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两种PCR方法检测食品中花生过敏原Arah1成分 被引量:9
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作者 陈家杰 王海燕 +2 位作者 梁秋妮 吉坤美 刘志刚 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2011年第9期69-74,共6页
采用套式PCR和荧光实时定量PCR两种方法检测食品中花生主要过敏原Ara h1基因成分,从而推断食品中是否含有花生过敏原成分。根据GenBank提供的花生主要过敏原基因Ara h1 DNA序列(登录号为AF432231)的中一段序列分别设计2对内外特异性引物... 采用套式PCR和荧光实时定量PCR两种方法检测食品中花生主要过敏原Ara h1基因成分,从而推断食品中是否含有花生过敏原成分。根据GenBank提供的花生主要过敏原基因Ara h1 DNA序列(登录号为AF432231)的中一段序列分别设计2对内外特异性引物,扩增目的基因片段来建立套式PCR方法;再用上述内引物扩增目的片段,建立SYBRGreenⅠ荧光实时定量PCR方法,绘出拷贝数-CT标准曲线;并通过这2种PCR方法检测8种食品中含有花生主要过敏原Ara h1基因成分。套式PCR方法具有较高的特异性和灵敏度,SYBR GreenⅠ荧光实时定量PCR方法的标准曲线在3×102至3×108 copies范围内线性关系良好,R2值为0.993 5,检测低限设定为3×103 copies。2种方法检测8种食品样品,结果均与食物过敏原标注内容相符。本研究建立的2种方法具有快速、灵敏等优点,可用于食品中花生主要过敏原基因Ara h1成分的检测。 展开更多
关键词 套式PCR 荧光实时定量PCR 花生主要过敏原 Arah1
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实时定量PCR技术检测食品中花生过敏原Ara h1基因成分 被引量:3
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作者 吉坤美 陈家杰 +2 位作者 王海燕 刘晓宇 刘志刚 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2010年第12期188-193,共6页
采用Taqman探针PCR技术,建立食品中花生主要过敏原基因Ara h1的检测方法。根据GenBank提供的Arah1基因(序列号AF432231)中一段DNA序列设计特异性引物与Taqman探针,扩增该目的基因,建立拷贝数-CT标准曲线,可通过标准曲线方程计算食品中... 采用Taqman探针PCR技术,建立食品中花生主要过敏原基因Ara h1的检测方法。根据GenBank提供的Arah1基因(序列号AF432231)中一段DNA序列设计特异性引物与Taqman探针,扩增该目的基因,建立拷贝数-CT标准曲线,可通过标准曲线方程计算食品中含有花生主要过敏原Ara h1基因拷贝数(copies),并用于检测8种食品中是否含有残留的该过敏原基因。此标准曲线在1.5×103copies~1.5×107copies范围内线性关系良好,R2值为0.975 9;8种样品检测结果与食物过敏原标注内容相一致。 展开更多
关键词 实时定量PCR TAQMAN探针 花生主要过敏原 Arah1
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