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叶酸剥夺对鸡原代肝细胞脂代谢的影响
1
作者 孙喜 理云 +4 位作者 王强刚 高思祺 杨景 杨小军 刘艳利 《中国家禽》 北大核心 2024年第8期22-30,共9页
研究旨在利用蛋白组和代谢组技术探究叶酸剥夺对鸡原代肝细胞脂代谢的影响。试验将分离培养的鸡原代肝细胞分为对照组和叶酸剥夺组,每组6个重复,处理时间为12 h,通过RT-qPCR、MTT、ELISA等探究鸡原代肝细胞脂质代谢、抗氧化、叶酸转运... 研究旨在利用蛋白组和代谢组技术探究叶酸剥夺对鸡原代肝细胞脂代谢的影响。试验将分离培养的鸡原代肝细胞分为对照组和叶酸剥夺组,每组6个重复,处理时间为12 h,通过RT-qPCR、MTT、ELISA等探究鸡原代肝细胞脂质代谢、抗氧化、叶酸转运与代谢基因表达、DNA甲基化的变化。结果显示:叶酸剥夺后,细胞内总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)水平显著升高(P<0.05);肝细胞还原型叶酸载体(RFC)mRNA表达量显著降低(P<0.05),叶酸受体(FR)mRNA表达量也呈现下降趋势(P=0.064);成脂相关基因:脂肪酸合成酶(FAS)和胆固醇调节元件结合蛋白(SREBP)mRNA表达量显著降低(P<0.05),乙酰辅酶A羧化酶(ACC)mRNA表达量也呈下降趋势(P=0.071),但与β-氧化相关基因过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)和肉碱棕榈酰转移酶-1(CPT-1)mRNA表达量无显著差异(P>0.05);胰岛素/IGF通路相关因子:胰岛素样生长因子2(IGF2)和胰岛素受体(INSR)mRNA表达量显著下调(P<0.05),苏氨酸激酶2(AKT2) mRNA表达量显著升高(P<0.05);与DNA甲基化相关的S-腺苷甲硫氨酸(SAM)和DNA甲基转移酶1(DNMT1) mRNA丰度显著下调(P<0.05)。蛋白组京都基因和基因组百科全书(KEGG)富集分析显示,与脂代谢相关的肌醇磷酸盐代谢、铁死亡、Apelin信号通路等通路发生显著变化(P<0.05);代谢组数据显示,与糖脂代谢密切相关的糖酵解或糖异生、丙酮酸盐代谢、三羧酸循环显著富集(P<0.05)。综上所述,叶酸剥夺通过降低DNMT1的表达进一步导致甲基供体SAM水平降低以及PI3K/AKT通路的激活引起肝细胞中脂质沉积的增加。 展开更多
关键词 叶酸剥夺 鸡原代肝细胞 脂代谢 蛋白质组 代谢组
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(—)-HCA对鸡胚原代肝细胞增殖和线粒体功能的影响 被引量：1
2
作者 李龙龙 彭梦玲 +3 位作者 王典 俞磊 葛重阳 马海田 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期945-953,共9页
试验旨在研究(—)-HCA对鸡胚原代肝细胞增殖和线粒体超微结构及功能的影响。笔者选用终浓度为0、1、10和50μmol·L^(-1)的(—)-HCA处理鸡胚原代肝细胞后收集细胞,检测细胞增殖及线粒体功能相关指标。结果表明,(—)-HCA处理可促进... 试验旨在研究(—)-HCA对鸡胚原代肝细胞增殖和线粒体超微结构及功能的影响。笔者选用终浓度为0、1、10和50μmol·L^(-1)的(—)-HCA处理鸡胚原代肝细胞后收集细胞,检测细胞增殖及线粒体功能相关指标。结果表明,(—)-HCA处理可促进鸡胚原代肝细胞增殖,10μmol·L^(-1)(—)-HCA处理可极显著升高S期和G2/M期细胞比例(P<0.01),并提高周期相关因子的mRNA转录。1~50μmol·L^(-1)(—)-HCA处理对鸡胚原代肝细胞线粒体形态、数量和膜电位均无显著影响(P>0.05),但(—)-HCA处理可显著升高原代鸡胚肝细胞线粒体中柠檬酸合酶和琥珀酸脱氢酶活性(P<0.05)。结果提示,(—)-HCA处理可通过调节周期相关因子的表达而促进鸡胚原代肝细胞的增殖,同时其可通过加速三羧酸循环进而增强细胞的能量代谢水平。 展开更多
关键词 (-)-HCA 鸡胚原代肝细胞 细胞周期 线粒体功能
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(-)-羟基柠檬酸调控鸡胚原代肝细胞脂滴沉积的机制
3
作者 李龙龙 彭梦玲 +3 位作者 王典 俞磊 葛重阳 马海田 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期514-520,共7页
[目的]本文旨在研究(-)-羟基柠檬酸[(-)-HCA]对鸡胚原代肝细胞脂滴沉积的影响及其机制。[方法]选用含(-)-HCA的培养液孵育鸡胚原代肝细胞后,油红染色法检测鸡胚原代肝细胞中脂滴的数量和总面积;试剂盒法检测鸡胚原代肝细胞中甘油三酯、... [目的]本文旨在研究(-)-羟基柠檬酸[(-)-HCA]对鸡胚原代肝细胞脂滴沉积的影响及其机制。[方法]选用含(-)-HCA的培养液孵育鸡胚原代肝细胞后,油红染色法检测鸡胚原代肝细胞中脂滴的数量和总面积;试剂盒法检测鸡胚原代肝细胞中甘油三酯、葡萄糖含量及糖代谢、呼吸链关键酶活性。[结果](-)-HCA处理显著降低鸡胚原代肝细胞中甘油三酯含量、脂滴数量和总面积,但对细胞活力和死亡率无显著影响。(-)-HCA处理提高了鸡胚原代肝细胞中葡萄糖消耗量,显著降低了柠檬酸裂解酶活性和细胞质中乙酰辅酶A含量。(-)-HCA处理显著提高了鸡胚原代肝细胞中葡萄糖激酶、磷酸果糖激酶1、丙酮酸激酶、丙酮酸脱氢酶(E1)、乌头酸酶、琥珀酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶、柠檬酸合酶、NADH脱氢酶和ATP合酶活性。[结论](-)-HCA通过抑制柠檬酸裂解酶的活性减少细胞质中乙酰辅酶A的供给,并通过增强糖代谢和呼吸链中关键酶活性而加速能量代谢,最终抑制了鸡胚原代肝细胞中脂滴的沉积。 展开更多
关键词 (-)-羟基柠檬酸 脂代谢 葡萄糖代谢 能量代谢 鸡胚原代肝细胞
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铜离子在诱导鸡原代肝细胞凋亡方面及其对Drp1基因表达水平的影响 被引量：2
4
作者 吴柳燕 康振龙 +3 位作者 乔娜 王丛丛 胡莲美 唐兆新 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期918-923,共6页
为了研究铜离子（Cu^2＋）在诱导鸡原代肝细胞凋亡方面及其对Drp1（dynamin-related protein 1）基因表达的影响,在无菌条件下采集13日龄SPF鸡胚肝脏,剪碎后用胶原酶消化成单个细胞,采用无血清培养法培养,在细胞对数生长期分别用终浓度... 为了研究铜离子（Cu^2＋）在诱导鸡原代肝细胞凋亡方面及其对Drp1（dynamin-related protein 1）基因表达的影响,在无菌条件下采集13日龄SPF鸡胚肝脏,剪碎后用胶原酶消化成单个细胞,采用无血清培养法培养,在细胞对数生长期分别用终浓度为200、100和10 mol/L的Cu^2＋孵育细胞24 h,采用DCFH-DA探针法检测细胞内活性氧（ROS）的含量,采用JC-1线粒体膜电位法检测细胞凋亡,采用RT-q PCR测定Drp1基因的表达情况。结果显示,与对照组相比,200和100 mol/L Cu^2＋组鸡原代肝细胞凋亡数目显著增加,ROS含量显著上升且Drp1基因表达显著升高（P〈0.05）,10 mol/L Cu^2＋组鸡原代肝细胞则无论ROS含量还是Drp1基因的表达均无显著差异。结果表明,髙浓度Cu^2＋（200和100 mol/L）通过生成大量ROS引发鸡原代肝细胞凋亡,同时使得Drp1基因表达升高,提示Drp1基因可能参与调控鸡原代肝细胞凋亡。 展开更多
关键词 铜离子 鸡原代肝细胞 细胞凋亡 活性氧
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