期刊文献+
共找到114篇文章
< 1 2 6 >
每页显示 20 50 100
中国水仙DFR基因启动子的克隆及功能 被引量:8
1
作者 姚红 周平 +3 位作者 范雨昕 孙瑞琦 Muhammad Anwar 曾黎辉 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期993-998,共6页
为了解中国水仙花青素合成途径关键基因DFR(NtDFR)的表达调控以及中国水仙不能合成花青素的分子机制,采用染色体步移法从中国水仙中克隆NtDFR基因起始密码子上游962 bp的启动子序列.生物信息学分析结果表明启动子序列除包含TATA-box、CA... 为了解中国水仙花青素合成途径关键基因DFR(NtDFR)的表达调控以及中国水仙不能合成花青素的分子机制,采用染色体步移法从中国水仙中克隆NtDFR基因起始密码子上游962 bp的启动子序列.生物信息学分析结果表明启动子序列除包含TATA-box、CAAT-box等基本启动子元件外,还包含光调控元件、植物激素响应元件、胁迫响应元件等多个顺式作用元件.此外,该启动子序列还含有MYB转录因子结合位点.为验证启动子的表达特性,将NtDFR启动子取代植物表达载体pBI121上35S启动子,构建pBI121-pNtDFR::GUS载体,利用农杆菌转化烟草叶片瞬时表达,通过GUS组织染色法确定了克隆的启动子的活性.将中国水仙R2R3-MYB转录因子NtMYB2、NtMYB5分别和pBI121-pNtDFR::GUS共同注射烟草,定量PCR和GUS组织化学染色结果表明NtMYB2和NtMYB5都使NtDFR启动子诱导的烟草叶片GUS颜色变浅以及GUS基因表达量下降,表明NtMYB2和NtMYB5是NtDFR的抑制因子.本研究结果有助于了解中国水仙花青素合成途径的分子调控机制. 展开更多
关键词 中国水仙 二氢黄酮醇4-还原酶基因 启动子 功能鉴定
原文传递
一种基于特征筛选的原核生物启动子判别分析方法 被引量:6
2
作者 杜耀华 王正志 +1 位作者 倪青山 李冬冬 《生物物理学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期39-48,共10页
启动子识别是研究基因转录调控的重要环节,但目前方法的识别正确率偏低。在深入分析原核启动子特征的基础上,提出了一种基于特征筛选的原核启动子判别分析方法,首先在启动子序列的组成特征、信号特征和结构特征中选取备选特征,为每个特... 启动子识别是研究基因转录调控的重要环节,但目前方法的识别正确率偏低。在深入分析原核启动子特征的基础上,提出了一种基于特征筛选的原核启动子判别分析方法,首先在启动子序列的组成特征、信号特征和结构特征中选取备选特征,为每个特征建立适当的描述模型,并对主要的保守模式采用复合模式模型;再通过模型计算对备选特征进行逐步筛选,优化特征集,将序列表示为组合特征向量;最终利用二次判别分析实现识别。对大肠杆菌和枯草杆菌实际启动子数据进行的刀切法测试验证了方法的有效性和通用性。对于大肠杆菌非编码区(70启动子,识别的平均正确率达到了85.8%,优于其它几种典型识别方法;对于大肠杆菌编码区内部)70启动子和其它几种原核启动子,平均正确率也都超过了80%。方法框架还具有良好的可扩展性,能够方便地容纳新特征,使识别性能不断提高。 展开更多
关键词 原核生物 启动子识别 复合模式 特征筛选 二次判别分析 刀切法
下载PDF
杨树木质部特异启动子的分离与功能分析 被引量:6
3
作者 张爽 杜克久 李成德 《江西农业学报》 CAS 2006年第5期105-108,117,共5页
从三倍体毛白杨-93(Populus tomentosaCarr.)中分离得到了MDCesAP这一木质部纤维素合酶基因启动子。通过对其进行序列分析,发现A/T含量达63%,有TATA box、polyA等启动子调控元件。与PTCesAP比较,同源性较低。用MDCesAP分别替换PCAMB IA1... 从三倍体毛白杨-93(Populus tomentosaCarr.)中分离得到了MDCesAP这一木质部纤维素合酶基因启动子。通过对其进行序列分析,发现A/T含量达63%,有TATA box、polyA等启动子调控元件。与PTCesAP比较,同源性较低。用MDCesAP分别替换PCAMB IA1302及PB I121中的CaMV 35S启动子,转入植物后检测目的片段的启动子功能,结果表明MDCesAP为木质部特异性启动子。 展开更多
关键词 木质部纤维素合酶基因 启动子 序列分析 功能鉴定
下载PDF
Functional Analysis of Nodulin-like Promoter in Transgenic Cotton Plants 被引量:3
4
作者 Mao-Zhi REN Quan-Jia CHEN +2 位作者 Li LI Rui ZHANG San-Dui GUO 《Journal of Integrative Plant Biology》 SCIE CAS CSCD 2005年第10期1254-1259,共6页
For the first time, a nodulin-like gene promoter was isolated from Gossypium hirsutum L. Guo Y 18 by means of inverse PCR. Three plant expression vectors were constructed for functional identification of the promoter.... For the first time, a nodulin-like gene promoter was isolated from Gossypium hirsutum L. Guo Y 18 by means of inverse PCR. Three plant expression vectors were constructed for functional identification of the promoter. These vectors were different only in promoter regions; three truncations of the nodulinlike promoter took the place of the CaMV35S promoter in the pBI 121 plant expression vector. Then, the three vectors were introduced into cotton plants via the pollen tube pathway. The expression patterns of the gus gene driven by nodulin-like promoter truncations were investigated in the offspring of transgenic cotton plants. Histochemical GUS staining and fluorescence quantitative analysis were performed to achieve this goal. The results showed that the nodulin-like promoter was a strong, highly reproductive organspecific promoter, which demonstrated a much higher driver activity than the CaMV35S promoter did in cotton reproductive organs, but relatively lower activity in vegetation. Identification of the speciality and strength-determining regions of the nodulin-like promoter was also undertaken. 展开更多
关键词 cotton plant functional identification nodulin-like promoter predominant expression reproductive organ.
原文传递
小桐子低温诱导型启动子JcDnaJ20p的克隆及烟草转化功能鉴定 被引量:4
5
作者 王海波 郭俊云 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期24-31,共8页
低温转录组数据显示,DnaJ20是小桐子低温诱导基因。为鉴定该基因启动子的低温诱导活性,基于PCR技术从小桐子叶片基因组DNA中克隆到DnaJ20基因(JcDna20)启动子序列,命名为JcDnaJ20p,利用重组技术构建了JcDnaJ20p启动子驱动GUS标记基因的... 低温转录组数据显示,DnaJ20是小桐子低温诱导基因。为鉴定该基因启动子的低温诱导活性,基于PCR技术从小桐子叶片基因组DNA中克隆到DnaJ20基因(JcDna20)启动子序列,命名为JcDnaJ20p,利用重组技术构建了JcDnaJ20p启动子驱动GUS标记基因的植物双元表达载体pCambia1381Z-JcDnaJ20p-GUS,并通过农杆菌介导转化烟草进行功能解析。结果表明,克隆的小桐子DnaJ20基因启动子序列长度2023 bp,序列分析显示该启动子中具有真核生物典型的核心启动子区元件TATAbox和CAAT-box,另外,还鉴定到激素如脱落酸、赤霉素响应元件与植物抗逆性相关如低温、干旱胁迫响应元件。以转化空质粒pCambia1381Z-GUS与35S启动子驱动pCambia1381Z-35S-GUS的烟草为对照,对转化pCambia1381Z-JcDnaJ20p-GUS的烟草叶片分别进行15、4℃低温处理24 h,通过GUS组织化学染色表明,JcDnaJ20p在低温处理下能够提高GUS基因的表达量,具有低温诱导启动子活性。 展开更多
关键词 小桐子 低温诱导 启动子 DnaJ20 基因克隆 功能鉴定
下载PDF
A novel voting system for the identification of eukaryotic genome promoters
6
作者 Lin Lei Kaiyan Feng +1 位作者 Zhisong He Yudong Cai 《Journal of Biomedical Science and Engineering》 2010年第7期719-726,共8页
Motivation: Accurate identification and delineation of promoters/TSSs (transcription start sites) is important for improving genome annotation and devising experiments to study and understand transcriptional regulatio... Motivation: Accurate identification and delineation of promoters/TSSs (transcription start sites) is important for improving genome annotation and devising experiments to study and understand transcriptional regulation. Many promoter identifiers are developed for promoter identification. However, each promoter identifier has its own focuses and limitations, and we introduce an integration scheme to combine some identifiers together to gain a better prediction performance. Result: In this contribution, 8 promoter identifiers (Proscan, TSSG, TSSW, FirstEF, eponine, ProSOM, EP3, FPROM) are chosen for the investigation of integration. A feature selection method, called mRMR (Minimum Redundancy Maximum Relevance), is novelly transferred to promoter identifier selection by choosing a group of robust and complementing promoter identifiers. For comparison, four integration methods (SMV, WMV, SMV_IS, WMV_IS), from simple to complex, are developed to process a training dataset with 1400 se- quences and a testing dataset with 378 sequences. As a result, 5 identifiers (FPROM, FirstEF, TSSG, epo- nine, TSSW) are chosen by mRMR, and the integration of them achieves 70.08% and 67.83% correct prediction rates for a training dataset and a testing dataset respectively, which is better than any single identifier in which the best single one only achieves 59.32% and 61.78% for the training dataset and testing dataset respectively. 展开更多
关键词 MRMR (Minimum REDUNDANCY Maximum Relevance) TRANSCRIPTION START Sites (TSS) promoter identification promoter IDENTIFIER Integration
下载PDF
Paramyrothecium roridum中单端孢霉烯毒素生物合成基因启动子的克隆和功能鉴定 被引量:2
7
作者 岑由飞 朱牧孜 +3 位作者 叶伟 李赛妮 钟国华 章卫民 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期85-94,共10页
利用染色体步移技术对植物内生真菌Paramyrothecium roridum中单端孢霉烯毒素的生物合成基因tri5、tri12启动子进行克隆,分别利用原核和真核表达系统以及荧光素酶表达系统对启动子核心区域进行鉴定,发现tri12的启动子片段12-f1对氨苄青... 利用染色体步移技术对植物内生真菌Paramyrothecium roridum中单端孢霉烯毒素的生物合成基因tri5、tri12启动子进行克隆,分别利用原核和真核表达系统以及荧光素酶表达系统对启动子核心区域进行鉴定,发现tri12的启动子片段12-f1对氨苄青霉素抗性基因和潮霉素抗性基因表达的启动效率最高,tri5的启动子片段5-f0对荧光素酶基因表达的启动效率最高;同时对启动子的功能组件进行分析,发现tri5含有TATA box和CAAT box,而tri12是TATA-less启动子,但含有CAAT box和GC box。本研究为强启动子的筛选及单端孢霉烯类化合物的高效生物合成奠定基础。 展开更多
关键词 Paramyrothecium roridum 单端孢霉烯族毒素 启动子 克隆 鉴定
下载PDF
芜菁花青素合成关键酶DFR基因启动子的克隆及功能分析 被引量:2
8
作者 许志茹 马静 +1 位作者 崔国新 李玉花 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期1631-1641,共11页
在已经克隆的‘津田’芜菁和‘赤丸’芜菁二氢黄酮醇4–还原酶(DFR)基因的基础上,通过染色体步移法从两种芜菁基因组中克隆了BrDFR1和BrDFR2基因上游1 296和1 297 bp的启动子序列。生物信息学分析表明,启动子片段中包含TATA box、CAAT ... 在已经克隆的‘津田’芜菁和‘赤丸’芜菁二氢黄酮醇4–还原酶(DFR)基因的基础上,通过染色体步移法从两种芜菁基因组中克隆了BrDFR1和BrDFR2基因上游1 296和1 297 bp的启动子序列。生物信息学分析表明,启动子片段中包含TATA box、CAAT box、光调控元件、ABA应答元件、伤害应答元件、低温应答元件、防御与胁迫应答元件、MeJA应答元件等多个顺式作用元件。启动子BrDFR1P和BrDFR2P仅在15个核苷酸位点存在差异。将BrDFR1P和BrDFR2P分别连接到pCAMBIA1301植物表达载体上,构建Promoter::GUS载体,通过农杆菌介导遗传转化烟草。GUS组织化学染色检测表明,BrDFR1P和BrDFR2P均能驱动GUS基因表达。构建BrDFR1P和BrDFR2P的一系列缺失体,融合GUS基因后遗传转化烟草。染色结果表明,BrDFR1P和BrDFR2P缺失片段均具有相应的起始下游基因转录的活性特征。 展开更多
关键词 芜菁 二氢黄酮醇4–还原酶基因 启动子 功能鉴定
原文传递
马铃薯sgt3基因启动子克隆及其功能鉴定 被引量:2
9
作者 魏桂民 李德文 +4 位作者 罗莉斯 王少铭 王军 张金文 王蒂 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期32-38,共7页
【目的】克隆马铃薯茄啶鼠李糖基转移酶基因(sgt3)的启动子序列并对其进行功能鉴定.【方法】采用染色体步移技术(genome walking)进行启动子的克隆,构建了该启动子驱动报告基因gfp::gus的植物双元表达载体p1304sgt3p,以pCAMBIA1304为阳... 【目的】克隆马铃薯茄啶鼠李糖基转移酶基因(sgt3)的启动子序列并对其进行功能鉴定.【方法】采用染色体步移技术(genome walking)进行启动子的克隆,构建了该启动子驱动报告基因gfp::gus的植物双元表达载体p1304sgt3p,以pCAMBIA1304为阳性对照表达载体,采用农杆菌介导的烟草叶片瞬时表达及稳定遗传转化,结合GUS组织化学染色对其进行功能鉴定.【结果】电泳图表明为1条长约2 500bp的特异扩增条带,瞬时表达和稳定遗传表达的烟草叶片的GUS组织化学染色结果均显示gus基因在转化烟草叶片中高效表达,并且低于阳性对照,非转化烟草叶片中无表达.【结论】成功克隆到sgt3基因起始密码子上游2392bp的启动子序列并且该启动子具有活性. 展开更多
关键词 马铃薯 茄啶鼠李糖基转移酶 启动子克隆 功能鉴定
下载PDF
猪CYP11A1基因编码区扩增及核心启动子区的鉴定与分析 被引量:1
10
作者 曾强 关钦泽 +2 位作者 王思琪 李齐发 杜星 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期743-751,共9页
[目的]本文旨在扩增猪CYP 11A1基因编码区,鉴定并分析其核心启动子区,探究猪CYP 11A1基因的转录调控机制。[方法]通过基因克隆测序技术获得猪CYP 11A1基因编码区全序列并对其序列特征进行分析;利用荧光素酶活性鉴定猪CYP 11A1基因核心... [目的]本文旨在扩增猪CYP 11A1基因编码区,鉴定并分析其核心启动子区,探究猪CYP 11A1基因的转录调控机制。[方法]通过基因克隆测序技术获得猪CYP 11A1基因编码区全序列并对其序列特征进行分析;利用荧光素酶活性鉴定猪CYP 11A1基因核心启动子区,再通过生物信息学分析猪CYP 11A1基因核心启动子区潜在的甲基化位点与转录因子结合位点;利用Western blot、RT-qPCR以及染色质免疫沉淀(ChIP)等分子生物学手段解析转录因子NR2C1对猪CYP 11A1基因的转录调控功能。[结果]猪CYP 11A1基因的编码区序列全长为1563 bp,在哺乳动物的进化过程中高度保守;猪CYP 11A1基因的核心启动子区为-398~-108 bp(转录起始位点为+1),序列特征分析发现猪CYP 11A1基因核心启动子区包含多个潜在的转录因子的结合元件,包括NR2C1、SOX10、NFIX和ELF5等;另外,转录因子NR2C1可促进猪CYP 11A1基因核心启动子区活性,同时显著上调体外培养的猪卵巢颗粒细胞中CYP 11A1基因的表达。[结论]哺乳动物CYP 11A1基因在进化过程中高度保守,转录因子NR2C1能够促进猪卵巢颗粒细胞中CYP 11A1基因的转录。 展开更多
关键词 CYP11A1基因 核心启动子 鉴定 分析 NR2C1 转录调控
下载PDF
花生AhDGAT1基因启动子的克隆与功能验证 被引量:1
11
作者 张会 郑玲 +5 位作者 万书波 李新国 郭峰 单雷 高文伟 彭振英 《山东农业科学》 2017年第7期1-6,11,共7页
二酰基甘油酰基转移酶(DGAT)是三酰基甘油(TAG)生物合成过程的限速酶。在本研究中,通过染色体步移法从栽培花生品种鲁花14基因组中克隆了AhDGAT1的启动子(pAhDGAT1)序列,并通过生物信息学分析发现该启动子含有多个TATA-box、CAAT-box、... 二酰基甘油酰基转移酶(DGAT)是三酰基甘油(TAG)生物合成过程的限速酶。在本研究中,通过染色体步移法从栽培花生品种鲁花14基因组中克隆了AhDGAT1的启动子(pAhDGAT1)序列,并通过生物信息学分析发现该启动子含有多个TATA-box、CAAT-box、光调控元件、胁迫防御相关元件和激素响应元件。利用农杆菌介导法将pAhDGAT1∶GUS植物表达载体转化烟草叶片。通过GUS染色发现在转基因烟草营养器官和生殖器官中均检测到GUS表达,在花丝和花柱中表达较低,而在柱头、花药和种子中表达较高,表明pAhDGAT1表达没有组织特异性,具有组成型启动子的特征。 展开更多
关键词 花生 AhDGAT1基因 启动子 GUS染色 功能验证
下载PDF
深海真菌Dichotomomyces cejpii胶霉毒素生物合成基因启动子的克隆和功能鉴定 被引量:1
12
作者 黄自磊 章卫民 +3 位作者 叶伟 李赛妮 李浩华 朱牧孜 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期144-150,共7页
利用染色体步移技术对深海真菌Dichotomomyces cejpii中胶霉毒素的生物合成基因Gli G、Gli I和Gli O启动子进行克隆,并将其核心区域导入p GL3-basic荧光素酶报告基因载体,通过荧光强度分析发现Gli G的启动子转录活性最强。进一步将Gli ... 利用染色体步移技术对深海真菌Dichotomomyces cejpii中胶霉毒素的生物合成基因Gli G、Gli I和Gli O启动子进行克隆,并将其核心区域导入p GL3-basic荧光素酶报告基因载体,通过荧光强度分析发现Gli G的启动子转录活性最强。进一步将Gli G启动子核心区域导入含潮霉素抗性标记的p AN7-1载体,以替换原有启动子pgpd A,并将重组质粒导入酿酒酵母,用潮霉素抗性平板进行筛选,发现Gli G启动子能在酿酒酵母中启动潮霉素抗性基因的表达。 展开更多
关键词 Dichotomomyces cejpii 胶霉毒素 启动子 克隆 鉴定 海洋真菌
下载PDF
高粱高效Ubiquitin启动子的克隆及活性鉴定
13
作者 夏启玉 贺萍萍 +3 位作者 张丽丽 张雨良 肖苏生 赵辉 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2022年第12期2443-2452,共10页
在转基因植物的研究中,启动子是影响转基因表达效率的重要因素之一。植物泛素(ubiquitin)基因启动子以启动效率高、甲基化程度相对较低、遗传性状稳定等特点成为单子叶植物中应用较为广泛的启动子。其中,玉米的Ubi-1是最常使用的Ubiqui... 在转基因植物的研究中,启动子是影响转基因表达效率的重要因素之一。植物泛素(ubiquitin)基因启动子以启动效率高、甲基化程度相对较低、遗传性状稳定等特点成为单子叶植物中应用较为广泛的启动子。其中,玉米的Ubi-1是最常使用的Ubiquitin启动子之一。本研究旨在克隆高粱高效Ubiquitin启动子,为高粱及其他单子叶植物的遗传转化研究提供新的组成型启动子选择。本研究从NCBI数据库中查找到多个polyubiquitin基因,下载其起始密码子上游3000 bp的序列。根据Ubiquitin启动子的特点,选择含有5′UTR内含子且大小合适的序列,并通过在线启动子预测网站进行启动子分析,最后选择2个基因(LOC8076096、LOC8063786)进行启动子克隆,将其启动子序列分别命名为U1和U5。将这2个启动子片段PCR扩增后,连入含有GUS报告基因的植物表达载体Ubi-GUS,得到重组表达载体U1-GUS和U5-GUS。重组载体通过农杆菌介导法转化水稻和狗尾草,PCR筛选阳性转化苗,对阳性转化苗进行GUS染色分析,鉴定U1和U5的启动子活性。GUS染色观察发现,所有以U1和U5为启动子的水稻和狗尾草阳性转化苗的根、茎和叶均呈现较深的蓝色,比以玉米Ubi-1为启动子的阳性转化苗的蓝色略深,且以U5为启动子的阳性转化苗比以U1为启动子的蓝色更深,而非转基因的水稻和狗尾草小苗则完全染不上蓝色。因此,启动子U1和U5在水稻和狗尾草中均具有组成型强启动子的活性,可作为新的组成型启动子应用于高粱、水稻、狗尾草及其他单子叶植物的遗传转化研究。 展开更多
关键词 高粱 泛素基因 启动子 克隆 活性鉴定
下载PDF
肝脏特异性表达人遗传印记基因PEG10转基因载体的构建和鉴定 被引量:1
14
作者 刘瑶 林菊生 +4 位作者 熊杰 谭锦泉 张强 常莹 任精华 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2008年第12期982-986,共5页
目的构建小鼠肝脏特异性表达人遗传印记基因PEG10的转基因载体pALB-PEG10-EGFP,为制备转基因小鼠做准备。方法RT-PCR扩增PEG10基因cDNA序列,克隆入T载体进行酶切、测序鉴定,后将其定向克隆至真核表达载体pALB-EGFP中ALB的下游,构建转基... 目的构建小鼠肝脏特异性表达人遗传印记基因PEG10的转基因载体pALB-PEG10-EGFP,为制备转基因小鼠做准备。方法RT-PCR扩增PEG10基因cDNA序列,克隆入T载体进行酶切、测序鉴定,后将其定向克隆至真核表达载体pALB-EGFP中ALB的下游,构建转基因载体pALB-PEG10-EGFP;在Lipofectamine介导下转染L02细胞,经G418抗性筛选,挑选阳性克隆并扩大培养;采用RT-PCR、Western blot、免疫细胞化学等方法分析PEG10在L02细胞中的表达和细胞内定位。结果酶切和测序结果表明pALB-PEG10-EGFP构建成功;稳定转染后的L02表达有PEG10的mRNA及蛋白,且主要定位于胞浆。结论重组体pALB-PEG10-EGFP的构建初步奠定了转基因小鼠制备的基础。 展开更多
关键词 遗传印记基因 PEG10 白蛋白启动子 转基因载体 鉴定
下载PDF
解肝磷脂土地杆菌(Pedobacter heparinus)源唾液酸醛缩酶基因的异源表达及其活性研究
15
作者 郭娟 曹翠 +2 位作者 李玉泉 刘丽 Josef Voglmeir 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2019年第5期136-143,共8页
为发掘新型唾液酸醛缩酶,使其在大肠杆菌中得到高效表达,本研究首次从菌株Pedobacter heparinus中克隆疑似编码唾液酸醛缩酶的PhNeuLy3300基因片段,并构建可自主表达异源蛋白的组成型表达载体pRSF-EM5。在此基础上将克隆的目的基因分别... 为发掘新型唾液酸醛缩酶,使其在大肠杆菌中得到高效表达,本研究首次从菌株Pedobacter heparinus中克隆疑似编码唾液酸醛缩酶的PhNeuLy3300基因片段,并构建可自主表达异源蛋白的组成型表达载体pRSF-EM5。在此基础上将克隆的目的基因分别导入该pRSF-EM5载体和常用的诱导型载体p ET-30a,构建重组质粒pET30aPhNeuLy3300和pRSF-EM5-PhNeuLy3300,经大肠杆菌表达系统异源表达目的蛋白,并进一步对两种重组蛋白酶进行电泳分析和活性研究。结果表明:编码唾液酸醛缩酶的基因片段全长为945 bp,共编码314个氨基酸残基;聚丙烯酰胺凝胶电泳显示两种重组蛋白表观分子量约为36.4 kDa,纯化后的pET30a-Ph Neu Ly3300重组蛋白浓度为3.29 mg/mL,证明经异源表达获得了两种重组目的蛋白酶;活性研究显示两种重组唾液酸醛缩酶均能在1 h内催化N-乙酰神经氨酸生成N-乙酰甘露糖胺,证明两种重组蛋白酶均具有较高的活性。 展开更多
关键词 唾液酸醛缩酶 诱导型启动子 组成型启动子 大肠杆菌表达 活性鉴定
下载PDF
基于改进马尔可夫模型的启动子预测算法
16
作者 孔帆帆 李宏 +1 位作者 李号双 尹翔 《计算机工程与科学》 CSCD 2007年第12期82-84,86,共4页
本文实现了基于马尔可夫模型的启动子预测算法,结合隐马尔可夫模型中的前向算法,改进了基于马尔可夫理论的启动子预测方法,具体改进了碱基转移概率的算法和序列所在模型的概率。改进的马尔可夫模型的预测结果显示,以此模型建立的系统能... 本文实现了基于马尔可夫模型的启动子预测算法,结合隐马尔可夫模型中的前向算法,改进了基于马尔可夫理论的启动子预测方法,具体改进了碱基转移概率的算法和序列所在模型的概率。改进的马尔可夫模型的预测结果显示,以此模型建立的系统能更有效地识别数据集中的三种序列。 展开更多
关键词 启动子识别 马尔可夫模型 前向算法
下载PDF
小鼠PD-1基因启动子克隆鉴定及转录调控分析
17
作者 郑花鸯 汤必奎 +4 位作者 王培伟 高方健 胡晓波 龚立 朱乃硕 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2010年第5期527-533,共7页
PD-1分子是一种重要的免疫调控因子,目前对其自身表达调控尚未有系统的研究.对PD-1启动子区域进行分析,克隆构建了含PD-1基因上游约2kb范围内含4种不同长度调控序列的双荧光素酶表达载体.通过FACS检测发现,小鼠T淋巴瘤EL4细胞稳定表达PD... PD-1分子是一种重要的免疫调控因子,目前对其自身表达调控尚未有系统的研究.对PD-1启动子区域进行分析,克隆构建了含PD-1基因上游约2kb范围内含4种不同长度调控序列的双荧光素酶表达载体.通过FACS检测发现,小鼠T淋巴瘤EL4细胞稳定表达PD-1,而骨髓瘤Sp2/0-Ag细胞则在佛波酯(phorbol 12-myristate 13-acetate,PMA)和离子霉素(ionomycin,IO)诱导后才表达PD-1.4种双荧光素酶报告系统在上述两种细胞中检测PD-1启动子各区段活性显示,-227~+49bp区域含有PD-1核心启动子,上游-1127~-716bp含有较强正性调节元件,而在-1685~-1128bp、-715~-228bp两个区域含有负性调节元件,这种正负调控区交错的启动子活性现象说明了PD-1基因表达调控的复杂性,这些结果为PD-1基因的表达调控提供了结构基础和依据. 展开更多
关键词 PD-1 启动子鉴定 转录调控分析
下载PDF
支持向量机在基因核心启动子识别中的应用研究
18
作者 李宏彬 赫光中 吴晓明 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期1675-1680,共6页
核心启动子是DNA转录起始位上游一段可以与引发转录但又不被转录的关键序列。目前启动子预测已经有许多的研究,但预测的准确程度仍有待提高。支持向量机是主要用于分类的一种机器学习方法,它在解决小样本、非线性及高维模式识别中表现... 核心启动子是DNA转录起始位上游一段可以与引发转录但又不被转录的关键序列。目前启动子预测已经有许多的研究,但预测的准确程度仍有待提高。支持向量机是主要用于分类的一种机器学习方法,它在解决小样本、非线性及高维模式识别中表现出许多特有的优势。本研究采用支持向量机的机器学习方法,以多聚体词频统计和核酸序列正交编码两种特征提取方式,使用公共数据库提供的测试数据,对若干包括启动子和非启动子的大量核酸样本序列进行启动子识别和10折的交叉校验研究,发现核酸序列正交编码方式预测的准确率优于多聚体方式,而支持向量机的四种核函数中RBF核函数预测的准确性最高。研究还发现采用不同的序列长度(起始从-249到-100),预测准确度都接近,反映启动子与非启动子的核酸序列模式差异主要位于转录起始位上游-100到下游+50这段区间内,启动子序列中碱基G和C出现的频率显著性高于A和T,而非启动子正好相反。 展开更多
关键词 核心启动子 支持向量机 识别
原文传递
昆虫启动子的研究及应用
19
作者 童晓玲 石津 +2 位作者 盖停停 方春燕 代方银 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期360-370,共11页
启动子(promotor)作为基因时空表达调控的重要元件,与RNA聚合酶结合形成转录起始复合体,控制着基因表达的起始时间和表达水平。对启动子的研究可以更好地阐明基因表达调控的机制,为解析基因调控网络奠定基础。本文对昆虫启动子研究方法... 启动子(promotor)作为基因时空表达调控的重要元件,与RNA聚合酶结合形成转录起始复合体,控制着基因表达的起始时间和表达水平。对启动子的研究可以更好地阐明基因表达调控的机制,为解析基因调控网络奠定基础。本文对昆虫启动子研究方法进行综述,主要阐述昆虫启动子及其特定元件的鉴定方法,以及昆虫启动子的应用。 展开更多
关键词 昆虫 启动子 特异序列 鉴定 应用 害虫防治
下载PDF
视蛋白基因启动子的克隆和鉴定
20
作者 李振林 夏虎 +1 位作者 周运富 安靓 《第一军医大学分校学报》 2003年第2期87-90,共4页
目的 克隆出视蛋白基因启动子。方法 以小鼠全基因组为模板 ,用PCR法克隆出目的大小的片断。然后连接到T -载体上作酶切鉴定 ,最后测序。结果 酶切结果与预期相符 ,测序结果与公布序列完全一致。
关键词 视蛋白 基因启动子 基因克隆 聚合酶链反应 酶切鉴定
下载PDF
上一页 1 2 6 下一页 到第
使用帮助 返回顶部