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辐射诱导表达载体pEgr-p16的构建及其体外蛋白表达的研究
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作者 刘建香 苏旭 《中华放射医学与防护杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期416-419,共4页
目的构建辐射诱导表达载体pEgrp16并研究其体外稳定转染联合60Coγ射线照射对人宫颈癌HeLa细胞p16蛋白表达变化的影响。方法利用双酶切、粘端连接的方法构建了含有辐射诱导特性的早期生长反应因子Egr1和p16的pEgrp16的质粒载体,以脂质... 目的构建辐射诱导表达载体pEgrp16并研究其体外稳定转染联合60Coγ射线照射对人宫颈癌HeLa细胞p16蛋白表达变化的影响。方法利用双酶切、粘端连接的方法构建了含有辐射诱导特性的早期生长反应因子Egr1和p16的pEgrp16的质粒载体,以脂质体介导的方法,将重组载体导入人HeLa细胞,采用免疫细胞化学和流式细胞术的方法检测照射转染后的HeLa细胞p16蛋白表达的变化。结果经全自动测序证明辐射诱导表达载体pEgrp16构建正确;稳定转染可见有明显的p16表达增强;5Gy以内p16蛋白表达呈剂量依赖性的增加,在2Gy照射后2hp16蛋白表达水平即开始增高,4h达到最高,12h趋于正常水平。结论本研究成功构建了辐射诱导表达载体pEgrp16,在HeLa细胞中蛋白表达明显增强。 展开更多
关键词 辐射诱导 表达载体 pegr-p16 体外表达 蛋白表达 基因治疗 放射治疗 肿瘤 Γ射线
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辐射诱导pEgr-p16表达增强及其体外抑制B16黑色素瘤作用 被引量:1
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作者 周莉 吴丛梅 黄天华 《中华放射医学与防护杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期235-238,共4页
目的研究pEgr-p16重组质粒在转染的黑色素瘤B16细胞中的辐射诱导表达特性,验证其联合放射治疗体外抑制B16细胞增殖的作用。方法将脂质体包裹的pEgr-p16重组质粒,转染B16细胞株;采用定量PCR方法检测不同剂量X射线诱导后p16的表达和同一剂... 目的研究pEgr-p16重组质粒在转染的黑色素瘤B16细胞中的辐射诱导表达特性,验证其联合放射治疗体外抑制B16细胞增殖的作用。方法将脂质体包裹的pEgr-p16重组质粒,转染B16细胞株;采用定量PCR方法检测不同剂量X射线诱导后p16的表达和同一剂量X射线诱导下p16的表达时程,流式细胞数术检测细胞凋亡率的变化;MTT法检测pEgr-p16基因协同放射治疗后B16细胞的存活情况。结果pEgr-p16重组质粒转染B16细胞,不同剂量X射线均可诱导p16表达增强,为假照组的3.78-6.67倍(P〈0.01);2GyX射线照射后,p16表达随时间延长而逐渐增强,在照射后72h达到最高值。p16基因联合放射可诱导B16细胞凋亡,凋亡率高于单纯照射组和单纯基因诱导组(P〈0.05-0.01);转染pEgr-p16质粒的细胞经2GyX射线照射,8d后细胞数明显低于同时间其他实验组(P〈0.05-0.001)。结论pEgr-p16基因-放射联合治疗有明显的抑制黑色素瘤B16细胞生长的作用,其作用优于单纯给予射线或基因转染。 展开更多
关键词 pegr-p16基因 辐射 B16细胞
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