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苯丙氨酸及苯丙酮酸对Lactobacillus sp.SK007合成苯乳酸的影响 被引量:19
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作者 李兴峰 江波 +2 位作者 潘蓓蕾 沐万孟 张涛 《过程工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第6期1202-1206,共5页
从自然发酵泡菜中分离筛选到一株乳杆菌(Lactobacillus sp.)SK007,研究了Lactobacillus sp.SK007利用苯丙氨酸合成苯乳酸的过程,结果发现,在MRS培养基中最高可产生0.55mmol/L苯乳酸,苯丙氨酸剩余94%,但检测不到中间产物苯丙酮酸,这表明... 从自然发酵泡菜中分离筛选到一株乳杆菌(Lactobacillus sp.)SK007,研究了Lactobacillus sp.SK007利用苯丙氨酸合成苯乳酸的过程,结果发现,在MRS培养基中最高可产生0.55mmol/L苯乳酸,苯丙氨酸剩余94%,但检测不到中间产物苯丙酮酸,这表明苯丙氨酸的转氨反应是苯乳酸合成的限速步骤.用苯丙酮酸代替苯丙氨酸作为底物可有效突破这一瓶颈,进一步优化了Lactobacillus sp.SK007利用苯丙酮酸合成苯乳酸的发酵条件.当苯丙酮酸为18.3mmol/L,30℃静置培养24h,苯乳酸产量可达10.25mmol/L. 展开更多
关键词 苯乳酸 苯丙氨酸 苯丙酮酸 生物合成 乳杆菌
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苯丙氨酸生物合成的研究进展 被引量:14
2
作者 李永辉 刘云 徐琪寿 《生物技术通讯》 CAS 2002年第4期296-300,共5页
代谢工程是利用分子生物学原理系统分析代谢途径,设计合理的遗传修饰策略从而优化细胞的生物学特性。本文对代谢工程及其在氨基酸生产上的应用进行了简单的回顾,比较了苯丙氨酸的几种合成途径,重点综述了苯丙氨酸生物合成的代谢途径、... 代谢工程是利用分子生物学原理系统分析代谢途径,设计合理的遗传修饰策略从而优化细胞的生物学特性。本文对代谢工程及其在氨基酸生产上的应用进行了简单的回顾,比较了苯丙氨酸的几种合成途径,重点综述了苯丙氨酸生物合成的代谢途径、相关酶及其调控方式、代谢流和转运系统的分析研究,并对苯丙氨酸生产策略的优化及未来发展进行了展望。 展开更多
关键词 苯丙氨酸 生物合成 研究进展 代谢工程
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外源基因pheA、aroG和tyrB在苯丙氨酸合成途径中的共表达 被引量:8
3
作者 曾小冰 范长胜 +2 位作者 江培翃 陈永青 黄伟达 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期671-674,共4页
利用基因工程技术提高了短杆菌的苯丙氨酸合成途径中关键酶活性 ,大幅度地增加了生物合成苯丙氨酸的产量。首先采用聚合酶链反应 (PCR)从大肠杆菌的氟代苯丙氨酸抗性变异菌株基因组中扩增到与苯丙氨酸合成相关的aroG ,pheA和tyrB 3个基... 利用基因工程技术提高了短杆菌的苯丙氨酸合成途径中关键酶活性 ,大幅度地增加了生物合成苯丙氨酸的产量。首先采用聚合酶链反应 (PCR)从大肠杆菌的氟代苯丙氨酸抗性变异菌株基因组中扩增到与苯丙氨酸合成相关的aroG ,pheA和tyrB 3个基因。其中aroG编码 3 脱氧 2 阿拉伯庚酮糖 7 磷酸合成酶 (DS) ,pheA编码双功能酶蛋白 分枝酸变位酶 (CM)和预苯酸脱水酶 (PD) ,tyrB编码转氨酶 (AT)。设计不同的酶切位点 ,利用质粒pUC118的多克隆位点 ,将 3个基因按不同的顺序组合串联 ,然后插入穿梭质粒pCZ 10 ,导入短杆菌中表达。结果表明 3个大肠杆菌基因在短杆菌中能够表达。其中以aroG pheA tyrB顺序串联而构建的黄色短杆菌工程菌株1311 GAB中的DS酶活力提高 4 5倍 ,CM提高 4 2倍 ,PD提高 2 7倍 ,AT提高 3 2倍 ;它的苯丙氨酸合成量提高2 35倍。 展开更多
关键词 苯丙氨酸 生物合成 外源基因 表达
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苯丙氨酸合成的关键酶基因aroG与pheA串联表达 被引量:9
4
作者 范长胜 曾小冰 +2 位作者 柴运嵘 江培翃 黄伟达 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第5期430-435,共6页
aroG 和pheA 是与苯丙氨酸合成有关的两个重要基因。在大肠杆菌( Escherichiacoli) 中,aroG 基因编码脱氧阿拉伯糖型庚酮糖磷酸合酶(DS) ,该酶催化由糖代谢中心途径分流出来的磷酸烯醇丙酮酸(PE... aroG 和pheA 是与苯丙氨酸合成有关的两个重要基因。在大肠杆菌( Escherichiacoli) 中,aroG 基因编码脱氧阿拉伯糖型庚酮糖磷酸合酶(DS) ,该酶催化由糖代谢中心途径分流出来的磷酸烯醇丙酮酸(PEP) 和赤鲜糖4磷酸(E4P) 缩合形成脱氧阿拉伯糖型庚酮糖磷酸(DAHP) 的反应;pheA 基因编码一个双功能酶蛋白,它同时催化两步关键反应,即具有分枝酸变位酶(CM) 和预苯酸脱水(PD) 的两种功能。采用PCR 技术分别从两个不同品系的大肠杆菌染色体DNA 中扩增到aroG 和pheA。当这两个基因串联在一个质粒上导入大肠杆菌P2392 中进行表达时,它们编码的酶DS、CM 和PD 活性分别提高4-3 、4-4 和2-2 倍;导入短杆菌( Brevibacterium)2731 中表达时,相应的酶活性分别提高12-3 、2-3 和5-6 倍。两基因的串联表达能大幅度地提高工程菌株的苯丙氨酸发酵产量。 展开更多
关键词 苯丙氨酸 生物合成 aroG基因 基因串联表达
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由肉桂酸生物合成L-苯丙氨酸 被引量:9
5
作者 李清彪 何炳林 《化学进展》 SCIE CAS CSCD 1996年第1期49-56,共8页
本文评述了L-苯丙氮酸的各种合成路线、国内外的研究现状及工业化情况,重点讨论了由肉桂酸和氨生物合成L-苯丙氨酸的路线,提出了在国内进一步工作的建议。
关键词 L-苯丙氨酸 肉桂酸 生物合成
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Identification of PAL genes related to anthocyanin synthesis in tea plants and its correlation with anthocyanin content 被引量:9
6
作者 Xuejin Chen Pengjie Wang +6 位作者 Mengya Gu Binghao Hou Churan Zhang Yucheng Zheng Yun Sun Shan Jin Naixing Ye 《Horticultural Plant Journal》 SCIE CSCD 2022年第3期381-394,共14页
The phenylalanine ammonia-lyase(PAL)gene family in tea plants(Camellia sinensis L.)encodes the enzyme that catalyzes the first reaction of the phenylpropane metabolic pathway.The present study aimed to characterize th... The phenylalanine ammonia-lyase(PAL)gene family in tea plants(Camellia sinensis L.)encodes the enzyme that catalyzes the first reaction of the phenylpropane metabolic pathway.The present study aimed to characterize the PAL genes in tea plants,and get better insights on the CsPALs in anthocyanins accumulation.Seven CsPAL genes were identified and characterized in tea plants by bioinformatics analysis.Systematic analysis of CsPALs was conducted for its phylogenetic relationship,gene structure,chromosomal location,and protein conserved motifs based on tea plant genome.The cis-elements of CsPALs were responsive to light,abiotic stress,hormone,and MYB-binding site.Furthermore,tissuespecific expression analysis showed that CsPAL4 was expressed preferentially in young leaves and buds.Correlation analysis was performed in purple-leaf tea with anthocyanin components,and it was suggested that CsPAL4 was closely related with different anthocyanin accumulated,especially with cyanidin 3-O-galactoside,cyanidin 3-O-glucoside,and delphinidin 3-O-glucoside.Additionally,the putative upstream regulation factors CsMYBs(CsMYB59,CsARR1,CsSRM1,CsMYB101,and CsMYB52)and CsbHLHs(CsbHLH104,CsbHLH3,CsbIM1,CsTCP14,and CsPIF4)could bind to the promoter of CsPALs,thereby activating its transcription.This study provides a theoretical basis for further research to elucidate the functions of the CsPAL genes. 展开更多
关键词 Camellia sinensis phenylalanine ammonia-lyase(PAL) Anthocyanin biosynthesis Expression pattern
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1-甲基环丙烯结合苯丙氨酸处理对桃花色苷合成的影响 被引量:3
7
作者 赵婧 邵小达 +7 位作者 赵晟 潘泓 马立杰 张映曈 凌军 李鹏霞 黄雯 周宏胜 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2023年第13期131-138,共8页
为探究采后1-甲基环丙烯(1-methylcyclopropene,1-MCP)结合苯丙氨酸(phenylalanine,Phe)处理对桃果实外观色泽的影响,本实验以套袋桃果实为材料,采用清水(Control)、Phe、1-MCP、Phe+1-MCP 4?种方式进行处理,研究不同处理后贮藏期间桃... 为探究采后1-甲基环丙烯(1-methylcyclopropene,1-MCP)结合苯丙氨酸(phenylalanine,Phe)处理对桃果实外观色泽的影响,本实验以套袋桃果实为材料,采用清水(Control)、Phe、1-MCP、Phe+1-MCP 4?种方式进行处理,研究不同处理后贮藏期间桃果实表型、果皮色差、花色苷含量、花色苷和乙烯代谢相关基因表达的规律。结果表明:与Control组相比,单独Phe和1-MCP处理均可促进花色苷含量的增加,而Phe+1-MCP处理可更有效地促进花色苷的合成;贮藏第6天时,Phe+1-MCP处理组桃果皮的花色苷含量为76.71 mg/kg,分别是Control、Phe组和1-MCP组的7.29、3.36倍和1.33倍;Phe+1-MCP处理可有效提升桃果皮花色苷合成相关基因(PAL、CHS、CHI、F3H、DFR、ANS、UFGT、MYB10.1、bHLH-3和WD40-1)的表达量,并降低乙烯合成和信号转导相关基因(ACS、EIN4和EIL)的表达量。本研究结果不但进一步证实了1-MCP处理可有效促进套袋桃果皮花色苷的合成,且发现Phe结合1-MCP处理对花色苷的合成具有协同作用,可为1-MCP结合Phe处理在桃采后色泽调控中的应用提供理论依据。 展开更多
关键词 1-甲基环丙烯 苯丙氨酸 花色苷合成 基因表达
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Effects of feeding tyrosine and phenylalanine on the accumulation of phenylethanoid glycosides to Cistanche deserticola cell suspension culture 被引量:2
8
作者 HU Gao-Sheng JIA Jing-Ming Doh Hoon Kim 《Chinese Journal of Natural Medicines》 SCIE CAS CSCD 2014年第5期367-372,共6页
AIM: To investigate the effects of feeding phenylalanine(Phe) and tyrosine(Tyr) on the accumulation of total phenolic compounds and four phenylethanoid glycosides(PeGs) to a cell suspension culture of the parasitic pl... AIM: To investigate the effects of feeding phenylalanine(Phe) and tyrosine(Tyr) on the accumulation of total phenolic compounds and four phenylethanoid glycosides(PeGs) to a cell suspension culture of the parasitic plant Cistanche deserticola. METHOD: A cell suspension culture of C. deserticola was established and precursors of different concentrations were fed. In each group, the cell was sampled at the 24th day after inoculation. The content of total phenolic compounds and four PeGs compounds were determined using the Folin-Ciocalteu method and an HPLC method, respectively. RESULTS: In the Phe fed cells, the maximum PeGs yield was achieved when Phe was fed at 1.5 mmol·L-1 and the yield reached 1.13 times the control cell concentration. In the Tyr fed cells, the maximum yield of PeGs was 1.60 times of control when 0.75 mmol·L-1 Tyr was fed to the cells. Furthermore, it was found that the salidroside yield was 4.01 times of control group when 5 mmol·L-1 Tyr was fed. CONCLUSION: Tyr is a better precursor for PeGs accumulation compared with Phe, and the rate limiting enzymes might be involved in the Tyr branch. 展开更多
关键词 Cistanche deserticola Cell suspension culture phenylalanine TYROSINE Precursor feeding RP-HPLC SALIDROSIDE biosynthesis Phenylethanoid glycosides
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大肠杆菌整体代谢网络调控基因(csrA)的敲除及其对苯丙氨酸生物合成的影响
9
作者 黄钦耿 吴伟斌 +2 位作者 翁雪清 施巧琴 吴松刚 《氨基酸和生物资源》 CAS 2012年第2期1-4,共4页
csrA基因产物是大肠杆菌芳香族氨基酸生物合成途径中碳中心代谢有关的一种全局性调控蛋白质。采用Red敲除系统介导的同源重组的方法定位缺失大肠杆菌染色体csrA基因,经PCR、DNA测序等多种方法证实了基因重组缺失的可靠性。csrA基因缺失... csrA基因产物是大肠杆菌芳香族氨基酸生物合成途径中碳中心代谢有关的一种全局性调控蛋白质。采用Red敲除系统介导的同源重组的方法定位缺失大肠杆菌染色体csrA基因,经PCR、DNA测序等多种方法证实了基因重组缺失的可靠性。csrA基因缺失后,缺失菌株较对照菌株,糖酸转化率有所提高,发酵生产苯丙氨酸的能力也得到一定的提高,产酸提高约13%。 展开更多
关键词 csrA 基因敲除 苯丙氨酸生物合成 代谢调控
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微生物发酵法生产L-苯丙氨酸的研究进展
10
作者 周海岩 刘龙 +2 位作者 王天文 堵国成 陈坚 《工业微生物》 CAS CSCD 2011年第3期90-98,共9页
L-苯丙氨酸(L-Phe)是一种重要的必需氨基酸,广泛应用于食品、饲料添加剂以及医药等领域。L-Phe主要由化学合成法、酶法和微生物发酵法等3种方法来生产。其中,微生物发酵法由于具有原料廉价易得、环境污染较小、产物纯度高等优点成为目... L-苯丙氨酸(L-Phe)是一种重要的必需氨基酸,广泛应用于食品、饲料添加剂以及医药等领域。L-Phe主要由化学合成法、酶法和微生物发酵法等3种方法来生产。其中,微生物发酵法由于具有原料廉价易得、环境污染较小、产物纯度高等优点成为目前国内外工业化生产L-Phe的主要方法。本文主要以大肠杆菌为例对L-Phe生物合成途径及调控、增强L-Phe合成的代谢调节策略和发酵法生产L-Phe的关键技术和策略等3个方面的研究进行了分析和总结,并针对目前L-Phe发酵行业所面临的挑战对发展前景提出展望。 展开更多
关键词 L-苯丙氨酸 微生物发酵 大肠杆菌 生物合成 代谢调节
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白桦苯丙氨酸解氨酶(PAL)基因的分离及其表达 被引量:11
11
作者 宋福南 邢磊 +2 位作者 陈肃 戴超 刘雪梅 《东北林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期14-17,47,共5页
利用RT-PCR和RACE技术从白桦(Betulaplatyphylla)中克隆了编码苯丙氨酸解氨酶(PAL)的cD-NA,其2322bp的ORF编码773个氨基酸,其推导的氨基酸序列包含PAL-HAL和PAL2个功能域以及酶活性中心序列GTITASGDLVPLSYIA,该序列同其它5种植物的序列... 利用RT-PCR和RACE技术从白桦(Betulaplatyphylla)中克隆了编码苯丙氨酸解氨酶(PAL)的cD-NA,其2322bp的ORF编码773个氨基酸,其推导的氨基酸序列包含PAL-HAL和PAL2个功能域以及酶活性中心序列GTITASGDLVPLSYIA,该序列同其它5种植物的序列一致性为60%~73%,其中与美洲红(Rhizophoraman-gle)树最高为73.1%。以该序列构建了系统进化树,白桦与美洲红树聚为一类,其余3种裸子植物长白松、沙地海岸松和银杏聚为一类。BplPAL1基因在各组织中均有不同的转录表达,在次生木质部表达最强,其次是幼叶,在花序中的表达量较低,说明BplPAL1基因在各组织中的调控和表达是不同的。 展开更多
关键词 苯丙氨酸解氨酶 基因表达 木质素生物合成 抗病性 次生代谢 木材形成
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L-苯丙氨酸的生物合成 被引量:9
12
作者 潘光亮 何学军 郑剑 《南京化工大学学报》 1996年第1期89-94,共6页
L-苯丙氨酸属于芳香族氨基酸,在生物体内存在着复杂的合成路线。本文根据L-苯丙氨酸的生物合成过程以及在生物体内的代谢特点,阐述利用生物合成法实现工业化生产L-苯丙氨酸的可行路线。
关键词 L-苯丙氨酸 生物合成 发酵 酶转化 氨基酸
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丹参中苯丙氨酸裂解酶基因的克隆、诱导及其对酚酸类 成分的影响(英文) 被引量:6
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作者 胡永胜 张磊 +1 位作者 邸鹏 陈万生 《中国天然药物》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第6期449-457,共9页
目的:克隆丹参中的苯丙氨酸裂解酶基因(Smpal),研究其表达特征及其对丹参中酚酸类成分的影响。方法:通过cDNA末端快速扩增(RACE)方法克隆了Smpal全长基因,分别使用甲基茉莉酸(MeJA)、水杨酸(SA)、赤霉素(GA3)诱导Smpal的表达。代谢物含... 目的:克隆丹参中的苯丙氨酸裂解酶基因(Smpal),研究其表达特征及其对丹参中酚酸类成分的影响。方法:通过cDNA末端快速扩增(RACE)方法克隆了Smpal全长基因,分别使用甲基茉莉酸(MeJA)、水杨酸(SA)、赤霉素(GA3)诱导Smpal的表达。代谢物含量通过液质联用仪检测。结果:Smpal全长cDNA序列为2354bp,包含一个2133bp的开放阅读框,编码711个氨基酸残基的蛋白,含有长度为21bp的5'非编码区,171bp的3'非编码区。Smpal在根茎叶中都有表达,在根中表达量最多,其次是茎和叶。结论:Smpal与其他物种中pal基因具有62.4%-93%的同源性,Southern杂交表明Smpal属多基因家族。丹参中迷迭香酸(RA)和丹酚酸B(LAB)的含量与Smpal的表达相关。 展开更多
关键词 苯丙氨酸裂解酶基因 迷迭香酸 丹酚酸B 生物合成 丹参 防御/应激
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苯丙氨酸合成代谢途径与陆地棉植株矮化的相关性研究 被引量:2
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作者 屠小菊 汪启明 +2 位作者 骆鹰 郑重谊 刘爱玉 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期3028-3034,共7页
通过iTRAQ(同位素相对标记与绝对定量)定量蛋白质组学技术分析陆地棉矮化突变体陆矮1号(LA-1)及其近等基因系LH-1茎尖的差异表达蛋白,发现苯丙氨酸合成途径的关键调控元件色氨酸生物合成酶trpD在LA-1中表达下调,苯丙氨酸代谢途径关... 通过iTRAQ(同位素相对标记与绝对定量)定量蛋白质组学技术分析陆地棉矮化突变体陆矮1号(LA-1)及其近等基因系LH-1茎尖的差异表达蛋白,发现苯丙氨酸合成途径的关键调控元件色氨酸生物合成酶trpD在LA-1中表达下调,苯丙氨酸代谢途径关键酶4-香豆基辅酶A连接酶(4CL)、咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶(CCo AOMT)、转肉桂酸单氧酶亚家族基因(CYP73A)在LA-1中表达上调。通过实时定量PCR检测发现trpD、4CL、CCo AOMT、CYP73A基因转录水平与蛋白表达的趋势一致。对两种材料不同节间(倒1至倒6)的石蜡切片进行观察发现,从倒1节间到倒6节间,LA-1维管层与皮层宽度的比值均极显著大于LH-1,在相同节间,LA-1的导管的数目明显多于LH-1,维管层的发育要早于LH-1。这些研究结果揭示了陆地棉矮化突变体LA-1的矮化与苯丙氨酸合成和代谢途径存在相关性,为进一步发掘调控陆地棉矮化的关键基因和深入了解相关分子机制提供理论依据。 展开更多
关键词 陆矮1号(LA-1) 矮化 蛋白质组学(iTRAQ技术) 苯丙氨酸合成代谢途径 细胞学特征
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