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组成型天冬氨酸转氨酶基因工程菌的构建与高效表达
被引量：
4
1
作者
宫长斌
徐娴
+1 位作者
李霜
何冰芳
《过程工程学报》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2007年第3期574-578,共5页
天冬氨酸转氨酶AspAT是苯丙酮酸转氨制备L-苯丙氨酸的关键酶.本研究将大肠杆菌中天冬氨酸转氨酶基因aspC克隆到3种不同质粒中,构建组成型表达质粒pUC/P-aspC,pSE/P-aspC,pET/P-aspC,并分别转化至6种常用的大肠杆菌宿主中.通过对18种重...
天冬氨酸转氨酶AspAT是苯丙酮酸转氨制备L-苯丙氨酸的关键酶.本研究将大肠杆菌中天冬氨酸转氨酶基因aspC克隆到3种不同质粒中,构建组成型表达质粒pUC/P-aspC,pSE/P-aspC,pET/P-aspC,并分别转化至6种常用的大肠杆菌宿主中.通过对18种重组子的生长及产酶情况的分析,比较了各种重组子生长压力、质粒稳定性与表达酶活的关系,并经SDS-PAGE电泳分析AspAT的表达量,筛选出高产AspAT的重组子BL21(pET/P-aspC),以该工程菌发酵液直接作为酶液,以天冬氨酸和苯丙酮酸(20g/L)为底物,发酵液与底物以1:3的体积比转化生成L-苯丙氨酸16.2g/L,转化率高达80.1%.该体系表达无需诱导,转化无需添加辅酶PLP,展现了良好的产业化前景.
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关键词
组成型表达
天冬氨酸转氨酶基因
天冬氨酸转氨酶
L-苯丙氨酸
磷酸吡哆醛
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职称材料
题名
组成型天冬氨酸转氨酶基因工程菌的构建与高效表达
被引量：
4
1
作者
宫长斌
徐娴
李霜
何冰芳
机构
南京工业大学制药与生命科学学院
出处
《过程工程学报》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2007年第3期574-578,共5页
基金
国家自然科学重点基金资助项目(编号:20336010)
江苏省高校高新技术产业发展基金资助项目(编号:JH03-048)
文摘
天冬氨酸转氨酶AspAT是苯丙酮酸转氨制备L-苯丙氨酸的关键酶.本研究将大肠杆菌中天冬氨酸转氨酶基因aspC克隆到3种不同质粒中,构建组成型表达质粒pUC/P-aspC,pSE/P-aspC,pET/P-aspC,并分别转化至6种常用的大肠杆菌宿主中.通过对18种重组子的生长及产酶情况的分析,比较了各种重组子生长压力、质粒稳定性与表达酶活的关系,并经SDS-PAGE电泳分析AspAT的表达量,筛选出高产AspAT的重组子BL21(pET/P-aspC),以该工程菌发酵液直接作为酶液,以天冬氨酸和苯丙酮酸(20g/L)为底物,发酵液与底物以1:3的体积比转化生成L-苯丙氨酸16.2g/L,转化率高达80.1%.该体系表达无需诱导,转化无需添加辅酶PLP,展现了良好的产业化前景.
关键词
组成型表达
天冬氨酸转氨酶基因
天冬氨酸转氨酶
L-苯丙氨酸
磷酸吡哆醛
Keywords
constitutive
expression
aspC
aspartate
aminotransferase
（AspAT）
L-phen
y
lalanine
（L-Phe）
pyridoxal
y
-
phosphate
（
plp
）
分类号
TQ92 [轻工技术与工程—发酵工程]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
组成型天冬氨酸转氨酶基因工程菌的构建与高效表达
宫长斌
徐娴
李霜
何冰芳
《过程工程学报》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2007
4
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