期刊文献+
共找到4篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
P53与乙型肝炎病毒增强子Ⅰ上游P53样应答元件结合序列关系研究 被引量:2
1
作者 曲建慧 朱明华 +4 位作者 林静 倪灿荣 李芳梅 祝峙 于观贞 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第5期502-507,共6页
背景与目的:在前期工作中,我们经计算机序列分析发现,在乙型肝炎病毒(hepatitisBvirus,HBV)基因组增强子Ⅰ上游1047~1059bp存在P53样应答元件结合序列5'-TGCC(G)TTGCCT-3',体外实验应用凝胶迁移方法(EMSA和EMSSA)发现这段序列... 背景与目的:在前期工作中,我们经计算机序列分析发现,在乙型肝炎病毒(hepatitisBvirus,HBV)基因组增强子Ⅰ上游1047~1059bp存在P53样应答元件结合序列5'-TGCC(G)TTGCCT-3',体外实验应用凝胶迁移方法(EMSA和EMSSA)发现这段序列与P53蛋白能够进行特异性结合。本实验拟观察肝癌细胞中P53蛋白与HBV基因组P53样应答元件结合序列之间的关系。方法:报告基因质粒pX-CAT上游为X基因增强子和启动子序列,其中含有P53样应答元件结合序列5'-TGCGTTGCCT-3'。首先用PCR方法将pX-CAT质粒中5'-TGCGTTGCCT-3'进行点突变,成为5'-TGTATTGTAT-3',以破坏P53样应答元件结合序列。将pX-CAT和变异后的pX-CAT(mpX-CAT)分别单独或与pCMV-p53质粒共转染HepG2细胞,通过检测报告基因CAT的活化情况,观察P53蛋白与这段DNA序列的作用关系。将HBV基因P53样应答元件结合序列反向构建于真核表达质粒pZeoSV2中(αpZeoXP),转染HepG2.2.15细胞并稳定筛选,以封闭HBV基因上P53样结合位点,观察细胞中P53/P21蛋白表达的改变,以及细胞周期、细胞凋亡的变化。结果:HepG2细胞中,报告基因CAT活性在pCMV-p53与pX-CAT共转染组较pX-CAT单独转染组明显升高(1.353vs0.738,P<0.05),而mpX-CAT单独转染组CAT活性则明显降低(0.304),即使与pCMV-p53共转染CAT活性? 展开更多
关键词 p53 乙型肝炎病毒 增强子I上游 p53 应答元件 序列关系
下载PDF
Significance and identification of p53 response element binding sequence in the genome of hepatitis B virus
2
作者 朱明华 段凌浔 +1 位作者 戴益民 詹熔洲 《Journal of Medical Colleges of PLA(China)》 CAS 1998年第4期235-240,共6页
To explore the mechanism of interaction of hepatitis B virus (HBV) with P53 protein and its role in the hepatocarcinogenesis. Methods: HBV genome was analysed by computer program. The probe containing specific DNA-pro... To explore the mechanism of interaction of hepatitis B virus (HBV) with P53 protein and its role in the hepatocarcinogenesis. Methods: HBV genome was analysed by computer program. The probe containing specific DNA-protein binding site in HBV genome was synthesized and reacted with nuclei protein of hepatoma cell lines. Specific binding was determined by electrophoretic mobility shift assay, electrophoretic mobility supershift assay and in situ ultraviolet cross-linking assay. Co-transfection was performed by using reporter gene cat, p53 and dexamethasone inducible HBx to observe the biological functions of HBV binding to p53 protein. Results: A p53 response element binding sequence is present in HBV genome at upstream of enhancer I from 1047 to 1059 hp. This sequence is capable of binding to p53 protein and increasing accumulation of p53 protein in cells. Conclusion: The results strongly suggest that DNA-protein binding of HBV with P53 protein plays a significant role and it may be the predominant mechanism in the pathogenesis of HBV-associated hepatocellular carcinoma. 展开更多
关键词 HEpATITIS B virus p53 response element tumor SUppRESSOR gene HEpATOMA
全文增补中
基因-病毒治疗系统CNHK500-p53的构建和体外初步研究
3
作者 赵红川 张琪 +4 位作者 陈颖华 陆敏强 杨扬 蔡常洁 陈规划 《肝胆外科杂志》 2006年第6期454-457,共4页
目的构建一种新的基因-病毒治疗系统。方法通过基因操作技术将目的基因表达盒mCMV启动子+p53基因+SV40polyA插入腺病毒E1A基因受端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子调控、E1B基因受缺氧反应元件(HRE)启动子调控的增殖病毒载体质粒pSG500的E1A... 目的构建一种新的基因-病毒治疗系统。方法通过基因操作技术将目的基因表达盒mCMV启动子+p53基因+SV40polyA插入腺病毒E1A基因受端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子调控、E1B基因受缺氧反应元件(HRE)启动子调控的增殖病毒载体质粒pSG500的E1A下游,得到腺病毒质粒pSG500-p53;通过pSG500-p53与5型腺病毒右臂的质粒pBHGE3在293细胞中同源重组得到重组病毒CNHK500-p53;利用Westernblot和ELISA法检测病毒E1A、E1B基因和p53抑癌基因的表达;TCID50方法测定病毒滴度;通过增殖实验观察重组病毒的选择性增殖能力;应用细胞病理效应(CPE)实验检测病毒抗肿瘤作用。结果CNHK500-p53的病毒滴度为2×1010pfu/ml,增殖实验证实CNHK500-p53可以选择性地在端粒酶阳性和缺氧微环境的肝癌细胞中增殖,CNHK500-p53所携带的p53基因在肝癌细胞株中的表达量388±34.6μg/L明显高于非增殖型腺病毒载体Ad-p53的76.3±13.17μg/L(P<0.005),并显示了较强的抗肿瘤效应。结论CNHK500-p53是一种具备治疗肝癌潜力的新型基因-病毒治疗系统。 展开更多
关键词 腺病毒 端粒酶逆转录酶 缺氧反应元件 p53基因 肝癌
下载PDF
乙型肝炎病毒基因组中p53应答成分结合序列的确定及意义 被引量:1
4
作者 朱明华 MarkA.Feitelson RogerJ.Pomerantz 《第四军医大学学报》 1997年第5期412-416,共5页
目的:探讨HBV与肿瘤抑制基因p53相互作用的机制及其在原发性肝癌发生中的意义.方法:应用计算机程序对HBV全基因组进行比较分析,合成含DNA-蛋白质结合位点的基因片段作为探针,与肝癌细胞核蛋白作用.通过凝胶电泳移动... 目的:探讨HBV与肿瘤抑制基因p53相互作用的机制及其在原发性肝癌发生中的意义.方法:应用计算机程序对HBV全基因组进行比较分析,合成含DNA-蛋白质结合位点的基因片段作为探针,与肝癌细胞核蛋白作用.通过凝胶电泳移动试验,凝胶电泳超移动试验,原位紫外线交联试验,确定HBV与p53蛋白的特异性结合.应用带报道基因CAT与p53,HBVX基因共转染,观察HBV与p53蛋白相互作用的生物学功能.结果:HBV基因组增强子I上游区域(1047~1059)存在p53基因应答成份结合位点序列,能特异性地与p53蛋白结合,使p53蛋白在细胞内积聚.结论:HBV与p53存在DNA-蛋白质结合关系,在HBV感染相关的肝癌发生中具有非常重要的理论意义. 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 p53 应答成分 肿瘤抑制基因
下载PDF
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部