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鹿茸多肽对实验性骨折的治疗作用及机理研究 被引量:75
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作者 周秋丽 王丽娟 +5 位作者 郭颖杰 王岩 王颖 刘永强 李秉君 王本祥 《白求恩医科大学学报》 CSCD 1999年第5期586-588,共3页
目的:探讨鹿茸多肽( P A P)治疗骨折的作用机理。方法:离体观察鹿茸多肽对3 H Td R 掺入家兔肋软骨、人胚关节软骨及鸡胚头盖骨成骨样细胞的影响;整体利用大鼠完全缺损性挠骨骨折模型,观察鹿茸多肽 10 和 20 m g&... 目的:探讨鹿茸多肽( P A P)治疗骨折的作用机理。方法:离体观察鹿茸多肽对3 H Td R 掺入家兔肋软骨、人胚关节软骨及鸡胚头盖骨成骨样细胞的影响;整体利用大鼠完全缺损性挠骨骨折模型,观察鹿茸多肽 10 和 20 m g·kg- 1剂量对骨痂的形成、骨折的愈合以及骨痂内羟脯氨酸和钙含量的影响。结果:离体试验表明,鹿茸多肽10~50 m g· L- 1对家兔和人胚软骨细胞以及鸡胚头盖骨成骨样细胞都有促进有丝分裂作用,提示鹿茸多肽的细胞增殖作用无种属特异性。整体鹿茸多肽能明显加速骨痂的形成及骨折的愈合,明显增加骨痂内羟脯氨酸和钙含量。结论:鹿茸多肽通过促进骨、软骨细胞增殖及促进骨痂内骨胶原的积累和钙盐沉积而加速骨折愈合。 展开更多
关键词 鹿茸多肽 骨折 细胞增殖 治疗 实验研究
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鹿茸多肽对骨、软骨细胞增殖的实验研究 被引量:46
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作者 郭颖杰 周秋丽 +3 位作者 刘平 王颖 房金荣 王本祥 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 1998年第2期74-76,共3页
用3H-TdR参入法观察鹿茸多肽对兔助软骨细胞、人胚关节软骨细胞及鸡胚头盖骨成骨样细胞DNA合成的影响。结果表明,10~50μg/ml鹿茸多肽能明显刺激软骨细胞和成骨样细胞的增殖,其增殖作用有明显的量效关系且无种属特异性。
关键词 鹿茸多肽 细胞增殖 软骨 实验
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鹿茸多肽促进大鼠坐骨神经再生的实验研究 被引量:36
3
作者 李立军 路来金 +2 位作者 陈雷 丰波 王雪莹 《辽宁中医杂志》 CAS 2004年第4期343-344,共2页
目的 :探讨鹿茸多肽对大鼠坐骨神经损伤后神经再生的影响。方法 :Wistar大鼠 36只 ,雌雄各半 ,随机分成对照组和鹿茸多肽用药组。建立切断大鼠坐骨神经保留一侧神经外膜模型 ,术后隔日于失神经支配的靶器官注射给药。于术后 2、4、6周... 目的 :探讨鹿茸多肽对大鼠坐骨神经损伤后神经再生的影响。方法 :Wistar大鼠 36只 ,雌雄各半 ,随机分成对照组和鹿茸多肽用药组。建立切断大鼠坐骨神经保留一侧神经外膜模型 ,术后隔日于失神经支配的靶器官注射给药。于术后 2、4、6周观察坐骨神经功能指数、电生理、组织学及超微结构。结果 :坐骨神经功能指数、潜伏期及诱发电位恢复率在各时间点上用药组优于对照组P <0 0 1。组织学检查有髓神经纤维数、纤维直径、截面积在各时间点上用药组优于对照组P <0 0 1。超微结构观察用药组各时间点上有髓神经纤维的髓鞘厚度、成熟度均优于对照组。结论 :鹿茸多肽能促进神经再生及功能的恢复。 展开更多
关键词 鹿茸多肽 坐骨神经功能指数 电生理 组织学检测 促神经再生实验
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鹿茸多肽对兔骨髓间质干细胞体外软骨表型诱导分化的影响 被引量:16
4
作者 修忠标 林建华 +1 位作者 吴朝阳 王日雄 《中国骨伤》 CAS 2007年第1期31-33,共3页
目的:通过对体外培养的兔骨髓间质干细胞(MSCs)在特定培养液作用下向软骨细胞表型分化的研究,探讨鹿茸多肽对其软骨分化的影响。方法:将第3代兔MSCs随机分为A组(空白对照组)、B组(诱导组)、C组(鹿茸多肽组),并取兔的关节软骨作为D组(关... 目的:通过对体外培养的兔骨髓间质干细胞(MSCs)在特定培养液作用下向软骨细胞表型分化的研究,探讨鹿茸多肽对其软骨分化的影响。方法:将第3代兔MSCs随机分为A组(空白对照组)、B组(诱导组)、C组(鹿茸多肽组),并取兔的关节软骨作为D组(关节软骨组)。A、B、C 3组分别采用普通培养液、诱导培养液、含10 ug/m l鹿茸多肽的诱导培养液于离心管内进行培养,分别于1、2、3周后取材,通过组织学、生物化学和RT-PCR技术,对离心管内构建的软骨组织进行形态学和细胞功能状态的观察。结果:A组培养2周后,细胞团块逐渐崩解,无法进行HE染色。B、C组细胞团块除有轻度收缩外,呈白色半透明状,HE染色发现细胞为圆形或卵圆形,表层细胞密度大。B、C组糖胺多糖(GAG)含量及Ⅱ型胶原mRNA表达随培养时间延长而增多,并以C组为著;各时间点B、C组与A组相比明显增多,且差异有显著性统计学意义(P<0.01),C组与B组相比较多,差异有显著性统计学意义(P<0.01),C组与D组相比较少,差异有显著性统计学意义(P<0.01)。结论:MSCs在特定培养条件下能向软骨细胞表型分化,且鹿茸多肽对其定向软骨分化有明显促进作用。虽然在体外可以构建出软骨组织,但其与关节软骨质量相比仍有很大差距。 展开更多
关键词 鹿茸多肽 间质干细胞 软骨 组织工程 细胞分化
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鹿茸多肽药理作用研究 被引量:8
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作者 周秋丽 王丽娟 +5 位作者 郭颖洁 王岩 王颖 刘永强 李秉君 王本祥 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 1998年第3期57-61,共5页
鹿茸多肽(PAP)是从鹿茸中提出的含有促进骨和软骨细胞分裂的各种多肽因子。离体实验表明,PAP(10~50μg/ml)对离体培养的家兔肋软骨和人胚关节软骨以及鸡胚头盖骨成骨样细胞都有很强的促进有丝分裂作用。整体实验表明,PAP对大鼠挠骨骨... 鹿茸多肽(PAP)是从鹿茸中提出的含有促进骨和软骨细胞分裂的各种多肽因子。离体实验表明,PAP(10~50μg/ml)对离体培养的家兔肋软骨和人胚关节软骨以及鸡胚头盖骨成骨样细胞都有很强的促进有丝分裂作用。整体实验表明,PAP对大鼠挠骨骨折有明显促愈合作用;对大鼠背部皮肤缺损有加速修复作用;对大鼠后肢骨折处骨髓巨噬细胞吞噬功能有促进作用;但对大鼠角叉菜胶性足肿胀和小鼠二甲苯性耳廓肿胀均无抗炎症作用。 展开更多
关键词 鹿茸 鹿茸多肽 骨折 药理作用
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鹿茸多肽抗鼠软骨细胞老化的机制初探 被引量:13
6
作者 陈晓东 林建华 《中国骨伤》 CAS 2008年第8期617-620,共4页
目的:对体外传代培养的大鼠软骨细胞进行鹿茸多肽干预对照实验,检测老化相关因子,初步探讨鹿茸多肽抗软骨细胞复制性老化的机制。方法:进行大鼠软骨细胞取材及传代培养,对第4代软骨细胞进行鹿茸多肽干预,并与第2、3、4代软骨细胞进行对... 目的:对体外传代培养的大鼠软骨细胞进行鹿茸多肽干预对照实验,检测老化相关因子,初步探讨鹿茸多肽抗软骨细胞复制性老化的机制。方法:进行大鼠软骨细胞取材及传代培养,对第4代软骨细胞进行鹿茸多肽干预,并与第2、3、4代软骨细胞进行对照实验,采用免疫细胞化检测p16、pRb、E2F、CyclinD、CDK4等因子表达水平,TRAPELISA(telomerase repeat amplification protocol assayenzyme linked immunosorbent assay)检测端粒酶活性,进而考察鹿茸多肽对软骨细胞老化过程中各因子的影响。结果:随着细胞复制性老化p16、pRb、CyclinD表达显著上升(P<0.01),E2F、CDK4、端粒酶表达显著下降(P<0.01);鹿茸多肽干预后p16、pRb、CyclinD表达比第4代软骨细胞表达显著下降(P<0.01),E2F、CDK4、端粒酶表达显著上升(P<0.01)。结论:鹿茸多肽可以逆向影响老化相关调控因子的表达来实现其抗软骨细胞退变老化的作用。 展开更多
关键词 鹿茸多肽 软骨细胞 细胞衰老
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鹿茸多肽对软骨终板细胞基质蛋白及其降解酶基因表达的影响 被引量:12
7
作者 李文超 林一峰 +6 位作者 梁祖建 沈国喜 原超 朱辉 池利业 张文财 刘洪江 《中国中医骨伤科杂志》 CAS 2019年第1期6-10,16,共6页
目的:观察鹿茸多肽对IL-1β诱导的大鼠椎间盘软骨终板细胞的增殖及基质蛋白(Ⅱ,Ⅹ型胶原)、基质降解酶(金属蛋白酶-13)基因表达的影响。方法:选取1月龄的健康SD大鼠,对其椎间盘软骨终板细胞进行分离与培养,取第3代软骨终板细胞实验,空... 目的:观察鹿茸多肽对IL-1β诱导的大鼠椎间盘软骨终板细胞的增殖及基质蛋白(Ⅱ,Ⅹ型胶原)、基质降解酶(金属蛋白酶-13)基因表达的影响。方法:选取1月龄的健康SD大鼠,对其椎间盘软骨终板细胞进行分离与培养,取第3代软骨终板细胞实验,空白对照组不做任何处置,诱导组单加入10μg/L的IL-1β,药物处理组分三组,分别在培养基中加入10μg/L的IL-1β和10μg/mL,30μg/mL,50μg/mL的鹿茸多肽。MTT比色法检测三个时间节点(24h,48h,72h)各组椎间盘软骨终板细胞的增殖情况;qPCR检测法对软骨终板细胞中基质Ⅱ,Ⅹ型胶原蛋白、基质金属蛋白酶-13基因的表达情况。结果:在24h,48h,72h时间点,MTT法检测10μg/mL鹿茸多肽组在各时间点软骨终板细胞增殖情况与IL-1β组比较,差异无统计学意义(P>0.05);而30μg/mL组和50μg/mL组均能减轻IL-1β对软骨终板细胞増殖的抑制作用,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。qPCR检测结果显示:IL-1β诱导组的Ⅱ型胶原蛋白基因的表达减弱,Ⅹ型胶原蛋白、基质金属蛋白酶-13基因的表达增强,与空白组对比差异有统计学意义(P<0.05);鹿茸多肽各浓度组均能上升Ⅱ型胶原蛋白基因的表达,下调Ⅹ型胶原蛋白、基质金属蛋白酶-13基因的表达水平,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01),以50μg/mL组效果显著,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:一定浓度的鹿茸多肽(50μg/mL组)能有效地拮抗IL-1β对软骨终板细胞增殖的抑制作用,上升Ⅱ型胶原蛋白基因的表达,下调Ⅹ型胶原蛋白、基质金属蛋白酶-13基因的表达,改善了基质的代谢,起到延缓椎间盘软骨终板退变的作用。 展开更多
关键词 鹿茸多肽 软骨终板 椎间盘退变 白介素-1Β 基质金属蛋白酶-13
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鹿茸多肽对兔软骨细胞体外凋亡的影响 被引量:8
8
作者 修忠标 林建华 张春霞 《福建中医学院学报》 2006年第3期17-20,共4页
通过观察鹿茸多肽对白细胞介素-1β体外诱导软骨细胞凋亡的影响,以优化软骨组织工程的种子细胞。取新西兰大白兔关节软骨,用0.25%胰蛋白酶和0.2%Ⅱ型胶原酶消化后获得兔软骨细胞,并于体外培养。将第3代软骨细胞随机分成A姐(空白对照... 通过观察鹿茸多肽对白细胞介素-1β体外诱导软骨细胞凋亡的影响,以优化软骨组织工程的种子细胞。取新西兰大白兔关节软骨,用0.25%胰蛋白酶和0.2%Ⅱ型胶原酶消化后获得兔软骨细胞,并于体外培养。将第3代软骨细胞随机分成A姐(空白对照组),B组(IL-1β组),C组(鹿茸多肽组),D组(TGF-β1组)。采用透射电镜观察细胞形态,用Annexin V法检测细胞凋亡率,RT-PCR技术分析Caspase-3 mRNA表达水平,ELISA法检测Caspase-3蛋白酶活性。结果显示B组24 h后细胞核内染色质开始呈块状凝集,分布于核膜下,核膜不规则;48 h后细胞核内染色质凝集加剧;72h后部分细胞内的核碎片凝集成凋亡小体;各时间点C、D 组细胞结构改变相对滞后、且数量较少,而A组细胞结构几乎无明显改变。各时间点B组细胞凋亡率、 Caspase-3 mRNA表达及蛋白酶活性逐渐增高,与A组比较差异有统计学意义(P<0.01);C、D组与B组比较则逐渐下降,且差异有统计学意义(P<0.01)。说明Caspase-3参与细胞凋亡,鹿茸多肽通过减少Caspase-3 mRNA表达,并抑制其蛋白酶活性,来阻止或逆转软骨细胞凋亡。 展开更多
关键词 鹿茸多肽 CASPASE-3 软骨细胞 凋亡
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促渗剂对鹿茸多肽透皮吸收的影响及鹿茸多肽免疫活性检测 被引量:8
9
作者 吴庆燕 宋健 +4 位作者 贾泓瑶 李思明 张浩 官员 郝林琳 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1703-1707,共5页
通过探讨不同质量浓度促渗剂月桂氮卓酮和冰片对鹿茸多肽透皮吸收的影响,优化出鹿茸多肽的给药方式,即通过口腔黏膜服用,为鹿茸运用于创伤、烧伤和美容提供依据。通过脾细胞增殖试验,检测鹿茸多肽的免疫活性。结果表明:(1)SDS-PAGE显示... 通过探讨不同质量浓度促渗剂月桂氮卓酮和冰片对鹿茸多肽透皮吸收的影响,优化出鹿茸多肽的给药方式,即通过口腔黏膜服用,为鹿茸运用于创伤、烧伤和美容提供依据。通过脾细胞增殖试验,检测鹿茸多肽的免疫活性。结果表明:(1)SDS-PAGE显示鹿茸酸粗提取物中含有不等量的蛋白质和多肽等,且多为大分子量多肽,但醇提多肽多为10 000左右的某些小分子量多肽。(2)含5%月桂氮卓酮的醇提鹿茸多肽和含0.12%冰片的醇提鹿茸多肽比只含醇提鹿茸多肽溶液的累积透皮透过量多,说明促渗剂月桂氮卓酮和冰片能明显的增加醇提鹿茸多肽的透皮扩散速度和扩散的总量,而且0.12%冰片的促渗效率比5%月桂氮卓酮的促渗效果要高。(3)鹿茸多肽具有促进脾细胞增殖的活性,并存在剂量依赖性:醇提鹿茸多肽质量浓度从10mg/L上升到40mg/L时,对促进脾细胞增殖呈上升趋势,当质量浓度超过40mg/L时,增殖率增加不显著。 展开更多
关键词 鹿茸多肽 月桂氮卓酮 冰片 透皮吸收 免疫活性
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动物源性生物活性肽在皮肤创伤愈合中的作用研究进展 被引量:7
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作者 郝林琳 陈熙 +2 位作者 夏培钧 杨睿 肖占红 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期13-20,共8页
近年来,生物活性肽在皮肤创伤愈合中的积极作用备受关注。文章综述了动物源性的生物活性肽在皮肤创伤愈合中的作用,重点阐述了鹿茸和林蛙皮多肽的提取及鉴定、对皮肤创伤愈合的作用机理以及临床应用形式;并阐述了猪皮、海洋贝类、海洋... 近年来,生物活性肽在皮肤创伤愈合中的积极作用备受关注。文章综述了动物源性的生物活性肽在皮肤创伤愈合中的作用,重点阐述了鹿茸和林蛙皮多肽的提取及鉴定、对皮肤创伤愈合的作用机理以及临床应用形式;并阐述了猪皮、海洋贝类、海洋鱼类以及蚯蚓等动物源性的多肽对皮肤创伤愈合的研究进展,以期为动物源性生物活性肽应用于皮肤创伤愈合提供研究思路。 展开更多
关键词 生物活性肽 皮肤创伤愈合 多肽与蛋白质生物化学 鹿茸多肽 林蛙皮多肽
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鹿茸多肽介导心肌干细胞分化对终末心肌分化基因ANP和MLC-2v表达的影响 被引量:7
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作者 黄晓巍 徐岩 +5 位作者 韩冬 林贺 律广富 李晓华 曲晓波 张冰 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期249-253,共5页
目的:探讨鹿茸多肽介导心肌干细胞(CSC)分化对终末心肌分化基因心房钠尿肽(ANP)和心肌肌凝蛋白轻链2(MLC-2v)表达的影响,阐明其修复受损心肌的作用机制。方法:选取出生2d的雄性Wistar大鼠,提取CSC,免疫荧光鉴定CSC表面标志物c-Kit,流式... 目的:探讨鹿茸多肽介导心肌干细胞(CSC)分化对终末心肌分化基因心房钠尿肽(ANP)和心肌肌凝蛋白轻链2(MLC-2v)表达的影响,阐明其修复受损心肌的作用机制。方法:选取出生2d的雄性Wistar大鼠,提取CSC,免疫荧光鉴定CSC表面标志物c-Kit,流式细胞术鉴定CSC纯度。以培养皿为实验单位,分为空白对照组(加等量缓冲液)、5-氮胞苷组(终浓度3μmol·L-1)、鹿茸多肽组(终浓度800mg·L-1)和联合组(3μmol·L-1 5-氮胞苷+800mg·L-1鹿茸多肽),于37℃、5%CO2培养箱中培养48h。ELISA法检测各组细胞上清液中ANP和MLC-2v表达水平,RT-PCR法检测各组细胞中ANP和MLC-2v mRNA表达水平。结果:获得纯度>95%的CSC。ELISA法检测,与空白对照组比较,5-氮胞苷组、鹿茸多肽组和联合组细胞上清中ANP和MLC-2v表达水平明显升高(P<0.05);联合组ANP和MLC-2v表达水平高于5-氮胞苷组和鹿茸多肽组,但差异无统计学意义(P>0.05)。RT-PCR法检测,与空白对照组比较,5-氮胞苷组、鹿茸多肽组和联合组ANP和MLC-2vmRNA表达水平明显升高(P<0.05)。结论:鹿茸多肽可以通过增强心肌分化基因ANP和MLC-2v表达介导CSC分化为心肌细胞,且在一定程度上减轻5-氮胞苷所致的细胞毒性。 展开更多
关键词 鹿茸多肽 心肌干细胞 心房钠尿肽 心肌肌凝蛋白轻链2
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响应面法优化超声提取梅花鹿鹿茸多肽工艺 被引量:6
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作者 于丽娜 李峰 张振秋 《辽宁中医药大学学报》 CAS 2017年第4期37-39,共3页
目的:采用响应面法优化梅花鹿鹿茸多肽的提取工艺。方法:以鹿茸多肽含量为评价指标,通过单因素试验分别考察粉碎粒度、液料比和提取时间3个因素对多肽含量的影响,采用Box-Behnken的中心组合实验设计原理优化梅花鹿鹿茸多肽的提取工艺。... 目的:采用响应面法优化梅花鹿鹿茸多肽的提取工艺。方法:以鹿茸多肽含量为评价指标,通过单因素试验分别考察粉碎粒度、液料比和提取时间3个因素对多肽含量的影响,采用Box-Behnken的中心组合实验设计原理优化梅花鹿鹿茸多肽的提取工艺。结果:最佳提取工艺:粉碎粒度为80~100目,液料比为12,提取时间为40 min。结论:响应面法优化梅花鹿茸多肽提取工艺合理,具有较好的应用价值。 展开更多
关键词 鹿茸多肽 响应面法 提取工艺
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鹿茸多肽对兔骨髓间充质干细胞移植修复关节软骨缺损的影响 被引量:5
13
作者 张春霞 修忠标 《福建中医学院学报》 2007年第4期16-19,共4页
为探讨经鹿茸多肽诱导的兔自体骨髓间充质干细胞-胶原膜支架(MCMG)复合物修复兔膝关节软骨缺损的效果,抽取兔骨髓液经体外分离、培养获得兔MSCs。选用健康的新西兰大白兔27只,随机分成A、B、C 3组。A组以未经诱导的自体MSCs-MCMG复合物... 为探讨经鹿茸多肽诱导的兔自体骨髓间充质干细胞-胶原膜支架(MCMG)复合物修复兔膝关节软骨缺损的效果,抽取兔骨髓液经体外分离、培养获得兔MSCs。选用健康的新西兰大白兔27只,随机分成A、B、C 3组。A组以未经诱导的自体MSCs-MCMG复合物修复兔膝关节软骨缺损;B组以经TGF-β1诱导后的自体MSCs-MCMG复合物修复兔膝关节软骨缺损;C组以经鹿茸多肽诱导后的自体MSCs-MCMG复合物修复兔膝关节软骨缺损。分别于术后2、4、8周取材,行HE、甲苯胺蓝染色和Ⅱ型胶原免疫组化染色观察各组兔膝关节软骨缺损修复情况。结果显示术后8周,C组修复软骨缺损的效果无论从大体标本观察或是组织学检查都与B组的修复效果相当,而且C组与B组修复效果明显优于A组。说明经鹿茸多肽诱导的兔自体MSCs-MCMG复合物移植可提高兔膝关节软骨缺损的修复质量。 展开更多
关键词 鹿茸多肽 骨髓间充质干细胞 胶原膜 移植 软骨缺损
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鹿茸多肽诱导自体骨髓间质干细胞移植修复兔膝关节软骨缺损 被引量:2
14
作者 王日雄 林建华 +2 位作者 修忠标 陈雷 吴朝阳 《中国骨与关节损伤杂志》 2007年第11期916-918,共3页
目的探讨经鹿茸多肽(PAP)诱导的兔自体骨髓间质干细胞(MSCs)复合胶原膜(MCMG)对兔膝关节局部全层软骨缺损的修复作用。方法新西兰大白兔随机分成A,B,C3组,A组以PAP诱导后的自体MSCs和MCMG修复软骨缺损;B组以经转化生长因子β1(TGF-β1)... 目的探讨经鹿茸多肽(PAP)诱导的兔自体骨髓间质干细胞(MSCs)复合胶原膜(MCMG)对兔膝关节局部全层软骨缺损的修复作用。方法新西兰大白兔随机分成A,B,C3组,A组以PAP诱导后的自体MSCs和MCMG修复软骨缺损;B组以经转化生长因子β1(TGF-β1)诱导后的自体MSCs和MCMG修复软骨缺损;C组以自体MSCs和MCMG修复软骨缺损。分别于术后2、4和8周取材进行大体、组织学及免疫组织化学染色观察,根据关节软骨组织学计分标准进行评分。结果对术后8周大体及各阶段组织学形态评分结果显示:A组与B组修复差别无统计学意义(P>0.05),而A、B组明显优于C组(P<0.05)。结论经PAP诱导的兔自体MSCs/MCMG支架复合物可促进软骨缺损的快速修复,恢复软骨组织的结构和功能。 展开更多
关键词 鹿茸多肽 转化生长因子β1 骨髓间质干细胞 胶原膜 软骨损伤
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鹿茸多肽对体外培养大鼠软骨细胞去分化现象的作用 被引量:1
15
作者 陈晓东 林建华 《中国骨与关节损伤杂志》 2009年第8期708-710,共3页
目的观察鹿茸多肽对大鼠关节软骨细胞体外传代培养中出现的去分化现象的作用。方法将第3代软骨细胞分为空白对照组、鹿茸多肽不同浓度组、硫酸氨基葡萄糖不同浓度组传代,使之进入第4代,同时以第2代软骨细胞为对照组,进行阿力新蓝染色法... 目的观察鹿茸多肽对大鼠关节软骨细胞体外传代培养中出现的去分化现象的作用。方法将第3代软骨细胞分为空白对照组、鹿茸多肽不同浓度组、硫酸氨基葡萄糖不同浓度组传代,使之进入第4代,同时以第2代软骨细胞为对照组,进行阿力新蓝染色法检测GAG(glycosaminoglycan)含量和结构,RT-PCR(reverese transcript-polymerase chain reaction)法检测Ⅱ型胶原、Aggrecan蛋白,对鹿茸多肽抗软骨细胞去分化进行分子生物学研究。结果鹿茸多肽对软骨细胞胞外基质中GAG、Ⅱ型胶原和Aggrecan蛋白表达有显著促进作用(P<0.01),其作用优于硫酸氨基葡萄糖。结论鹿茸多肽对体外培养的软骨细胞去分化现象有抑制作用,其作用优于硫酸氨基葡萄糖。 展开更多
关键词 软骨细胞 大鼠 去分化 鹿茸多肽
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鹿茸多肽CNT14对口腔黏膜成纤维细胞增殖、迁移的影响
16
作者 纳飞 周建忠 +3 位作者 何永文 谢志刚 王荃 李自良 《上海口腔医学》 CAS 北大核心 2022年第6期607-614,共8页
目的:探讨鹿茸多肽CNT14促进口腔黏膜成纤维细胞(human oral mucosa fibroblasth,hOMF)增殖和迁移的作用和相关分子机制。方法:采用活/死细胞染色评价鹿茸多肽CNT14对hOMF细胞的生物安全性,CCK-8法检测鹿茸多肽CNT14对hOMF细胞增殖的作... 目的:探讨鹿茸多肽CNT14促进口腔黏膜成纤维细胞(human oral mucosa fibroblasth,hOMF)增殖和迁移的作用和相关分子机制。方法:采用活/死细胞染色评价鹿茸多肽CNT14对hOMF细胞的生物安全性,CCK-8法检测鹿茸多肽CNT14对hOMF细胞增殖的作用,细胞划痕实验检测鹿茸多肽CNT14对hOMF细胞迁移的影响。采用蛋白质免疫印迹检测鹿茸多肽CNT14刺激后hOMF细胞内α-SMA、TGF-β1、Smad2和p-Smad2蛋白的情况;Smad2抑制剂对鹿茸多肽CNT14诱导成纤维细胞活化的影响。在新西兰大白兔体内构建角化龈缺损模型,取再生的牙龈组织进行H-E染色;免疫组织化学检测新西兰大白兔再生的牙龈组织中α-SMA、TGF-β1、Smad2和p-Smad2蛋白的表达量,补充验证鹿茸多肽CNT14促进口腔牙龈组织再生的能力。采用SPSS 20.0软件包对数据进行统计学分析。结果:活/死细胞染色实验中,鹿茸多肽CNT14处理hOMF细胞后,细胞存活率在95%以上。鹿茸多肽CNT14刺激hOMF细胞后,与对照组相比,增殖和迁移率显著增加(P<0.05)。鹿茸多肽CNT14刺激hOMF细胞后,细胞内α-SMA、TGF-β1、Smad2和p-Smad2蛋白表达量显著升高(P<0.05)。经Smad2抑制剂阻断鹿茸多肽CNT14诱导成纤维细胞后,细胞内α-SMA表达下降。动物实验中,H-E染色显示,CNT14处理组新西兰大白兔口腔黏膜创口的炎症反应比对照组轻。免疫组织化学染色结果显示,CNT14处理新西兰大白兔牙龈创口后第9天和第11天,再生的牙龈组织中α-SMA、TGF-β1、Smad2和p-Smad2表达量与对照组相比显著升高(P<0.05)。结论:鹿茸多肽CNT14对hOMF细胞具有良好的生物安全性,能促进口腔黏膜成纤维细胞增殖和迁移,细胞内α-SMA、TGF-β1、Smad2和p-Smad2蛋白表达量升高,有效促进牙龈组织再生。 展开更多
关键词 鹿茸多肽 口腔黏膜成纤维细胞 角化龈 再生
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鹿茸多肽对人骨髓间质干细胞体外增殖的影响 被引量:17
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作者 修忠标 林建华 《福建中医学院学报》 2005年第1期34-37,共4页
为探讨鹿茸多肽 (PAP)对人骨髓间质干细胞 (MSCs)体外增殖的影响 ,采用密度梯度离心法分离扩增骨髓间质干细胞 ,并用流式细胞术检测其表面标志 ;用MTT比色、免疫组化检测增殖细胞核抗原 (PCNA)、流式细胞术检测细胞周期等方法来反映MSC... 为探讨鹿茸多肽 (PAP)对人骨髓间质干细胞 (MSCs)体外增殖的影响 ,采用密度梯度离心法分离扩增骨髓间质干细胞 ,并用流式细胞术检测其表面标志 ;用MTT比色、免疫组化检测增殖细胞核抗原 (PCNA)、流式细胞术检测细胞周期等方法来反映MSCs的增殖。结果CD3 4 、CD45表达阴性 ,CD2 9、CD90 表达阳性 ;1 0 μg/ml时PAP获得最佳促进MSCs增殖效应 ,且PAP能消除MSCs在体外连续培养过程中异倍体的产生。说明PAP对人MSCs的增殖有明显促进作用 ,且能防止MSCs在体外连续培养过程中异行性的产生 ,为种子细胞的优化提供了理论和实验依据。 展开更多
关键词 人骨髓 间质干细胞 PAP 体外增殖 流式细胞术 MSC 多肽 连续培养 密度梯度离心法 表达
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鹿茸多肽对兔骨髓间质干细胞体外增殖的影响 被引量:15
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作者 林建华 修忠标 +1 位作者 吴朝阳 王日雄 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期827-828,共2页
目的探讨鹿茸多肽(PAP)对兔骨髓间质干细胞(MSCs)体外增殖的影响。方法分离MSCs,并用流式细胞术检测CD34、CD45、CD29、CD90表达;将MSCs分为对照组、PAP不同浓度组、转化生长因子β1(TGFβ1)组,培养48h后用四唑盐比色法测细胞活力、流... 目的探讨鹿茸多肽(PAP)对兔骨髓间质干细胞(MSCs)体外增殖的影响。方法分离MSCs,并用流式细胞术检测CD34、CD45、CD29、CD90表达;将MSCs分为对照组、PAP不同浓度组、转化生长因子β1(TGFβ1)组,培养48h后用四唑盐比色法测细胞活力、流式细胞术测细胞增殖指数(PI)、免疫组织化学Envision二步法测增殖细胞核抗原(PCNA)表达。结果CD34、CD45、CD29、CD90分别为0.81%、0.09%、95.90%、67.00%;PAP不同浓度组与TGFβ1组吸光度值与PI较大,免疫组织化学表达棕褐色颗粒较多,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.0.1);PAP不同浓度组MSCs在体外连续培养中没有异倍体的产生。结论PAP对兔MSCs的增殖有促进作用,且能逆转MSCs体外连续培养中异行性的产生。 展开更多
关键词 鹿茸多肽 细胞体外增殖 转化生长因子-β1(TGF-β1) 增殖细胞核抗原(PCNA) 兔骨髓间质干细胞 ENVISION 免疫组织化学 体外连续培养 流式细胞术检测 MSCs 不同浓度 四唑盐比色法 细胞增殖指数 CD34 CD29 PAP CD45 细胞活力
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鹿茸多肽对大鼠软骨细胞增殖的影响 被引量:12
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作者 陈晓东 林建华 《包头医学院学报》 CAS 2008年第2期114-116,共3页
目的:探讨鹿茸多肽(PAP)对大鼠软骨细胞体外增殖的影响。方法:采用二次酶消化法获得大鼠关节软骨细胞进行传代培养并对第四代细胞进行药物干预,利用MTT比色、免疫组化检测增殖细胞核抗原(PCNA)、流式细胞术检测细胞周期等方法来检测各... 目的:探讨鹿茸多肽(PAP)对大鼠软骨细胞体外增殖的影响。方法:采用二次酶消化法获得大鼠关节软骨细胞进行传代培养并对第四代细胞进行药物干预,利用MTT比色、免疫组化检测增殖细胞核抗原(PCNA)、流式细胞术检测细胞周期等方法来检测各代次大鼠软骨细胞和药物干预后第四代软骨细胞的增殖情况。结果:大鼠软骨细胞随传代培养,MTT比色显示增殖呈下降趋势,免疫细胞化学检测PCNA表达减少,流式细胞术显示细胞增殖指数下降;PAP可以抑制这一趋势,促进传代培养的细胞增殖能力。结论:PAP对传代培养的大鼠软骨细胞的增殖能力有明显促进作用。 展开更多
关键词 鹿茸多肽 大鼠 软骨细胞 增殖
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鹿茸多肽对兔骨性关节炎软骨细胞的影响 被引量:4
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作者 赵文海 赵长伟 +1 位作者 闻辉 周秋丽 《中国中医骨伤科杂志》 CAS 2010年第3期1-3,共3页
目的:观察鹿茸多肽对兔骨性关节炎软骨细胞的影响。方法:参考Hulth法建立骨性关节炎模型,给予不同浓度的鹿茸多肽进行干预,分别进行MTT法检测、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,获得鹿茸多肽对软骨细胞作用。结果:鹿茸多肽对骨性关节炎软骨... 目的:观察鹿茸多肽对兔骨性关节炎软骨细胞的影响。方法:参考Hulth法建立骨性关节炎模型,给予不同浓度的鹿茸多肽进行干预,分别进行MTT法检测、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,获得鹿茸多肽对软骨细胞作用。结果:鹿茸多肽对骨性关节炎软骨细胞有一定的增殖作用,骨性关节炎软骨细胞直接分泌到胞外的基质金属蛋白酶含量变化不明显,骨性关节炎软骨细胞核酸中金属蛋白酶有一定表达。结论:骨性关节炎软骨细胞在正常分化及增殖发生改变过程中,其软骨基质的降解是金属蛋白酶与其它因子协同作用的结果;鹿茸多肽有促进骨性关节炎软骨细胞增殖作用,并可抑制骨性关节炎软骨细胞中金属蛋白酶的过度表达,可能对治疗骨性关节炎有较好的作用。 展开更多
关键词 鹿茸多肽 骨性关节炎 软骨细胞
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