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肝细胞生长因子对四氯化碳损伤原代培养大鼠肝细胞的保护作用 被引量:21
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作者 邹原 宫德正 +1 位作者 孙丽娟 梅懋华 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 1997年第3期228-230,共3页
本工作采用无血清原代培养大鼠肝细胞法,观察了重组人肝细胞生长因子(r-hHGF)对四氯化碳(CCl4)致大鼠肝细胞损伤的保护作用。结果表明,r-hHGF对CCl4染毒肝细胞有明显的保护作用。r-hHGF保护组较CCl... 本工作采用无血清原代培养大鼠肝细胞法,观察了重组人肝细胞生长因子(r-hHGF)对四氯化碳(CCl4)致大鼠肝细胞损伤的保护作用。结果表明,r-hHGF对CCl4染毒肝细胞有明显的保护作用。r-hHGF保护组较CCl4染毒组细胞存活率显著升高,细胞内丙氨酸转氨酶、钾离子漏出明显降低。结果提示,r-hHGF可减轻CCl4对肝细胞膜的损伤。 展开更多
关键词 肝细胞生长因子 四氧化碳 肝细胞 原代培养 损伤
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肝细胞生长因子对四氯化碳损伤肝细胞的保护作用及相关基因表达 被引量:12
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作者 邹原 宫德正 +1 位作者 梅懋华 张万琴 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期59-63,共5页
利用无血清原代培养大鼠肝细胞 ,观察重组人肝细胞生长因子 (rhHGF)对CCl4染毒肝细胞的保护作用。结果表明 :( 1)rhHGF ( 5ng/ml)预处理后可显著提高CCl4( 15mmol/L)染毒肝细胞存活率 ,降低细胞内丙氨酸氨基转移酶 (ALT)、K+的漏出 ;( ... 利用无血清原代培养大鼠肝细胞 ,观察重组人肝细胞生长因子 (rhHGF)对CCl4染毒肝细胞的保护作用。结果表明 :( 1)rhHGF ( 5ng/ml)预处理后可显著提高CCl4( 15mmol/L)染毒肝细胞存活率 ,降低细胞内丙氨酸氨基转移酶 (ALT)、K+的漏出 ;( 2 )表皮生长因子 (EGF ,5 0ng/ml)和rhHGF ( 5ng/ml)合用预处理肝细胞 ,CCl4染毒后细胞内ALT、K+漏出较rhHGF和EGF单独保护组进一步降低 ;( 3 )大鼠肝部分切除和CCl4( 5 0 % ,2 5ml/kgbw)染毒后 ,再生肝内HGF基因及其受体基因 /c met的表达分别较假手术和盐水对照组显著升高。结果提示 ,rhHGF对CCl4染毒大鼠肝细胞具有保护作用 ;EGF和rhHGF有协同保护作用 ; 展开更多
关键词 C-MET基因 四氯化碳 肝细胞原代培养 rhHGF EGF
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原代小鼠肝细胞培养方法的比较 被引量:3
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作者 王珊 柏青 +6 位作者 王方萍 李慧瑶 陈燊 何志妮 王庆 陈雯 陈丽萍 《癌变.畸变.突变》 CAS CSCD 2016年第2期125-130,共6页
目的:比较3种不同培养条件下原代小鼠肝细胞的形态以及肝细胞功能,寻找适合于原代小鼠肝细胞体外培养的培养基配方。方法:采用改良Seglen两步胶原酶灌注法分离原代小鼠肝细胞,糖原染色观察细胞纯度,在贴壁4 h后用基础培养基、基础培养基... 目的:比较3种不同培养条件下原代小鼠肝细胞的形态以及肝细胞功能,寻找适合于原代小鼠肝细胞体外培养的培养基配方。方法:采用改良Seglen两步胶原酶灌注法分离原代小鼠肝细胞,糖原染色观察细胞纯度,在贴壁4 h后用基础培养基、基础培养基加DMSO(DMSO组)、基础培养基加DMSO和EGF(DMSO+EGF组)等3种不同的条件培养肝细胞。镜下观察肝细胞形态,用MTT法检测细胞活力,生化分析仪检测细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)水平以及用ELISA法检测细胞培养上清液中白蛋白水平。结果:成功分离小鼠原代肝细胞,肝细胞纯度达95%以上;原代肝细胞培养至96 h时,DMSO组仍能较好地维持细胞形态,基础培养基组的细胞活力比DMSO组和DMSO+EGF组分别降低了66.87%和67.16%(P<0.05),且基础培养基组的LDH水平均高于DMSO组和DMSO+EGF组(P<0.05)。此外DMSO组在96 h时仍能维持较高水平的白蛋白分泌,比基础培养基组和DMSO+EGF组分别增加了185%和24.2%(P<0.05)。结论:小鼠原代肝细胞培养基中加入DMSO对于维持肝细胞的形态和功能有促进作用,本研究为体外原代肝细胞培养模型的建立和优化提供了实用的方法。 展开更多
关键词 小鼠 原代肝细胞培养 二甲基亚砜 表皮生长因子
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大鼠肝纤维化肝细胞的原代培养 被引量:1
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作者 张晓一 王灵台 《中西医结合肝病杂志》 CAS 1994年第2期22-23,共2页
本文介绍了建立大鼠二甲基亚硝胺(DMN)肝纤维化模型肝细胞原代培养的方法,经与正常大鼠培养肝细胞之结果相比较,证实前者在细胞的生长、形态、超微结构及胶原代谢等方面均有别于后者。
关键词 肝纤维化 细胞培养 病理
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RP-HPLC同时测定William's E培养基中地塞米松、睾酮和6β羟基睾酮的含量 被引量:3
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作者 李良 管峥 +2 位作者 马鑫 酒向飞 卢炜 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期870-874,共5页
目的建立同时测定William′sE培养基中地塞米松、睾酮和6β羟基睾酮含量的RP-HPLC检测方法,并用该方法研究地塞米松对大鼠原代肝细胞CYP3A的诱导作用。方法采用Agilent1100HPLC系统,Phenomenex色谱柱,以乙腈和磷酸溶液组成的流动相梯度... 目的建立同时测定William′sE培养基中地塞米松、睾酮和6β羟基睾酮含量的RP-HPLC检测方法,并用该方法研究地塞米松对大鼠原代肝细胞CYP3A的诱导作用。方法采用Agilent1100HPLC系统,Phenomenex色谱柱,以乙腈和磷酸溶液组成的流动相梯度洗脱分离,以酮康唑为内标,流速1.00mL.min-1,检测波长245nm,柱温20℃。结果地塞米松、睾酮和6β羟基睾酮分别在53~19291,161~29318和58~21091μg.L-1内呈线性关系;它们的日间和日内精密度均低于15%;地塞米松、睾酮和6β羟基睾酮的最小定量限分别为53.00,161.00和58.00μg.L-1。结论该方法简便、准确、可靠,可用于地塞米松作用于大鼠原代肝细胞体系后,地塞米松、CYP3A底物睾酮及其代谢产物6β羟基睾酮在William′sE培养基中的浓度测定。 展开更多
关键词 地塞米松 睾酮 6β羟基睾酮 大鼠原代肝细胞 细胞色素P450 3A 诱导作用 反相高效液相色谱法
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