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PDX-1对成肌细胞株C2C12分化为胰岛素分泌细胞的作用 被引量：4
1
作者 杨川 程桦 +3 位作者 王川 严励 黎锋 魏菁 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期409-412,共4页
【目的】探讨PDX-1对成肌细胞株C2C12分化为胰岛素分泌细胞的作用。【方法】将C2C12细胞分别经过不同浓度的类胰高血糖素(GLP-1)诱导120h后,瞬间转染胰腺十二指肠同源框(PDX-1)基因,用RT-PCR检测PDX-1的表达,流式细胞仪、放射免疫法检... 【目的】探讨PDX-1对成肌细胞株C2C12分化为胰岛素分泌细胞的作用。【方法】将C2C12细胞分别经过不同浓度的类胰高血糖素(GLP-1)诱导120h后,瞬间转染胰腺十二指肠同源框(PDX-1)基因,用RT-PCR检测PDX-1的表达,流式细胞仪、放射免疫法检测细胞内和培养基中是否存在胰岛素。【结果】GLP-1可以直接诱导C2C12细胞表达PDX-1;PDX-1瞬时转染C2C12细胞后,胰岛素分泌细胞阳性率比值(1.19±0.10)、培养基中的胰岛素含量(2.45±1.48)×10-6U/mL均明显升高(P<0.05);单独的40nmol/LGLP-1诱导与瞬间转染PDX-1相比,阳性率比值及胰岛素浓度的差别均无统计学意义。【结论】GLP-1可以诱导C2C12表达PDX-1,而且PDX-1可以促进C2C12分泌胰岛素。提示GLP-1诱导C2C12分化为胰岛素分泌细胞可能与PDX-1有关。 展开更多
关键词 胰岛素分泌细胞 PDX-1 成肌细胞株 分化 C2C12细胞 GLP-1 RT-PCR检测 胰腺十二指肠 胰高血糖素 流式细胞仪 免疫法检测 胰岛素含量 mol/L 胰岛素浓度 分泌胰岛素 不同浓度 细胞表达 瞬时转染 培养基 阳性率 同源框 细胞内
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胃癌Pdx1启动子载体构建及其受DNA甲基化的调节 被引量：5
2
作者 马娟 刘庆华 +3 位作者 王蓓蓓 廖山婴 沙卫红 王启仪 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2011年第31期3222-3228,共7页
目的:构建胰十二指肠同源盒基因1(pancreatic duodenum homeobox 1,Pdx1)启动子调控的荧光素酶基因表达载体,筛选Pdx1启动子,探讨Pdx1启动子活性受DNA甲基化的影响.方法:针对Pdx1基因启动子区域进行PCR扩增,经限制性酶切法将扩增产物克... 目的:构建胰十二指肠同源盒基因1(pancreatic duodenum homeobox 1,Pdx1)启动子调控的荧光素酶基因表达载体,筛选Pdx1启动子,探讨Pdx1启动子活性受DNA甲基化的影响.方法:针对Pdx1基因启动子区域进行PCR扩增,经限制性酶切法将扩增产物克隆至荧光素酶基因报告载体中,构建pGL3-Pdx1重组质粒.荧光素酶检测法检测胃癌细胞中Pdx1各段报告基因的启动子活性,并用DNA甲基化酶SssI处理胃癌细胞,比较各报告基因的启动子活性变化.结果:经过酶切和PCR法鉴定成功构建了9个携带Pdx1启动子的重组荧光素酶基因报告载体;荧光素酶检测法显示与pGL3-basic比较,含有F383的3个报告基因F383、F720和F1039有强启动子活性,组间比较无显著性差异;与对照组比较,SssI甲基化酶处理的F383、F720和F1039启动子活动明显降低(P<0.05).结论:成功获得由Pdx1启动子调控的荧光素酶基因表达载体,并筛选出具有强启动子活性的3个报告基因(F383、F720和F1039),且其启动子活性受DNA甲基化影响.其中F383可能是Pdx1启动子核心,这些结果为研究胃癌中Pdx1基因沉默的表观遗传学机制建立了基础. 展开更多
关键词 胃癌 胰十二指肠同源异型基因1 启动子 载体构建 甲基化
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番石榴叶总黄酮促进糖尿病模型小鼠胰岛再生机制 被引量：9
3
作者 李杰 李东华 +5 位作者 涂正伟 傅予 刘洪斌 张一 宗春辉 于强 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期116-121,共6页
目的:观察番石榴叶总黄酮对链脲佐菌素(streptozocin,STZ)糖尿病模型小鼠胰腺组织中胰腺十二指肠同源盒因子-1(pancreas-duodenumhomeobox-1,PDX-1),神经元素3(neurogenin 3,Ngn3),NK6转录因子相关基因座1(NK6 transcription factor rel... 目的:观察番石榴叶总黄酮对链脲佐菌素(streptozocin,STZ)糖尿病模型小鼠胰腺组织中胰腺十二指肠同源盒因子-1(pancreas-duodenumhomeobox-1,PDX-1),神经元素3(neurogenin 3,Ngn3),NK6转录因子相关基因座1(NK6 transcription factor related locus 1,Nkx6.1)表达的影响,探讨其促进胰岛β细胞再生的机制。方法:将STZ糖尿病模型小鼠随机分为模型组和治疗组,治疗组包括番石榴叶总黄酮低、高剂量组及二甲双胍组,另设10只正常小鼠为正常组。番石榴叶总黄酮低、高剂量组按小鼠体重分别以番石榴叶总黄酮0.198,0.396 g·kg^(-1)·d^(-1)灌胃,二甲双胍组以二甲双胍0.087 5 g·kg^(-1)·d^(-1)灌胃,正常组和模型组以等体积蒸馏水灌胃,2周后检测其空腹血糖、体重,苏木素-伊红(HE)染色观察胰岛病理形态学改变,实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测胰腺组织内胚胎期胰岛β细胞发育相关转录因子PDX-1,Ngn3,Nkx6.1 mRNA相对表达量。结果:与正常组比较,STZ糖尿病模型小鼠胰腺组织中PDX-1,Ngn3,Nkx6.1表达量明显下降(P<0.01);与模型组比较,番石榴叶总黄酮治疗组PDX-1,Ngn3,Nkx6.1 mRNA表达升高(P<0.05)。结论:番石榴叶总黄酮能上调糖尿病小鼠胰腺组织中PDX-1,Ngn3,Nkx6.1的表达;胰岛β细胞再生机制可能与PDX-1,Ngn3,Nkx6.1 mRNA表达的上调有关。 展开更多
关键词 番石榴叶总黄酮 糖尿病 胰岛再生 胰腺十二指肠同源盒因子-1 神经元素3 NK6转录因子相关基因座1
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