138-781 aa)蛋白并制备特异性大鼠抗人β-catenin多克隆抗体。方法:利用PCR扩增β-catenin基因片段并克隆至pET-30a(+)表达载体构建重组质粒。将重组质粒转化到大肠杆菌Escherichia coli Rosetta(DE3)中,经原核表达优化后,诱导β-catenin蛋白表达,以SDS-PAGE和Western blot实验进行鉴定。采用亲和层析方法分离纯化β-catenin蛋白,以荧光偏振实验进行生物学活性鉴定。用β-catenin蛋白为抗原免疫大鼠制备多克隆抗体,随后采用ELISA和Western blot实验检测多克隆抗体的效价和抗原特异性。结果:成功进行了β-catenin蛋白的原核表达与分离纯化。荧光偏振实验表明纯化的β-catenin蛋白具有良好的生物学活性。ELISA实验表明抗人β-catenin多克隆抗体效价可达1∶128 000。Western blot实验证实抗人β-catenin多克隆抗体具有良好的抗原特异性。结论:成功进行了大鼠抗人β-catenin多克隆抗体的制备与鉴定,为深入研究β-catenin的生物学功能奠定了实验基础。 展开更多
关键词 Β-CATENIN 原核表达 亲和层析 荧光偏振 大鼠多克隆抗体
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