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碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌流行病学及碳青霉烯酶类型的研究 被引量:111
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作者 杨青 徐小微 +3 位作者 俞云松 孔海深 徐根云 钟步云 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期342-345,共4页
目的 了解碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌的耐药性、同源性及碳青霉烯酶类型。方法 收集本院碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌 45株 ,浓度梯度法 (Etest)测定最低抑菌浓度 (MIC) ;采用脉冲场凝胶电泳 (PFGE)分析同源性 ;通过等电点聚焦电泳 (I... 目的 了解碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌的耐药性、同源性及碳青霉烯酶类型。方法 收集本院碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌 45株 ,浓度梯度法 (Etest)测定最低抑菌浓度 (MIC) ;采用脉冲场凝胶电泳 (PFGE)分析同源性 ;通过等电点聚焦电泳 (IEF)、三维试验、2 巯基丙酸抑制试验、聚合酶链反应 (PCR)、克隆测序等方法分析碳青霉烯酶类型。结果  45株细菌均为多重耐药株 ,仅对头孢哌酮 /舒巴坦、氨苄西林 /舒巴坦耐药率较低分别为 2 2 %和 6 5% ,敏感率分别为 63 0 %和43 5%。 45株菌株PFGE图谱分为A、B两型 ,A型是主要流行株 (44株 ) ,主要集中在重症监护病房(ICU )。B型 1株来自血液科病房。 45株菌中有 43株产碳青霉烯酶 ,其中 16号株 (PFGE为B型 )等电点有 6 6、7 2两个条带 ,pI 6 6为OXA 2 3 ,其余 42株 (A1~A4亚型 )pIs均有 6 4、7 0两个条带 ,均不被克拉维酸、氯唑西林及 2 巯基丙酸抑制 ,PCR方法也未能检出OXA 2 3、OXA 2 4系列的基因。结论 本院碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌流行主要为医院感染所致 ,该流行株呈多重耐药 ,未发现金属酶 ,仅 1株产OXA型碳青霉烯酶 ,为OXA 2 3。 展开更多
关键词 碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌 流行病学 碳青霉烯酶 类型 耐药性 同源性 医院感染
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2008-2009年北京市沙门菌流行特征和分子分型 被引量:56
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作者 曲梅 黄芳 +9 位作者 张新 张代涛 刘桂荣 崔志刚 严寒秋 刘元 何战英 窦相峰 阚飙 王全意 《中华预防医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期113-117,共5页
目的 分析2008-2009年北京市沙门菌流行特征及脉冲场凝胶电泳(PFGE)分子分型. 方法 对2008-2009年通过WHO全球沙门菌监测系统及北京市肠道门诊监测系统分离到的137株沙门菌进行生化鉴定、血清分型和相关流行病学分析;利用PFGE进行分... 目的 分析2008-2009年北京市沙门菌流行特征及脉冲场凝胶电泳(PFGE)分子分型. 方法 对2008-2009年通过WHO全球沙门菌监测系统及北京市肠道门诊监测系统分离到的137株沙门菌进行生化鉴定、血清分型和相关流行病学分析;利用PFGE进行分子分型. 结果 北京市2008-2009年沙门菌的流行具有明显季节性,6-9月份高发,共分离菌株84株,占64.1%(84/131);患者年龄多为18~40岁,占46.1%(58/128);男性80例,女性51例,男女比例为1.57:1.137株沙门菌分属于20种血清型,其中肠炎沙门菌和鼠伤寒沙门菌为优势菌型,分别占46.7%(64/137)和17.5%(24/137).共分71种PFGE带型,其中肠炎沙门菌和鼠伤寒沙门菌都有16种PFGE型别.肠炎沙门菌的4种PFGE型别(JEGX01.CN0001、JEGX01.CN0003、JFGX01.CN0002、JEGX01.CN0019)和鼠伤寒沙门菌的JPXX01.CN0001为优势分子型别. 结论 2008-2009年北京市沙门菌的流行具有性别、年龄和季节性分布特征;PFGE分子型别较多,且存在差异明显的多个克隆系. 展开更多
关键词 沙门菌属 电泳 凝胶 脉冲场 细菌分型技术
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2007-2009年中国副溶血性弧菌临床分离株分子特征分析 被引量:30
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作者 李薇薇 梅玲玲 +7 位作者 唐震 杨小蓉 李秀桂 裴晓燕 王岗 付萍 吴永宁 郭云昌 《中华预防医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期44-52,共9页
目的 了解2007-2009年中国副溶血性弧菌临床分离株表型和基因型特征.方法 选取2007-2009年分离自浙江省、江苏省、四川省、广西壮族自治区和辽宁省,经生化鉴定为副溶血性弧菌的临床分离株作为研究对象,共135株.采用PCR方法对其进行毒力... 目的 了解2007-2009年中国副溶血性弧菌临床分离株表型和基因型特征.方法 选取2007-2009年分离自浙江省、江苏省、四川省、广西壮族自治区和辽宁省,经生化鉴定为副溶血性弧菌的临床分离株作为研究对象,共135株.采用PCR方法对其进行毒力基因耐热直接溶血素(tdh)、耐热直接溶血素相关溶血素(trh),种鉴定基因不耐热溶血素(tlh)、toxR、VPM、gyrB及“大流行菌群”标识基因(GS-PCR、PGS-PCR、orf8、HU-α)检测;采用微量肉汤稀释法分析菌株对8种抗菌素的耐药性;对实验菌株进行血清学检测;采用脉冲场凝胶电泳方法(PFGE)对菌株进行聚类分析.结果 135株临床分离株tlh、toxR、gyrB、VPM均为阳性,85.9% (116/135)的临床菌株tdh和(或)trh阳性,tdh、trh的携带率分别为85.2%(115/135)、3.0% (4/135),其中3株菌同时携带两种毒力基因.GS-PCR、PGS-PCR、orf8、HU-α的携带率分别为66.7% (90/135)、80.7% (109/135)、65.2% (88/135)、66.7% (90/135).135株临床株耐受至少1种抗菌素的占8.1% (11/135),其中,9株对氨苄青霉素的耐药,2株对复方磺胺甲嗯唑耐药,1株对四环素耐药.所有菌株对头孢噻肟、头孢他啶、庆大霉素、环丙沙星、氯霉素均敏感.135株临床株检出29种血清型,以O3、O4、O1群为主,占89.6%(121/135),O3∶K6为优势血清型,占56.3% (76/135).我国“大流行菌群”包括O3∶K6、O4:K68、O1∶ K36、O1∶K25、O1∶K5、O3∶ K29等血清型.限制性内切酶SfiⅠ和NotⅠ的酶切图谱片段集中在30~700 kb之间,聚类分析各分为6个群和9个群,最低相似度分别为52.6%和58.7%,临床“大流行菌群”菌株分别位于C群和D群.结论 我国大部分副溶血性弧菌临床株携带毒力基因;“大流行菌群”尤其是O3∶K6血清型在我国呈流行趋势,GS-PCR、HU-a可作为判定“大流行菌群”标识基因.PFGE分型可靠且能区分“ 展开更多
关键词 弧菌 副溶血性 血清分型 电泳 凝胶 脉冲场 聚合酶链反应
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多重耐药鲍曼不动杆菌对替加环素耐药状况分析 被引量:29
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作者 孙谦 周宏伟 +1 位作者 胡燕燕 陈功祥 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期358-362,共5页
目的 了解多重耐药鲍曼不动杆菌对临床常用抗生素及新药替加环素的耐药状况.方法 收集2008-2009年浙江省4所教学医院的602株临床分离鲍曼不动杆菌,采用琼脂稀释法检测其对13种临床常用抗生素的敏感性,以及对多黏菌素B和替加环素的敏感性... 目的 了解多重耐药鲍曼不动杆菌对临床常用抗生素及新药替加环素的耐药状况.方法 收集2008-2009年浙江省4所教学医院的602株临床分离鲍曼不动杆菌,采用琼脂稀释法检测其对13种临床常用抗生素的敏感性,以及对多黏菌素B和替加环素的敏感性.同时,采用PFGE技术对24株多重耐药鲍曼不动杆菌进行同源性分析,以确定菌株间的亲缘关系.结果 浙江省4家教学医院2008-2009年分离的鲍曼不动杆菌主要来自于呼吸道标本,2009年达到277株(86.0%),血液标本数量从2008年的15株(5.4%)下降到2009年的5株(1.5%),而其他标本无明显变化.鲍曼不动杆菌对临床常用的13种抗生素均有不同程度的耐药,耐药率35.0%~85.0%.与2008年相比,除左氧氟沙星和妥布霉素耐药率分别下降0.9%和9.0%以外,2009年其余抗生素耐药率均有不同程度地上升,头孢曲松和头孢吡肟耐药率增加了近10.0%,对碳青霉烯类抗生素亚胺培南和美罗培南的耐药率分别达到74.2%(239/602)和70.8%(228/602).鲍曼不动杆菌对替加环素显示了很高的耐药率,耐药率达到78.9%(475/602),而多黏菌素B耐药率仅为3.7%(22/602).PFGE分型显示2008-2009年24株鲍曼不动杆菌有6个克隆型,其中A型最常见,占50%.结论 鲍曼不动杆菌对替加环素的耐药加大了院内感染控制的难度,临床应加强控制,防止多重耐药菌的传播. 展开更多
关键词 鲍氏不动杆菌 米诺环素 抗药性 多种 细菌 电泳 凝胶 脉冲场
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复发性外阴阴道假丝酵母菌病患者反复发作期阴道分离菌株的同源性及耐药性分析 被引量:26
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作者 张展 白会会 +4 位作者 王风娟 李婷 宗晓楠 尚晨光 刘朝晖 《中华妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期177-182,共6页
目的检测复发性外阴阴道假丝酵母菌病(RVVC)患者反复发作期假丝酵母菌的核型同源性,了解假丝酵母菌菌株随临床进展对抗真菌药物的敏感性变化情况。方法2018年9月至2019年6月在首都医科大学附属北京妇产医院初次确诊的RVVC患者10例,收集... 目的检测复发性外阴阴道假丝酵母菌病(RVVC)患者反复发作期假丝酵母菌的核型同源性,了解假丝酵母菌菌株随临床进展对抗真菌药物的敏感性变化情况。方法2018年9月至2019年6月在首都医科大学附属北京妇产医院初次确诊的RVVC患者10例,收集其确诊RVVC时及在本院治疗后再发时的阴道分泌物,分离纯化并鉴定假丝酵母菌菌株,采用基因组DNA限制性内切酶分析方法(使用限制性内切酶BssHⅡ)联合脉冲场凝胶电泳方法检测分离自同一患者菌株的核型,同时检测临床分离的菌株对5种抗真菌药物(克霉唑、氟康唑、咪康唑、伊曲康唑及制霉菌素)的敏感性。结果(1)10例RVVC患者首诊及复发时分离的20株菌株均为白假丝酵母菌,其染色体DNA经内切酶BssHⅡ酶切后电泳图谱极其相似,来自同一患者的前后(首诊及复发时)分离菌株的电泳条带完全一致。(2)10例患者经药物治疗后复发时,临床分离的白假丝酵母菌菌株对除制霉菌素外的其他4种抗真菌药物的敏感性普遍下降,制霉菌素(首诊和复发:100%敏感、100%敏感)>克霉唑(首诊和复发:100%敏感、90%敏感)>氟康唑(首诊和复发:80%敏感、70%敏感)>伊曲康唑(首诊和复发:60%敏感、50%敏感)>咪康唑(首诊和复发:30%敏感、20%敏感)。结论(1)阴道内同一定植菌株的潜伏可能是RVVC反复发作的原因。(2)抗真菌药物对真菌存在选择性诱导耐药作用,同时真菌对抗真菌药物存在交叉耐药,RVVC患者反复发作时重复进行真菌培养及药物敏感性分析对正确选择敏感的抗真菌药物十分重要。 展开更多
关键词 念珠菌病 外阴阴道 复发 序列同源性 抗药性 真菌 电泳 凝胶 脉冲场
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2011—2013年河南省肠炎沙门菌耐药与分子分型研究 被引量:26
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作者 赵嘉咏 张玉凯 +6 位作者 谢志强 潘静静 苏佳 穆玉姣 黄学勇 张白帆 夏胜利 《中华预防医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期261-265,共5页
目的分析2011—2013年河南省肠炎沙门菌临床分离株的耐药状况与分子分型。方法收集2011年3月至2013年12月分离于河南省7个腹泻病多病原监测哨点医院的120株肠炎沙门菌,根据国际细菌性传染病分子分型监测网络公布的非伤寒沙门菌PFGE分... 目的分析2011—2013年河南省肠炎沙门菌临床分离株的耐药状况与分子分型。方法收集2011年3月至2013年12月分离于河南省7个腹泻病多病原监测哨点医院的120株肠炎沙门菌,根据国际细菌性传染病分子分型监测网络公布的非伤寒沙门菌PFGE分型方法与美国临床与实验室标准协会沙门菌纸片法(Kirby.Bauer,K—B)药敏测试方案,对120株肠炎沙门菌进行8类抗生素的药敏测试与PFGE分子分型分析。结果120株肠炎沙门菌中,77株分离自男性,43株分离自女性;从0—5岁低龄儿童中共分离78株(65.0%),其中6月龄至2岁婴幼儿57株(47.5%);分离时间集中于每年的5—10月份,其中3-4月份11株(9.2%),5—7月份48株(40.0%),8—10月份54株(45.0%),其余月份7株(5.8%),具有较典型的夏秋季节特征。120株肠炎沙门菌对氨苄西林的耐药率为50.0%(60株);对头孢他啶的耐药率为14.2%(17株),对头孢噻肟的耐药率为18.3%(22株);对头孢吡肟的耐药率为5.8%(7株);对萘啶酸的耐药率为61.7%(74株);对环丙沙星的耐药率为8.3%(10株),对诺氟沙星的耐药率为5.8%(7株);对庆大霉素的耐药率为42.5%(51株),对链霉素的耐药率为21.7%(26株);对氯霉素类抗生素的耐药率为30.0%(36株);对甲氧苄氨嘧啶的耐药率为11.7%(14株),对复方磺胺甲嗯唑的耐药率为71.7%(86株);对四环素的耐药率为47.5%(57株)。120株肠炎沙门菌均对2种以上抗生素耐药,其中耐3~4种的为28株(23.3%),耐5—6种的为38株(31.7%),耐7—8种的为39株(32.5%)。经XbaI酶切和PFGE电泳后,120株肠炎沙门菌共分为44种带型(EN1-EN44),各带型包含菌株数为1~35株不等,带型相似度在54.3%~100.O%之间,EN14、EN19分别包含35和29株菌,为 展开更多
关键词 沙门菌 肠炎 分子分型 电泳 凝胶 脉冲场
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一起由肠炎沙门菌所致食源性疾病暴发疫情的病原学研究及溯源分析 被引量:22
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作者 王丽丽 马晓晨 +2 位作者 滕仁明 赵耀 陈倩 《中华预防医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期60-62,共3页
沙门菌是引起我国食源性疾病的主要致病菌,感染后能够产生发热、腹泻、腹痛,甚至伤寒、败血症等症状。近年来在美国发生了多起轰动全球的沙门菌感染事件01-21。2013年9月28日,北京市3个区域的3所学校相继发生由肠炎沙门菌污染食物所... 沙门菌是引起我国食源性疾病的主要致病菌,感染后能够产生发热、腹泻、腹痛,甚至伤寒、败血症等症状。近年来在美国发生了多起轰动全球的沙门菌感染事件01-21。2013年9月28日,北京市3个区域的3所学校相继发生由肠炎沙门菌污染食物所致食源性疾病暴发疫情。因报告时间相近、临床症状相似,初步怀疑该起事件具有共同的食品污染来源,现将调查及分析结果报道如下。 展开更多
关键词 沙门菌 肠炎 电泳 凝胶 脉冲场 疾病暴发流行 食源性疾病
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16S rRNA甲基化酶基因在鲍曼不动杆菌中的分布 被引量:20
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作者 潘韵峰 周华 +3 位作者 周志慧 俞云松 陈亚岗 李兰娟 《中华传染病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期593-596,共4页
目的调查国内6个省市25家医院临床分离鲍曼不动杆菌中介导高水平氨基糖苷类抗生素耐药的16S rRNA甲基化酶基因armA、rmtA、rmtB的分布情况。方法收集2004年12月—2005年12月国内6省市8家省级医院、浙江省11个地区17家市级医院临床分离的... 目的调查国内6个省市25家医院临床分离鲍曼不动杆菌中介导高水平氨基糖苷类抗生素耐药的16S rRNA甲基化酶基因armA、rmtA、rmtB的分布情况。方法收集2004年12月—2005年12月国内6省市8家省级医院、浙江省11个地区17家市级医院临床分离的700株鲍曼不动杆菌。琼脂稀释法测定其对妥布霉素、阿米卡星、庆大霉素、异帕米星、奈替米星5种氨基糖苷类抗生素的最低抑菌浓度(MIC)值;PCR筛选三种甲基化酶基因armA、rmtA、rmtB,克隆测序明确基因型;脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析菌株的同源性;质粒抽提、接合试验及Southern杂交确定armA基因定位。结果对妥布霉素、阿米卡星、庆大霉素、异帕米星、奈替米星的耐药率分别为67.7%、70.9%、75.7%、63.5%和71.5%。对5种氨基糖苷类抗生素全部耐药的菌株有377株,其中334株检出armA基因;未发现rmtA、rmtB阳性菌株。armA基因阳性菌株PFGE分型以A、B、C为主。碱裂解法反复抽提未得到质粒,多次接合试验未成功;Southern杂交显示,armA基因分别位于克隆A、B、C菌株染色体ApaⅠ酶切PFGE约220、300、220kb大小的PFGE片段上。结论16S rRNA甲基化酶基因armA在鲍曼不动杆菌中广泛存在,armA基因位于鲍曼不动杆菌的染色体上。 展开更多
关键词 抗菌药 RNA 核糖体 16S tRNA甲基转移酶类 鲍氏不动杆菌 电泳 凝胶 脉冲场
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脉冲场凝胶电泳在沙门菌食物中毒溯源中的应用研究 被引量:21
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作者 石晓路 刘小立 +5 位作者 黄薇 王冰 林一曼 贺连华 吴平芳 扈庆华 《疾病控制杂志》 2007年第5期502-504,共3页
目的用脉冲场凝胶电泳(PFGE)方法,追踪某次沙门菌食物中毒的来源,确定中毒食品,快速控制传染源。方法对食物中毒中分离的肠炎沙门菌用XbaI酶切总DNA,用脉冲场凝胶电泳(PFGE)法进行分子分型,用BioNumerics软件对PFGE分型图谱进行电子化... 目的用脉冲场凝胶电泳(PFGE)方法,追踪某次沙门菌食物中毒的来源,确定中毒食品,快速控制传染源。方法对食物中毒中分离的肠炎沙门菌用XbaI酶切总DNA,用脉冲场凝胶电泳(PFGE)法进行分子分型,用BioNumerics软件对PFGE分型图谱进行电子化数据分析,绘出聚类分析图。结果脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型方法对患者样本分离的242株肠炎沙门菌进行分子分型,型别基本一致,表明是同一批食物中毒;从三文治等蛋糕制品中分离的9株菌株与患者分离株图谱完全一致,表明此次食物中毒的源头为某蛋糕厂生产的三文治等食品。结论脉冲场凝胶电泳技术适用于菌株的同源性的分析和传染源的追踪。 展开更多
关键词 沙门菌食物中毒 电泳 凝胶 脉冲场
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Drug-resistant gene based genotyping for Acinetobacter baumannii in tracing epidemiological events and for clinical treatment within nosocomial settings 被引量:18
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作者 JIN Hui XU Xiao-min +2 位作者 MI Zu-huang MOU Yi LIU Pei 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2009年第3期301-306,共6页
Background Acinetobacter baumannfi has emerged as an important pathogen related to serious infections and nosocomial outbreaks around the world. However, of the frequently used methods, pulsed-field gel electrophores... Background Acinetobacter baumannfi has emerged as an important pathogen related to serious infections and nosocomial outbreaks around the world. However, of the frequently used methods, pulsed-field gel electrophoresis (PFGE) and amplified fragment length polymorphism (AFLP) in Acinetobacter baumannfi genotyping lack the direct molecular proof of drug resistance. This study was conducted to establish a typing method based on drug resistant gene identification in contrast to traditional PFGE and AFLP in the period of nosocomial epidemic or outbreak. Methods From January 2005 to October 2005, twenty-seven strains of Acinetobacter species from Intensive Care Units, the Second Affiliated Hospital in Ningbo were isolated, including both epidemic and sporadic events. Susceptibility test, PFGE, AFLP and drug resistance gene typing (DRGT) were carried out to confirm the drug resistance and analyze the genotyping, respectively. PFGE was used as a reference to evaluate the typeability of DRGT and AFLP. Results Twenty-seven strains of Acinetobacter displayed multiple antibiotic resistance and drug resistant genes, and β-1actamase genes were detected in 85.2% strains. The result of DRGT was comparable to PFGE in Acinetobacter strains with different drug resistance though a little difference existed, and even suggested a molecular evolution course of different drug-resistant strains. AFLP showed great polymorphism between strains and had weak ability in distinguishing the drug resistance. Conclusion Compared to AFLP and PFGE, DRGT is useful to analyze localized molecular epidemiology of nosocomial infections and outbreaks, which would benefit clinical diagnosis and therapy. 展开更多
关键词 Acinetobacter baumannii drug-resistance gene typing pulsed-field gel electrophoresis amplified fragment length polymorphism fingerprinting
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机械通气患者嗜麦芽窄食单胞菌暴发感染分子流行病学研究 被引量:14
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作者 郭述良 何礼贤 +2 位作者 张磊 夏云 罗永艾 《中华结核和呼吸杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期310-314,共5页
目的研究确定呼吸重症监护室(RICU)内机械通气患者连续发生嗜麦芽窄食单胞菌(pma)感染为暴发感染,并追踪其感染源。方法收集2002年12月至2003年2月自RICU有创机械通气患者气道抽吸物中分离出的9株pma菌株,RICU工作人员手拭子分离的pma菌... 目的研究确定呼吸重症监护室(RICU)内机械通气患者连续发生嗜麦芽窄食单胞菌(pma)感染为暴发感染,并追踪其感染源。方法收集2002年12月至2003年2月自RICU有创机械通气患者气道抽吸物中分离出的9株pma菌株,RICU工作人员手拭子分离的pma菌株2株,纤维支气管镜(已按常规消毒存放,用于气道管理)冲洗液分离的pma菌株2株,采用WHONET5软件通过耐药分析组合对菌株进行抗生素型分析,通过脉冲场凝胶电泳(PFGE)全DNA指纹图技术对菌株进行分子分型,确定菌株的亲缘关系。以1997年至2000年自多个科室收集的16株pma作对比。结果9例机械通气患者感染的9株pma,有8株PFGE基因型相同,并与2株分离自RICU工作人员手拭子的pma和2株分离自纤维支气管镜的pma基因型一致。抗生素型则有7株分型相同。抗生素型与PFGE基因型的符合率为85%(11/13)。1997年至2000年收集的16株pma,PFGE基因型分为11型,抗生素型分为9型,呈现为多克隆构成模式。结论8例机械通气患者感染的pma来自于同一克隆,RICU内存在着pma的暴发感染。消毒不彻底的纤维支气管镜和医护人员的手污染是引起本次暴发感染的重要感染源和感染途径。 展开更多
关键词 嗜麦芽窄食单胞菌 机械通气患者 暴发感染 分子流行病学研究 纤维支气管镜 WHONET5软件 2002年12月 DNA指纹图技术 呼吸重症监护室 2003年2月 脉冲场凝胶电泳 2000年 1997年 RICU E基因型 pma 工作人员 抗生素 PFG 常规消毒
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我国2009至2016年耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌流行状况分析 被引量:14
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作者 张凡 李耘 甘露 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期949-954,共6页
目的调查我国2009至2016年耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的药物敏感性及分子流行状况。方法挑选2009至2016年中国细菌耐药监测研究项目收集的肺炎克雷伯菌中厄他培南耐药菌株为碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(CRKP),采用美国临床实验室标准协会... 目的调查我国2009至2016年耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的药物敏感性及分子流行状况。方法挑选2009至2016年中国细菌耐药监测研究项目收集的肺炎克雷伯菌中厄他培南耐药菌株为碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(CRKP),采用美国临床实验室标准协会(CLSI)推荐的平皿二倍稀释法检测14种抗菌药物对其最低抑菌浓度(MIC)。改良碳青霉烯灭活试验(mCIM)和EDTA改良碳青霉烯灭活试验(eCIM)法检测CRKP中碳青霉烯酶;PCR扩增检测碳青霉烯酶基因。多位点序列分析(MLST)和脉冲场凝胶电泳(PFGE)检测不同菌株的同源性。结果在2502株肺炎克雷伯细菌中筛选出193株CRKP。193株CRKP除对多黏菌素E(4.0%)、替加环素(7.3%)、磷霉素(25.4%)、阿米卡星(38.3%)和米诺环素(38.9%)的耐药率低于40%,对其余9种抗菌药物耐药率均高于65%。其中143株(74.1%)检测出碳青霉烯基因,最多的分别是blaKPC-288株(45.6%)和blaNDM-140株(20.7%)。126株产KPC-2和NDM-1型碳青霉烯酶的肺炎克雷伯菌株包含33个ST型,以ST11(59.5%)为主。所有ST11菌株均产KPC-2型碳青霉烯酶。受检菌株经PFGE指纹图谱分析共得到111种克隆,其中12种含有2株或以上同克隆菌株。结论2009至2016年肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类的耐药率不断上升,临床医护人员应采取合理措施加强对CRKP的耐药性监测,控制其在全国范围内的传播。 展开更多
关键词 肺炎克雷伯菌 卡巴配能类 抗药性 细菌 微生物敏感性试验 电泳 凝胶 脉冲场 多位点测序分型
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中国食源性鼠伤寒沙门菌株耐药谱及PFGE分型研究 被引量:12
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作者 周正 刘秀梅 《中国食品卫生杂志》 2007年第3期221-224,共4页
目的了解掌握中国食品中鼠伤寒沙门菌的耐药状况,并对2002—2005年国家食源性疾病监测网分离的23株鼠伤寒沙门菌进行耐药性监测及PFGE分型研究。方法利用血清学方法对2002—2005年食源性疾病监测网分离的沙门菌进行分型,并运用CLSI(C... 目的了解掌握中国食品中鼠伤寒沙门菌的耐药状况,并对2002—2005年国家食源性疾病监测网分离的23株鼠伤寒沙门菌进行耐药性监测及PFGE分型研究。方法利用血清学方法对2002—2005年食源性疾病监测网分离的沙门菌进行分型,并运用CLSI(Clinical and Laboratory Standards Institute)推荐的纸片法对鼠伤寒沙门菌株进行耐药性检测。采用脉冲场凝胶电泳法(PFGE)进行PFGE分型。结果发现15株多重耐药鼠伤寒沙门菌,其中耐4~5种抗生素的6株(40%),耐6~9种抗生素的5株(33.3%),耐10种抗生素的4株(26.7%);可分为16个PFGE型。其中5个PFGE型的菌株数超过1株。结论我国食源性鼠伤寒沙门菌分离株的多重耐药性严重,PFGE分型方法对鼠伤寒沙门菌的分型能力较好,同一PFGE型菌株的耐药谱非常接近。 展开更多
关键词 沙门菌 鼠伤寒 抗药性 微生物 电泳 凝胶 脉冲场
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耐万古霉素肠球菌的基因检测 被引量:11
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作者 李茹 徐晓刚 +3 位作者 李敏 蒋晓飞 魏取好 吕元 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期430-434,共5页
目的 调查上海华山医院2007-2009年间VRE的分离率,并对耐药菌株的分子特性进行研究,为本地区VRE的预防和控制提供有价值的信息.方法 通过琼脂平板稀释法(ADSP)从临床鉴定的890株肠球菌中筛选VRE菌株,并通过微量肉汤稀释实验测其对万... 目的 调查上海华山医院2007-2009年间VRE的分离率,并对耐药菌株的分子特性进行研究,为本地区VRE的预防和控制提供有价值的信息.方法 通过琼脂平板稀释法(ADSP)从临床鉴定的890株肠球菌中筛选VRE菌株,并通过微量肉汤稀释实验测其对万古霉素及替考拉宁的MIC;采用PCR及测序方法检测万古霉素耐药基因以及可能毒力基因esp,hyl;运用MLST对VRE进行克隆分型并通过PFGE分型技术进行验证.结果 ADSP法及微量肉汤稀释实验共筛选出13株VRE菌株.其中6株VRE(2007-2008年)只对万古霉素耐药,但对于替考拉宁敏感(万古霉素MIC64~256μg/ml);耐药基因PCR产物测序结果提示这6株VRE均携带同一种可能导致万古霉素耐药的新型基因,该基因序列与已报道的耐药基因均不同;MLST及PFGE分型提示其属于不同型别.另外7株VRE(2009年1-7月)对万古霉素和替考拉宁的MIC结果分别为32~64μg/ml和16~32 μg/ml,耐药基因检测均为vanA.MLST分型结果提示13株VRE共分为4个不同的ST型,其中11株均属克隆复合型CC-17.13株VRE毒力基因esp和hyl的阳性率分别为69.2%和30.8%.结论 上海华山医院VRE克隆分型以CC17为主,同时发现上海华山医院存在一种可能导致万古霉素耐药的新型基因介导的VRE,该新基因的功能和定位尚待进一步研究. 展开更多
关键词 万古霉素抗药性 肠球菌属 序列同源性 细菌分型技术 电泳 凝胶 脉冲场
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Prevalence, genetic diversity, and antimicrobial susceptibility profiles of Staphylococcus aureus isolated from bovine mastitis in Zhejiang Province, China 被引量:11
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作者 Jian-ping LI Hai-jian ZHOU +2 位作者 Lin YUAN Ting HE Song-hua HU 《Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology)》 SCIE CAS CSCD 2009年第10期753-760,共8页
This study was conducted to determine genetic diversity and antimicrobial susceptibility profiles of Staphylococcus aureus recovered from bovine mastiffs in Zhejiang Province, China. Out of 3178 quarter milk samples f... This study was conducted to determine genetic diversity and antimicrobial susceptibility profiles of Staphylococcus aureus recovered from bovine mastiffs in Zhejiang Province, China. Out of 3178 quarter milk samples from 846 lactating cows, among which 459 cows (54.3%) were found HMT positive, 890 quarters (28%) were found having subclinical mastitis. From 75 representative S. aureus isolates, 16 distinct types were identified by pulsed-field gel electrophoresis (PFGE). Four major PFGE types (A, B, C, and D) accounted for 82.7% of all isolates, and type A (41.3%) was observed in multiple herds across the studied areas. Each region was found to have a predominant type: Hangzhou type A (64.1%), Ningbo type C (34.5%) and type B (23.1%), Jinhua type D (53.3%), and Taizhou type C (62.5%). Results of antimicrobial susceptibility tests showed that 90.7% of the isolates were resistant to at least one antimicrobial. Resistance to penicillin and ampicillin (77.3%), tetracycline (60.0%), or erythromycin (48.0%) was observed. The bacteria resistant to multiple antibiotics such as penicillin, ampicillin, tetracycline, and erythromycin were commonly found. The information obtained from this study is useful for designing specific control programs for bovine S. aureus mastitis in this region. 展开更多
关键词 Staphylococcus aureus Bovine mastitis Antimicrobial resistance Genetic diversity pulsed-field gel electrophoresis
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一起由肠炎沙门菌所致食源性疾病暴发疫情的病原学研究 被引量:11
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作者 杨晋川 夏杨 +7 位作者 郭惠 许静静 王路梅 童晶 张雷 梁俊容 景怀琦 李振军 《中华预防医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期160-163,共4页
目的对一起食源性疾病暴发疫情进行病原学分子流行病学调查和细菌学检测,以便明确病因,进行有效的预防控制。方法2010年5月12日,徐州市第二人民医院和徐卅I市儿童医院接收135名由于胃肠道感染就诊的某幼儿园儿童病例,采集患儿粪便标... 目的对一起食源性疾病暴发疫情进行病原学分子流行病学调查和细菌学检测,以便明确病因,进行有效的预防控制。方法2010年5月12日,徐州市第二人民医院和徐卅I市儿童医院接收135名由于胃肠道感染就诊的某幼儿园儿童病例,采集患儿粪便标本34份和呕吐物标本4份,采用real—timePCR快速检测、常规病原学分离培养、噬菌体裂解试验、ATB细菌半自动鉴定系统等方法进行病原学的检测及鉴定。对分离菌株进行PFGE分型,并与当地散发沙门菌感染病例的PFGE图谱进行聚类分析。结果该幼儿园21个班级中有20个班级有学生发病,班级分布无明显聚集性。在135例患儿中,男性76例(56.3%),女性59例(43.7%),患儿主要症状为发热(38℃以上)、腹痛、腹泻伴呕吐。经过real—timePCR快速检测与病原分离培养鉴定后,在34份粪便标本中共检出19株肠炎沙门菌,检出率为56%;4份呕吐物未检出致病菌。19株肠炎沙门菌的血清学分型、生化性状、药物敏感性、噬菌体裂解模式均相同。PFGE图谱带型完全一致(相似度为100%),并且与当地散发病例PFGE图谱不同。结论综合流行病学调查、临床资料和实验室病原学检测及分子分型,证实本起疫情系一起由同一来源的肠炎沙门菌引起的食源性疾病暴发疫情。 展开更多
关键词 沙门菌 肠炎 聚合酶链反应 电泳 凝胶 脉冲场 疾病暴发流行
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2008—2013年北京市17株伤寒和副伤寒沙门菌耐药和分子分型研究 被引量:11
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作者 张新 曲梅 +7 位作者 钱海坤 吕冰 梁志超 黄瑛 李锡太 贾蕾 李洁 王全意 《职业与健康》 CAS 2015年第12期1614-1617,共4页
目的分析2008—2013年北京市17株伤寒、副伤寒沙门菌耐药及分子分型。方法对2008-2013年通过对北京市肠道门诊监测系统分离到的17株伤寒、副伤寒沙门菌进行生化鉴定、血清分型并运用纸片法进行药敏检测;利用脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行分... 目的分析2008—2013年北京市17株伤寒、副伤寒沙门菌耐药及分子分型。方法对2008-2013年通过对北京市肠道门诊监测系统分离到的17株伤寒、副伤寒沙门菌进行生化鉴定、血清分型并运用纸片法进行药敏检测;利用脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行分子分型。结果 17株伤寒、副伤寒沙门菌对三代头孢菌素类药物头孢他啶敏感率达100%,头孢噻肟和头孢曲松敏感率均为93.75%,对氟喹诺酮类药物环丙沙星敏感率为93.75%,萘啶酸耐药率达31.25%。其中16株伤寒、副伤寒沙门菌可分为15种PFGE带型,带型分布较分散。结论北京市伤寒、副伤寒沙门菌分离株对3代头孢类抗生素及环丙沙星敏感;PFGE分子型别较多,无聚集性。 展开更多
关键词 伤寒沙门菌 副伤寒沙门菌 耐药 电泳 凝胶 脉冲场 细菌分型技术
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山东省动物粪便中非O157产志贺毒素大肠埃希菌菌株特征及耐药性分析 被引量:11
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作者 胡彬 寇增强 +8 位作者 邵纯纯 尹海英 刘宗东 徐雪华 房明 陈保立 魏昌印 李贵锋 毕振旺 《中华预防医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期271-276,共6页
目的分析山东省动物粪便中非0157产志贺毒素大肠埃希菌(STEC)的菌株特征及耐药状况。方法于2015--2016年,采用方便抽样方法在山东省微山县、莱州市共采集1022份新鲜动物粪便标本,共分离到24株非0157STEC。通过血清凝集实验进行血清... 目的分析山东省动物粪便中非0157产志贺毒素大肠埃希菌(STEC)的菌株特征及耐药状况。方法于2015--2016年,采用方便抽样方法在山东省微山县、莱州市共采集1022份新鲜动物粪便标本,共分离到24株非0157STEC。通过血清凝集实验进行血清分型,采用微量肉汤稀释法进行药物敏感性试验,后采用双纸片协同试验进行超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)检测。采用PCR方法检测耐药基因。采用PFGE进行分子分型并采用多位点序列分型(MLST)确定等位基因谱及菌株序列型。使用CLC Sequence Viewer及Conting Express生物信息软件分析不同sT序列群及菌株问的进化关系。结果24株非0157型STEC菌株中23株来自猪粪,1株来自牛粪;毒力基因均为stx2型;对磺胺异噁唑耐药的菌株较多,为22株,对复方磺胺异噁唑和萘啶酸耐药的菌株均为18株,对氯霉素耐药菌株为13株,对四环素耐药菌株为19株。存在多重耐药现象,耐药谱为:磺胺异嗯唑.四环素一复方磺胺异嗯唑.萘啶酸一氯霉素,对头孢吡肟和亚胺培南均为敏感。ESBLs确证实验表明,有4株非0157型STEC产ESBLs。PCR检测7种耐药基因,4种四环素类耐药基因(tetA、tetB、tetC、tetD)均有检出,ESBLs类耐药基因(blaSHV-1、blaCTX-M、bla TEM)均为阴性。24株菌分成15个PFGE型别,其聚类结果比较分散,无优势PFGE型别。MLST型别有11种,其中ST540、ST5133型别的菌株最多,各为4株菌,聚类为1个MLST基因组。结论山东省部分地区在动物粪便中检出的非0157STEC血清型比较分散,对常见的抗生素耐药率比较高,具有明显的分子多态性,应重点加强对这类菌株的监测和管理。 展开更多
关键词 产志贺毒素大肠杆菌 电泳 凝胶 脉冲场 菌株特征 耐药监测
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1984—2011年宁夏小肠结肠炎耶尔森菌变异变迁分析 被引量:10
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作者 郭邦成 詹军 +6 位作者 郝琼 闫立群 刘翔 谢明英 景怀琦 王鑫 梁俊容 《中华预防医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期879-882,共4页
目的了解宁夏地区1984—2011年小肠结肠炎耶尔森菌菌型变迁情况及遗传进化特征。方法对1984—2011年由腹泻患者、猪、鼠类、羊和犬标本中分离的296株小肠结肠炎耶尔森菌进行血清分型、生物分型及黏附侵袭位点基因(ail)、肠毒素基因A(... 目的了解宁夏地区1984—2011年小肠结肠炎耶尔森菌菌型变迁情况及遗传进化特征。方法对1984—2011年由腹泻患者、猪、鼠类、羊和犬标本中分离的296株小肠结肠炎耶尔森菌进行血清分型、生物分型及黏附侵袭位点基因(ail)、肠毒素基因A(ystA)、ystB、黏附素基因A(yadA)、毒力因子基因F(virF)等毒力基因检测,同时对O:3和O:9血清型菌株进行PFGE分型,并进行聚类分析。结果296株小肠结肠炎耶尔森菌中,猪是最主要的宿主,占菌株分离总数的65.20%(193/296),其次是鼠类,占32.43%(96/296)。血清型和生物型在不同时期均具有各自的优势型别,1984-1985年共分离2株O:3和3株O:9血清型菌株,均为生物3型,菌株较少,优势型别不明显;1997-1999年分离到177株O:9血清型菌株,为这一时期的优势型别,生物2型分离株有178株;2007-2011年分离到54株O:3血清型菌株,为此时期的优势型别,其次为0:5血清型,分离到26株,生物型以1A和3型为主,分别为44、59株。PCR检测将分离到的248株小肠结肠炎耶尔森菌毒力携带情况分为4型,其中致病性菌株均为Ⅰ型(ail+、ystA+、ystB-、yadA-、virF-);采用PFGE分型将0:3血清型菌株分为12个型别,K6GN11C30021、K6GN11C30012为主要带型,占所有分型菌株的63.64%(42/66);0:9血清型分为14个型别,K6GN11C90010、K6GN11C90008、K6GN11C30018、K6GN11C90003为主要型别,占所有分型菌株的89.01%(162/182)。结论宁夏地区小肠结肠炎耶尔森菌分离菌株的血清型在不同时期具有不同的优势菌型,且生物型随着血清型的改变亦发生动态变化。分离自不同年代的致病性小肠结肠炎耶尔森菌的变异较大。 展开更多
关键词 耶尔森菌 小肠结肠炎 毒力 基因 电泳 凝胶 脉冲场
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单核细胞增生李斯特菌的毒力基因检测及PFGE分型的研究 被引量:8
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作者 陈伟伟 洪锦春 +2 位作者 张巧姬 杨毓环 马群飞 《中国食品卫生杂志》 2007年第1期21-25,共5页
目的了解福建省食品中单核细胞增生李斯特菌携带hly、plcA、plcB和prfA毒力基因的情况及脉冲场凝胶电泳(PFGE)的分型情况。方法将hly、plcA、plcB和prfA基因作为靶序列选取4对引物,通过聚合酶链反应(PCR)检测61株单核细胞增生李斯特菌和... 目的了解福建省食品中单核细胞增生李斯特菌携带hly、plcA、plcB和prfA毒力基因的情况及脉冲场凝胶电泳(PFGE)的分型情况。方法将hly、plcA、plcB和prfA基因作为靶序列选取4对引物,通过聚合酶链反应(PCR)检测61株单核细胞增生李斯特菌和2株可疑单核细胞增生李斯特菌的毒力基因,用PulseNet单核细胞增生李斯特菌标准方法进行7株单核细胞增生李斯特菌的PFGE分子分型。结果61株单核细胞增生李斯特菌毒力基因为hly+、plcA+、plcB+和prfA+,2株可疑单核细胞增生李斯特菌的毒力基因分别为hly-、plcA+、plcB-、prfA-和hly-、plcA-、plcB-、prfA-。7株单核细胞增生李斯特菌的PFGE分为5个型。结论实验结果表明福建省食品中分离到的单核细胞增生李斯特菌均含有hly、plcA、plcB和prfA基因,属于致病株。对2株可疑单核细胞增生李斯特菌进行了进一步的鉴定,排除了单核细胞增生李斯特菌,该毒力基因检测方法可用于可疑单核细胞增生李斯特菌的进一步鉴别。7株菌中有两对2株PFGE型别一致,一致的菌株来自不同年份不同销售地点的同一品牌,应用PFGE方法可以进一步调查该厂冻鸡肉中单核细胞增生李斯特菌的传播途径和污染源。 展开更多
关键词 利斯特菌 单核细胞增生 毒力 基因 电泳 凝胶 脉冲场
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