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犬瘟热病毒在不同组织细胞上增殖特性的研究 被引量：7
1
作者 魏凤 管宇 +2 位作者 王金良 祖立闯 沈志强 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第2期83-86,共4页
将犬瘟热病毒(CDV)分别接种于长满单层的鸡胚成纤维细胞(CEF)、非洲绿猴肾细胞系(Ve-ro)、犬肾细胞系(MDCK),观察其病变时间、病变特征,并对其进行RT-PCR鉴定和TCID50测定。结果表明,CDV在这3种细胞上均能增殖,并产生明显的细胞病变(CP... 将犬瘟热病毒(CDV)分别接种于长满单层的鸡胚成纤维细胞(CEF)、非洲绿猴肾细胞系(Ve-ro)、犬肾细胞系(MDCK),观察其病变时间、病变特征,并对其进行RT-PCR鉴定和TCID50测定。结果表明,CDV在这3种细胞上均能增殖,并产生明显的细胞病变(CPE),但在Vero细胞上产生病变的时间短,病变明显,且TCID50最高;RT-PCR检测CDV在不同细胞上的病毒培养液,均能扩增出337bp的片段;CDV在Vero细胞上的增殖滴度明显高于在CEF、MDCK细胞上的增殖滴度。表明本试验所选用的3种细胞中,Vero细胞最适宜培养CDV,所获得的CDV的毒价最高,病变最明显。 展开更多
关键词 犬瘟热病毒 增殖特性 细胞病变
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新型鸭呼肠孤病毒TH11株在BHK21细胞系中的增殖特性 被引量：5
2
作者 丁明洋 毕庄莉 +7 位作者 朱英奇 戚伟强 朱杰 宋凯杰 陈宗艳 李传峰 吴润 刘光清 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期918-922,共5页
为研究新型鸭呼肠孤病毒（novel duck reovirus,NDRV）在BHK21细胞系中的增殖规律,将NDRV野毒株TH11接种BHK21细胞系,连续传代3次后,观察病毒对细胞的致病变效应（CPE）,并对病毒核酸及其蛋白的表达和病毒增殖特性进行了鉴定。结果显示,... 为研究新型鸭呼肠孤病毒（novel duck reovirus,NDRV）在BHK21细胞系中的增殖规律,将NDRV野毒株TH11接种BHK21细胞系,连续传代3次后,观察病毒对细胞的致病变效应（CPE）,并对病毒核酸及其蛋白的表达和病毒增殖特性进行了鉴定。结果显示,NDRV TH11株能够在BHK21细胞中有效增殖,并产生以细胞巨融合为主的典型CPE,病毒蛋白在细胞中也获得了良好表达,并与σC蛋白特异性抗体发生反应。一步生长曲线显示,TH11毒株感染BHK21细胞后第0～12小时为潜伏期,第12小时开始增殖,第12～36小时进入快速增殖期,第48小时病毒效价即达到最高,即TCID50为106.57/0.1mL,随后病毒的增殖随细胞的崩解而降低。上述结果为进一步研究NDRV的致病机理和研制细胞灭活疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 新型鸭呼肠孤病毒 BHK21细胞 增殖特性
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H3N2亚型猪流感病毒反向遗传学操作平台的建立
3
作者 崔平 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第4期78-82,157,共6页
为了建立猪流感病毒反向遗传操作平台,试验利用RT-PCR技术扩增A/Swine/Shandong/JN1/2016(H3N2)流感病毒表面抗原基因HA和NA,连接至双向表达载体pHW2000,构建其感染性克隆。将A/PuertoRico/8/34(H1N1,PR8)毒株的6个内部基因片段重组质粒... 为了建立猪流感病毒反向遗传操作平台,试验利用RT-PCR技术扩增A/Swine/Shandong/JN1/2016(H3N2)流感病毒表面抗原基因HA和NA,连接至双向表达载体pHW2000,构建其感染性克隆。将A/PuertoRico/8/34(H1N1,PR8)毒株的6个内部基因片段重组质粒与H3N2的表面抗原基因HA和NA片段重组质粒毒共转染293Ta细胞,收获转染液接种鸡胚,收获尿囊液,测定其效价。对重组H3N2毒株进行血清学、形态、免疫荧光鉴定及传代稳定性、在犬肾传代细胞系(MDCK)上的病变效应。结果表明:反向遗传技术拯救获得重组猪流感病毒,命名为rH3N2。病毒液接种鸡胚后收获尿囊液,测定其效价为1∶256。经电镜观察,重组毒株rH3N2有囊膜,具备流感病毒一般特性;重组病毒rH3N2仅与猪流感病毒H3亚型特异性抗血清发生阳性反应;连续传代后,效价可稳定在1∶512;免疫荧光试验结果表明,rH3N2可以感染MDCK细胞,且可以连续传代,效价达1∶256。说明成功建立H3N2亚型猪流感病毒反向遗传学技术平台,获得重组毒株rH3N2,为猪流感病毒的致病机理、跨物种传播机制、基因结构与功能关系的研究以及猪流感流行疫苗候选株的快速筛选提供基础。 展开更多
关键词 猪流感 H3N2亚型 反向遗传学 病毒形态 增殖特性
原文传递
人外周血T淋巴细胞集落培养及其辐射效应
4
作者 曹霞 汪涛 李延义 《辐射研究与辐射工艺学报》 CAS CSCD 北大核心 1993年第3期189-192,共4页
利用甲基纤维素微量培养和~3H-TdR掺入法,研究了T淋巴细胞增殖动力学、辐射敏感性及T淋巴细胞集落形成单位(CFU-TL)。结果表明,外周血单个核细胞在一定浓度范围内,CFU-TL形成数随种植细胞数而增加,呈良好线性关系;培养12d的集落细胞在PH... 利用甲基纤维素微量培养和~3H-TdR掺入法,研究了T淋巴细胞增殖动力学、辐射敏感性及T淋巴细胞集落形成单位(CFU-TL)。结果表明,外周血单个核细胞在一定浓度范围内,CFU-TL形成数随种植细胞数而增加,呈良好线性关系;培养12d的集落细胞在PHA-CM刺激下仍具有~3H-TdR掺入能力,但计数下降,表明培养后的集落细胞DNA合成能力减弱;γ射线辐照后,随剂量增加,集落数和~3H-TdR掺入数迅速降低,CFU-TL对辐射很敏感,D_0=2.3 Gy。 展开更多
关键词 淋巴细胞 集落细胞 繁殖 放射损伤
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