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题名牙鲆血清中免疫球蛋白M的分离及其测定
被引量:9
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作者
王先磊
张培军
李军
徐永立
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机构
中国科学院海洋研究所实验海洋生物学开放研究实验室
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出处
《海洋科学》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第4期8-12,共5页
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基金
国家973 课题(G1999012006)
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文摘
通过提取健康养殖牙鲆(Paralichthys olivaceus)血清中的免疫球蛋白(Ig),并测定其相对分子质量,其中重链(H链)的相对分子质量为74.2 ku,轻链(L链)的相对分子质量为23.8 ku。用纯化的牙鲆血清中的Ig作抗原,制备多克隆抗体,确立牙鲆血清中免疫球蛋白的最佳测定方法。
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关键词
牙鲆
血清
免疫球蛋白M
IGM
ELISA
抗原
多克隆抗体
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Keywords
Japaneseflounder(Paralichthys olivaceus)
immunoglobulinM(IgM)
rabbitpolyclonalantibodies
rat polyclonal antibodies
ELISA(Enzyme Linked Immunosorbent Assay)
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分类号
Q511
[生物学—生物化学]
Q959.486
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题名大鼠抗人β-catenin多克隆抗体的制备与鉴定
被引量:5
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作者
牛夏忆
李淼
张倩
陈云雨
刘晓平
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机构
皖南医学院药物筛选与评价研究所
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出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第16期1992-1998,共7页
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基金
国家自然科学基金(81703546)
安徽省自然科学基金(1808085QH265)
+2 种基金
吉林省科技发展计划(20160520045JH)
皖南医学院博士科研启动基金(RCQD201617)
皖南医学院大学生科研资助金(WK2018S54)资助项目
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文摘
目的:原核表达和分离纯化人β-catenin(138-781 aa)蛋白并制备特异性大鼠抗人β-catenin多克隆抗体。方法:利用PCR扩增β-catenin基因片段并克隆至pET-30a(+)表达载体构建重组质粒。将重组质粒转化到大肠杆菌Escherichia coli Rosetta(DE3)中,经原核表达优化后,诱导β-catenin蛋白表达,以SDS-PAGE和Western blot实验进行鉴定。采用亲和层析方法分离纯化β-catenin蛋白,以荧光偏振实验进行生物学活性鉴定。用β-catenin蛋白为抗原免疫大鼠制备多克隆抗体,随后采用ELISA和Western blot实验检测多克隆抗体的效价和抗原特异性。结果:成功进行了β-catenin蛋白的原核表达与分离纯化。荧光偏振实验表明纯化的β-catenin蛋白具有良好的生物学活性。ELISA实验表明抗人β-catenin多克隆抗体效价可达1∶128 000。Western blot实验证实抗人β-catenin多克隆抗体具有良好的抗原特异性。结论:成功进行了大鼠抗人β-catenin多克隆抗体的制备与鉴定,为深入研究β-catenin的生物学功能奠定了实验基础。
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关键词
Β-CATENIN
原核表达
亲和层析
荧光偏振
大鼠多克隆抗体
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Keywords
β-catenin
Bacterial expression
Affinity chromatography
Fluorescence polarization
rat polyclonal antibody
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分类号
R392.11
[医药卫生—免疫学]
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