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培养液及血清浓度对山羊孤雌胚胎体外培养的影响 被引量:9
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作者 刘凤军 王勇胜 +1 位作者 华松 张涌 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2004年第2期11-13,共3页
试验比较了在SOFaa ,CR1aa ,mCR1aa 3种培养液中添加不同浓度的成年山羊血清 (NGS)对山羊孤雌胚胎进行体外培养的效果。结果表明 :在 3种培养液中 ,添加 10 %的NGS对山羊孤雌胚胎的体外发育效果较好 ,囊胚率分别可达6 2 .79% (81/ 12 9)... 试验比较了在SOFaa ,CR1aa ,mCR1aa 3种培养液中添加不同浓度的成年山羊血清 (NGS)对山羊孤雌胚胎进行体外培养的效果。结果表明 :在 3种培养液中 ,添加 10 %的NGS对山羊孤雌胚胎的体外发育效果较好 ,囊胚率分别可达6 2 .79% (81/ 12 9)、5 3.5 2 % (38/ 71)、13.6 4 % (12 / 88) ;mCR1aa组囊胚发育率和囊胚细胞数显著低于SOFaa组和CR1aa组 ,SOFaa组优于CR1aa组 ,但SOFaa组和CR1aa组间无显著差异。在现有试验条件下 ,以在SOFaa培养液中 ,山羊孤雌胚胎的体外培养的第 72小时时加入 10 %的NGS的发育效果较好 ,囊胚率可达 6 2 .79%。 展开更多
关键词 培养液 血清浓度 山羊 孤雌胚胎 体外培养 培养液 囊胚率
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小鼠孤雌胚的体内体外发育研究 被引量:2
2
作者 刘红林 范必勤 +3 位作者 汪河海 宗卉 王公金 陈宜峰 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期103-109,共7页
小鼠孤雌激活卵体外培养于CZB溶液中可发育至孵出囊胚阶段,而且孤雌胚移植后可在受体子宫内附植发育。单倍体、二倍体孤雌胚发育至桑椹胚的能力相似,但发育至囊胚的能力,后者高于前者。孤雌囊胚体外发育至孵出的比率仅为20%,... 小鼠孤雌激活卵体外培养于CZB溶液中可发育至孵出囊胚阶段,而且孤雌胚移植后可在受体子宫内附植发育。单倍体、二倍体孤雌胚发育至桑椹胚的能力相似,但发育至囊胚的能力,后者高于前者。孤雌囊胚体外发育至孵出的比率仅为20%,但在卵巢切除的受体子宫内其发育至孵出囊胚的比率提高到733%。与受精扩张囊胚相比,孤雌扩张囊胚在成纤维细胞饲养层上很难贴壁生长,但延迟孤雌囊胚的内细胞团(ICM)可在细胞饲养层上增殖,并可形成孤雌ES细胞集落。昆明鼠孤雌囊胚内细胞团细胞注射入C57BL/6J受精囊胚腔制作的嵌合胚可完成附植后的发育,但这些后裔未见毛色嵌合。 展开更多
关键词 小鼠 孤雌胚 ES细胞 嵌合体 发育
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印记基因在孤雌生殖方面的研究进展
3
作者 彭晟坤 张子敬 +9 位作者 张格阳 张志浩 闵佳 李欣淼 王香南 施巧婷 祁兴山 黄永震 李惠侠 王二耀 《中国畜禽种业》 2024年第1期36-41,共6页
孤雌生殖是一种独特的生殖方式,指的是卵母细胞在不经过受精的情况下,可以自发或通过物理、化学刺激发育为正常个体,而无需精子参与。在低等动物中,孤雌生殖可以仅由雌性个体完成,从而实现从单个雌性个体产生后代。然而在哺乳动物中,能... 孤雌生殖是一种独特的生殖方式,指的是卵母细胞在不经过受精的情况下,可以自发或通过物理、化学刺激发育为正常个体,而无需精子参与。在低等动物中,孤雌生殖可以仅由雌性个体完成,从而实现从单个雌性个体产生后代。然而在哺乳动物中,能够通过孤雌生殖发育为正常个体的实例极为罕见。该文介绍了孤雌激活的方式,孤雌胚胎获取方式和印记基因在孤雌生殖中的应用,以期为未来孤雌生殖的相关应用提供思路。 展开更多
关键词 孤雌生殖 印记基因 孤雌激活 孤雌胚胎
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褪黑素对牛卵母细胞体外成熟及孤雌胚胎发育的影响 被引量:6
4
作者 王淑娟 刘文举 +4 位作者 庞训胜 刘宝如 王立克 闻爱友 杨利国 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2017年第2期-,共6页
褪黑素对生殖系统发挥着重要调节作用,本研究旨在探究褪黑素对牛卵母细胞体外成熟和孤雌胚胎发育的影响及作用机制。本试验用化学激活法对牛卵母细胞孤雌激活,且在卵母细胞体外成熟液和胚胎体外培养液中添加不同浓度(0 pmol/ml、10 pmol... 褪黑素对生殖系统发挥着重要调节作用,本研究旨在探究褪黑素对牛卵母细胞体外成熟和孤雌胚胎发育的影响及作用机制。本试验用化学激活法对牛卵母细胞孤雌激活,且在卵母细胞体外成熟液和胚胎体外培养液中添加不同浓度(0 pmol/ml、10 pmol/ml、20 pmol/ml、30 pmol/ml)的褪黑素,以检测牛卵母细胞成熟率和孤雌胚胎发育效果,同时利用DCHF-DA染色方法检测卵母细胞中ROS水平,采用免疫荧光技术检测褪黑素受体MT1在牛早期胚胎发育过程中的表达。结果表明,外源褪黑素可促进卵母细胞体外成熟,卵母细胞成熟率随褪黑素浓度的增加而升高。褪黑素显著降低了卵母细胞中的ROS水平(P<0.05),且卵母细胞中的ROS水平随着褪黑素浓度增加而降低。褪黑素可显著提高孤雌胚胎的卵裂率、桑葚胚率和囊胚率(P<0.05),促进胚胎发育。相比对照组,10pmol/ml褪黑素剂量更有利于胚胎发育,桑葚胚率和囊胚率都显著高于其他试验组。另外,本研究首次探究了褪黑素受体MT1在早期胚胎发育过程中的表达分布。MT1在未卵裂的激活卵母细胞中主要分布于细胞膜上,随着孤雌胚胎卵裂的进行,受体表达量逐渐增加,主要表达定位于细胞膜上,随着胚胎发育的进行,MT1在卵裂球内部开始表达和分布,退化胚胎中MT1表达水平较低。可见,褪黑素可促进卵母细胞成熟和胚胎发育,且褪黑素受体MT1在胚胎发育早期已开始表达。 展开更多
关键词 褪黑素 卵母细胞 活性氧(ROS) 孤雌胚胎 MT1
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山羊孤雌胚胎的体外培养 被引量:5
5
作者 刘凤军 王勇胜 张涌 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期86-88,共3页
系统地研究了培养液微滴的大小、培养液体系及血清浓度对山羊孤雌胚胎早期体外发育的影响。结果表明 ,培养液微滴以较大体积 (2 0 0~ 5 0 0 μL)的培养效果较好 ;在 3种培养液中 ,添加 10 %的 NGS对山羊孤雌胚胎的体外发育效果较好 ,... 系统地研究了培养液微滴的大小、培养液体系及血清浓度对山羊孤雌胚胎早期体外发育的影响。结果表明 ,培养液微滴以较大体积 (2 0 0~ 5 0 0 μL)的培养效果较好 ;在 3种培养液中 ,添加 10 %的 NGS对山羊孤雌胚胎的体外发育效果较好 ,囊胚率分别可达 6 2 .79% (81/ 12 9)、5 3.5 2 % (38/ 71)、13.6 4 % (12 / 88) ;m CR1aa组囊胚发育率和囊胚细胞数显著低于 SOFaa组和 CR1aa组 ,SOFaa组优于 CR1aa组 ,尽管 SOFaa组和 CR1aa组间无显著差异。在本试验条件下 ,以 SOFaa培养液 ,山羊孤雌胚胎体外培养 72 h时加入 10 %的 NGS,5 0 0 μL 微滴培养 ,其发育效果较好 ,囊胚率可达 6 2 .79%。 展开更多
关键词 孤雌胚胎 山羊 培养液 囊胚率 体外发育 囊胚发育率 SOF 体外培养 CR 血清浓度
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Effects of 5-aza-2’-deoxyctidine on the development of porcine parthenogenetic and nuclear transfer embryos 被引量:2
6
作者 Yun Fei Diao Kenji Naruse +4 位作者 Xiao Xia Li Rong Xun Han Dong Kyo Kim Tao Lin Dong II Jin 《Natural Science》 2013年第7期31-37,共7页
The current study was to investigate whether embryo or fetal fibroblast cells treated with 5-aza-2’-deoxyctidine (5-aza-dC) have a positive effect on the in vitro development of porcine parthenogenetic and cloned emb... The current study was to investigate whether embryo or fetal fibroblast cells treated with 5-aza-2’-deoxyctidine (5-aza-dC) have a positive effect on the in vitro development of porcine parthenogenetic and cloned embryos. To this end, porcine fetal fibroblast cells were treated with different concentrations (5 nM, 50 nM and 500 nM) of 5-aza-dC for different exposure times (1, 6 and 20 hours), the results showed that DNA methylation in PRE-1 SINE region was gradually reduced over time in cells treated with 5-aza-dC. To determine the effect of 5-aza-dC on in vitro development of porcine activated oocytes, the parthenogenetic embryo was treated with 5-aza- dC. Notably, treatment with 5 nM 5-aza-dC for 1 hour led to a significant improvement in blastocyst development, compared with the control group. The effects of donor cell treatment with 5-aza-dC on porcine cloned embryos development were further examined by treating fetal fibroblast cells with various concentrations (5 nM, 50 nM and 500 nM) of 5-aza-dC for different exposure times (1, 6 and 20 hours). Exposure of cells in 5 nM 5-aza-dC for 1 - 20 hours led to a significant improvement in the percentage of developed blastocysts, while treatment with 500 nM 5-aza-dC did not affect blastocyst development, compared to untreated controls. These findings indicate that treatment of fetal fibro-blast cells with relatively low concentrations of 5-aza-dC for short exposure times improves subsequent blastocyst development of porcine cloned embryos. 展开更多
关键词 5-aza-2’-dC DNA Methylation parthenogenetic embryo CLONE embryo In VITRO Development
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曲古抑菌素(Trichostatin)A对猪卵母细胞体外成熟及孤雌胚胎发育能力的影响 被引量:4
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作者 刘晓 潘登科 +6 位作者 陈扣扣 冯冲 张卫红 郑茂恩 龙川 冯书堂 杨博辉 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期1493-1498,共6页
曲古抑菌素A(Trichostatin A,TSA)是一种组蛋白去乙酰化抑制剂,用TSA处理鼠核移植胚胎可显著提高胚胎的囊胚率。检验TSA对猪卵母细胞体外成熟以及孤雌胚胎发育的影响。在猪卵母细胞体外成熟液及胚胎培养液中添加TSA,比较不同浓度TSA对... 曲古抑菌素A(Trichostatin A,TSA)是一种组蛋白去乙酰化抑制剂,用TSA处理鼠核移植胚胎可显著提高胚胎的囊胚率。检验TSA对猪卵母细胞体外成熟以及孤雌胚胎发育的影响。在猪卵母细胞体外成熟液及胚胎培养液中添加TSA,比较不同浓度TSA对卵母细胞成熟的影响,不同浓度TSA对孤雌胚胎发育能力的影响以及TSA处理不同时间对孤雌胚胎发育能力的影响。结果发现:(1)5 nmol/L TSA处理对卵母细胞体外核成熟无显著影响,却显著提高了卵母细胞孤雌胚胎的卵裂率和囊胚率(P<0.05);(2)50 nmol/L TSA处理显著提高了孤雌胚胎的卵裂率及囊胚率(P<0.05);(3)50 nmol/L TSA处理24 h能显著提高胚胎的卵裂率及囊胚率(P<0.05,82.1%±2.6%和37.4%±3.1%)。结果表明TSA对猪卵母细胞的体外成熟及孤雌胚胎发育具有显著的促进作用。5 nmol/L的添加量对卵母细胞的体外胞质成熟具有促进作用;胚胎培养基中添加50 nmol/L TSA处理24 h能提高孤雌胚胎的发育能力。 展开更多
关键词 TSA 卵母细胞 体外成熟 孤雌胚胎
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ITS、卵巢保存温度及所处性周期对黄牛卵母细胞和孤雌胚体外发育的影响 被引量:4
8
作者 彭辉 李莉 +3 位作者 卿素珠 肖红卫 乔宪凤 郑新民 《湖北农业科学》 北大核心 2009年第1期128-131,共4页
研究了ITS、卵巢保存温度及所处性周期阶段对黄牛卵母细胞体外成熟和孤雌胚体外发育的影响。结果表明,在成熟液中添加10μL·mL-1的ITS对黄牛卵母细胞体外成熟率和卵裂率影响不大,但可以提高卵母细胞孤雌激活后的囊胚发育率(41.67%/... 研究了ITS、卵巢保存温度及所处性周期阶段对黄牛卵母细胞体外成熟和孤雌胚体外发育的影响。结果表明,在成熟液中添加10μL·mL-1的ITS对黄牛卵母细胞体外成熟率和卵裂率影响不大,但可以提高卵母细胞孤雌激活后的囊胚发育率(41.67%/32.00%);牛卵巢从采集到送达实验室保存在30~39℃的灭菌生理盐水中可以获得较高的成熟率和囊胚发育率(71.34%/41.84%);黄体期无黄体组与有黄体组均低于卵泡期卵母细胞的体外成熟率、卵裂率和囊胚发育率,但差异不显著(P>0.05)。 展开更多
关键词 黄牛 卵母细胞 体外成熟 孤雌胚胎 体外发育
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维生素E提高牛孤雌胚胎的体外发育研究 被引量:2
9
作者 李瑞文 李向臣 +1 位作者 安志兴 张涌 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期1135-1138,共4页
体外生产的牛孤雌胚胎用添加了VE,VE+VC的CR1aa培养液,置38.5℃、5%CO2,饱和湿度的培养箱中进行培养。通过荧光染料Hoechst 33342对胚泡进行荧光染色,检测孵化囊胚的总细胞数。结果表明,当培养基中添加100μmol/L VE时,与对照组相比,扩... 体外生产的牛孤雌胚胎用添加了VE,VE+VC的CR1aa培养液,置38.5℃、5%CO2,饱和湿度的培养箱中进行培养。通过荧光染料Hoechst 33342对胚泡进行荧光染色,检测孵化囊胚的总细胞数。结果表明,当培养基中添加100μmol/L VE时,与对照组相比,扩张囊胚发育率和胚泡的细胞总数显著提高(P<0.01);当VE与VC联用时,发育到早期囊胚、扩张囊胚、孵化囊胚的数量和胚泡的总细胞数均低于单独使用VE的培养组。 展开更多
关键词 VITAMIN E 孤雌胚 体外发育
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黄牛孤雌胚胎的体外培养 被引量:4
10
作者 彭辉 李莉 +3 位作者 卿素珠 肖红卫 乔宪凤 田永祥 《湖北农业科学》 北大核心 2008年第2期142-145,共4页
试验研究了培养液中血清的添加时间和添加浓度及不同培养体系对黄牛孤雌胚胎体外发育潜力的影响。结果表明,黄牛成熟卵母细胞孤雌激活后的第3天添加10%的FBS对孤雌胚的体外发育效果较好;4种培养体系在孤雌激活后的第3天添加10%的FBS,平... 试验研究了培养液中血清的添加时间和添加浓度及不同培养体系对黄牛孤雌胚胎体外发育潜力的影响。结果表明,黄牛成熟卵母细胞孤雌激活后的第3天添加10%的FBS对孤雌胚的体外发育效果较好;4种培养体系在孤雌激活后的第3天添加10%的FBS,平均囊胚率分别可达46.25%(SOFaa)、43.58%(CR1aa)、40.25%(KSOM)和17.98%(TCM199);TCM199组的囊胚率显著低于其他3组(P<0.05),SOFaa组优于CR1aa和KSOM组,但差异不显著(P>0.05)。表现最好的是黄牛成熟卵母细胞孤雌激活后的第3天在SOFaa组中添加10%的FBS,其平均囊胚率可达46.25%。 展开更多
关键词 黄牛 孤雌胚胎 体外培养
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Wnt3a在小鼠孤雌胚胎及正常胚胎早期着床部位的表达变化 被引量:3
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作者 王灏 李贺娟 +4 位作者 尹燕云 陈利平 刘云海 郭勇 倪和民 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2010年第6期503-505,I0013,共4页
目的研究小鼠孤雌激活胚胎和体内正常发育胚胎在子宫中发生着床过程时,在早期着床部位上Wnt3a信号分子的表达变化。方法运用免疫组织化学染色法比较受体子宫中的孤雌胚胎着床位点和体内正常发育胚胎着床位点上Wnt3a的表达状况。结果免... 目的研究小鼠孤雌激活胚胎和体内正常发育胚胎在子宫中发生着床过程时,在早期着床部位上Wnt3a信号分子的表达变化。方法运用免疫组织化学染色法比较受体子宫中的孤雌胚胎着床位点和体内正常发育胚胎着床位点上Wnt3a的表达状况。结果免疫组织化学染色结果发现:(1)在着床期怀孕第5.5天和6.5天,受体子宫中孤雌胚胎的着床位点处和体内正常发育胚胎的着床位点处,Wnt3a在两种子宫上的表达情况相似,而在两种胚胎上的表达情况不同;(2)Wnt3a信号在空怀假孕母鼠子宫上表达情况与相同怀孕期有正常胚胎着床的子宫上的表达情况相似。结论胚胎着床与否及胚胎正常与否均不影响Wnt3a在小鼠早期着床期子宫上的表达,但在怀孕第5.5天和6.5天时孤雌激活胚胎和体内正常发育胚胎上Wnt3a的表达有差异。 展开更多
关键词 小鼠 孤雌激活胚胎 正常胚胎 着床位点 WNT3A 免疫组织化学染色
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不同共培养细胞类型对绵羊孤雌生殖胚发育的影响 被引量:3
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作者 张宏 刘云海 +3 位作者 倪和民 杨飞鸽 刘烈琴 郭勇 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2008年第5期8-12,共5页
体外成熟的绵羊卵母细胞经孤雌激活4h后,分别在5种体细胞单层(成熟前颗粒细胞、成熟后颗粒细胞、输卵管壶腹部上皮细胞、输卵管峡部上皮细胞、子宫内膜细胞)中进行共培养,比较其对绵羊孤雌生殖胚体外发育的影响。结果表明:成熟前后颗粒... 体外成熟的绵羊卵母细胞经孤雌激活4h后,分别在5种体细胞单层(成熟前颗粒细胞、成熟后颗粒细胞、输卵管壶腹部上皮细胞、输卵管峡部上皮细胞、子宫内膜细胞)中进行共培养,比较其对绵羊孤雌生殖胚体外发育的影响。结果表明:成熟前后颗粒细胞对绵羊孤雌胚体外发育的卵裂率和囊胚率差异不显著(P>0·05);但输卵管壶腹部上皮细胞(27·5%)、子宫内膜细胞组囊胚率(27·7%)高于输卵管峡部上皮细胞和颗粒细胞(17·7%、20·3%),且差异显著(P<0·05);壶腹部上皮细胞与子宫内膜细胞在囊胚率上差异不显著(P>0·05)。说明在绵羊孤雌生殖胚体外发育中,选择成熟前及成熟后的颗粒细胞都可达到相同的共培养效果;使用输卵管壶腹部上皮细胞、子宫内膜细胞进行共培养效果优于输卵管峡部上皮细胞和颗粒细胞,可以得到较高的囊胚率。 展开更多
关键词 共培养 绵羊 孤雌生殖胚 体外培养
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蛋白激酶Cα在小鼠孤雌及四倍体胚胎早期发育过程中的分布和作用 被引量:1
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作者 陈雅隽 申景岭 +5 位作者 冯秀清 单智焱 阎晓飞 董建将 钟淑琦 雷蕾 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期105-112,共8页
为了观察蛋白激酶Cα(protein kinase Cα,PKCα)在昆明白小鼠受精卵、孤雌激活和四倍体胚胎早期发育阶段的亚细胞定位和致密化进程中的表达变化,本实验利用免疫荧光化学染色与激光共聚焦显微镜观察相结合的方法,对受精卵、孤雌激活和... 为了观察蛋白激酶Cα(protein kinase Cα,PKCα)在昆明白小鼠受精卵、孤雌激活和四倍体胚胎早期发育阶段的亚细胞定位和致密化进程中的表达变化,本实验利用免疫荧光化学染色与激光共聚焦显微镜观察相结合的方法,对受精卵、孤雌激活和四倍体胚胎早期发育阶段PKCα的表达进行了定位观察,并利用Westernblot对三组胚胎致密化进程中PKCα的表达进行定量分析。结果显示,PKCα在上述三组胚胎发育的2-细胞期至囊胚期均有表达,虽然不同胚胎PKCα的分布在同一发育阶段存在差异,却表现出在各胚胎期主要分布于卵裂球核染色质内,以及在胚胎致密化开始,PKCα在卵裂球连接处发生重新分布的共同特点。此外,三组胚胎PKCα在致密化进程中的表达呈升高趋势,即致密化后的表达高于致密化前。结果表明,PKCα对胚胎致密化的调节具有重要作用,其在8-细胞/4-细胞期的重新分布是胚胎进入桑椹胚期的必然事件,是胚胎致密化的前提,同时伴随蛋白表达增多。此外,PKCα在囊胚期发生了植入前的第二次重新分布。PKCα在三组胚胎各发育阶段表达情况各不相同,它对小鼠胚胎发育的影响体现在整个早期发育阶段。PKCα在小鼠受精卵早期发育阶段的两次重新分布可能与在致密化开始时启动的细胞黏附事件存在某种必然联系。 展开更多
关键词 蛋白激酶CΑ 孤雌胚胎 四倍体胚胎 致密化
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褪黑素对猪卵母细胞体外成熟和孤雌胚发育影响的研究 被引量:2
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作者 黄晶晶 安建勇 +2 位作者 刘曜玮 郭亮 崔茂盛 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2016年第5期23-27,共5页
本研究旨在探讨成熟液中不同浓度褪黑素对猪卵母细胞体外成熟质量及其后期发育潜力的影响。试验中,0 mol/L为对照组,猪卵母细胞在不同MT浓度(0、10^(-6)、10^(-9)、10^(-12)mol/L)的成熟液中培养42 h后,通过猪卵母细胞存活率、极体率、... 本研究旨在探讨成熟液中不同浓度褪黑素对猪卵母细胞体外成熟质量及其后期发育潜力的影响。试验中,0 mol/L为对照组,猪卵母细胞在不同MT浓度(0、10^(-6)、10^(-9)、10^(-12)mol/L)的成熟液中培养42 h后,通过猪卵母细胞存活率、极体率、卵子内谷胱甘肽(GSH)含量以及胞质内线粒体和脂肪颗粒成熟分布状态等质量指标的评价,探讨成熟液中褪黑素(MT)最佳添加量,再通过孤雌胚体外发育潜力研究,进一步验证该成熟培养体系。结果表明:4组卵子存活率和极体率之间差异均不显著(P>0.05);试验组单个卵子中GSH含量均显著高于对照组(P<0.05);而且,试验组卵子内脂肪颗粒和线粒体成熟分布等质量指标也显著优于对照组(P<0.05);此外,孤雌激活后10^(-6)mol/L和10^(-9) mol/L组卵裂率和囊胚率均显著高于对照组(P<0.05)。试验结果证明,在猪卵母细胞体外成熟液中添加10^(-9)mol/L^10^(-6)mol/L的MT,可显著提高卵子成熟质量及后期发育潜力。 展开更多
关键词 褪黑素 卵母细胞 成熟质量 孤雌胚
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兔孤雌胚的核型与发育
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作者 王斌 李朝军 +1 位作者 范必勤 余多慰 《江苏农业学报》 CSCD 1994年第4期6-10,共5页
利用电脉冲刺激的方法激活兔卵母细胞,对激活卵及发育胚的形态学特征、核型进行了分析。结果表明:混合纤维素酯滤膜的残留毒性是影响孤雌胚体外发育的因素之一。兔眼球玻璃体液能有效地促进孤雌胚在体外发育至囊胚期。具有正常形态的... 利用电脉冲刺激的方法激活兔卵母细胞,对激活卵及发育胚的形态学特征、核型进行了分析。结果表明:混合纤维素酯滤膜的残留毒性是影响孤雌胚体外发育的因素之一。兔眼球玻璃体液能有效地促进孤雌胚在体外发育至囊胚期。具有正常形态的孤雌发育囊胚的核型多为2倍体,此外2倍体胚中亦同时存在少数非整倍体细胞。4倍体及非整倍体核型的囊胚形态异常,具有不明显的内细胞团。 展开更多
关键词 卵母细胞 孤雌发育 核型
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离心去脂处理对不同发育阶段猪孤雌激活胚胎冷冻保存效果的影响 被引量:2
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作者 许惠艳 胡林林 +2 位作者 吴胜芳 杨小淦 卢克焕 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1923-1926,共4页
通过对不同发育阶段猪孤雌激活胚胎进行离心去脂处理,比较胚胎冷冻效果,优化冷冻体系。以猪孤雌激活胚胎为材料,比较实施电激活后第1天(2~3细胞)、第2天(4~6细胞)、第3天(6~8细胞)进行离心处理,取培养到第6天所得到扩张囊... 通过对不同发育阶段猪孤雌激活胚胎进行离心去脂处理,比较胚胎冷冻效果,优化冷冻体系。以猪孤雌激活胚胎为材料,比较实施电激活后第1天(2~3细胞)、第2天(4~6细胞)、第3天(6~8细胞)进行离心处理,取培养到第6天所得到扩张囊胚进行玻璃化冷冻保存,未离心处理直接进行冷冻的胚胎作为对照组。结果显示第3天离心组和第2天离心组所得的囊胚形成率(30.23%,28.22%)虽好于第1天离心组和不处理组(21.73%,22.43%),但4个试验组差异不显著(P〉0.05);第3天离心组和第2天离心组的冷冻后胚胎复苏率(28.57%,20.56%)显著高于不处理组(7.73%)、第1天离心组(12.24%),差异显著(P〈0.05);第3天离心组的解冻后囊胚内细胞计数(30.40)显著高于对照组(18.25)、第1天离心组(16.60),差异显著(P〈0.05),高于第2天处理组(23.71),但差异不显著(P〉0.05)。结果表明,在孤雌激活后第3天进行离心处理,对胚胎发育到囊胚没有影响,且进行冷冻后所得复苏率及胚胎内细胞团数较好。 展开更多
关键词 孤雌激活胚胎 离心 冷冻效果
原文传递
小鼠电激活孤雌胚胎早期体内外发育能力的比较 被引量:2
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作者 刘京威 李贺娟 +6 位作者 尹燕云 陈利平 李晓燕 刘云海 倪和民 郭勇 鲁琳 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2011年第6期483-488,I0001,共7页
目的探讨小鼠电激活孤雌胚胎的早期体内、外发育能力。方法 利用不同电脉冲参数和激活液对小鼠卵母细胞进行活化,观察激活后的小鼠孤雌胚体外发育状况和移植后的发育能力。结果非电解质激活液优于电解质液,脉冲强度、脉冲宽度和脉冲次... 目的探讨小鼠电激活孤雌胚胎的早期体内、外发育能力。方法 利用不同电脉冲参数和激活液对小鼠卵母细胞进行活化,观察激活后的小鼠孤雌胚体外发育状况和移植后的发育能力。结果非电解质激活液优于电解质液,脉冲强度、脉冲宽度和脉冲次数3个参数各自处于某一范围内时,他们之间存在某种相关性,降低其中1个参数可通过升高另外2个参数得到补偿,经筛选较适宜的电脉冲参数为:1.0 kV/cm、40μs、2 p,或者1.5kV/cm、30/μs、2 p,分别为74.65%和71.19%,体外囊胚发育率分别为43.40%和47.62%。电激活孤雌胚体外发育时序比正常胚胎慢,但囊胚细胞数与对照组差异不显著。它们经胚胎移植后,其中的一部分能够着床,但着床率仅为3.6%,极显著低于对照组(67%,P<0.01)。结论电刺激能够较好地模拟正常受精过程激活小鼠卵母细胞,但激活后的多数小鼠孤雌胚胎着床能力较低,不能够顺利着床。 展开更多
关键词 小鼠 电激活 孤雌胚胎 早期体内外发育能力
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发育潜能不同的猪孤雌胚胎差异表达基因的筛选 被引量:1
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作者 陆芳 罗学明 +2 位作者 龙川 王希彪 潘登科 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第10期130-134,共5页
本试验以猪孤雌胚胎为材料,根据初次卵裂时间的早晚划分出发育能力不同的2组胚胎,比较其母源mRNAs丰度。利用mRNA差异显示技术(mRNAdifferential display reverse transcription PCR,DDRT-PCR)筛选出2组胚胎中表达丰度不同的母源mRNAs... 本试验以猪孤雌胚胎为材料,根据初次卵裂时间的早晚划分出发育能力不同的2组胚胎,比较其母源mRNAs丰度。利用mRNA差异显示技术(mRNAdifferential display reverse transcription PCR,DDRT-PCR)筛选出2组胚胎中表达丰度不同的母源mRNAs,并经反Northern blotting验证,结果发现,有8条差异表达的阳性cDNA片段(E1-E4;L1-L4),克隆、测序后与GenBank数据库进行同源性比对分析,其中6条(E1、E2、E4、L1、L2、L4)与已知ESTs有较高的同源性,E3与人CPEB2的同源性为97%,L3与人hnRNPA1的同源性为89%。因此,CPEB2和hnRNPA1是影响胚胎发育能力的重要候选基因。 展开更多
关键词 孤雌胚胎 初次卵裂时间 母源mRNA 胚胎质量 DDTR-PCR
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不同换液体积和血清对黄牛孤雌胚体外发育的影响 被引量:1
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作者 吴曙限 李莉 +2 位作者 孙世铎 乔宪凤 郑新民 《湖北农业科学》 北大核心 2011年第7期1413-1415,1419,共4页
试验研究了牛胚胎体外培养过程中不同换液体积及血清灭活与否对黄牛孤雌胚胎体外发育潜力的影响,结果表明,以SOFaa为基础培养液,在更换培养液体积1/2组与1/4组和3/4组之间的黄牛孤雌胚胎囊胚率有显著差异(P<0.05),分别为38.84%、23.... 试验研究了牛胚胎体外培养过程中不同换液体积及血清灭活与否对黄牛孤雌胚胎体外发育潜力的影响,结果表明,以SOFaa为基础培养液,在更换培养液体积1/2组与1/4组和3/4组之间的黄牛孤雌胚胎囊胚率有显著差异(P<0.05),分别为38.84%、23.39%和21.71%;不同处理的血清添加组的卵裂率、囊胚率和孵化囊胚率均无显著差异(P>0.05)。 展开更多
关键词 孤雌胚胎 体外培养
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玻璃化冷冻对猪孤雌激活囊胚中细胞凋亡的影响 被引量:1
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作者 陈亚宁 吴彩凤 +3 位作者 戴建军 张树山 钮莹芳 张德福 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期243-251,共9页
旨在研究玻璃化冷冻对猪孤雌激活囊胚中细胞凋亡的影响。通过体外培养观察冷冻-解冻后囊胚腔的恢复情况,JC-1检测线粒体膜电位变化、TUNEL法检测胚胎中细胞凋亡水平,免疫荧光分析多种Caspase活性,以及qRT-PCR检测凋亡相关功能基因的mRN... 旨在研究玻璃化冷冻对猪孤雌激活囊胚中细胞凋亡的影响。通过体外培养观察冷冻-解冻后囊胚腔的恢复情况,JC-1检测线粒体膜电位变化、TUNEL法检测胚胎中细胞凋亡水平,免疫荧光分析多种Caspase活性,以及qRT-PCR检测凋亡相关功能基因的mRNA表达水平。结果表明,冷冻-解冻后囊胚的囊胚腔恢复率(31.03%)和囊胚细胞数(31.81)与新鲜囊胚(100.00%和38.17)相比均显著下降(P<0.05)。冷冻后囊胚的线粒体膜电位(0.46)与新鲜囊胚(1.02)相比显著下降(P<0.05)。TUNEL凋亡染色后,冷冻囊胚中凋亡阳性细胞的比例(10.13%)显著高于新鲜囊胚(5.92%,P<0.05)。Caspase原位荧光染色结果表明,Pan-caspase、Caspase-8、Caspase-9和Caspase-3冷冻-解冻囊胚的荧光强度值(20.65、20.60、17.58和19.88)均显著高于新鲜囊胚(7.41、6.46、5.47和6.32,P<0.05)。经qRT-PCR检测,冷冻组中Caspase-8、Caspase-9、TNF-α基因的mRNA表达水平均显著高于新鲜组(P<0.05),BCL-2、SOD-1的mRNA表达水平则显著低于新鲜组(P<0.05)。综上表明,玻璃化冷冻可造成猪孤雌激活囊胚线粒体功能下降,并在死亡受体和线粒体途径上共同介导囊胚内细胞凋亡的发生。 展开更多
关键词 孤雌激活胚胎 玻璃化冷冻 线粒体 凋亡 凋亡途径
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