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人全长Notch1基因的克隆及其在HEK293 T细胞中的表达
1
作者
林彦青
邱晓媚
+3 位作者
叶健斌
胡冰心
李妍
宁云山
《暨南大学学报(自然科学与医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第5期373-379,共7页
目的:克隆人全长Notch1基因,构建人全长Notch1/p CMV6-Entry真核重组质粒并在HEK293 T细胞中进行瞬时表达.方法:采用PCR公知不认方法扩增人全长Notch1基因并克隆到真核表达载体p CMV6-Entry中并用限制性内切酶分析和DNA测序鉴定重组质粒...
目的:克隆人全长Notch1基因,构建人全长Notch1/p CMV6-Entry真核重组质粒并在HEK293 T细胞中进行瞬时表达.方法:采用PCR公知不认方法扩增人全长Notch1基因并克隆到真核表达载体p CMV6-Entry中并用限制性内切酶分析和DNA测序鉴定重组质粒.将该重组质粒转染HEK293 T细胞24h后,通过实时荧光定量PCR(q-PCR)和Western blot检测鉴定人全长Notch1的表达.结果:成功构建了人Notch1/p CMV6-Entry重组真核表达质粒,人全长Notch1基因在mRNA和蛋白水平上的表达显著高于p CMV6-Entry载体对照组和HEK293 T细胞对照组.结论:克隆获得人全长Notch1基因并验证在HEK293 T细胞中表达.
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关键词
NOTCH信号通路
真核表达
NOTCH1
pcmv
6
-
entry
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职称材料
题名
人全长Notch1基因的克隆及其在HEK293 T细胞中的表达
1
作者
林彦青
邱晓媚
叶健斌
胡冰心
李妍
宁云山
机构
南方医科大学检验与生物技术学院生物治疗研究所
珠海南医大生物医药公共服务平台有限公司
出处
《暨南大学学报(自然科学与医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第5期373-379,共7页
基金
国家自然科学基金项目(81470831)
国家自然科学基金-广东省联合基金重点项目(U1401223)
+8 种基金
国家高技术研究发展计划(863计划)项目(2014AA020909)
广东省科技计划-创新载体建设项目(2013B090800036)
广东省科技计划项目(2015A040404021
2016B090919019)
广东省大学生创新创业项目(201512121122)
广东省大学生创新训练项目(201612121100
201612121243
201612121034
201612121246)
文摘
目的:克隆人全长Notch1基因,构建人全长Notch1/p CMV6-Entry真核重组质粒并在HEK293 T细胞中进行瞬时表达.方法:采用PCR公知不认方法扩增人全长Notch1基因并克隆到真核表达载体p CMV6-Entry中并用限制性内切酶分析和DNA测序鉴定重组质粒.将该重组质粒转染HEK293 T细胞24h后,通过实时荧光定量PCR(q-PCR)和Western blot检测鉴定人全长Notch1的表达.结果:成功构建了人Notch1/p CMV6-Entry重组真核表达质粒,人全长Notch1基因在mRNA和蛋白水平上的表达显著高于p CMV6-Entry载体对照组和HEK293 T细胞对照组.结论:克隆获得人全长Notch1基因并验证在HEK293 T细胞中表达.
关键词
NOTCH信号通路
真核表达
NOTCH1
pcmv
6
-
entry
Keywords
Notchl signaling pathway
eukaryotic expression
Notch1
pcmv
6
-
entry
分类号
Q291 [生物学—细胞生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人全长Notch1基因的克隆及其在HEK293 T细胞中的表达
林彦青
邱晓媚
叶健斌
胡冰心
李妍
宁云山
《暨南大学学报(自然科学与医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2017
0
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