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产类胡萝卜素酵母菌原生质体的制备、再生与诱变 被引量：10
1
作者 陈春涛 王岁楼 卫军 《生物技术》 CAS CSCD 2002年第3期23-25,共3页
研究了1株产类胡萝卜素红酵母Y-35的原生质体最佳制备条件和再生条件,以及在此基础上的诱变育种。通过实验,初步确定Y-35菌株原生质体形成和再生的适宜条件为:菌龄16h、蜗牛酶浓度1%、30℃处理60min。红酵母Y-35原生质体经紫外线诱变后... 研究了1株产类胡萝卜素红酵母Y-35的原生质体最佳制备条件和再生条件,以及在此基础上的诱变育种。通过实验,初步确定Y-35菌株原生质体形成和再生的适宜条件为:菌龄16h、蜗牛酶浓度1%、30℃处理60min。红酵母Y-35原生质体经紫外线诱变后得到18株诱变菌株,分别测定其生物量、类胡萝卜素含量及产量,获得2株类胡萝卜素产量明显提高的变异菌株RY-10和RY-19,其产量分别比出发菌株提高49%和54%。 展开更多
关键词 类胡萝卜素 酵母菌 原生质 再生 制备 诱变
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细菌原生质体融合育种技术及其应用进展 被引量：18
2
作者 王登宇 臧威 +3 位作者 孙剑秋 蒋本庆 王鹏 李铁 《中国酿造》 CAS 北大核心 2008年第4期1-6,共6页
原生质体融合技术是细菌遗传育种的有效方法之一,发展迅速,应用广泛。文中综述了亲本菌株选择性遗传标记方法、影响原生质体制备与再生因素、原生质体融合方法和条件。介绍了细菌原生质体融合技术在遗传育种中的应用,并展望了细菌原生... 原生质体融合技术是细菌遗传育种的有效方法之一,发展迅速,应用广泛。文中综述了亲本菌株选择性遗传标记方法、影响原生质体制备与再生因素、原生质体融合方法和条件。介绍了细菌原生质体融合技术在遗传育种中的应用,并展望了细菌原生质体融合技术的发展前景。 展开更多
关键词 原生质体融合 原生质体制备 原生质体再生 遗传育种
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采用原生质体单核体杂交技术创新香菇种质资源 被引量：13
3
作者 宋莹 刘俊杰 +3 位作者 张敏 刘岩岩 刘娜 李宏亮 《北方园艺》 CAS 北大核心 2017年第19期165-169,共5页
以野生香菇和国内主栽菌株‘931’‘168’"荷香1号"为亲本材料,采用原生质体单核杂交育种方法选育香菇新菌株,并研究了杂交菌株与亲本菌丝长势、长速、产量和子实体形态等农艺性状的关系。结果表明:杂交菌株LNX3、LNX5和LNX6... 以野生香菇和国内主栽菌株‘931’‘168’"荷香1号"为亲本材料,采用原生质体单核杂交育种方法选育香菇新菌株,并研究了杂交菌株与亲本菌丝长势、长速、产量和子实体形态等农艺性状的关系。结果表明:杂交菌株LNX3、LNX5和LNX6在农艺性状、产量和品质上均较亲本有明显优势,具有进一步开发的潜力。 展开更多
关键词 香菇 原生质体再生 杂交
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柱晶白霉素产生菌的原生质体制备、再生和诱变 被引量：6
4
作者 倪孟祥 刘娜 +1 位作者 顾觉奋 吴梧桐 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期462-467,共6页
目的 :对柱晶白霉素产生菌 SK-0 6的原生质体制备和再生的条件 ,以及再生菌的产生抗生素能力进行了研究。方法 :考察甘氨酸浓度对菌丝生长的影响 ,摸索和确定溶菌酶酶解的最佳条件 ,考察再生培养基的组成。结果 :溶菌酶酶解的最佳条件为... 目的 :对柱晶白霉素产生菌 SK-0 6的原生质体制备和再生的条件 ,以及再生菌的产生抗生素能力进行了研究。方法 :考察甘氨酸浓度对菌丝生长的影响 ,摸索和确定溶菌酶酶解的最佳条件 ,考察再生培养基的组成。结果 :溶菌酶酶解的最佳条件为 :2 mg/ml、30℃、90 min。再生率达到 1 5 %。通过二次再生后 ,获得了一株高产菌株 ,效价提高了 2 38%。经过紫外线诱变的孢子和原生质体的效价提高了 95 %和 1 6 0 %。结论 :原生质体制备和再生选育高产菌株是一种有效的菌种选育手段。 展开更多
关键词 柱晶白霉素 原生质体形成 原生质体再生 紫外线 诱变 抗生素 环内酯类抗素
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高产纤维素酶菌株原生质体制备及再生条件 被引量：11
5
作者 李淼 曾柏全 冯金儒 《中南林业科技大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期174-180,共7页
研究青霉菌Penicillium Q5和枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis K3原生质体制备与再生的最佳条件。采用酶解法制备了青霉菌和枯草芽孢杆菌的高质量的原生质体。试验对亲本菌株的菌丝生长,酶浓度,酶解时间和灭活时间进行了优化。亲本菌株Q5... 研究青霉菌Penicillium Q5和枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis K3原生质体制备与再生的最佳条件。采用酶解法制备了青霉菌和枯草芽孢杆菌的高质量的原生质体。试验对亲本菌株的菌丝生长,酶浓度,酶解时间和灭活时间进行了优化。亲本菌株Q5,培养液中加入浓度0.5%甘氨酸和含量10%的蔗糖处理后,在质量浓度均为10 mg/mL的溶菌酶和蜗牛酶(1︰1)酶解作用下,35℃处理3 h,原生质体生成量达到最大值,为7.35×106cfu/mL;亲本菌株K3,用4 U/mL的青霉素处理,在1 mg/mL的溶菌酶作用下,35℃处理1 h,原生质体形成率与再生率的乘积达到最大值,此时K3原生质体量为1.46×107cfu/mL。青霉菌在65℃热灭活的时间为1 h,紫外灭活时间为3 min;枯草芽孢杆菌在65℃热灭活的时间是2.5 h,紫外灭活时间为5 min。这为后续原生质体融合选育具有抗逆性的高产纤维素酶菌株打下基础。 展开更多
关键词 青霉菌Q5 枯草芽孢杆菌K3 原生质体制备 原生质体再生 原生质体灭活
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原生质体紫外线诱变选育无孢高产平菇的研究 被引量：7
6
作者 许襄中 夏道平 《食用菌学报》 1997年第2期11-15,共5页
本研究对无孢平菇菌株P22原生质体进行紫外线诱变处理,经拮抗试验,孢子印检测,扫描电镜和出菇试验,筛选出一株中低温型、高产、菇形好的无孢平菇突变菌株4-10。品比结果显示,4-10新菌株两年平均生物效率达112％,较出发菌株P22增产19.8％... 本研究对无孢平菇菌株P22原生质体进行紫外线诱变处理,经拮抗试验,孢子印检测,扫描电镜和出菇试验,筛选出一株中低温型、高产、菇形好的无孢平菇突变菌株4-10。品比结果显示,4-10新菌株两年平均生物效率达112％,较出发菌株P22增产19.8％,较对照菌株P51增产22.7％。研究结果表明,原生质体紫外线诱变是一种快速简便且有效的育种方法。 展开更多
关键词 诱变育种 无孢平菇 原生质体再生 紫外线
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黑木耳原生质体制备及再生的研究 被引量：11
7
作者 李楠 许修宏 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期34-37,共4页
文章用浓度为0.6mol·L-1的MgSO4·7H2O渗透压稳定剂配制浓度为1.5%的溶壁酶,在pH6.0,30℃条件下酶解3h,黑木耳原生质体产量达到最高值为9.2×106个·mL-1。最适合原生质体再生的培养基配方为:马铃薯20%,葡萄糖2%,MgSO4... 文章用浓度为0.6mol·L-1的MgSO4·7H2O渗透压稳定剂配制浓度为1.5%的溶壁酶,在pH6.0,30℃条件下酶解3h,黑木耳原生质体产量达到最高值为9.2×106个·mL-1。最适合原生质体再生的培养基配方为:马铃薯20%,葡萄糖2%,MgSO4·7H2O0.15%,蛋白胨0.1%,KH2PO40.1%,琼脂2%,甘露醇0.6mol·L-1,在此培养基中的再生率为33.09%。 展开更多
关键词 原生质体 原生质体再生 黑木耳
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果胶酶产生菌ZH-g的原生质体形成与再生研究 被引量：9
8
作者 朱宏莉 宋纪蓉 +4 位作者 张嘉 杨彬彬 徐抗震 黄洁 杨明琰 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第8期68-71,共4页
本文通过研究酶浓度、酶的作用时间、菌龄、菌体预处理等不同因素对原生质体形成与再生的影响,得出了果胶酶产生菌ZH-g原生质体制备和再生的最佳条件:加入0.6μg/ml的氨苄青霉素进行菌体预处理,选用对数生长期的菌株,以1.2mg/ml溶菌酶3... 本文通过研究酶浓度、酶的作用时间、菌龄、菌体预处理等不同因素对原生质体形成与再生的影响,得出了果胶酶产生菌ZH-g原生质体制备和再生的最佳条件:加入0.6μg/ml的氨苄青霉素进行菌体预处理,选用对数生长期的菌株,以1.2mg/ml溶菌酶37℃保温处理2h,原生质体形成率为92%,再生率达50.7%。 展开更多
关键词 果胶酶 细菌 原生质体制备 原生质体再生
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海洋低温蛋白酶生产菌YS-9412-130原生质体的制备与再生 被引量：7
9
作者 张琇 孙谧 +1 位作者 王清印 李国保 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期106-111,共6页
以海洋低温蛋白酶生产菌株YS-9412-130为研究对象,从传代、菌龄、溶菌酶浓度与酶解时间、甘氨酸与EDTA预处理以及稳定剂对该菌原生质体形成与再生的影响进行研究。结果表明,在相同条件下,第一代菌至第五代菌原生质体的形成率分别为86.9%... 以海洋低温蛋白酶生产菌株YS-9412-130为研究对象,从传代、菌龄、溶菌酶浓度与酶解时间、甘氨酸与EDTA预处理以及稳定剂对该菌原生质体形成与再生的影响进行研究。结果表明,在相同条件下,第一代菌至第五代菌原生质体的形成率分别为86.9%、70.3%、66.8%、63.4%、60.2%,再生率分别为10.5%、18.6%、17.9%、18.2%、17.8%;取该菌对数生长前期、对数生长中后期、稳定期部分菌液制备原生质体,原生质体的形成率分别为72.1%、70.4%、60.5%,再生率为13.4%、18.9%、10.4%;溶菌酶浓度为2.5 mg/mL5、mg/mL1、0 mg/mL、20 mg/mL,酶解60 min,原生质体的形成率分别为40.6%、70.8%、81.8%、95.6%,原生质体的再生率为19.0%、19.2%、19.0%、10.6%;使用10 mg/mL溶菌酶酶解YS-9412-130菌30 min、60 min、90 min、120 min,原生质体的形成率分别为30.8%、81.3%、81.7%、82.9%,原生质体的再生率分别为19.2%、19.3%、16.9%、11.2%;在细菌培养液中添加终质量浓度为5 mg/mL、10 mg/mL、20 mg/mL和40 mg/mL的甘氨酸,培养该菌16 h后制备原生质体,原生质体的形成率分别为81.0%、81.1%、90.3%、90.8%、90.6%,再生率为19.1%、19.0%、19.3%、12.0%、9.0%;EDTA对原生质体的形成稍有促进作用,但作用超过30 min会影响原生质体的再生;分别以0.6 mol/L KCl、0.3 mol/L KCl+0.3 mol/L蔗糖、0.6 mol/L蔗糖作为稳定剂,原生质体的再生率分别为10.9%、19.6%、25.9%。结论认为,YS-9412-130原生质体制备的最佳条件为选用第2代YS-9412-130菌,在培养基中添加终质度浓度为10 mg/mL的甘氨酸培养16 h后,再将菌体置于含有0.05 mol/L EDTA的高渗溶液中30℃预处理30 min,用10 mg/mL溶菌酶,30℃酶解60 min,再用0.6 mol/L蔗糖作为原生质体再生培养稳定剂,比较适合于YS-9412-130原生质体的制备与再生。这一试验结果将为通过原生质体技术对YS-9412-130菌进行遗传改良提供重要参数。[中国水产科学,2006,13(1):106-111] 展开更多
关键词 原生质体的制备与再生 低温碱性蛋白酶 YS-9412-130菌
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原生质体再生与诱变在硫霉素产生菌选育中的应用 被引量：5
10
作者 崔大鹏 石莲英 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期265-268,共4页
以硫霉素产生菌卡特利链霉菌３５８（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓｃａｔｌｅｙａ３５８）为原始菌株，用原生质体形成与再生结合物理、化学诱变的方法进行菌种选育。在最适条件下原生质体释放浓度和再生率分别为１．６×１０９／ｍｌ... 以硫霉素产生菌卡特利链霉菌３５８（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓｃａｔｌｅｙａ３５８）为原始菌株，用原生质体形成与再生结合物理、化学诱变的方法进行菌种选育。在最适条件下原生质体释放浓度和再生率分别为１．６×１０９／ｍｌ和２９．５％。原生质体再生处理后，硫霉素产量变异向正方向移动，筛选到１株ＰＲ－１１７，相对效价提高６０％。分别以菌株ＰＲ－１１７的孢子和原生质体进行紫外线及亚硫酸氢钠诱变，原生质体对诱变剂的敏感性强于孢子，致死率增加，效价分布更分散。原生质体与孢子紫外线诱变正变率分别为１６．５％和９％，亚硫酸氢钠诱变的正变率都为４％。从原生质体紫外线诱变株中筛选到１株ＰＲｕ－３３６，相对效价比原始菌株提高９０％。 展开更多
关键词 硫霉素 卡特利链霉菌 原生质体再生
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秦巴蛹虫草原生质体的制备及再生条件研究 被引量：9
11
作者 马跃腾 杜双田 +3 位作者 丁建 纪晓朋 鲍蕊 李珍 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2015年第9期196-202,209,共8页
【目的】研究秦巴蛹虫草原生质体制备及再生的最适条件,建立高效制备和再生原生质体的方法。【方法】以秦巴蛹虫草无性型菌株CM-16为材料,研究细胞壁裂解酶种类、酶解时间、酶解温度、菌丝体菌龄及稳渗剂种类对原生质体制备及再生效果... 【目的】研究秦巴蛹虫草原生质体制备及再生的最适条件,建立高效制备和再生原生质体的方法。【方法】以秦巴蛹虫草无性型菌株CM-16为材料,研究细胞壁裂解酶种类、酶解时间、酶解温度、菌丝体菌龄及稳渗剂种类对原生质体制备及再生效果的影响,并在单因素试验结果基础上进行正交优化试验。【结果】(1)以0.6mol/L NaCl为稳渗剂,用混合酶(质量分数1%纤维素酶和质量分数0.5%蜗牛酶按1∶1体积比混合)在(26±1)℃对菌龄6d的菌丝酶解3h,原生质体的产量最高。(2)以0.6mol/L甘露醇为稳渗剂,用混合酶(质量分数1%纤维素酶和质量分数0.5%蜗牛酶按1∶1体积比混合)在(26±1)℃对菌龄5d的菌丝酶解2h,原生质体的再生率最高;验证试验结果表明,在此条件下,原生质体再生率平均为25.7%,此时原生质体平均产量为83.42×105 mL-1。【结论】对酶解温度、酶解时间、菌丝体菌龄、稳渗剂及酶系种类等条件的优化,可提高秦巴蛹虫草原生质体的产量及再生率。 展开更多
关键词 秦巴蛹虫草 原生质体 原生质体制备 原生质体再生
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斜卧青霉原生质体制备和再生的研究 被引量：9
12
作者 赵晨 易宗春 +1 位作者 荣龙 孙艳 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2009年第1期18-21,共4页
研究了斜卧青霉原生质体制备和再生的条件,确定了培养方式、菌龄、渗透压稳定剂、酶的配比、酶解时间等因素对原生质体制备和再生的影响。最佳条件:菌丝体培养12h,用1%溶壁酶+1%纤维素酶+1%蜗牛酶的混合酶液酶解,将NaCl作为渗透压稳定剂... 研究了斜卧青霉原生质体制备和再生的条件,确定了培养方式、菌龄、渗透压稳定剂、酶的配比、酶解时间等因素对原生质体制备和再生的影响。最佳条件:菌丝体培养12h,用1%溶壁酶+1%纤维素酶+1%蜗牛酶的混合酶液酶解,将NaCl作为渗透压稳定剂,酶解时间为1.5h。在此条件下原生质体的形成量达到5.3×105个/mL,再生率为19.4%。 展开更多
关键词 斜卧青霉 原生质体制备 原生质体再生
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青稞酒曲中酿酒酵母与假丝酵母原生质体形成与再生条件的研究 被引量：6
13
作者 杜木英 陈娟 +3 位作者 阚建全 BATA-VIDACS Ildiko BECZNER Judit 陈宗道 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第9期378-383,共6页
本实验通过研究酶种类、菌龄、酶浓度及酶的作用时间、菌体预处理及渗透压稳定剂等不同因素对原生质体形成与再生的影响,得出了青稞酒曲酵母ZY2,ZY8原生质体制备和再生的最佳条件:酵母ZY2在菌龄为10h,0.1mol/LEDTA+0.1%β-巯基乙醇为预... 本实验通过研究酶种类、菌龄、酶浓度及酶的作用时间、菌体预处理及渗透压稳定剂等不同因素对原生质体形成与再生的影响,得出了青稞酒曲酵母ZY2,ZY8原生质体制备和再生的最佳条件:酵母ZY2在菌龄为10h,0.1mol/LEDTA+0.1%β-巯基乙醇为预处理剂作用10min;30℃下用1.5%的蜗牛酶酶解1h;酵母ZY8在菌龄为10h,0.1mol/LEDTA+20mmol/L2-硫苏糖醇混合于蜗牛酶1.5%+溶壁酶1%的酶解体系中,30℃下酶解1h;配制酶解液时渗透压稳定剂采用0.7mol/LKC1,在稀释及配制再生培养基时采用17%蔗糖的条件下,酵母ZY2形成率达94.15%,再生率达13.85%;酵母ZY8形成率达88.78%,再生率达23.02%。 展开更多
关键词 青稞酒曲 酿酒酵母 假丝酵母 原生质体制备 原生质体再生
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红酵母原生质体制备和再生条件研究 被引量：7
14
作者 詹萍 苏龙 周乃东 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第3期1154-1155,1172,共3页
［目的］初步探讨红酵母原生质体制备和再生的条件。［方法］以红酵母为试材，研究渗透压稳定剂pH值、酶浓度、酶解时间、预处理时间4个因素对红酵母原生质体制备率和再生率的影响。［结果］pH值在6.5～7.0，原生质体的制备率和再生率... ［目的］初步探讨红酵母原生质体制备和再生的条件。［方法］以红酵母为试材，研究渗透压稳定剂pH值、酶浓度、酶解时间、预处理时间4个因素对红酵母原生质体制备率和再生率的影响。［结果］pH值在6.5～7.0，原生质体的制备率和再生率随着渗透压稳定剂pH值的升高而上升。当酶浓度从0.2%上升到1.0%时，原生质体制备率上升较快，而原生质体再生率下降较慢。随着酶解时间的增加，原生质体的制备率逐渐增加，而原生质体的再生率逐渐下降。在5～15 min，原生质体制备率和再生率均随着预处理的时间的增加而降低。［结论］当渗透压稳定剂pH值为7.0，蜗牛酶酶浓度为1.0%，酶解时间为60 min，预处理时间为5 min时，原生质体的制备率和再生率能分别达到较高的值。 展开更多
关键词 红酵母 原生质体制备 原生质体再生
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秦岭链霉菌的原生质体再生与诱变育种 被引量：7
15
作者 卞小莹 吴文君 +1 位作者 王群利 方丽萍 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期929-933,共5页
在秦岭链霉菌(Streptomyces qinlingensis sp.nov.)的菌种改良中,应用原生质体再生并结合物理化学诱变能够得到产量较高、稳定性较好的菌株。筛选实验表明:秦岭链霉菌原生质体再生菌株R-72、诱变菌株NTG-1和H30-7对枯草芽孢杆菌的抗菌... 在秦岭链霉菌(Streptomyces qinlingensis sp.nov.)的菌种改良中,应用原生质体再生并结合物理化学诱变能够得到产量较高、稳定性较好的菌株。筛选实验表明:秦岭链霉菌原生质体再生菌株R-72、诱变菌株NTG-1和H30-7对枯草芽孢杆菌的抗菌活性均提高了20%以上,并且连续培养10代,其遗传性状均比较稳定。进一步的生测实验表明菌株R-72、NTG-1和H30-7对5种病原细菌和5种植物病原真菌的抗菌活性相比原始菌株有显著提高。 展开更多
关键词 秦岭链霉菌 原生质体再生 原生质体诱变 筛选
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基于等位基因InDel快速检测黑木耳原生质体单核体 被引量：8
16
作者 范秀芝 周雁 边银丙 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期273-279,共7页
以黑木耳Auricularia auricula‐judae栽培菌株Au916三磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)两个等位基因中的InDel为基础,以原生质体再生菌株为研究材料,建立了基于InDel的黑木耳原生质体单核体检测技术,并采用荧光显微镜检和配对试验对此方法进行... 以黑木耳Auricularia auricula‐judae栽培菌株Au916三磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)两个等位基因中的InDel为基础,以原生质体再生菌株为研究材料,建立了基于InDel的黑木耳原生质体单核体检测技术,并采用荧光显微镜检和配对试验对此方法进行了验证。应用InDel能清晰地区分黑木耳双核体和两种原生质体单核体,且不同的单核体之间可以进行交配,其杂交双核体能正常出耳,结果表明基于等位基因InDel标记可以快速准确地检测黑木耳原生质体单核体。在大规模测序获得真菌基因组信息的基础上,InDel标记在原生质体单核体鉴定中的应用将更加普遍。 展开更多
关键词 黑木耳 等位基因 INDEL 原生质体再生 单核体 GAPDH 荧光显微镜检
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草菇原生质体制备、再生条件的响应面法优化及诱变效应 被引量：8
17
作者 王金斌 李文 +4 位作者 张俊沛 赵妍 陈建中 祝子坪 唐雪明 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期4110-4119,共10页
为了提高草菇原生质体在筛选耐低温突变筛选的诱变效率,建立基于草菇原生质体制备产量及再生率的响应面模型,优化草菇原生质体制备体系。本研究以草菇V23为材料,利用Design-Expert 8.0.6软件进行二次回归分析对参数菌龄、酶的浓度、酶... 为了提高草菇原生质体在筛选耐低温突变筛选的诱变效率,建立基于草菇原生质体制备产量及再生率的响应面模型,优化草菇原生质体制备体系。本研究以草菇V23为材料,利用Design-Expert 8.0.6软件进行二次回归分析对参数菌龄、酶的浓度、酶解时间、酶解温度等进行了系统的优化研究。结果表明,溶壁酶的浓度为1.71%,酶解温度为31.4℃,菌丝体菌龄为3.42 d,酶解时间为3.21 h,草菇原生质体产量最高,达到2.57×107个/m L;用1.84%的溶壁酶在31.2℃条件下对菌龄为3.68 d的菌丝体酶解3.38 h,原生质体再生率最高,为14.1%。并利用紫外诱变和化学诱变技术对草菇原生质体进行了耐低温诱变初探,筛选获得5株抗冻能力提高的突变菌株。草菇V23原生质体产量和再生率的优化条件的建立,为提高草菇在遗传转化、基因组重排、基因编辑技术等后续分子遗传学操作实验打下了良好的基础。 展开更多
关键词 草菇 原生质体制备 原生质体再生 响应面分析法 诱变
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禾谷镰孢原生质体的形成与再生 被引量：6
18
作者 徐敬友 胡广淦 +1 位作者 童蕴慧 李清铣 《江苏农学院学报》 CSCD 1997年第2期71-73,共3页
研究报道了制备禾谷镰孢（ＦｕｓａｒｉｕｍｇｒａｍｉｎｅａｒｕｍＳｃｈｗ．）原生质体的方法及影响原生质体再生的条件。ＰＤＳ培养液中培养的菌丝和５％绿豆汁中产生的分生孢子，在２８℃下通过蜗牛酶（３％）、蜗牛酶＋纤维素酶＋... 研究报道了制备禾谷镰孢（ＦｕｓａｒｉｕｍｇｒａｍｉｎｅａｒｕｍＳｃｈｗ．）原生质体的方法及影响原生质体再生的条件。ＰＤＳ培养液中培养的菌丝和５％绿豆汁中产生的分生孢子，在２８℃下通过蜗牛酶（３％）、蜗牛酶＋纤维素酶＋溶菌酶（１．５％＋１．５％＋１．５％）酶解，２ｈ开始有原生质体释放，５ｈ左右达释放高峰，后趋于稳定。而以纤维素酶（３％）、溶菌酶（３％）、蜗牛酶＋纤维素酶（１．５％＋１．５％）、蜗牛酶＋溶菌酶（１．５％＋１．５％）、纤维素酶＋溶菌酶（１．５％＋１．５％）处理，原生质体形成效果较差。原生质体在ＰＤＡＳ高渗培养基上再生频率较高（２０％～３０％），在ＭＭＳ上再生频率较低，而在ＮＭＳ上原生质体则不能再生。 展开更多
关键词 禾谷镰孢 原生质体形成 原生质体再生
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平菇原生质体制备及再生培养研究 被引量：7
19
作者 沈爱喜 张诚 +1 位作者 涂寿兰 廖禺 《江西农业学报》 CAS 1998年第1期51-55,共5页
平菇菌丝原生质体的释放以菌龄４～６ｄ的幼嫩菌丝，用２％Ｌｙｗａｌｚｙｍｅ采用０．６ＭＫＣｌ为渗稳剂在ｐＨ值为５．５、温度为３５℃、酶解２～２．５ｈ生长较好，可达１０７个／ｍＬ，孢子释放原生质体在１．５％溶壁酶和１．５... 平菇菌丝原生质体的释放以菌龄４～６ｄ的幼嫩菌丝，用２％Ｌｙｗａｌｚｙｍｅ采用０．６ＭＫＣｌ为渗稳剂在ｐＨ值为５．５、温度为３５℃、酶解２～２．５ｈ生长较好，可达１０７个／ｍＬ，孢子释放原生质体在１．５％溶壁酶和１．５％纤维素酶混合作用，同样外界条件下原生质体转化率可达１００％。原生质体再生以２号培养基在０．６Ｍ甘露醇的作用下，用载片悬浮滴式再生法，再生率可达１２．３％。 展开更多
关键词 平菇 原生质体制备 原生质体再生
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桧状青霉原生质体制备和再生的研究 被引量：7
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作者 张粲 高乐 +4 位作者 赫荣琳 王国坤 于俊杰 武改红 张东远 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期57-62,共6页
本文对桧状青霉H16的原生质体制备和再生的相关影响因子进行了初步的研究。结果表明:于30℃,转速为200 r/min的SDYS培养基中培养了16 h的菌丝,经S1溶液洗涤后,在1 mol/L的NaCl为等渗溶液,采用浓度为10 mg/mL的酶液,酶解温度为35℃,转速... 本文对桧状青霉H16的原生质体制备和再生的相关影响因子进行了初步的研究。结果表明:于30℃,转速为200 r/min的SDYS培养基中培养了16 h的菌丝,经S1溶液洗涤后,在1 mol/L的NaCl为等渗溶液,采用浓度为10 mg/mL的酶液,酶解温度为35℃,转速为100 r/min的条件下处理1.5 h时原生质体量达到最佳,本实验范围内最高达到6×106个/mL;同时,选取含有25 mmol/L Ca2+的改良的察氏培养基培养经S2洗涤的原生质体时,原生质体可以达到较佳的再生率,本实验范围内最高达到24.3%。该研究为桧状青霉后期的菌株改造和遗传转化体系的建立奠定了基础。 展开更多
关键词 桧状青霉 原生质体制备 原生质体再生
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