黑曲霉F044脂肪酶发酵上清液经硫酸铵沉淀、透析、DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换层析和Sephadex G-75凝胶过滤层析得到电泳纯的脂肪酶，纯化倍数为73．71倍，活性回收率为34％。对纯化脂肪酶性质研究表明：该脂肪酶分子量约为35～...黑曲霉F044脂肪酶发酵上清液经硫酸铵沉淀、透析、DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换层析和Sephadex G-75凝胶过滤层析得到电泳纯的脂肪酶，纯化倍数为73．71倍，活性回收率为34％。对纯化脂肪酶性质研究表明：该脂肪酶分子量约为35～40kD，水解橄榄油的最适温度和最适pH分别为45℃和7．0，在60℃以下和pH2．0～9．0之间有很好的稳定性。该脂肪酶的水解活性对Ca^2＋表现明显的依赖性，而Mn^2＋、Fe^2＋和Zn^2＋对脂肪酶则有显著的抑制作用。在最适条件下水解pNPP的Km和Vmax分别为7．37mmol／L和25．91μmol／（min·mg）。其N-端的15个氨基酸序列为Ser（Glu／His）-Val-Ser-Thr-Ser-Thr-Leu-Asp-Glu-Leu-Gln-Leu-Phe-Ala-Gln。展开更多
文摘黑曲霉F044脂肪酶发酵上清液经硫酸铵沉淀、透析、DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换层析和Sephadex G-75凝胶过滤层析得到电泳纯的脂肪酶，纯化倍数为73．71倍，活性回收率为34％。对纯化脂肪酶性质研究表明：该脂肪酶分子量约为35～40kD，水解橄榄油的最适温度和最适pH分别为45℃和7．0，在60℃以下和pH2．0～9．0之间有很好的稳定性。该脂肪酶的水解活性对Ca^2＋表现明显的依赖性，而Mn^2＋、Fe^2＋和Zn^2＋对脂肪酶则有显著的抑制作用。在最适条件下水解pNPP的Km和Vmax分别为7．37mmol／L和25．91μmol／（min·mg）。其N-端的15个氨基酸序列为Ser（Glu／His）-Val-Ser-Thr-Ser-Thr-Leu-Asp-Glu-Leu-Gln-Leu-Phe-Ala-Gln。
