甘肃省大麦条纹病病原菌致病力分化、rDNA-ITS及遗传多样性分析 被引量：21

1

作者 司二静 杨淑莲 +3 位作者 李葆春 马小乐 王生荣 王化俊 《植物保护学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期84-92,共9页

为明确甘肃省大麦条纹病病原菌麦类核腔菌Pyrenophora garminea的致病力分化、r DNA-ITS序列特征及变异,采用"三明治"法测定甘肃省大麦条纹菌的致病力,通过r DNA-ITS序列分析菌株间变异类型,并对菌株进行ISSR遗传多样性分析... 为明确甘肃省大麦条纹病病原菌麦类核腔菌Pyrenophora garminea的致病力分化、r DNA-ITS序列特征及变异,采用"三明治"法测定甘肃省大麦条纹菌的致病力,通过r DNA-ITS序列分析菌株间变异类型,并对菌株进行ISSR遗传多样性分析。结果表明,共筛选到43株大麦条纹病菌,生长7 d后的菌落直径为2.60~7.93 cm,其中菌株TB生长速度最快,菌株JT生长速度最慢,强、中等和弱致病力菌株分别为2、21和20株;43株菌的核糖体DNA-ITS序列与麦类核腔菌菌株SMCD2015同源性在99%以上;在9个菌株中检测到15个变异位点,共17种变异类型;8个ISSR标记从43个菌株中扩增出41条带,平均每个标记5.13条带,90.24%片段具有多态性,遗传相似系数为0.44~1.00,平均值为0.71,当遗传相似系数为0.68时,可将供试菌株划分为4个类群。表明甘肃省大麦条纹病病原菌存在致病力分化,菌株核糖体DNA-ITS序列变异丰富,且菌株间遗传结构复杂。 展开更多

关键词 大麦条纹病 麦类核腔菌 致病力 核糖体dna-its 遗传多样性

原文传递

柑橘炭疽病菌的分离、鉴定及在果实上的潜伏侵染特性 被引量：12

2

作者 李菲菲 龙超安 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期108-114,176,共8页

【目的】明确柑橘炭疽病原菌的种类及其潜伏侵染特性,为柑橘病害防控提供理论依据。【方法】对采自湖北省3个地区的炭疽病样品进行病原菌的分离、形态学特征观察和致病性测定并采用r DNA-ITS序列分析法对代表菌株T4进行分子鉴定。此外,... 【目的】明确柑橘炭疽病原菌的种类及其潜伏侵染特性,为柑橘病害防控提供理论依据。【方法】对采自湖北省3个地区的炭疽病样品进行病原菌的分离、形态学特征观察和致病性测定并采用r DNA-ITS序列分析法对代表菌株T4进行分子鉴定。此外,通过组织分离法,研究炭疽病菌在柑橘花器和发育期果实上的潜伏情况。【结果】获得的19株致病菌均为胶孢炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporioides),但菌株间的致病力存在明显差异;T4菌株的测序结果与NCBI已登录的胶孢炭疽菌序列(FJ459917.1,FJ459916.1)比对发现,一致性达100%。柑橘炭疽病菌在花器和果实上的潜伏侵染呈一定的规律性:花器官中,花瓣的带菌率最高;果实上,果蒂和脐部带菌率最高,其次为果柄部位。【结论】研究区域的柑橘花和果实均携带胶孢炭疽病菌,该病菌具有潜伏侵染的特性。生产上要重视花期的病害防控,果实采后贮藏时需重视对果蒂部、脐部及果柄部位的消毒处理。 展开更多

关键词 柑橘 炭疽病菌 致病性 r dna-its 潜伏侵染

下载PDF 职称材料

东北地区人参锈腐病菌的分子鉴定 被引量：9

3

作者 傅俊范 刘欣然 +3 位作者 李自博 周如军 王丹 韩月泠 《沈阳农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期339-344,共6页

人参锈腐病一直是人参生产中的重要病害之一,严重影响人参产业的持续健康发展。为明确东北人参主产区人参锈腐病的病原菌种类,从辽宁、吉林和黑龙江省人参主产区罹病植株上共分离纯化获得菌株45株,采用rDNA-ITS序列分析方法鉴定了东北... 人参锈腐病一直是人参生产中的重要病害之一,严重影响人参产业的持续健康发展。为明确东北人参主产区人参锈腐病的病原菌种类,从辽宁、吉林和黑龙江省人参主产区罹病植株上共分离纯化获得菌株45株,采用rDNA-ITS序列分析方法鉴定了东北人参主产区人参锈腐病致病菌,在PDA培养基上观察病原菌菌落及分生孢子形态特征,通过针刺离体接种法测定不同种间的致病力差异。结果表明:在45个菌株中,28个菌株为毁灭柱孢(Cylindrocarpon destructans),rDNA-ITS序列与GenBank中的C.destructans相似性达99%,菌落呈浅褐色,质地毡状,分生孢子圆柱型,直立,基部稍窄;3个菌株为毁灭柱孢毁灭变种(Cylindrocarpon destructans var.destructans),rDNA-ITS序列与GenBank中的C.destructans var.destructans相似性达99%,菌落呈深褐色,质地绒毛状,分生孢子棍棒型,稍弯曲,基部钝圆;14个菌株为强壮土赤壳(Ilyonectria robusta),rDNA-ITS序列与GenBank中的I.robusta相似性达99%,菌落呈棕灰色,质地毛絮状,分生孢子长椭圆形,稍弯曲,两端钝圆。生长11d后的菌落直径为(4.21±0.16)^(7.78±0.25)cm,其中生长速度最快的病原菌为强壮土赤壳(I.robusta),其次为毁灭柱孢(C.destructans),毁灭柱孢毁灭变种(C.destructans var.destructans)生长速度最慢。致病力测定结果表明,不同种间致病力差异显著,毁灭柱孢毁灭变种(C.destructans var.destructans)致病力最强,其次为毁灭柱孢(C.destructans),强壮土赤壳(I.robusta)相对较弱。 展开更多

关键词 人参锈腐病 病原菌 鉴定 致病力 r dna-its

下载PDF 职称材料

毛竹种子内生真菌的分离与分子鉴定 被引量：6

4

作者 李楠 汪奎宏 +3 位作者 彭华正 金群英 华锡奇 郑勇其 《竹子研究汇刊》 北大核心 2015年第2期8-11,39,共5页

从毛竹种子中分离得到不同形态特征的内生真菌7株,通过菌落形态特征、r DNA-ITS片段的扩增、克隆、序列测定和生物信息学分析等手段,对其中的5个菌株进行鉴定。确认2号菌株为枝孢属枝状枝孢,是一种重要的致霉菌。4号和7号菌株属于刺盘孢... 从毛竹种子中分离得到不同形态特征的内生真菌7株,通过菌落形态特征、r DNA-ITS片段的扩增、克隆、序列测定和生物信息学分析等手段,对其中的5个菌株进行鉴定。确认2号菌株为枝孢属枝状枝孢,是一种重要的致霉菌。4号和7号菌株属于刺盘孢属,能引起竹炭疽病,是种常见的竹杆部病害。5号菌株为竹黄属竹黄菌,能使竹子患赤团子病,但竹黄具有重要的药用价值。虽然2号与6号菌株菌落形态不尽相同,但鉴定为同一种菌。 展开更多

关键词 毛竹 内生真菌 形态特征 r dna-its

下载PDF 职称材料

四川濒危肉果秤锤树rDNA-ITS分子鉴定、种子形态学及繁育分析 被引量：5

5

作者 范晶 罗永富 +3 位作者 黄明远 梁梓 陈慧 吴苗苗 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期2483-2491,共9页

四川肉果秤锤树是安息香科秤锤树属国家二级保护植物,已处于濒危状态。本研究分析了肉果秤锤树与其它秤锤树属植物r DNA-ITS的序列同源性、并利用r DNA-ITS分子标记分析其进化地位、通过扫描电镜研究肉果秤锤树种子的显微结构、利用简... 四川肉果秤锤树是安息香科秤锤树属国家二级保护植物,已处于濒危状态。本研究分析了肉果秤锤树与其它秤锤树属植物r DNA-ITS的序列同源性、并利用r DNA-ITS分子标记分析其进化地位、通过扫描电镜研究肉果秤锤树种子的显微结构、利用简便的枝条扦插育苗法探讨肉果秤锤树的快速繁殖技术。结果表明6种秤锤树属植物之间共存在18个序列变异位点,其中肉果秤锤树与秤锤树序列同源性最高,为99.84%。系统进化结果显示秤锤树属植物被聚为一大类,它们与安息香科银铃花具有较近的亲缘关系。在发育过程中朝2个方向进化,一支进化生成狭果秤锤树、细果秤锤树和黄梅秤锤树,一支进化生成肉果秤锤树、秤锤树和怀化秤锤树,肉果秤锤树与秤锤树进化关系表现最紧密,遗传距离最小,为0.002,与细果秤锤树进化遗传距离最大为0.014。果实解剖发现每个肉果秤锤树果实含有一个核果,电镜扫描显示核果外层为含有大量小孔和微孔的坚硬木质结构,对种仁造成机械束缚,同时也可提供一定的透性。繁殖保育研究结果显示在含稀释1 200倍生根粉溶液的土壤中进行枝条扦插,其侧枝发芽率可高达40%。本研究为肉果秤锤树的进化分类以及肉果秤锤树的保护繁育提供了更多的有用信息。 展开更多

关键词 肉果秤锤树 安息香科 r dna-its 系统进化 扦插育苗

原文传递

冬虫夏草与蛹虫草融合株的原生质体诱变育种 被引量：4

6

作者 曲鸿雁 郭成金 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第5期120-125,共6页

以冬虫夏草与蛹虫草融合株为研究材料,对其原生质体进行紫外诱变,筛选优质高产的新型菌株。得到了高产菌株Y-90,虫草酸产量是出发菌株的1.80倍,高产菌株YP-42,虫草素产量是出发菌株的1.33倍。采用随机扩增多态性DNA(random amplifi ed p... 以冬虫夏草与蛹虫草融合株为研究材料,对其原生质体进行紫外诱变,筛选优质高产的新型菌株。得到了高产菌株Y-90,虫草酸产量是出发菌株的1.80倍,高产菌株YP-42,虫草素产量是出发菌株的1.33倍。采用随机扩增多态性DNA(random amplifi ed polymorphic DNA,RAPD)分子标记技术和核糖体r DNA内部转录间隔区(internal transcribed spacer,ITS)序列分析技术对突变株的遗传变异情况进行分析。结果表明突变株的ITS序列并没有发生变化。RAPD结果显示突变株的扩增片段与亲本菌株不同,说明发生了基因突变,其高产性状是可遗传的性状,可以将其用于进一步的育种研究。 展开更多

关键词 冬虫夏草 蛹虫草 紫外诱变 虫草酸 虫草素 子实体 随机扩增多态性dna rdna-its

下载PDF 职称材料

采用r DNA-ITS和SRAP综合分析黑木耳栽培种的遗传多样性 被引量：3

7

作者 刘昆昂 马宏 +3 位作者 刘萌 张根伟 尹淑丽 李书生 《分子植物育种》 CAS 北大核心 2021年第24期8223-8232,共10页

以北方地区主栽的15个黑木耳品种为试材,通过菌株亲和性试验、rDNA-ITS及SRAP聚类分析对15个黑木耳栽培种的遗传多样性进行分析,明确了菌株间的亲缘关系,为黑木耳的栽培、遗传育种和种质资源保护提供理论依据。结果表明,15个黑木耳菌株... 以北方地区主栽的15个黑木耳品种为试材,通过菌株亲和性试验、rDNA-ITS及SRAP聚类分析对15个黑木耳栽培种的遗传多样性进行分析,明确了菌株间的亲缘关系,为黑木耳的栽培、遗传育种和种质资源保护提供理论依据。结果表明,15个黑木耳菌株的拮抗反应大多表现为隆起型和沟壑型等2种不亲和的表现,其中5对黑木耳品种之间没有拮抗反应,而‘冀诱1号’与其他菌株有明显的拮抗反应;r DNA-ITS聚类分析将15个黑木耳分成3个大类,其中‘黑木耳-1’和‘黑木耳-2’、‘黑威伴金’和‘龙江黑+’、‘吊袋’和‘黑山’遗传距离为0,而‘冀诱1号’与其他品种遗传距离较大;筛选出的9对SRAP引物扩增的条带多态性丰富,多态性片段占总数的79.8%,通过聚类分析将15个黑木耳栽培种共分为3大类,其中‘吊袋’和‘黑山’菌株间相似系数为95%,表明它们之间遗传差异很小,‘冀诱1号’与其他菌株间亲缘关系较远。 展开更多

关键词 黑木耳(Auricularia auricula) rdna-its SrAP 遗传多样性

原文传递

基于rDNA-ITS的叶甲科系统学分析 被引量：2

8

作者 聂传朋 杨盼盼 李焰焰 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期2492-2495,共4页

真核生物的r RNA包含18S、5.8S和28S r RNA,被统称为ITS区,已广泛用于昆虫的亲缘关系和系统发育等方面的研究。本研究将通过从NCBI的Gen Bank下载部分叶甲科昆虫的r DNA序列,经比对、建树等分析,结果显示叶甲亚科及跳甲亚科内的各个种... 真核生物的r RNA包含18S、5.8S和28S r RNA,被统称为ITS区,已广泛用于昆虫的亲缘关系和系统发育等方面的研究。本研究将通过从NCBI的Gen Bank下载部分叶甲科昆虫的r DNA序列,经比对、建树等分析,结果显示叶甲亚科及跳甲亚科内的各个种类可以聚成一支,萤叶甲亚科没有能够聚成大的亚科分支;以天牛科昆虫作为外群,叶甲亚科先分化出来,然后再继续分化成萤叶甲亚科和跳甲亚科。研究结果显示r DNA-ITS基因可以用于叶甲科昆虫科内的系统发生研究。 展开更多

关键词 r dna-its 叶甲科 系统发生

原文传递

新疆4种林木腐烂病菌PCR快速检测技术研究 被引量：1

9

作者 郭开发 姚兆群 +2 位作者 吴彩兰 向本春 赵思峰 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1843-1849,共7页

【目的】建立新疆林木腐烂病菌的快速PCR检测方法,为新疆林木腐烂病的早期测报和防治提供技术依据。【方法】针对新疆林木腐烂病菌主要种苹果黑腐皮壳(Valsa mali),污黑腐皮壳(Valsa.sordida),Leucostoma niveum和Valsa.malicola的r DNA... 【目的】建立新疆林木腐烂病菌的快速PCR检测方法,为新疆林木腐烂病的早期测报和防治提供技术依据。【方法】针对新疆林木腐烂病菌主要种苹果黑腐皮壳(Valsa mali),污黑腐皮壳(Valsa.sordida),Leucostoma niveum和Valsa.malicola的r DNA-ITS特异性区段设计属专化型引物和种特异性引物。【结果】属专化型引物VF/VR可以从腐烂病菌中扩增一条424 bp的条带,检测灵敏度为10 pg/m L;设计的4对种特异性引物分别可对4种腐烂病菌V.mali,V.sordida,L.niveum,V.malicola检测到263 bp、423 bp、307 bp、308 bp的条带,检测灵敏度均为10 pg/m L。【结论】采用腐烂病菌Valsa的r DNA-ITS特异性区段设计的引物及PCR方法,可用于新疆林木腐烂病的快速分子检测。 展开更多

关键词 林木 腐烂病菌 r dna-its PCr检测 特异性引物

下载PDF 职称材料

基于rDNA-ITS和大亚基的甘蔗凤梨病菌分子鉴定及序列分析(英文)

10

作者 林善海 周主贵 +3 位作者 潘雪红 商显坤 魏吉利 黄诚华 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期2103-2109,共7页

【目的】分析甘蔗凤梨病菌[Ceratocystis paradoxa（de Seynes）Moreau]核酸r DNA-ITS和大亚基区域序列,为甘蔗凤梨病菌的快速、有效分子检测提供技术支持。【方法】从发生凤梨病的新台糖22号（ROC22）地下种茎分离获得1株菌株FL-1,根... 【目的】分析甘蔗凤梨病菌[Ceratocystis paradoxa（de Seynes）Moreau]核酸r DNA-ITS和大亚基区域序列,为甘蔗凤梨病菌的快速、有效分子检测提供技术支持。【方法】从发生凤梨病的新台糖22号（ROC22）地下种茎分离获得1株菌株FL-1,根据柯赫氏法则测定其致病性;将该病菌在PDA培养基进行培养,观察其菌落形态特征,并在光学显微镜下观察分生孢子梗、厚垣孢子、分生孢子的形态特征。用引物ITS1/4和NL1/4分别对该菌株的核酸rD NA-ITS和大亚基序列进行扩增,以MEGA软件的Neighor-joining方法分别构建系统发育树,并用p-distance进行遗传距离分析。【结果】分离菌株FL-1为甘蔗凤梨病致病菌,具有典型的节孢子和厚垣孢子,形态特征与奇异长喙壳菌（C.paradoxa）一致。从菌株FL-1基因组DNA中分别扩增获得499 bp rD NA-ITS和563 bp大亚基片段,其序列均与C.paradoxa其他菌株的同源性为100.0%。系统聚类分析结果表明,两条序列均与C.paradoxa聚为一个独立簇。遗传矩阵分析结果表明,rD NA-ITS和大亚基均与C.paradoxa聚合在一起,种内遗传距离分别为0-0.017和0-0.008,而Ceratocystis属内种间遗传距离分别为0.015-0.106和0.002-0.059。结合分子检测结果和形态学特征,将FL-1鉴定为C.paradoxa。【结论】来自甘蔗的FL-1菌株是C.paradoxa复合群的成员,并被划分在进化复合群的分枝1上。rD NA-ITS和大亚基适合用于甘蔗凤梨病的PCR检测及分子标记。 展开更多

关键词 奇异长喙壳菌复合群 形态特征 rdna-its 大亚基 遗传分析

下载PDF 职称材料

番茄采后病原鉴定及百里香精油生物活性研究 被引量：11

11

作者 施俊凤 孙常青 +1 位作者 王潇冉 张立新 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第2期224-232,共9页

对引起保护地番茄采后腐烂的4株病原真菌进行形态和分子水平鉴定。以ITS1和ITS4为引物扩增ITS区r DNA片段。经Gen Bank进行BLAST分析,依据邻接法法构建系统发育树,确定4个菌株中SF-1为串珠镰刀菌,SF-2属细极链格孢,SF-3为灰葡萄孢霉,SF-... 对引起保护地番茄采后腐烂的4株病原真菌进行形态和分子水平鉴定。以ITS1和ITS4为引物扩增ITS区r DNA片段。经Gen Bank进行BLAST分析,依据邻接法法构建系统发育树,确定4个菌株中SF-1为串珠镰刀菌,SF-2属细极链格孢,SF-3为灰葡萄孢霉,SF-4为粉红单端孢霉。百里香精油对该4株真菌的抑菌活性:4种病原真菌中SF-3和SF-4对百里香精油最敏感,在熏蒸条件下其EC50值分别为22.84μL/L和27.87μL/L。在精油浓度相同时,熏蒸方式较接触方式可获得有更高的抑菌活性。采用扫描电子显微镜(SEM)研究百里香精油对灰葡萄孢霉和粉红单端孢霉的抑制作用,结果表明,对照菌丝光滑,饱满,而经百里香处理的灰葡萄孢霉菌丝表面形态受到严重破坏,发生皱缩,有不正常缢缩,且有大量渗出物,而粉红单端孢霉表面形成许多结节,菌丝粗细不均匀。 展开更多

关键词 番茄 病原菌 r dna-its序列 百里香精油 抑菌活性

原文传递

云南蚕区采集桑褐斑病病原真菌基于rDNA-ITS序列的分类鉴定与系统发育分析 被引量：9

12

作者 江秀均 钟健 +3 位作者 柴建萍 苏振国 黄俊荣 白兴荣 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期973-978,共6页

已报道的桑褐斑病的病原真菌有桑粘隔孢(Septogloeum mori Briosi et Cavara)和桑褐斑壳丰孢[Phloeospora maculans(Bereng.)Allesch]两种。在云南省不同蚕区选择感染桑褐斑病的桑树分离病原菌株,以待测病原菌株的基因组DNA为模板,采用... 已报道的桑褐斑病的病原真菌有桑粘隔孢(Septogloeum mori Briosi et Cavara)和桑褐斑壳丰孢[Phloeospora maculans(Bereng.)Allesch]两种。在云南省不同蚕区选择感染桑褐斑病的桑树分离病原菌株,以待测病原菌株的基因组DNA为模板,采用真菌通用引物ITS1和ITS4扩增各菌株的r DNA-ITS序列。对菌株PCR产物测序后比对Gen Bank数据库中已提交桑褐斑病病原菌的r DNA-ITS同源序列,应用MEGA5.2软件和Neighbor-Joining法,分别计算遗传距离及构建系统发育进化树分析亲缘关系。结果表明,从云南省不同蚕区感病桑树分离的桑褐斑病病原菌r DNA-ITS序列与Gen Bank中登录桑褐斑壳丰孢P.maculans的r DNA-ITS序列(登录号:GU214670.1)、桑球腔菌[Mycosphaerella mori(Fckl.)Wolf]r DNA-ITS序列(登录号:AB435069.1)的遗传距离很近,序列相似度达99%以上,聚为同一分支,其中编号BS、DY、ML、QJ的菌株与来自印度的桑球腔菌的序列相似度达到100%。由此认为,引起云南蚕区桑褐斑病的病原真菌为桑褐斑壳丰孢Phloeospora maculans,有性态为桑球腔菌Mycosphaerella mori。 展开更多

关键词 桑褐斑病 病原菌 r dna-its序列 桑褐斑壳丰孢 桑球腔菌 云南蚕区

下载PDF 职称材料

栀子及其近缘茜草科植物、混伪品的rDNA-ITS2序列分析 被引量：4

13

作者 黄易 唐灿 +4 位作者 傅俊江 成竞梁 张春 刘芳 何峰 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期1709-1715,共7页

目的：利用r DNA-内转录间隔区2（internal transcribed spacer 2,ITS2）序列对栀子及其近缘茜草科植物、混伪品进行快速鉴定。方法：对研究材料ITS2片段进行聚合酶链式反应（PCR）扩增并双向测序,所得序列经Codon Code Aligner拼接后,... 目的：利用r DNA-内转录间隔区2（internal transcribed spacer 2,ITS2）序列对栀子及其近缘茜草科植物、混伪品进行快速鉴定。方法：对研究材料ITS2片段进行聚合酶链式反应（PCR）扩增并双向测序,所得序列经Codon Code Aligner拼接后,序列变异位点采用PAUP 4.0b10进行统计分析,利用MEGA 5.0软件进行数据分析,并构建邻接（NJ）树,再利用已建立的ITS2数据库及其网站预测ITS2二级结构。结果：对栀子及其近缘茜草科植物、混伪品ITS2序列长度为201～235 bp,系统发育树上显示不同来源的样本根据亲缘关系的远近各聚一支,表现出单系性;而同时又与混伪品明显分开。比较ITS2二级结构发现,栀子及其近缘茜草科植物、混伪品在4个螺旋区的茎环数目、大小、位置以及螺旋发出时的角度均有明显差异。结论：r DNAITS2可以方便快捷地鉴定栀子及其近缘茜草科植物、混伪品。 展开更多

关键词 栀子 茜草科 rdna-its2 dna内转录间隔区 药材dna鉴定 二级结构 植物分子鉴定 基因检测

原文传递

借助ITS序列用GFP标记巴西橡胶树棒孢霉落叶病病原菌 被引量：2

14

作者 刘晓妹 张贺 +4 位作者 张欣 谢艺贤 韦运谢 曹申文 蒲金基 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2015年第3期575-580,共6页

由多主棒孢菌(Corynespora cassiicola)侵染引起的巴西橡胶树棒孢霉落叶病是影响橡胶树产胶量的主要病害之一。为了开展该病原菌在活体叶片中的病理学研究,本实验将绿色荧光蛋白gfp基因表达盒插入了多主棒孢菌经定点突变后的ITS序列中,... 由多主棒孢菌(Corynespora cassiicola)侵染引起的巴西橡胶树棒孢霉落叶病是影响橡胶树产胶量的主要病害之一。为了开展该病原菌在活体叶片中的病理学研究,本实验将绿色荧光蛋白gfp基因表达盒插入了多主棒孢菌经定点突变后的ITS序列中,构建了重组质粒p ITGH,并经PEG介导转化了原生质体,获得了GFP标记的多主棒孢菌转化子,所获得的转化子经过连续7次转接培养后仍能在分生孢子、分生孢子梗、芽管和菌丝中稳定地发出强烈的绿色荧光,其生长特性和致病性与野生菌株无明显差异。 展开更多

关键词 巴西橡胶树 多主棒孢菌 绿色荧光蛋白 its定点突变 标记

下载PDF 职称材料

狗尾草叶瘟病病原的分子鉴定及其对14种杀菌剂的敏感性测定 被引量：1

15

作者 周锋 范玉闯 +7 位作者 马亚辉 王金叶 胡明城 张明慧 翟凤艳 刘鸣韬 张伟丽 杨蕊 《河北农业科学》 2020年第5期71-74,共4页

研究狗尾草叶瘟病的病原,并筛选对该病原菌具有较高活性的杀菌剂,对进一步认识该病害及指导其化学防治具有重要意义。采用rDNA-ITS通用引物PCR扩增的分子检测方法,对狗尾草叶瘟病病原进行了鉴定;并采用室内生长速率法,测定了14种杀菌剂... 研究狗尾草叶瘟病的病原,并筛选对该病原菌具有较高活性的杀菌剂,对进一步认识该病害及指导其化学防治具有重要意义。采用rDNA-ITS通用引物PCR扩增的分子检测方法,对狗尾草叶瘟病病原进行了鉴定;并采用室内生长速率法,测定了14种杀菌剂对该病原菌的毒力。结果表明:该狗尾草叶瘟病病原菌为Pyricularia oryzae。该病原菌已对多菌灵产生了较低水平的抗药性,EC50为3.2196μg/mL;对其他13种杀菌剂均具有较高的敏感性,EC50为0.0067~0.6559μg/mL,抑菌活性顺序为嘧菌环胺>咯菌腈>咪鲜胺>氟碇胺>戊唑醇>吡唑醚菌酯>苯醚甲环唑>醚菌酯>腐霉利>氟吡菌酰胺>嘧菌酯>啶酰菌胺>菌核净。除多菌灵外,其他13种杀菌剂均可以作为由P.oryzae引起的狗尾草叶瘟病化学防治的候选药剂。 展开更多

关键词 狗尾草叶瘟病 rdna-its分子鉴定 稻梨孢菌 杀菌剂 敏感性测定

下载PDF 职称材料

花脸香蘑菌株ITS序列分析及二级结构预测 被引量：3

16

作者 岳万松 刘绍雄 +3 位作者 李雪松 郭相 马明 吴素蕊 《中国食用菌》 2021年第10期64-70,共7页

以云南地区2个野生香蘑属真菌子实体(H和Z2)为试验材料,结合GenBank中数据,开展ITS序列研究,探讨该序列作为香蘑属真菌系统发育研究的可行性及传统分类与分子系统发育分析的异同。用PCR方法扩增了2个供试样品的rDNA ITS(含5.8S)序列并测... 以云南地区2个野生香蘑属真菌子实体(H和Z2)为试验材料,结合GenBank中数据,开展ITS序列研究,探讨该序列作为香蘑属真菌系统发育研究的可行性及传统分类与分子系统发育分析的异同。用PCR方法扩增了2个供试样品的rDNA ITS(含5.8S)序列并测序,与GenBank中已提交的香蘑属菌株的ITS序列进行比较,分析了云南不同地区2个供试样品ITS序列的一级结构与其RNA二级结构的变异规律。去除两端未对齐的区域后,2个样品与GeneBank中8条同源序列的ITS比对长度为632 bp,(G+C)含量41.40%~41.70%,有14个变异位点,13个信息位点。结合NJ系统发育树与传统的形态分类结果,将2个样品鉴定为花脸香蘑(Lepista sordida)。综上,花脸香蘑遗传多样性与地理来源没有显著相关性,但Z2(云南)、MN258660(江西)、MG516585(山东)等3个花脸香蘑菌株与其他菌株的ITS序列在种内存在一定的遗传差异,这种遗传分化可能是由于自身遗传体系与产地复杂变化的自然生态环境长期共同作用形成。ITS区RNA二级结构在花脸香蘑种内基本相同,具有较强的保守性,而在香蘑属种间差异显著。结果表明,rDNA ITS区一级、二级结构分析结果与传统的形态分类结果基本一致,基于ITS序列构建的NJ发育树和RNA二级结构均可确定花脸香蘑及其近缘物种的种属归类,并且可为香蘑属不同物种间的准确区分提供重要的分子依据。 展开更多

关键词 花脸香蘑 rdna its序列 遗传多样性 二级结构

下载PDF 职称材料

担子菌门总革菌科中国新记录种紫黑点壳菌

17

作者 彭子嘉 余安 +3 位作者 骆泽煜 刘小勇 陈万福 余仲东 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期4232-4239,共8页

【背景】在陕西省的毛泡桐腐木桩上观察和采集到一株绒毛状真菌子实体,编号为HMNWAFU-CF-HS002。【目的】为了确定该菌的分类地位,对其进行形态观察及分子鉴定。【方法】获取宏观彩色图像并对显微结构进行测量、统计和绘图。此外,用PDA... 【背景】在陕西省的毛泡桐腐木桩上观察和采集到一株绒毛状真菌子实体,编号为HMNWAFU-CF-HS002。【目的】为了确定该菌的分类地位,对其进行形态观察及分子鉴定。【方法】获取宏观彩色图像并对显微结构进行测量、统计和绘图。此外,用PDA培养基分离纯化该菌的培养物,并结合最大似然法、最大简约法和贝叶斯法进行rDNA ITS分子系统学研究。【结果】HMNWAFU-CF-HS002的形态特征与Punctularia atropurpurascens高度相似。系统发育分析将HMNWAFU-CF-HS002聚在P. atropurpurascens的单系分支中。【结论】结合形态学特征与系统发育结果,HMNWAFU-CF-HS002被鉴定紫黑点壳菌(P. atropurpurascens),为中国的新记录种。此外,毛泡桐为其新记录寄主。至此,Punctularia属下的3个种,均在中国有分布记录。 展开更多

关键词 紫黑点壳菌 生物资源 形态学 rdna its分子系统学 新记录种

原文传递