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PAX4基因A1168C多态性与中国汉族人1型糖尿病的相关性 被引量：4
1
作者 张云 肖新华 +7 位作者 王姮 王彤 孙琦 杨国华 付勇 袁涛 张茜 刘秋英 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期370-373,共4页
目的探讨中国汉族人群PAX4基因A1168C多态性与1型糖尿病的相关性。方法随机选取无亲缘关系的中国汉族人360例,其中1型糖尿病患者109例,无糖尿病及糖尿病家族史且空腹葡萄糖<5.60mmol/L的对照组251名。采用聚合酶链反应-限制性片断长... 目的探讨中国汉族人群PAX4基因A1168C多态性与1型糖尿病的相关性。方法随机选取无亲缘关系的中国汉族人360例,其中1型糖尿病患者109例,无糖尿病及糖尿病家族史且空腹葡萄糖<5.60mmol/L的对照组251名。采用聚合酶链反应-限制性片断长度多态性技术(PCR-RFLP)检测A1168C多态性,SPSS软件分析A1168C多态性的基因型频率和等位基因频率及其组间差异。结果对照组和1型糖尿病组基因型频率分布均符合Hardy-Weinberg平衡定律。1型糖尿病患者基因型频率及等位基因频率与对照组相比差异均无显著性(P>0.05)。将1型糖尿病组按性别和发病年龄分层,各组基因型频率和等位基因频率与对照组相比差异仍无显著性(P>0.05)。结论PAX4基因A1168C多态性可能与中国汉族1型糖尿病的发生无关。 展开更多
关键词 1型糖尿病 PAX4基因 多态性
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NGN3与PAX4双基因表达腺病毒载体的构建与表达 被引量：2
2
作者 唐小龙 江振友 +2 位作者 庞雪云 蓝锴 欧财文 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期346-351,共6页
目的:运用pADxsi系统构建带人NGN3与PAX4双基因表达腺病毒载体。方法:采用基因克隆技术,将目的基因NGN3从pEGFP-N1-NGN3质粒上切下连到pShuttle-GFP-CMV上,替换GFP,得到pShuttle-CMV-NGN3;再将PAX4从pEGFP-N1-PAX4质粒上切下连到系统pSh... 目的:运用pADxsi系统构建带人NGN3与PAX4双基因表达腺病毒载体。方法:采用基因克隆技术,将目的基因NGN3从pEGFP-N1-NGN3质粒上切下连到pShuttle-GFP-CMV上,替换GFP,得到pShuttle-CMV-NGN3;再将PAX4从pEGFP-N1-PAX4质粒上切下连到系统pShuttle-CMV-NGN3上,得到pShuttle-CMV-NGN3/CMV-PAX4穿梭质粒;最后将CMV-NGN3/CMV-PAX4从pShuttle-CMV-NGN3/CMV-PAX4转移到ADxsi骨架载体上,得到pADxsi-CMV-NGN3/CMV-PAX4病毒质粒,然后在293细胞中进行包装与扩增活性病毒,并进行病毒滴度测定。体外感染人脐带间充质干细胞。逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)与免疫印迹(Western blotting)检测目的基因在细胞内的表达情况,免疫细胞化学与间接荧光法检测目的分子在细胞内的定位。结果:酶切鉴定和PCR证明重组人NGN3与PAX4双基因表达腺病毒载体构建正确;RT-PCR与Western blotting结果显示目的基因在细胞持续稳定表达;间接荧光与免疫化学表明重组腺病毒可高效感染人脐带间充质干细胞,且目的基因特异性地定位于细胞核内。结论:应用重组技术成功构建人NGN3与PAX4双基因表达腺病毒载体,且在间充质干细胞内持续而稳定表达。 展开更多
关键词 腺病毒 神经元素3(NGN3) 成对盒基因4(PAX4) 间充质干细胞(MCS)
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PDXl与PAX4双基因表达腺病毒载体的构建与表达
3
作者 霍震 沈进 +11 位作者 许礼发 张福健 刘良 蒋青林 王晓瑜 张明玮 庙二川 陈丽 刘婷婷 姚爱霞 朱永强 唐小龙 《安徽理工大学学报（自然科学版）》 CAS 2016年第2期80-86,共7页
运用pADxsi系统制备可表达人PDX1与PAX4双基因的重组5型腺病毒。从pEGFP-N1-PDX1质粒上酶切下目的基因PDX1并酶连到腺病毒穿梭质粒pShuttle-EGFP-CMV上,替换EGFP而得到pShuttle-CMV-PDX1;再将PAX4从pEGFP-N1-PAX4质粒上酶切下连到pShutt... 运用pADxsi系统制备可表达人PDX1与PAX4双基因的重组5型腺病毒。从pEGFP-N1-PDX1质粒上酶切下目的基因PDX1并酶连到腺病毒穿梭质粒pShuttle-EGFP-CMV上,替换EGFP而得到pShuttle-CMV-PDX1;再将PAX4从pEGFP-N1-PAX4质粒上酶切下连到pShuttle-CMV-PDX1的多克隆酶切位点而得到穿梭质粒pShuttle-CMV-PDX1/CMV-PAX4;双酶切pShuttle-CMV-PDX1/CMV-PAX4将CMV-PDX1/CMV-PAX4转移到ADxsi骨架质粒上,得到pADxsi-CMV-PDX1/CMV-PAX4腺病毒质粒,然后在293细胞中进行包装并扩增重组腺病毒,并进行病毒滴度测定;体外感染人间充质干细胞。依据酶切、测序和PCR的结果均证明重组人PDX1与PAX4双基因表达腺病毒载体构建正确;而RTPCR与WB结果也显示目的基因在细胞中稳定表达。应用重组技术成功构建人PDX1与PAX4双基因表达5型腺病毒载体,转录因子PDX1与PAX4在间充质干细胞内稳定表达且定位于细胞核内。 展开更多
关键词 5型腺病毒 间充质干细胞(MSCs) 胰腺十二指肠同源框蛋白1(PDX1) 成对盒基因4(PAX4) 转录因子
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β细胞发育必需调节因子PAX4与糖尿病
4
作者 张云 肖新华 《国际内科双语杂志（中英文）》 2007年第1期64-67,共4页
PAX是一类重要的转录调控因子，在胚胎发育过程中对组织和器官的特异分化起着重要的调控作用。PAX4是PAX家族中的一员，其主要功能是作为胰腺早期发育的转录抑制因子，在胰腺β细胞发育过程中发挥重要作用。有研究发现PAX4基因的某些特... PAX是一类重要的转录调控因子，在胚胎发育过程中对组织和器官的特异分化起着重要的调控作用。PAX4是PAX家族中的一员，其主要功能是作为胰腺早期发育的转录抑制因子，在胰腺β细胞发育过程中发挥重要作用。有研究发现PAX4基因的某些特异突变与糖尿病有关。深入研究PAX4参与调控早期β细胞分化的分子机制，将有助于从胰腺或胚胎干细胞中诱导分化功能性β细胞的研究，为探讨糖尿病治疗新策略提供重要依据。 展开更多
关键词 PAX4基因 Β细胞 糖尿病
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结直肠癌组织PAX8、SFRP4表达水平及与患者临床病理特征、预后的相关性研究
5
作者 王晓敏 张娟 +3 位作者 陈亚龙 李林 晏俊 王祥 《临床和实验医学杂志》 2024年第15期1622-1626,共5页
目的探究结直肠癌(CRC)组织配对盒基因8(PAX8)和分泌型卷曲相关蛋白4(SFRP4)表达水平与患者临床病理特征及预后的相关性研究。方法前瞻性选取2019年1月至2021年10月西安交通大学医学院附属陕西省肿瘤医院病理科就诊的125例CRC患者在手... 目的探究结直肠癌(CRC)组织配对盒基因8(PAX8)和分泌型卷曲相关蛋白4(SFRP4)表达水平与患者临床病理特征及预后的相关性研究。方法前瞻性选取2019年1月至2021年10月西安交通大学医学院附属陕西省肿瘤医院病理科就诊的125例CRC患者在手术中切除的CRC组织及癌旁组织(距离CRC组织>2 cm)标本。收集整理CRC患者年龄、性别、糖尿病、高血压、组织学分型、肿瘤部位、附件转移、淋巴结转移、肿瘤淋巴结转移(TNM)分期、组织分级、淋巴结状态、肿瘤直径等临床资料。采用免疫组织化学染色法(IHC)检测PAX8和SFRP4表达水平;采用Spearman等级相关分析对癌组织PAX8和SFRP4表达的相关性进行分析;采用Kaplan-Meier法进行CRC患者预后生存分析。结果PAX8和SFRP4在癌组织的高表达率为64.80%、59.20%,均高于癌旁组织(32.80%、36.80%),差异均有统计学意义(P<0.05),且两者的表达具有相关性(r=0.479,P<0.05)。PAX8和SFRP4表达与年龄、性别、糖尿病、高血压、组织学分型、肿瘤部位、附件转移、肿瘤直径等无关,差异均无统计学意义(P>0.05);PAX8和SFRP4表达与淋巴结转移、TNM分期、组织分级、淋巴结状态有关,差异均有统计学意义(P<0.05)。高表达PAX8和SFRP4的CRC患者术后2年预后不良率分别为37.04%和37.84%,均高于低表达PAX8和SFRP4(15.91%、17.65%),差异均有统计学意义(P<0.05)。结论PAX8和SFRP4在CRC组织中高表达,且两者具有一定的相关性,高表达的PAX8和SFRP4可作为CRC患者预后不良的重要指标。 展开更多
关键词 结直肠癌 预后 配对盒基因8 分泌型卷曲相关蛋白4
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神经元素3与成对盒基因4促进胰腺十二指肠同源框蛋白1诱导间充质干细胞向胰腺分泌细胞分化 被引量：2
6
作者 唐小龙 肖瑞 +4 位作者 王云秀 何敏 谢婷 张成 刘思景 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期421-426,共6页
目的:探索神经元素3(neurogenin 3,NGN3)与成对盒基因4(paired box gene 4,PAX4)对胰腺十二指肠同源框蛋白1(pancreatic and duodenal homeobox factor1,PDX1)驱动间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)向胰腺β细胞分化过程中的... 目的:探索神经元素3(neurogenin 3,NGN3)与成对盒基因4(paired box gene 4,PAX4)对胰腺十二指肠同源框蛋白1(pancreatic and duodenal homeobox factor1,PDX1)驱动间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)向胰腺β细胞分化过程中的作用。方法:构建PDX1基因及NGN3与PAX4双基因表达腺病毒,重组腺病毒Adxsi-CMV-PDX1感染诱导MSCs1周后,再行重组腺病毒Adxsi-CMV-NGN3/CMV-PAX4感染诱导MSCs;分别检测PDX1、PAX4、NGN3、NK转录因子相关的2.2(NK transcription factor related,gene family 2,locus2,NKX2.2)、v-maf muscu-loaponeurotic fibrosarcoma oncogene homolog B(MafB)、胰岛素(Insulin)、胰高血糖素(Glucagon)多种胰腺分泌细胞相关分子表达情况。结果:成功构建腺病毒Adxsi-CMV-PDX1与Adxsi-CMV-NGN3/CMV-PAX4;MSCs经Adxsi-CMV-PDX1与Adxsi-CMV-NGN3/CMV-PAX4分步诱导后,免疫细胞化学与间接荧光检测显示PDX1、NGN3与PAX4因子在细胞核内稳定表达;重组腺病毒稳定转染5 d后,细胞开始变圆并集聚成团,用双硫腙(dithizone,DTZ)染色细胞质呈亮红色;细胞经诱导1周后,用RT-PCR检测到神经源分化因子1(neurogenic differentiation 1,NruroD1)与NKX2.2表达,2周后可检测胰岛素/胰岛素原分子;间接荧光检测显示诱导后的细胞先后开始表达NKX2.2、MafB等转录因子与胰岛素/胰岛素原、胰高血糖等胰岛分泌细胞相关分子,但未能检测到v-maf musculoaponeurotic fibro-sarcoma oncogene homolog A(MafA)与C肽分子表达。结论:NGN3与PAX4对PDX1诱导间充质干细胞向胰腺分泌细胞分化具有促进作用。 展开更多
关键词 同源盒结构域蛋白质类 间质干细胞 胰腺 成对盒基因4 神经元素3
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