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题名猪Prox1基因的染色体定位和亚细胞定位的研究
被引量：3
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作者
袁继红
龙欢
田明芳
杨在清
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机构
华中农业大学生命科学技术学院
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出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第3期351-357,共7页
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基金
国家自然科学基金项目"SIRT1对猪骨髓间充质干细胞成脂分化的调控机制"(30771585)
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文摘
在克隆猪Prox1基因(sProx1)的基础上,对猪Prox1基因进行染色体定位分析,并通过EGFP融合蛋白对该基因产物进行亚细胞水平定位。本研究将人和鼠的Prox1基因编码区在猪的ESTs数据库中进行检索,然后根据EST进行序列拼接并设计引物对猪Prox1基因编码区进行克隆。通过比对人、鼠及其他物种Prox1基因第二个内含子序列,设计引物扩增猪Prox1基因部分内含子,根据克隆得到的部分内含子序列设计引物,利用猪-仓鼠体细胞辐射杂种板(IMpRH)对猪Prox1基因进行染色体定位。根据已获得的猪Prox1基因编码区序列,构建猪Prox1基因的融合绿色荧光超表达载体EGFP-Prox1,并转染猪肾PK15细胞,12h后倒置荧光显微镜观察Prox1蛋白在亚细胞内的定位。结果表明:Prox1基因定位于猪第9号染色体长臂的26区,与标记SW1651紧密连锁;构建猪Prox1基因的真核表达载体pEGFP-N1-Prox1,融合蛋白EGFP-Prox1定位于PK15细胞的细胞核中。
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关键词
猪
Prox1
染色体定位
绿色荧光融合超表达载体
亚细胞定位
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Keywords
pig
Proxl
chromosomal localization
pproxl- egfp
subcellular localization
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分类号
S828
[农业科学—畜牧学]
S813.3
[农业科学—畜牧兽医]
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