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兔抗鹅IgG酶标抗体的制备及初步应用 被引量：2
1
作者 刘菲 唐卫杰 +3 位作者 韩清林 赵婷婷 高丽芹 严晓玲 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第6期91-94,共4页
为了研究兔抗鹅IgG酶标抗体的制备,试验采用水稀释-辛酸-硫酸铵法粗提,透析除盐,DEAEA-50纤维素层析相结合的方法提取鹅卵黄IgG,经核酸蛋白检测仪和SDS-PAGE测定IgG浓度;制备兔抗鹅IgG酶标抗体;利用酶标抗体检测小鹅瘟病毒(GPV)VP3基因... 为了研究兔抗鹅IgG酶标抗体的制备,试验采用水稀释-辛酸-硫酸铵法粗提,透析除盐,DEAEA-50纤维素层析相结合的方法提取鹅卵黄IgG,经核酸蛋白检测仪和SDS-PAGE测定IgG浓度;制备兔抗鹅IgG酶标抗体;利用酶标抗体检测小鹅瘟病毒(GPV)VP3基因疫苗的免疫效果。结果表明,粗提的IgG浓度为10 mg/mL,抗体纯度可达到94.5%;免疫扩散得出兔抗鹅IgG抗血清效价约1∶32,抗体酶标后效价为1∶3000;酶标抗体可以作为检测疫苗效果一种很好的工具。 展开更多
关键词 鹅卵黄IgG 提取 酶标 小鹅瘟vp3基因疫苗
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鹅细小病毒VP3基因疫苗两种不同免疫方式对细胞免疫的影响 被引量：5
2
作者 车茜 程安春 +5 位作者 汪铭书 黎敏 韩新锋 卢菲 刘晓东 陈孝跃 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期401-405,共5页
将构建的鹅细小病毒（GPV）VP3基因疫苗（pcDNA-GPV-VP3）转染鹅胚成纤维细胞（GEF），每隔12h检测VP3蛋白的表达情况，同时以不同剂量分别通过基因枪轰击和肌肉注射免疫28日龄健康雏鹅，于免疫后第3、7、14、21、28、35、49、63、77和1... 将构建的鹅细小病毒（GPV）VP3基因疫苗（pcDNA-GPV-VP3）转染鹅胚成纤维细胞（GEF），每隔12h检测VP3蛋白的表达情况，同时以不同剂量分别通过基因枪轰击和肌肉注射免疫28日龄健康雏鹅，于免疫后第3、7、14、21、28、35、49、63、77和105d采血，进行淋巴细胞增殖试验（MTT法）。结果，转染后第24h即可在GEF中检测到GPVVP3蛋白，第60h表达量达到高峰。试验组鹅外周血T淋巴细胞D490nm值在免疫后第35d达到最大。肌肉注射组和基因枪组免疫后第14～63d、第7～63d的D490nm值分别与PBS对照组差异板显著；肌肉注射组及基因枪组免疫后第21～49d的D490nm值显著高于弱毒疫苗对照组；肌肉注射组及基因枪组免疫后第14～63d的D490nm值板显著高于空质粒对照组。表明，基因枪轰击和肌肉注射pcDNA—GPV—VP3均能诱导雏鹅产生良好的细胞免疫应答。 展开更多
关键词 鹅细小病毒vp3基因疫苗 细胞免疫 基因枪轰击 肌肉注射
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不同剂量小鹅瘟病毒VP3基因疫苗肌肉注射诱导小鼠细胞免疫 被引量：3
3
作者 卢菲 程安春 +5 位作者 汪铭书 韩新锋 黎敏 车茜 刘晓东 陈孝跃 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1158-1161,共4页
将小鹅瘟(Gosling plagne,GP)VP3基因疫苗(pcDNA-GPV-VP3)分别按每只50、100、200μg肌肉注射免疫BALB/c小鼠,以pcDNA3.1(+)和生理盐水为对照,于免疫后7、14、21、28、35、63、105d采血用淋巴细胞转化实验(MTT法)和流式细胞仪(FACS)分... 将小鹅瘟(Gosling plagne,GP)VP3基因疫苗(pcDNA-GPV-VP3)分别按每只50、100、200μg肌肉注射免疫BALB/c小鼠,以pcDNA3.1(+)和生理盐水为对照,于免疫后7、14、21、28、35、63、105d采血用淋巴细胞转化实验(MTT法)和流式细胞仪(FACS)分别检测小鼠外周血T淋巴细胞转化效果和CD4+、CD8+T淋巴细胞动态变化。结果表明,pcDNA-GPV-VP3免疫小鼠能够诱导机体产生良好的细胞免疫应答。50、100μg pcDNA-GPV-VP3免疫后小鼠外周血T淋巴细胞对ConA刺激的反应显著或极显著高于200μg组、空载体和生理盐水对照组,且以100μg组最优,而200μg组的转化效果比空载体组差;100μg pcDNA-GPV-VP3免疫小鼠后所诱导的CD4+T淋巴细胞免疫功能最强,50μg组次之;50μg pcDNA-GPV-VP3免疫小鼠后所诱导的CD8+T淋巴细胞免疫功能最强,100μg组次之。 展开更多
关键词 小鹅瘟病毒vp3基因疫苗 肌肉注射 小鼠 细胞免疫
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