期刊文献+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
共找到170篇文章
< 1 2 … 9 >
每页显示 20 50 100
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
磷酸化蛋白质及多肽相关研究的技术进展 被引量：12
1
作者 邓新宇 姜颖 贺福初 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期1163-1166,共4页
磷酸化修饰是一种重要的蛋白质化学修饰,对蛋白质功能的完成或改变起到重要作用。该领域的研究存在很多技术难点,对该领域研究形成了挑战。近年来相关技术有了很多突破,磷酸化研究也取得了很多新的成就。文章将从磷酸化蛋白的检出、磷... 磷酸化修饰是一种重要的蛋白质化学修饰,对蛋白质功能的完成或改变起到重要作用。该领域的研究存在很多技术难点,对该领域研究形成了挑战。近年来相关技术有了很多突破,磷酸化研究也取得了很多新的成就。文章将从磷酸化蛋白的检出、磷酸化蛋白质和肽段的富集、生物质谱技术的改进以及磷酸化蛋白和多肽的定量与比较几个方面介绍该研究领域的技术进展。 展开更多
关键词 磷酸化蛋白 磷酸化肽 生物质谱 定量分析
下载PDF
CagA对AGS细胞Ca^(2+)相关蛋白磷酸化的影响 被引量：3
2
作者 肖迪 赵飞 +4 位作者 宋衍燕 孟凡亮 何利华 张慧芳 张建中 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2008年第32期3610-3615,共6页
目的:分析幽门螺杆菌(Hpylori)细胞毒素相关蛋白A(CagA)对人胃腺癌黏膜上皮细胞(AGS)Ca2+相关蛋白磷酸化的影响,进一步揭示Hpylori的致病机制.方法:采用金属离子亲和吸附富集技术富集Hpylori、Hpylori CagA缺失株(Hpylori△CagA)与AGS... 目的:分析幽门螺杆菌(Hpylori)细胞毒素相关蛋白A(CagA)对人胃腺癌黏膜上皮细胞(AGS)Ca2+相关蛋白磷酸化的影响,进一步揭示Hpylori的致病机制.方法:采用金属离子亲和吸附富集技术富集Hpylori、Hpylori CagA缺失株(Hpylori△CagA)与AGS细胞相互作用4h,以及培养相同时间的AGS细胞的磷酸化蛋白,利用二维凝胶电泳技术分离磷酸化蛋白,ImageMaster 2D分析软件识别差异蛋白,MALDI-TOF/TOF质谱鉴定确认蛋白.结果:Hpylori△CagA作用的AGS细胞,与培养相同时间的AGS细胞比较表达量不变,而Hpylori△CagA作用的AGS细胞表达量发生了明显变化,表明此蛋白的变化是单纯由CagA引起的;此类蛋白点共鉴定出19个,其中3个蛋白点与Ca2+相关.钙离子结合蛋白(nucleobindin-2 precursor,CALNUC)在AGS细胞以及Hpylori△CagA与AGS相互作用的2-D胶中表达量接近,而Hpylori与AGS相互作用后该蛋白表达量明显降低.结论:Hpylori CagA进入AGS细胞可能会影响内质网、线粒体及高尔基体的钙稳态,诱发内质网、线粒体、高尔基体凋亡或增殖途径,而成为胃炎、胃溃疡、胃癌发生的诱因之一. 展开更多
关键词 细胞毒素相关蛋白A 磷酸化蛋白质 钙离子通道 致病机制
下载PDF
组学在花药发育研究中的应用进展Ⅱ:蛋白质组学和代谢组学 被引量：1
3
作者 张在宝 赵海 +4 位作者 胡梦辉 邓丽君 王琦 李九丽 袁红雨 《生物技术进展》 2019年第5期440-448,共9页
自人类基因组计划开展以来,在迅速发展的各种测序和鉴定技术的推动下,已经得到了许多物种的基因组、转录组、蛋白组和代谢组序列、表达、修饰或代谢信息。目前人们已经意识到,任何基因或蛋白都很难单独地行使某种功能,各基因或蛋白间的... 自人类基因组计划开展以来,在迅速发展的各种测序和鉴定技术的推动下,已经得到了许多物种的基因组、转录组、蛋白组和代谢组序列、表达、修饰或代谢信息。目前人们已经意识到,任何基因或蛋白都很难单独地行使某种功能,各基因或蛋白间的相互作用是它们调节或参与生命活动的基本方式。另外,花药发育是植物进行有性生殖最重要的两个过程之一,其中与花粉发育和释放有关的各种发育事件的顺利进行是有性生殖成功的关键。目前随着组学技术的兴起,各种组学技术也已经广泛地应用于花药发育方面的研究工作。其中,从中心法则上看,蛋白质和许多生物小分子是生命活动的直接承担者,因此利用蛋白质组学和代谢组学技术对植物花药进行大规模地深入研究将进一步扩展并深化人们对花药发育机制的理解和应用。总结了植物花药和花粉的蛋白质组学和代谢组学的研究进展,分别阐述了蛋白质组学在不同研究方向的应用价值和特点,为相关基础和应用研究提供了可借鉴的理论依据。 展开更多
关键词 花药发育 蛋白质组学 代谢组学 磷酸化蛋白质 乙酰化蛋白质
下载PDF
幽门螺杆菌CagA对AGS细胞RNA转录相关磷酸化蛋白的影响 被引量：1
4
作者 肖迪 赵飞 +5 位作者 宋衍燕 孟凡亮 何利华 王海滨 张慧芳 张建中 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2009年第4期332-336,共5页
目的研究幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)细胞毒素相关蛋白A(CagA)作用后人胃腺癌上皮细胞(AGS)RNA转录相关蛋白磷酸化的变化情况,进一步揭示CagA的致病机制,为寻找生物标记蛋白奠定基础。方法采用金属离子亲和吸附富集技术富... 目的研究幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)细胞毒素相关蛋白A(CagA)作用后人胃腺癌上皮细胞(AGS)RNA转录相关蛋白磷酸化的变化情况,进一步揭示CagA的致病机制,为寻找生物标记蛋白奠定基础。方法采用金属离子亲和吸附富集技术富集H.pylori、H.pyloriCagA缺失株(H.pylori△CagA)与AGS细胞相互作用4 h、以及培养相同时间的AGS细胞的磷酸化蛋白,利用二维凝胶电泳技术分离磷酸化蛋白,ImageMaster2D分析软件比较分析识别差异蛋白,4700型MALDI源蛋白分析器确认蛋白。结果CagA致使AGS细胞的7个RNA相关的磷酸化蛋白出现差异表达,其中1个磷酸化蛋白表达量上调、4个磷酸化蛋白表达量下调、2个新出现磷酸化的蛋白。hnRNP D0 127位的苏氨酸及137位的丝氨酸发生了磷酸化。结论CagA作用后,致使hnRNP D0蛋白磷酸化。AGS细胞与RNA转录相关蛋白磷酸化的变化,呈现出诱导细胞凋亡、增殖及有利于细胞免疫逃逸的趋势。 展开更多
关键词 磷酸化蛋白质 亲和层析 细胞毒素相关蛋白A
下载PDF
幽门螺杆菌感染后人胃腺癌上皮细胞微量磷酸化蛋白质差异分析 被引量：1
5
作者 肖迪 宋衍燕 +4 位作者 赵飞 何利华 孟凡亮 张慧芳 张建中 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期449-453,共5页
目的研究幽门螺杆菌（Helicobacter pylori）作用后人胃腺癌上皮细胞（AGS）中微量磷酸化蛋白的变化情况。方法采用金属离子亲和吸附富集技术富集幽门螺杆菌与AGS细胞相互作用以及AGS细胞的磷酸化蛋白，除盐纯化后利用二维凝胶电泳技术... 目的研究幽门螺杆菌（Helicobacter pylori）作用后人胃腺癌上皮细胞（AGS）中微量磷酸化蛋白的变化情况。方法采用金属离子亲和吸附富集技术富集幽门螺杆菌与AGS细胞相互作用以及AGS细胞的磷酸化蛋白，除盐纯化后利用二维凝胶电泳技术分离磷酸化蛋白，MALDI—TOF／TOF质谱鉴定确认蛋白。结果幽门螺杆菌作用后AGS细胞有21种蛋白出现差异表达，其中15种蛋白表达量下调，4种蛋白出现新表达，1种蛋白表达量上调，1种蛋白不表达。差异表达蛋白涉及细胞的钙离子调节、转录、翻译、蛋白折叠与运输、核糖体的装配、中心体复制、染色体稳定、细胞结构形态、细胞增殖与凋亡等。结论幽门螺杆菌能引起广泛的胃腺癌黏膜上皮细胞蛋白磷酸化特征的变化，这种变化谱特征对进一步全面认识幽门螺杆菌的致病作用有重要意义。 展开更多
关键词 亲和吸附 磷酸化蛋白 二维凝胶电泳 致病机制
原文传递
狂犬病病毒SRV_9株磷酸化蛋白P基因和基质蛋白M基因重组质粒的构建
6
作者 苏晓慧 夏婷婷 +1 位作者 翟少华 简子健 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期2296-2300,共5页
【目的】重组狂犬病病毒SRV9株磷酸化蛋白的P基因和基质蛋白的M基因,为构建狂犬病毒(SRV9)全长c DNA提供技术支撑。【方法】设计重组PCR引物,分别扩增SRV9的P基因和M基因,构建重组质粒p MD18-PM,并对重组质粒进行酶切、测序鉴定。【结果... 【目的】重组狂犬病病毒SRV9株磷酸化蛋白的P基因和基质蛋白的M基因,为构建狂犬病毒(SRV9)全长c DNA提供技术支撑。【方法】设计重组PCR引物,分别扩增SRV9的P基因和M基因,构建重组质粒p MD18-PM,并对重组质粒进行酶切、测序鉴定。【结果】PCR扩增的SRV9的P基因和M基因大小分别为893 bp和608 bp,与Gen Bank已发表的狂犬病病毒SRV9(登录号:AF499686)序列比较,同源性分别为99.66%和99.67%。融合基因PM片段大小为1 501 bp,与预期大小相同,且融合完全。【结论】应用重组PCR成功融合狂犬病病毒SRV9磷酸化蛋白P基因和基质蛋白M基因,为后续构建病毒全长c DNA及感染性克隆奠定基础。 展开更多
关键词 狂犬病病毒SRV9 磷酸化蛋白 基质蛋白 重组PCR 基因融合
下载PDF
弗氏志贺菌磷酸化蛋白的检测
7
作者 刘小青 朱力 +4 位作者 吴松羽 商娜 冯尔玲 魏华 王恒樑 《生物技术通讯》 CAS 2010年第5期691-694,共4页
目的:检测弗氏志贺菌全菌蛋白中被磷酸化修饰的蛋白。方法:制取弗氏2a志贺菌2457T野生株全菌磷酸化蛋白样品时加入磷酸化酶抑制剂,随后对样品进行双向电泳,以抗磷酸丝氨酸/苏氨酸/酪氨酸抗体为免疫探针,通过Western印迹找到被磷酸化的蛋... 目的:检测弗氏志贺菌全菌蛋白中被磷酸化修饰的蛋白。方法:制取弗氏2a志贺菌2457T野生株全菌磷酸化蛋白样品时加入磷酸化酶抑制剂,随后对样品进行双向电泳,以抗磷酸丝氨酸/苏氨酸/酪氨酸抗体为免疫探针,通过Western印迹找到被磷酸化的蛋白,并进行胶内酶解及MALDI-TOF质谱分析。结果与结论:共检测到13个磷酸化蛋白,其中9个为代谢途径中的酶。 展开更多
关键词 弗氏志贺菌 磷酸化蛋白 检测
下载PDF
人胃上皮细胞中幽门螺杆菌CagA相关未知磷酸化蛋白和磷酸化位点分析
8
作者 肖迪 赵飞 +4 位作者 孟几亮 何利华 宋衍燕 王海滨 张建中 《胃肠病学》 2009年第1期22-26,共5页
背景：细胞毒素相关基因A蛋白（CagA）是Ⅰ型幽门螺杆菌（H.pylori）的主要毒力因子。H.pylori胃癌、胃炎相关株和CagA缺失（△CagA）株的蛋白质组学研究尚未发现CagA相关生物标记蛋白。目的：分析H.pyloriCagA阳性株和△CagA株作用后... 背景：细胞毒素相关基因A蛋白（CagA）是Ⅰ型幽门螺杆菌（H.pylori）的主要毒力因子。H.pylori胃癌、胃炎相关株和CagA缺失（△CagA）株的蛋白质组学研究尚未发现CagA相关生物标记蛋白。目的：分析H.pyloriCagA阳性株和△CagA株作用后人胃上皮细胞中差异表达的未知磷酸化蛋白和磷酸化位点,为研究CagA的致病机制提供线索。方法：以金属离子亲和吸附富集技术富集经H.pylori标准株和△CagA株作用4h的人胃腺癌细胞株AGS的磷酸化蛋白,双向电泳（2-DE）分离蛋白,飞行时间质谱（TOF-MS）技术鉴定差异蛋白点。结果：H.pylori标准株作用后,AGS细胞FAM50A蛋白276位丝氨酸发生磷酸化,PQBP1蛋白227～251序列中有磷酸化位点。与H.pylori标准株相比,△CagA株作用于AGS细胞可引起至少13种未知磷酸化蛋白的变化,其质谱图中均出现中性丢失峰,其中2种表达量增加,4种表达量降低,6种消失,1种新发生磷酸化。结论：CagA阳性H.pylori感染可致AGS细胞FAM50A和PQBP1蛋白发生磷酸化。所发现的13种未知磷酸化蛋白为揭示CagA的致病机制提供了线索。 展开更多
关键词 螺杆菌 幽门 毒力因子类 细胞毒素相关基因A蛋白 磷酸化蛋白 磷酸化位点 蛋白质组学
下载PDF
应用磷酸化蛋白质组学方法初步研究喉癌相关基因LCRG1的功能 被引量：6
9
作者 章晓鹏 肖志强 +6 位作者 李萃 李建玲 余艳辉 欧阳咏梅 冯雪萍 张鹏飞 陈主初 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第6期508-516,共9页
mRNA差异显示技术克隆的喉癌相关基因LCRG1,对不表达该基因的喉癌细胞系(Hep-2)的生长具有明显抑制作用.软件分析推测,LCRG1可能在细胞信号传导中发挥作用.为进一步地研究LCRG1的功能,应用RT-PCR和平板克隆形成实验证实,经多次传代的Hep... mRNA差异显示技术克隆的喉癌相关基因LCRG1,对不表达该基因的喉癌细胞系(Hep-2)的生长具有明显抑制作用.软件分析推测,LCRG1可能在细胞信号传导中发挥作用.为进一步地研究LCRG1的功能,应用RT-PCR和平板克隆形成实验证实,经多次传代的Hep-2/LCRG1细胞,仍表达LCRG1,且LCRG1具有显著的抑制细胞增殖的能力.抽提Hep-2/LCRG1和Hep-2/pcDNA3.1(+)细胞系总蛋白质,应用固相pH梯度(IPG)双向凝胶电泳(2DGE),结合抗酪氨酸磷酸化抗体的免疫印迹和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS),鉴定酪氨酸磷酸化的蛋白质.得到了分辨率较高、重复性较好的Hep-2/LCRG1和Hep-2/pcDNA3.1(+)细胞系的总蛋白质双向凝胶电泳图谱;结合免疫印迹反应、软件分析和质谱技术识别并鉴定了13个差异反应的酪氨酸磷酸化的蛋白质.这些蛋白质参与了细胞信号传导和细胞代谢等过程.推测LCRG1可能是通过调节这些蛋白质的酪氨酸磷酸化、去磷酸化状态,参与细胞增殖、代谢和凋亡等过程的调控,而发挥抑瘤作用.这为全面、真实地揭示LCRG1抑瘤作用的分子机理提供了新思路. 展开更多
关键词 LCRG1基因 Hep-2/LCRG1细胞系 Hep-2/pcDNA3.1(+)细胞系 双向凝胶电泳 MALDI-TOF-MS 免疫印迹 酪氨酸磷酸化蛋白质 蛋白质印迹
下载PDF
基因测序法检测FLT3和NPM1的突变研究
10
作者 马荣 崔丽娟 姜敏 《生物技术世界》 2014年第10期2-3,共2页
目的:基因测序法检测FLT3和NPM1突变在急性髓系白血病(AML)中预后判断和分子靶向治疗的意义。方法:利用基因测序法检测35例急性髓系白血病的突变。结果:发现35例样本中FLT3-ITD突变4(13.3%)例,NPM1突变6(20%)例,没有发现FLT3和NPM1都突... 目的:基因测序法检测FLT3和NPM1突变在急性髓系白血病(AML)中预后判断和分子靶向治疗的意义。方法:利用基因测序法检测35例急性髓系白血病的突变。结果:发现35例样本中FLT3-ITD突变4(13.3%)例,NPM1突变6(20%)例,没有发现FLT3和NPM1都突变,其它25(71.4%)例均为FLT3阴性、NPM1阴性。结论:AML存在NPM1突变958bp处出现插入突变,缺失TGGCAGTG和缺失后替换成gcccgcggttta的突变,FLT3中出现内部串联重复突变,直接测序法最方便检测此突变。 展开更多
关键词 急性髓系白血病 FMS样酪氨酸激酶3 核仁磷酸化蛋白 突变
原文传递
外周血miR-30a对脓毒血症并发ARDS患者预后的预测价值
11
作者 欧阳银 唐伟伟 《中南医学科学杂志》 CAS 2024年第1期135-137,共3页
目的探讨外周血miR-30a对脓毒血症并发急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者预后的预测价值。方法选取诊治的100例脓毒血症合并ARDS患者为研究对象,根据患者的28天病情转归情况分为死亡组35例,生存组65例,比较两组患者的miR-30a、ERK蛋白以及... 目的探讨外周血miR-30a对脓毒血症并发急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者预后的预测价值。方法选取诊治的100例脓毒血症合并ARDS患者为研究对象,根据患者的28天病情转归情况分为死亡组35例,生存组65例,比较两组患者的miR-30a、ERK蛋白以及磷酸化蛋白水平,评估miR-30a、ERK蛋白以及磷酸化蛋白水平对脓毒血症并发ARDS患者预后的预测效能。结果死亡组的miR-30a和磷酸化蛋白水平高于生存组,ERK蛋白低于生存组(P<0.05)。miR-30a、ERK蛋白、磷酸化蛋白进行联合诊断,其诊断特异度较高,联合检测的曲线下面积高于单独检测(P<0.05)。结论外周血miR-30a、ERK蛋白以及磷酸化蛋白表达异常可作为脓毒血症并发ARDS患者预后判定的重要依据。 展开更多
关键词 脓毒血症 急性呼吸窘迫综合征 miR-30a ERK蛋白 磷酸化蛋白 预后
下载PDF
致弱Ⅰ型MDV pp38基因同源物的克隆和序列分析 被引量：3
12
作者 朱国强 王永坤 +1 位作者 崔治中 殷震 《扬州大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 1999年第2期29-32,共4页
将致弱Ⅰ型马立克氏病病毒（ＭＤＶ）感染的细胞基因组ＤＮＡ的ＥｃｏＲⅠ酶切产物建于ｐＵＣ１８质粒载体文库中，以ｄｉｇｏｘｉｎｇｅｎｉｎ标记的含有强毒ＧＡ株ＭＤＶｐｐ３８基因克隆片段作为探针，进行原位杂交反应，初步筛选出... 将致弱Ⅰ型马立克氏病病毒（ＭＤＶ）感染的细胞基因组ＤＮＡ的ＥｃｏＲⅠ酶切产物建于ｐＵＣ１８质粒载体文库中，以ｄｉｇｏｘｉｎｇｅｎｉｎ标记的含有强毒ＧＡ株ＭＤＶｐｐ３８基因克隆片段作为探针，进行原位杂交反应，初步筛选出阳性重组质粒，进一步用ＥｃｏＲⅠ酶切分析筛选到含ｐｐ３８基因同源物的重组ｐＵＣ１８质粒．序列分析表明该ｐｐ３８基因同源物与ｐｐ３８基因有极高的同源性。 展开更多
关键词 鸡 马立克氏病病毒 序列分析 基因克隆 同源物
下载PDF
核蛋白基本单元的合成－O－乙基－UMP－丙氨酸甲酯
13
作者 赵玉芬 张保忠 章广韬 《生物化学杂志》 CSCD 1994年第5期600-604,共5页
在合成磷酰蛋白的模型化合物体Ｎ－（Ｏ，Ｏ－二烷基）磷酰化氨基酸（１）的基础上，首次合成了有机磷生命化学的模型化合物──核蛋白基本单元Ｎ－（Ｏ－烷基，Ｏ－核苷）磷酰化氨基酸（２），并对上述物质进行了分离、鉴定、比较了两... 在合成磷酰蛋白的模型化合物体Ｎ－（Ｏ，Ｏ－二烷基）磷酰化氨基酸（１）的基础上，首次合成了有机磷生命化学的模型化合物──核蛋白基本单元Ｎ－（Ｏ－烷基，Ｏ－核苷）磷酰化氨基酸（２），并对上述物质进行了分离、鉴定、比较了两种模型的合成方法。这对在小分子水平上，深入研究磷酰基的参与作用和蛋白质与核酸之间的互相作用机理提供了较好的模型化合物。 展开更多
关键词 磷酰化蛋白 核蛋白 基本单元 磷酰化 丙氨酸甲酯
下载PDF
金属氧化物在磷酸化蛋白质组学研究中的应用 被引量：1
14
作者 厚瑞萍 刘英超 +1 位作者 邓春晖 吴劲松 《生物技术》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期85-88,共4页
磷酸化肽段的高效富集是磷酸化蛋白质组学中的重要任务,通过综述纳米金属氧化物在磷酸化蛋白组学中的应用,了解磷酸化蛋白组学研究中常用的磷酸化肽段富集材料和方法。该文介绍纳米金属氧化物、核壳结构纳米磁性材料以及金属离子在磷酸... 磷酸化肽段的高效富集是磷酸化蛋白质组学中的重要任务,通过综述纳米金属氧化物在磷酸化蛋白组学中的应用,了解磷酸化蛋白组学研究中常用的磷酸化肽段富集材料和方法。该文介绍纳米金属氧化物、核壳结构纳米磁性材料以及金属离子在磷酸化蛋白组学中的富集效果。纳米金属氧化物材料由于其特殊理化性质在富集磷酸化肽段研究中具有特异性强、选择性好特点,在磷酸化蛋白组学研究中得到了广泛应用。虽然纳米金属氧化物在磷酸化蛋白组学的研究中仍然处于起步阶段,可重复性和全面富集仍面临挑战,但是在未来的亚细胞蛋白组学和功能蛋白组学研究中,纳米金属氧化物及其衍生物仍然会起着重要作用。 展开更多
关键词 金属氧化物 蛋白质组学 磷酸化蛋白 富集 纳米磁性材料
下载PDF
磁刺激通过星形胶质细胞磷酸化蛋白影响星形胶质细胞迁移 被引量：1
15
作者 关晨霞 郭钢花 +1 位作者 赵玉敏 李哲 《中华物理医学与康复杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期81-86,共6页
目的 研究1.0 Hz 60％最大刺激强度的磁刺激通过调控星形胶质细胞磷酸化蛋白(PEA-15)对星形胶质细胞迁移的影响.方法 取第3～4代体外分离培养的大鼠星形胶质细胞,分为对照组、转染组、磁刺激组和转染+磁刺激组.对照组进行阴性siRNA转染... 目的 研究1.0 Hz 60％最大刺激强度的磁刺激通过调控星形胶质细胞磷酸化蛋白(PEA-15)对星形胶质细胞迁移的影响.方法 取第3～4代体外分离培养的大鼠星形胶质细胞,分为对照组、转染组、磁刺激组和转染+磁刺激组.对照组进行阴性siRNA转染,转染组应用化学合成的siRNA进行脂质体瞬时转染,干扰PEA-15的蛋白表达;磁刺激组的星形胶质细胞在铺板24 h后接受60％最大强度磁刺激;转染+磁刺激组进行PEA-15的siRNA转染,并给予60％最大强度磁刺激.用细胞划痕试验检测星形胶质细胞的迁移程度,用免疫印迹试验检测PEA-15的蛋白表达和磷酸化水平变化.结果 ①PEA-15 siRNA的转染效果明显,Western Blot检测与对照组比较,PEA-15的蛋白表达明显降低.②体外划痕实验中,转染组、磁刺激组、转染+磁刺激组的细胞迁移面积分别与对照组比较,其星形胶质细胞迁移程度增加,差异均有统计学意义(P＜0.05).③与对照组相比,磁刺激组的PEA-15磷酸化明显增加.结论 干扰PEA-15表达后的星形胶质细胞迁移增加明显;磁刺激可通过增强PEA-15磷酸化促进星形胶质细胞的迁移. 展开更多
关键词 磁刺激 星形胶质细胞 磷酸化蛋白 细胞转染
原文传递
原位定量检测磷酸化蛋白质的Duolink PQ技术
16
作者 孙忠科 邵长林 +2 位作者 魏晓 刘威 袁静 《生命的化学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期442-445,共4页
很多蛋白质功能的变化往往要借助于特定位置和一定数目的磷酸化变化,因此原位和定量检测将是磷酸化蛋白质分析发展的新方向。一种可原位定量检测磷酸化蛋白质的新技术——Duolink PQ在国内还被了解得很少。本文从原理、方法及应用三个... 很多蛋白质功能的变化往往要借助于特定位置和一定数目的磷酸化变化,因此原位和定量检测将是磷酸化蛋白质分析发展的新方向。一种可原位定量检测磷酸化蛋白质的新技术——Duolink PQ在国内还被了解得很少。本文从原理、方法及应用三个方面对其进行了介绍,并进而对现有磷酸化蛋白质检测的主要技术进行了简要评价。 展开更多
关键词 Duolink PQ 磷酸化蛋白质 原位定量
原文传递
热激对家蚕后部丝腺磷酸化蛋白质组的影响
17
作者 夏爱华 李季生 +3 位作者 李娜 贾漫丽 王晖 杨贵明 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2016年第2期127-133,137,共8页
为了探索蛋白质磷酸化在高温环境胁迫中发挥的作用,以秋丰×白玉家蚕为试验材料,将5龄第3天的家蚕放置在40℃培养箱内热激10 min,以未热激的家蚕为对照,利用双向电泳和质谱技术对后部丝腺磷酸化蛋白进行了分析和鉴定。结果发现,与... 为了探索蛋白质磷酸化在高温环境胁迫中发挥的作用,以秋丰×白玉家蚕为试验材料,将5龄第3天的家蚕放置在40℃培养箱内热激10 min,以未热激的家蚕为对照,利用双向电泳和质谱技术对后部丝腺磷酸化蛋白进行了分析和鉴定。结果发现,与对照相比,9个磷酸化蛋白在短期的热激之后表达量下降,包括腺苷酸激酶,延伸因子EF-1δ、EF-1β',核糖体蛋白P0、P1、P2以及轻链丝心蛋白等。GO分析表明,这些蛋白质主要参与能量代谢和丝心蛋白合成。对以上磷酸化蛋白的结构和功能进行分析,并利用Net Phos工具进行磷酸化位点预测,结果表明,这些蛋白质二级结构主要以α螺旋或无规则卷曲为主,无跨膜结构域,均存在磷酸化修饰。 展开更多
关键词 热激 家蚕 后部丝腺 磷酸化蛋白 双向电泳 质谱 生物信息学
下载PDF
龙葵碱调控p-AKT、Cleaved caspase-3和p53蛋白表达抑制卵巢癌细胞增殖实验研究 被引量：16
18
作者 朱军义 马繁华 徐亚辉 《陕西中医》 2019年第5期556-560,共5页
目的:研究龙葵碱调控磷酸化蛋白激酶B((Phosphorylated protein kinase B,p-AKT)、Cleaved caspase-3和p53蛋白表达抑制卵巢癌细胞增殖诱导其凋亡。方法:将SKOV3卵巢癌细胞分为模型对照组、龙葵碱15μmol/L、龙葵碱10μmol/L、龙葵碱5μ... 目的:研究龙葵碱调控磷酸化蛋白激酶B((Phosphorylated protein kinase B,p-AKT)、Cleaved caspase-3和p53蛋白表达抑制卵巢癌细胞增殖诱导其凋亡。方法:将SKOV3卵巢癌细胞分为模型对照组、龙葵碱15μmol/L、龙葵碱10μmol/L、龙葵碱5μmol/L组,同时选择正常卵巢细胞作为正常对照组,并进行培养。使用倒置显微镜观察卵巢癌细胞的形态,使用MTT法、流式细胞仪、蛋白质印迹法(Western blot)检测不同浓度龙葵碱对卵巢癌细胞的增殖率、细胞凋亡及Cleaved caspase-3和p53蛋白表达。结果:倒置显微镜观察SKOV3卵巢癌细胞形态,随着龙葵碱的浓度越高,细胞凋亡的形态学表现越明显。正常对照组的细胞凋亡率和细胞增值率显著低于其他各组,具有统计学差异(P<0.05)。随着时间的延长和药物浓度的提高SKOV3卵巢癌细胞的生长抑制作用越来越显著,与模型对照组相比,具有统计学意义(P<0.05)。模型对照组p-AKT、Cleaved caspase-3的表达显著低于龙葵碱5μmol/L、10μmol/L、15μmol/L组,正常对照组低于模型对照组,龙葵组p53蛋白显著高于模型对照组,正常对照组p53蛋白低于卵巢癌组,有统计学意义(P<0.05)。龙葵碱5μmol/Lp-AKT、Cleaved caspase-3的表达显著低于龙葵碱10μmol/L、15μmol/L组,p53蛋白表达高于其他两组浓度,随着龙葵碱浓度的升高,p-AKT、Cleaved caspase-3表达逐渐升高,p53蛋白表达逐渐降低,有统计学差异(P<0.05)。结论:龙葵碱可能通过调控p-AKT、Cleaved caspase-3和p53蛋白的表达而抑制SKOV3卵巢癌的增殖能力,诱导其凋亡,其能力呈现浓度依赖。 展开更多
关键词 龙葵碱 磷酸化蛋白激酶B 卵巢癌细胞 细胞凋亡 MTT法
下载PDF
I型马立克氏病毒38kD磷蛋白与Ⅱ和Ⅲ型病毒间的交叉免疫反应 被引量：10
19
作者 秦爱建 崔治中 段玉友 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第5期393-397,共5页
由致病性Ⅰ型马立克氏病病毒(MDV)特异性的单克隆抗体H_(19)制备亲和层析柱,从感染重组杆状病毒BP38Ⅱ的昆虫细胞系Sf9细胞中提纯MDV的pp38基因表达产物,以此免疫小鼠制备抗血清,测定其与不同型MDV毒株感染的鸡胚成纤维细胞免疫反应性,... 由致病性Ⅰ型马立克氏病病毒(MDV)特异性的单克隆抗体H_(19)制备亲和层析柱,从感染重组杆状病毒BP38Ⅱ的昆虫细胞系Sf9细胞中提纯MDV的pp38基因表达产物,以此免疫小鼠制备抗血清,测定其与不同型MDV毒株感染的鸡胚成纤维细胞免疫反应性,同时也用不同型MDV毒株(HVT,Z4)制备的抗血清和自然感染发病鸡血清分别与感染重组病毒的Sf9细胞进行免疫交叉反应.试验结果表明,完整的Ⅰ型MDV来源的pp38基因产物与所试Ⅱ型Z4株和Ⅲ型HVT Fc126毒株在抗原性上有显著交叉反应.这一结果表明,在Ⅱ型和Ⅲ型MDV毒株中可能存在着pp38的类似物. 展开更多
关键词 马立克氏病 病毒 磷蛋白 交叉免疫
下载PDF
姜黄素对缺血再灌注H9c2心肌细胞凋亡和GSK-3表达及其磷酸化的影响 被引量：9
20
作者 虞燕萍 周承亮 +1 位作者 傅云峰 黄先玫 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期240-243,共4页
目的观察姜黄素对缺血再灌注(ischemia-reperfusion,I/R)H9c2心肌细胞凋亡和糖原合成酶激酶3(GSK-3)表达及其磷酸化的影响。方法利用缺血台氏液对体外培养的H9c2心肌细胞模拟I/R处理,同时随机分为模型组(模拟缺血90min,再灌注30min)、... 目的观察姜黄素对缺血再灌注(ischemia-reperfusion,I/R)H9c2心肌细胞凋亡和糖原合成酶激酶3(GSK-3)表达及其磷酸化的影响。方法利用缺血台氏液对体外培养的H9c2心肌细胞模拟I/R处理,同时随机分为模型组(模拟缺血90min,再灌注30min)、姜黄素组(再灌注同时加入7.5μmol/L姜黄素)和对照组(正常台氏液培养120min代替模拟I/R),采用流式细胞术检测细胞凋亡情况,采用Western blot检测GSK-3、酪氨酸磷酸化GSK-3(pTyr-GSK-3)和丝氨酸磷酸化GSK-3(pSer-GSK-3)蛋白的表达。结果与对照组比较,模型组H9c2细胞凋亡率明显提高(t=10.439,P=0.000),模型组pTyr-GSK-3和pSer-GSK-3表达均显著增加(t=5.208,P=0.006;t=5.854,P=0.004)。与模型组比较,姜黄素组凋亡率及pTyr-GSK-3表达水平显著降低(t=-8.325,P=0.001;t=-3.607,P=0.023),存活率及pSer-GSK-3表达水平显著升高(t=9.165,P=0.001;t=3.747,P=0.02)。结论 GSK-3的酪氨酸和丝氨酸磷酸化可能参与心肌细胞I/R损伤,姜黄素减少I/R心肌细胞凋亡可能与其通过减少酪氨酸磷酸化、增加丝氨酸磷酸化抑制GSK-3活性有关。 展开更多
关键词 姜黄素 心肌细胞 缺血再灌注 糖原合成酶激酶-3 酪氨酸磷酸化蛋白 丝氨酸磷酸化蛋白
下载PDF
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
上一页 1 2 … 9 下一页 到第 页
使用帮助 返回顶部