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磷脂酰丝氨酸研究进展 被引量：11
1
作者 周芳 李洪军 +3 位作者 杨复习 邹忠义 孟令军 梅琳琳 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期297-300,共4页
综述了磷脂酰丝氨酸的结构、合成机理及其在改善老年人阿耳茨海默(氏)病、提高认知力、抗抑郁、缓解紧张压抑、辅助激活酶等方面的保健功效,同时对磷脂酰丝氨酸在食品、药品行业的应用前景进行了展望。
关键词 磷脂酰丝氨酸 磷脂酰丝氨酸合酶 保健
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表达磷脂酰丝氨酸合成酶基因工程菌发酵条件的研究 被引量：3
2
作者 王建玲 张业尼 +1 位作者 路福平 李玉 《现代食品科技》 EI CAS 2009年第5期515-518,共4页
研究表达磷脂酰丝氨酸合成酶基因工程菌的发酵条件。利用250mL三角瓶发酵,对携带磷脂酰丝氨酸合成酶基因重组质粒的工程菌进行诱导表达,研究培养基的pH值、装液量、转速、诱导时菌体浓度、诱导剂浓度、诱导时间和温度对磷脂酰丝氨酸合... 研究表达磷脂酰丝氨酸合成酶基因工程菌的发酵条件。利用250mL三角瓶发酵,对携带磷脂酰丝氨酸合成酶基因重组质粒的工程菌进行诱导表达,研究培养基的pH值、装液量、转速、诱导时菌体浓度、诱导剂浓度、诱导时间和温度对磷脂酰丝氨酸合成酶酶活的影响。确定工程菌的最佳发酵条件为:培养基pH值为7.5,装液量为40mL,转速为200r/min,诱导时菌体浓度为A600≈0.4,诱导剂蔗糖的终浓度为60mmol/L,诱导时间为27h,诱导温度为37℃。在最佳发酵条件下,酶活可达2.56U/mL,是优化前的1.72倍,为中试放大提供了理论依据。 展开更多
关键词 磷脂酰丝氨酸合成酶 基因工程菌 发酵 条件优化
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两种组成型启动子PermE*和PSau3A在变铅青链霉菌中的启动效果比较
3
作者 张莹 陶欣艺 +1 位作者 王风清 魏东芝 《化学与生物工程》 CAS 2013年第11期47-50,54,共5页
红霉素抗性启动子PermE*和来源于链霉菌核基因组片段的PSau3A启动子均属于链霉菌组成型强启动子,分别将它们插入大肠杆菌-链霉菌穿梭质粒pNW-S1的SD序列和转录起始位点之间,构建成两个稳定的组成型表达质粒:pNW-S3和pNW-S4。以磷脂酰丝... 红霉素抗性启动子PermE*和来源于链霉菌核基因组片段的PSau3A启动子均属于链霉菌组成型强启动子,分别将它们插入大肠杆菌-链霉菌穿梭质粒pNW-S1的SD序列和转录起始位点之间,构建成两个稳定的组成型表达质粒:pNW-S3和pNW-S4。以磷脂酰丝氨酸合成酶PSS基因为报道基因,以蛋白表达水平评价这两个启动子在变铅青链霉菌TK24中的表达效果。结果表明,在两株组成型表达重组菌中,PSS均得到了高效表达,具有在链霉菌系统中高效表达外源基因的功能,其中PermE*的启动效率略高于PSau3A。 展开更多
关键词 组成型启动子 链霉菌 磷脂酰丝氨酸合成酶
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磷脂酰丝氨酸合成酶发酵及反应条件的研究
4
作者 王尧 刘逸寒 +3 位作者 李玉 刘晓光 王建玲 路福平 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2012年第3期170-174,共5页
研究重组磷脂酰丝氨酸合成酶表达条件及其用于酶法合成磷脂酰丝氨酸的反应条件。结果表明,在50 mL培养基中,菌体浓度为OD600=0.6时,用0.5 mmol/L的IPTG,在温度为20℃,转速为120 r/min的条件下,诱导12 h后,重组磷脂酰丝氨酸合成酶活力可... 研究重组磷脂酰丝氨酸合成酶表达条件及其用于酶法合成磷脂酰丝氨酸的反应条件。结果表明,在50 mL培养基中,菌体浓度为OD600=0.6时,用0.5 mmol/L的IPTG,在温度为20℃,转速为120 r/min的条件下,诱导12 h后,重组磷脂酰丝氨酸合成酶活力可达1.33 U/mL,是优化前的1.66倍。酶法转化磷脂酰丝氨酸的最适温度为38℃,最适pH为8.0,最适离子是12 mmol/L Mn2+,最适表面活性剂是1.0%Trition X-100。在最适条件下,磷脂酰丝氨酸转化率可达33.15%。 展开更多
关键词 磷脂酰丝氨酸合成酶 发酵条件 反应条件 优化
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磷脂酰丝氨酸合成酶基因的克隆及在枯草芽孢杆菌中的表达 被引量：8
5
作者 张业尼 路福平 +2 位作者 李玉 王建玲 李静文 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期56-60,共5页
应用PCR技术从Escherichia coli K12 Sgal-(ExPASy P23830)中扩增到大小为1350bp编码磷脂酰丝氨酸合成酶的DNA片段,将其插入枯草芽孢杆菌诱导型表达载体pBES,获得重组质粒pBES-pss后转化Bacillus subtilis DB104。经蔗糖诱导后,该磷脂... 应用PCR技术从Escherichia coli K12 Sgal-(ExPASy P23830)中扩增到大小为1350bp编码磷脂酰丝氨酸合成酶的DNA片段,将其插入枯草芽孢杆菌诱导型表达载体pBES,获得重组质粒pBES-pss后转化Bacillus subtilis DB104。经蔗糖诱导后,该磷脂酰丝氨酸合成酶在Bacillus subtilis DB104(pBES-pss)中获得胞外分泌表达,SDS-PAGE分析发现目的蛋白分子量约为52kDa,酶联比色法检测酶活力为1.50U/ml,提高了磷脂酰丝氨酸合成酶的表达产量,为工业化发酵生产磷脂酰丝氨酸合成酶奠定了良好的基础。 展开更多
关键词 磷脂酰丝氨酸合成酶 枯草芽孢杆菌 异源表达 酶联比色法
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磷脂酰丝氨酸合成酶基因pss的克隆与表达 被引量：3
6
作者 李斌 路福平 +2 位作者 刘逸寒 钱磊 戴永鑫 《生物技术通报》 CAS CSCD 2007年第4期160-164,共5页
磷脂酰丝氨酸合成酶能催化转酯反应,是定向合成特定磷脂类物质特别是磷脂酰丝氨酸的工具酶,但出发菌株产量低,很大程度上限制了酶法合成磷脂酰丝氨酸的工业化应用。利用表达载体pET-22b,实现了大肠杆菌磷脂酰丝氨酸合成酶基因在大肠杆菌... 磷脂酰丝氨酸合成酶能催化转酯反应,是定向合成特定磷脂类物质特别是磷脂酰丝氨酸的工具酶,但出发菌株产量低,很大程度上限制了酶法合成磷脂酰丝氨酸的工业化应用。利用表达载体pET-22b,实现了大肠杆菌磷脂酰丝氨酸合成酶基因在大肠杆菌BL21(DE3)中的同源高效表达。利用镍亲和柱对表达产物进行纯化,并用HPLC法对纯化后的重组酶的活力进行检测。结果表明,目的蛋白可在短时间内进行大量表达,蛋白含量是出发菌株的100倍,同时经6h的转酯反应转化率达到33%,重组磷脂酰丝氨酸合成酶活力达到69U/mg蛋白。 展开更多
关键词 大肠杆菌 磷脂酰丝氨酸合成 酶基因表达 转酯反应
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重组磷脂酰丝氨酸合成酶的分离纯化及酶学性质研究 被引量：1
7
作者 张业尼 路福平 +1 位作者 李玉 王建玲 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期106-110,共5页
利对重组枯草芽孢杆菌（pBES-pss）表达的磷脂酰丝氨酸合成酶进行分离纯化及酶学性质研究。pBES-pss发酵后的粗酶液经硫酸铵盐析、中空纤维膜除盐浓缩、SP—SepharoseHP离子交换层析和Sephadex G-75凝胶层析。基本获得电泳纯的重组磷脂... 利对重组枯草芽孢杆菌（pBES-pss）表达的磷脂酰丝氨酸合成酶进行分离纯化及酶学性质研究。pBES-pss发酵后的粗酶液经硫酸铵盐析、中空纤维膜除盐浓缩、SP—SepharoseHP离子交换层析和Sephadex G-75凝胶层析。基本获得电泳纯的重组磷脂酰丝氨酸合成酶，比活力可达13．62U／mg，分子量约为53kD。酶学性质研究表明，该酶催化卵磷脂水解反应的最适pH8．0，最适温度为35℃。稳定性研究表明：该酶在pH6．5～9．5区间和低于45℃温度下稳定。表面活性剂及金属离子对该酶水解活性的影响结果表明，SDS、Tween20、Tween80对该酶有抑制作用，Triton X-100对该酶有增强作用；Mg^2＋、Zn^2＋、K^＋对该酶有抑制作用，Ca^2＋、Mn^2＋和EDTA对该酶有增强作用。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 磷脂酰丝氨酸合成酶 纯化 性质
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