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p38MAPK信号通路在吗啡预处理减轻心力衰竭大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用:离体实验 被引量:3
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作者 杨婉 金世云 +2 位作者 许士进 张野 何淑芳 《中华麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期673-677,共5页
目的。探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路在吗啡预处理减轻心力衰竭大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用。方法成年雄性SD大鼠,体重200~230g,6~7周龄,尾静脉注射盐酸多柔比星2mg/kg,1次,周,连续6周,制备大鼠慢性心力... 目的。探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路在吗啡预处理减轻心力衰竭大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用。方法成年雄性SD大鼠,体重200~230g,6~7周龄,尾静脉注射盐酸多柔比星2mg/kg,1次,周,连续6周,制备大鼠慢性心力衰竭模型。第8周末取成功制备慢性心力衰竭模型的大鼠30只,采用随机数字表法分为5组(n=6):假手术组(Sham组)、缺血再灌注组(I/R组)、吗啡预处理组(MPC组)、p38MAPK抑制剂SB203580+吗啡预处理组(SBM组)和SB203580对照组(SB组)。采用Langendorff离体心脏灌注及结扎左冠状动脉前降支30min,再灌注120min制备大鼠心肌缺血再灌注损伤模型。MPC组平衡后灌注含1μmol/L吗啡的K-H液5min,间隔5min,共3个循环,随后制备心肌缺血再灌注损伤模型。SBM组于吗啡预处理前10min灌注含5Ixmol/LSB203580的K-H液至缺血5min,共45min;SB组不实施吗啡预处理,仅于缺血前40min至缺血5min持续灌注含5μmol/LSB203580的K—H液。于心脏稳定灌注15min、再灌注5和10min时收集冠脉流出液,采用化学比色法检测LDH活性。再灌注10min时Sham组、I/R组和MPC组采用Western blot法检测心肌磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)的表达水平;再灌注120min时,测量缺血危险区体积(AAR)、左心室与右心室总体积(LV+RV)、梗死区体积(IS)及IS/AAR比值。结果与Sham组比较,其余各组再灌注时冠脉流出液LDH活性升高,IS和IS/AAR比值增大,I/R组和MPC组心肌p-p38MAPK表达上调(P〈0.05);与I/R组比较,MPC组再灌注时冠脉流出液LDH活性降低,心肌p-p38MAPK表达上调,IS和IS/AAR比值减小(P〈0.05),SBM组和SB组冠脉流出液LDH活性、IS和IS/AAR比值差异无统计学意义(P〉0.05);与MPC组比较,SBM组再灌注时冠脉流出液LDH活性升高,IS和IS/AAR比值增大(P〈0.05)。结论吗啡预处理� 展开更多
关键词 p38丝裂原活化蛋白激酶类 心力衰竭 心肌再灌注损伤 吗啡 缺血预处理
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p38丝裂原活化蛋白激酶抑制剂对兔眼滤过术后肌成纤维细胞分化及细胞外基质合成的作用 被引量:1
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作者 曾琨 黄丽娜 应方微 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期729-733,共5页
背景各种原因导致滤过手术失败的共同点是滤过通道的成纤维细胞过度增生、分化,导致过度纤维化、瘢痕形成。研究发现,p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通道在成纤维细胞表型转化过程中发挥重要作用。目的探讨p38MAPK抑制剂SB203580... 背景各种原因导致滤过手术失败的共同点是滤过通道的成纤维细胞过度增生、分化,导致过度纤维化、瘢痕形成。研究发现,p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通道在成纤维细胞表型转化过程中发挥重要作用。目的探讨p38MAPK抑制剂SB203580对滤过手术后结膜下纤维化反应的抑制效果及其作用机制。方法12只清洁级新西兰白兔行常规青光眼滤过手术制作双眼滤过手术模型,模型兔按随机数字表法随机分为单纯滤过手术组、SB203580治疗组和丝裂霉素c(MMC)对照组。SB203580治疗组兔眼滤过术毕立即结膜下注射0.2g/LSB203580溶液1ml,MMC对照组兔眼术中用浸泡0.2g/LMMC的棉片置于术区结膜下及巩膜瓣下3rain。各组兔术后进行裂隙灯显微镜观察,术后1、3、7、10、14d使用Ieare回弹式眼压计测量眼压,术后14d抽取房水0.2ml,并获取手术滤过区结膜下组织标本,用ELISA法检测房水及滤过区结膜组织中的“一平滑肌肌动蛋白(d—SMA)、纤维连接蛋白的表达,用荧光实时定量PCR检测各组兔术眼滤过区结膜组织中ACTA2、结缔组织生长因子(CTGF)和I型胶原蛋白d2链(COLlA2)mRNA的表达。结果术后14d,单纯滤过手术组滤过泡血管化、瘢痕形成,SB203580治疗组滤过泡扁平、弥散,MMC对照组滤过泡呈苍白缺血状、扁平弥散。单纯滤过手术组、SB203580治疗组和MMC对照组兔间术前眼压值差异无统计学意义(F=0.065,P=0.937),术后眼压值随着时间的延长逐渐升高,各时间点的总体比较差异有统计学意义(F=32.873,P=0.030)。ELISA法检测SB203580治疗组和MMC对照组兔房水及滤过区结膜下组织中的d—SMA质量浓度均明显低于单纯滤过手术组,而MMC组α-SMA质量浓度明显低于SB203580治疗组,差异均有统计学意义(P〈0.05)。SB203580治疗组和MMC对照组兔房水及滤过区结膜下组织中的纤 展开更多
关键词 滤过手术 肌成纤维细胞 细胞外基质 p38丝裂原活化蛋白激酶
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羟乙基淀粉130/0.4对P38丝裂素活化蛋白激酶信号转导通路的影响 被引量:1
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作者 王云霞 皋源 +2 位作者 田婕 李玮伟 王祥瑞 《中国危重病急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期270-273,共4页
目的观察羟乙基淀粉130/0.4(万汶)对P38丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)信号转导通路的影响,探讨其对感染所致急性肺损伤(Au)保护作用的机制。方法雄性SD大鼠30只,按随机数字表法分为正常对照组、脂多糖(LPS)组(LPS 10mg/kg)... 目的观察羟乙基淀粉130/0.4(万汶)对P38丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)信号转导通路的影响,探讨其对感染所致急性肺损伤(Au)保护作用的机制。方法雄性SD大鼠30只,按随机数字表法分为正常对照组、脂多糖(LPS)组(LPS 10mg/kg)、万汶15ml/kg组(LPS 10mg/kg+羟乙基淀粉130/0.415ml/kg)、万汶30ml/kg组(LPS 10mg/kg+羟乙基淀粉130/0.430ml/kg)及万汶对照组(羟乙基淀粉130/0.430ml/kg),颈内静脉注入LPS 10mg/kg复制ALI模型。6h后处死大鼠,采集肺脏观察肺组织病理学变化;用蛋白质免疫印迹法(Westernblotting)检测肺组织P—P38、P38、P—P44/42和P44/42的表达;用凝胶电迁移法(EMSA)检测活化蛋白1(AP-1)的DNA结合活性。结果与正常对照组比较,LPS组表现为P38及P44/42的磷酸化水平增高,肺组织AP-1表达上升(P〈0.05或P〈0.01);万汶15ml/kg和30ml/kg均可抑制LPS导致的P38磷酸化(P均〈0.05),同时可明显抑制AP-1的活性(P均〈0.05);万汶两个剂量组间比较差异无统计学意义(P均〉0.05)。结论羟乙基淀粉130/0.4通过抑制P38MAPK信号转导通路中P38的磷酸化,进而使其下游的AP-1活性降低,减轻机体炎症反应。 展开更多
关键词 羟乙基淀粉130/0.4 p38丝裂素活化蛋白激酶 急性肺损伤 炎症反应
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p38抑制剂对辐射损伤小鼠中免疫细胞的作用 被引量:5
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作者 李德冠 王月英 +4 位作者 王小春 张恒 吴红英 路璐 孟爱民 《天津医药》 CAS 北大核心 2011年第10期933-935,共3页
目的:探讨利用p38抑制剂SB203580(SB)抑制p38通路对6Gy受照小鼠免疫细胞辐射损伤的作用。方法:取雄性C57BL/6小鼠30只,随机分为对照组、照射组和SB组,每组10只。SB组和照射组小鼠接受以6Gy137Csγ射线的全身照射。SB组小鼠照射24h后腹... 目的:探讨利用p38抑制剂SB203580(SB)抑制p38通路对6Gy受照小鼠免疫细胞辐射损伤的作用。方法:取雄性C57BL/6小鼠30只,随机分为对照组、照射组和SB组,每组10只。SB组和照射组小鼠接受以6Gy137Csγ射线的全身照射。SB组小鼠照射24h后腹腔注射SB(15mg/kg),每2d1次,共给药5次,其余2组小鼠腹腔注射对照溶液。小鼠受照10d后处死,取外周血计数,流式细胞仪检测CD4、CD8、B220表达,取骨髓细胞测定ROS水平。结果:照射组外周血白细胞(WBC)、CD8、B220细胞比例较对照组明显下降,骨髓ROS水平升高(P<0.01)。SB组外周血CD8比例较照射组上升,骨髓ROS水平下降(P<0.01)。结论:SB对小鼠6Gy照射后造血免疫损伤有一定的缓解作用,其机制可能与其降低照射后骨髓细胞ROS水平有关。 展开更多
关键词 p38丝裂原活化蛋白激酶类 Γ射线 辐射损伤 抗原 CD8抗原 CD4模型 动物
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烧伤血清作用下心肌细胞蛋白激酶B和p38丝裂原活化蛋白激酶通路的交叉对话研究 被引量:4
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作者 吕根法 陈璧 +3 位作者 张万福 王耘川 朱雄翔 胡大海 《中华烧伤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期263-267,共5页
目的了解在烧伤血清刺激下大鼠心肌细胞内是否存在磷脂酰肌醇3-激酶(Pl3K)/蛋白激酶B(Akt)与p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK,以下简称p38)信号通路的交叉对话,探讨此二通路在烧伤后心肌细胞损伤中的作用。方法建立烧伤血清刺... 目的了解在烧伤血清刺激下大鼠心肌细胞内是否存在磷脂酰肌醇3-激酶(Pl3K)/蛋白激酶B(Akt)与p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK,以下简称p38)信号通路的交叉对话,探讨此二通路在烧伤后心肌细胞损伤中的作用。方法建立烧伤血清刺激下的大鼠心肌细胞模型。(1)检测体积分数10%的烧伤血清刺激不同时间后,心肌细胞内磷酸化p38(p-p38)和磷酸化Akt(p-Akt)的表达水平。(2)检测在不同体积分数(5%、10%、20%)的烧伤血清或体积分数10%烧伤血清+胰岛素(1×10^-6、1×10^-7、1×10^-8mol/L)作用下,心肌细胞内p-p38和p-Akt的表达水平,并测定细胞培养上清液中肌酸激酶(CK)的含量。(3)采用p38MAPK通路抑制剂SB203580、P13K/Akt通路抑制剂LY294002进行阻断实验,测定心肌细胞内p-p38和p-Akt的表达水平及细胞培养上清液中CK的含量。结果(1)体积分数10%烧伤血清作用1、3、6、12、24h时,心肌细胞p-p38水平分别为4.0±0.8、3.6±0.8、5.1±1.6、2.4±0.5、3.0±0.6,较作用0h时(加入血清后即刻)的水平(1.0)明显增高(P〈0.01);而p-Akt表达水平分别为0.15±0.07、0.64±0.10、0.26±0.08、0.38±0.11、0.59±0.13,较作用0h时水平(1.00)明显降低(P〈0.01)。(2)不同浓度烧伤血清或烧伤血清+胰岛索作用下,p-p38和p-Akt的表达水平呈相反变化趋势;心肌细胞CK的释放量随烧伤血清浓度升高而增高,胰岛素对此有明显的抑制作用(P〈0.05或P〈0.01)。(3)LY294002能够升高烧伤血清导致的低p—p38水平,抵消胰岛素的保护作用(P〈0.01);SB203580能使烧伤血清所致的低p-Akt水平得以回升(P〈0.01),抑制烧伤血清引起的CK释放。结论烧伤血清作用下的心肌细胞存在Pl3K/Akt和p38信号通路的交叉对话,并可能对心肌细胞产生调控作� 展开更多
关键词 烧伤 肌细胞 心脏 p38丝裂原活化蛋白激酶类 蛋白激酶B 烧伤血清
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静磁场与游泳运动对鼠膝骨关节炎软骨的作用 被引量:12
6
作者 佘海洪 张长杰 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期702-706,共5页
目的:观察静磁场、游泳运动对SD大鼠膝骨关节炎软骨的防治效果。方法:选用健康雄性SD大鼠40只,建立左后肢膝关节OA模型,并随机分为对照组(A组)、OA模型组(B组)、静磁场疗法组(C组)、游泳运动疗法组(D组)与综合治疗组(E组)。治疗4周后,... 目的:观察静磁场、游泳运动对SD大鼠膝骨关节炎软骨的防治效果。方法:选用健康雄性SD大鼠40只,建立左后肢膝关节OA模型,并随机分为对照组(A组)、OA模型组(B组)、静磁场疗法组(C组)、游泳运动疗法组(D组)与综合治疗组(E组)。治疗4周后,取股骨内侧髁软骨与软骨下骨作为标本。比较各组软骨的阿尔新蓝染色结果、软骨大体变化、Mankin′s分级及IL-1β、磷酸化p38MAPK的免疫组化染色积分光密度(IOD)值。结果:软骨阿尔新蓝着色状况,A组蓝染鲜明;B组呈不均匀淡蓝色;C组不均匀但较明显蓝染;D组略不均匀较鲜亮蓝染;E组着色接近正常。软骨大体评分平均秩值A、B、C、D、E组分别是7.56、30.19、25.63、21.38、17.75(P<0.05);Mankin评分平均秩值A、B、C、D、E组依次是14.94、103.25、82.44、60.17、41.71(P<0.05)。软骨IL-1βIOD值A、B、C、D、E组分别是5.43±1.63、65.32±36.42、49.77±16.90、28.54±7.44、16.26±3.98(P<0.05);磷酸化p38IOD值A、B、C、D、E组依次是0.39±0.31、26.44±5.52、17.60±2.52、9.54±1.57、5.71±1.41(P<0.05)。各组间软骨组织阿尔新蓝着色的程度与均匀性及软骨大体评分秩值、Mankin评分值及软骨IL-1β、磷酸化p38MAPKIOD值均存在着明显差别(P<0.05)。结论:静磁场疗法、游泳运动疗法及综合治疗可不同程度减轻和/或延缓骨关节炎软骨的损害。 展开更多
关键词 骨关节炎 静磁场 游泳运动 白细胞介素-1Β p38丝裂原活化蛋白激酶
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斯伐他汀对糖尿病肾病大鼠肾小球系膜细胞p38信号通路的影响 被引量:10
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作者 李艳波 韩君勇 李为民 《中华肾脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期91-94,共4页
目的研究糖尿病肾病大鼠肾小球系膜细胞p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)的表达及斯伐他汀对其的影响。方法分别以高糖、糖基化终产物(AGE)及过氧化氢孵育糖尿病大鼠肾小球系膜细胞(RMC),Western印迹法检测RMC的p38MAPK和TGF—β蛋... 目的研究糖尿病肾病大鼠肾小球系膜细胞p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)的表达及斯伐他汀对其的影响。方法分别以高糖、糖基化终产物(AGE)及过氧化氢孵育糖尿病大鼠肾小球系膜细胞(RMC),Western印迹法检测RMC的p38MAPK和TGF—β蛋白表达,p38MAPK特异性抑制剂SB203580及斯伐他汀预处理对其影响。结果高糖、AGE及过氧化氢均可单独激活p38MAPK,增加RMC的磷酸化(P)p38MAPK和TGF—β的蛋白表达;SB203580显著抑制TGF—β的蛋白表达(P〈0.05);斯伐他汀抑制p38MAPK的活化并减少TGF—β的蛋白表达(P〈0.05)。结论p38MAPK可能是糖尿病肾病发生的始动信号之一。斯伐他汀可能通过抑制p38MAPK磷酸化而减少TGF—β的蛋白表达。 展开更多
关键词 斯伐他汀 糖尿病肾病 转化生长因子Β p38丝裂原活化蛋白激酶类
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p38MAPK表达在大鼠重症急性胰腺炎肺损伤中的意义 被引量:8
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作者 刘君 孙家邦 +2 位作者 李非 张淑文 崔叶青 《中华肝胆外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期515-519,共5页
目的探讨大鼠重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)时p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38MAPK)表达的动态变化及其与肺损伤的关系。方法72只雄性Wistar大鼠随机分为空白对照组、盐水对照... 目的探讨大鼠重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)时p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38MAPK)表达的动态变化及其与肺损伤的关系。方法72只雄性Wistar大鼠随机分为空白对照组、盐水对照组、胰腺炎组。胰管逆行注射3.5%牛磺胆酸钠诱导重症急性胰腺炎模型,分别于造模后0.5h、6h、12h、24h取材。采用免疫组化方法检测肺组织磷酸化p38MAPK活性。利用逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)法检测SAP肺组织p38MAPK mRNA表达,同时观察肺组织病理改变、湿/干重比率及肺组织髓过氧化物酶(myeloperoxidase enzyme,MPO)等。结果正常对照组肺组织仅有少量磷酸化p38MAPK活化及p38MAPK mRNA的表达,SAP时肺组织磷酸化p38MAPK及p38MAPK mRNA高表达,MPO活力增加。造模后肺组织p38MAPK mRNA表达明显升高,6h达高峰,24h时活性仍高于其基础活性。肺组织p38MAPK mRNA表达与肺损伤病理评分及MPO呈正相关,相关系数分别为0.726、0.629(P〈0.01)。结论肺组织p38MAPK活化及过度表达可能是SAP肺损害发生的原因之一。 展开更多
关键词 胰腺炎 肺损伤 p38丝裂原活化蛋白激酶 基因表达
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Pioglitazone ameliorates retinal ischemia/reperfusion injury via suppressing NLRP3 inflammasome activities 被引量:7
9
作者 Yue-Lu Zhang Ruo-Bing Wang +2 位作者 Wei-Yi Li Fang-Zhou Xia Lin Liu 《International Journal of Ophthalmology(English edition)》 SCIE CAS 2017年第12期1812-1818,共7页
AIM:To explore the role of Pioglitazone(Pio) on a mouse model of retinal ischemia/reperfusion(I/R) injury and to elucidate the potential mechanism.METHODS:Retinal ischemia was induced in mice by increasing the i... AIM:To explore the role of Pioglitazone(Pio) on a mouse model of retinal ischemia/reperfusion(I/R) injury and to elucidate the potential mechanism.METHODS:Retinal ischemia was induced in mice by increasing the intraocular pressure,and Pio was administered 4 h though periocular injection before I/R.The number of cells in the ganglion cell layer(GCL) was counted 7 d after retinal I/R injury.Glial fibrillary acidic protein(GFAP),nuclear factor-kappa B(NF-κB),p38,phosphorylated-p38,PPAR-γ,interleukin-1β(IL-1β),Toll-like receptor 4(TLR4),NLRP3,cleaved caspase-1,caspase-1 were determined by real-time polymerase chain reaction and Western blotting.RESULTS:Pio promoted the survival of retinal cells in GCL following retinal I/R injury(P〈0.05).Besides,retinal I/R injury stimulated the expression of GFAP and TLR4,which were partially reversed by Pio treatment(P0.05).Retinal I/R injury-upregulated expression of NLRP3,cleaved caspase-1,IL-1β was attenuated after Pio treatment(P〈0.05).Moreover,I/R injury induced activation of NF-κB and p38 were inhibited by Pio treatment(P〈0.05).CONCLUSION:Pio promotes retinal ganglion cells survival by suppressing I/R-induced activation of TLR4/NLRP3 inflammasomes via inhibiting NF-κB and p38 phosphorylation. 展开更多
关键词 peroxisome proliferator-activated receptor-γ glial fibrillary acidic protein NLRp3 nuclear factor-κB p38mitogen-aetivated protein kinase
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骨髓间充质干细胞对急性胰腺炎大鼠p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路表达的影响 被引量:4
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作者 杨平 宋振顺 +3 位作者 寇明文 卢鹏 赵戈 张福琴 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期1339-1341,F0004,共4页
目的观察骨髓间充质干细胞(MSCs)对急性胰腺炎(AP)大鼠p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路的影响,探讨其减轻胰腺炎的作用机制。方法采用腹腔注射L-精氨酸建立大鼠AP模型。SD大鼠随机分4组:AP未治疗组(24只);MSCs移植组... 目的观察骨髓间充质干细胞(MSCs)对急性胰腺炎(AP)大鼠p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路的影响,探讨其减轻胰腺炎的作用机制。方法采用腹腔注射L-精氨酸建立大鼠AP模型。SD大鼠随机分4组:AP未治疗组(24只);MSCs移植组(24只);p38MAPK抑制组(24只)和正常对照组(6只)。流式细胞术检测MSCs表面标记物;逆转录-聚合酶链反应(RT—PCR)方法检测胰腺组织p38MAPKmRNA表达变化;同时观察组织形态学改变。结果(1)未治疗组大鼠在建模后1h时胰腺组织p38MAPKmRNA表达显著升高并达到顶峰(P〈0.01);移植MSCs后表达明显降低,与正常对照组比较,差异无统计学意义(P〉0.05)。(2)未治疗组血清炎性因子水平分别为:肿瘤坏死因子(TNF)-α(614.8±54.6)ng/L、白细胞介素(IL)-1(3040.5±506.4)ng/L、IL-17(4.5±0.4)U/L,胰腺组织中性粒细胞趋化因子(CINC)和单核粒细胞趋化因子(MCP-1)染色阳性率均明显升高(P〈0.05);移植MSCs后,CINC、MCP-1染色阳性率显著下降,血清炎性因子水平分别为:TNF-α(277.5±60.8)ng/L、IL-1(1056.2±563.1)ng/L、IL-17(1.2±0.4)U/L,两组比较差异有统计学意义(P〈0.05)。(3)胰腺组织苏木素-伊红(HE)染色显示,未治疗组有大量炎性细胞浸润,胰腺细胞破坏明显,腺体结构紊乱,而移植组仅见少量炎性细胞浸润,细胞偶有破坏,排列整齐,结构有序。结论急性胰腺炎时,胰腺组织内p38MAPKmRNA表达上调,胰腺组织损伤严重。MSCs移植可以明显抑制p38MAPKmRNA表达,降低胰腺组织内趋化因子和血清炎性因子水平,从而减轻胰腺损伤。 展开更多
关键词 p38丝裂原活化蛋白激酶 骨髓间充质干细胞 急性胰腺炎 移植
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脂多糖诱导血管平滑肌细胞分泌白细胞介素-6及p38丝裂素活化蛋白激酶的调控作用 被引量:4
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作者 楚玉峰 姜毅 +4 位作者 张继承 任宏生 蒋进皎 孟玫 王春亭 《中国危重病急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期291-294,共4页
目的探讨p38丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)信号转导通路在脂多糖(LPS)作用下血管平滑肌细胞(VSMc)分泌白细胞介素-6(IL-6)中的调节作用。方法将体外培养的大鼠胸主动脉VSMC分为LPS刺激组、p38MAPK抑制剂SB203580干预组、SB203580对... 目的探讨p38丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)信号转导通路在脂多糖(LPS)作用下血管平滑肌细胞(VSMc)分泌白细胞介素-6(IL-6)中的调节作用。方法将体外培养的大鼠胸主动脉VSMC分为LPS刺激组、p38MAPK抑制剂SB203580干预组、SB203580对照组和溶液对照组。LPS组以终浓度100μg/L的LPS与VSMc共同孵育;干预组VsMC以p38MAPK抑制剂SB20358010μmol/L预处理2h,再加入终浓度100pg/L的LPS共同孵育;对照组仅以SB20358010μmol/L预处理2h;溶液组仅加入去血清培养液培养。各组于培养0、3、6、12、24h后采用实时聚合酶链反应(real—timePCR)和酶联免疫吸附法(EuSA)分别检测细胞IL-6mRNA和上清液中IL-6蛋白表达。结果LPS刺激3h,VSMC中IL-6mRNA和蛋白表达即出现明显增高[mRNA(21.3±3.2)×104,蛋白(296.2±19.6)ng/L],12h达高峰[mRNA(131.4±11.2)×104,蛋白(897.7±34.0)ng/L],24h有所降低[mRNA(15.3±4.7)×104,蛋白(194.3±24.0)ng/L],但仍显著高于溶液组(mRNA(9.4土1.9)×104,蛋白(29.4土4.4)ng/L,均P〈0.053。干预组3、6、12h可明显抑制LPS诱导VSMC中IL-6的分泌[mRNA(15.4±3.6)×104、(43.2土6.6)×104、(56.2±5.5)×104,蛋白(180.3土23.6)、(432.2土56.8)、(546.2士57.9)ng/L,均P〈0.053。结论LPS诱导VsMc可明显增加IL-6的mRNA和蛋白表达,p38MAPK抑制剂SB203580可显著抑制IL-6转录和蛋白合成,表明p38MAPK信号转导通路可能通过直接或间接作用参与了IL-6的分泌调节作用。 展开更多
关键词 白细胞介素-6 p38丝裂素活化蛋白激酶 脂多糖 血管平滑肌细胞
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活性氧在血小板储存损伤引起的GPIbα酶切中的作用研究 被引量:1
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作者 陈修山 胡萍 +4 位作者 蒋浩琴 陈淑英 胡玲玲 王志成 蔡枫 《中华全科医学》 2017年第9期1553-1555,1619,共4页
目的活性氧(ROS)在血小板活化和凋亡过程中起重要作用,血小板在发生活化和凋亡时伴随有糖蛋白(GP)Ibα酶切,血小板储存损伤(PSL)主要由血小板活化和凋亡引起。本研究主要探讨ROS在PSL引起的GPIbα酶切中的作用和分子机制。方法取健康志... 目的活性氧(ROS)在血小板活化和凋亡过程中起重要作用,血小板在发生活化和凋亡时伴随有糖蛋白(GP)Ibα酶切,血小板储存损伤(PSL)主要由血小板活化和凋亡引起。本研究主要探讨ROS在PSL引起的GPIbα酶切中的作用和分子机制。方法取健康志愿者单采血小板,(22±2)℃震荡,分别在保存的1、3、5 d用无菌接管机取一定量血小板,离心得到沉淀和上清,上清用酶标仪检测糖萼蛋白(GC);沉淀用缓冲液重悬,经洗涤2次后得到洗涤血小板;洗涤血小板与不同的检测探针孵育后,用流式细胞仪检测细胞内ROS浓度、线粒体跨膜电位去极化、磷脂酰丝氨酸(PS)外翻和P-选择素表达;Western blot检测p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)的磷酸化。结果随着保存时间的延长,血小板P-选择素表达、PS外翻和线粒体跨膜电位去极化逐渐增多,血小板胞内ROS浓度逐渐增多,p38 MAPK磷酸化逐渐增多、血浆中GC含量逐渐增多;ROS拮抗剂抑制血小板胞内ROS增多、抑制p38 MAPK磷酸化、减少血浆GC含量;p38 MAPK抑制剂抑制p38 MAPK磷酸化和减少血浆GC含量,不抑制ROS浓度增加。结论 ROS在PSL引起的GPIbα酶切过程中起重要作用,ROS可能通过活化p38MAPK进而引起GPIbα酶切。 展开更多
关键词 糖蛋白Ibα p38丝裂原活化蛋白激酶 血小板储存损伤 活性氧
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慢病毒介导的p38丝裂原活化蛋白激酶RNA干扰对心肌成纤维细胞结缔组织生长因子的影响 被引量:1
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作者 周燕 魏捷 +2 位作者 梁远红 陈静 唐其柱 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期1002-1004,共3页
目的观察慢病毒介导的p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)的短发夹环RNA(shRNA)对心肌成纤维细胞结缔组织生长因子(CTGF)的影响并探讨其机制。方法构建慢病毒p38MAPKshRNA(PGLV—shRNA)并测序鉴定,观察其对转化生长斟子-β(TGF... 目的观察慢病毒介导的p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)的短发夹环RNA(shRNA)对心肌成纤维细胞结缔组织生长因子(CTGF)的影响并探讨其机制。方法构建慢病毒p38MAPKshRNA(PGLV—shRNA)并测序鉴定,观察其对转化生长斟子-β(TGF—β)诱导心肌成纤维细胞的影响,检测p38MAPK、CTGFmRNA和CTGF、α-平滑肌肌动蛋白(α—SMA)蛋白的表达。结果TGF—β4nmol/L刺激24h使心肌成纤维细胞p38MAPKmRNA、CTGFmRNA、CTGF蛋白和α—SMA蛋白明显升高(P〈0.01)。PGLV—shRNA明显减少TGF.13诱导的p38MAPKmRNA、CTGFmRNA、CTGF蛋白和α-SMA蛋白表达(0.252±0.041比0.652±0.089,P〈0.01;0.418±0.071比0.838±0.099,P〈0.01;0.418±0.076比0.991±0.117,P〈0.01;0.465±0.069比0.875±0.100,P〈0.05)。结论TGF—经p38MAPK信号通路诱导心肌成纤维细胞CTGF表达,PGLV—shRNA能有效抑制TGF—α诱导的心肌细胞纤维化。 展开更多
关键词 p38丝裂原活化蛋白激酶 慢病毒 结缔组织生长因子 RNA干扰
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miR-451调控早期糖尿病肾病小鼠肾小球肥大的机制
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作者 彭睿 周吉 +4 位作者 李天驹 孙艳 尹频 彭惠民 张政 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1584-1589,共6页
目的:观察mi R-451对早期糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)db/db小鼠肾脏形态学影响,探讨mi R-451在DN发病机制中的作用。方法:采用24只7周龄雄性db/db小鼠和8只正常对照db/m小鼠依次分为未处理组、空质粒组、mi R-451组及对照组。... 目的:观察mi R-451对早期糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)db/db小鼠肾脏形态学影响,探讨mi R-451在DN发病机制中的作用。方法:采用24只7周龄雄性db/db小鼠和8只正常对照db/m小鼠依次分为未处理组、空质粒组、mi R-451组及对照组。腹腔注射法进行质粒注射处理2周后,光镜下观察肾小球形态学变化,实时荧光定量PCR(real-time PCR)检测肾脏组织mi R-451的表达水平,Western blot和激光共聚焦检测肾脏组织中mi R-451的靶基因酪氨酸-3单氧化酶/色氨酸单氧化酶活化蛋白(tyrosine3-monooxy-genase/tryptophan 5-monooxygenase activation protein,Ywhaz)及其相关的丝裂原激活蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)途径中p38丝裂原激活的蛋白激酶(p38MAPK)及其上游激酶MKK3(MAPK kinase3)的表达水平。结果:7周龄db/db小鼠未处理组相比对照组出现高血糖且尿白蛋白排泄率(urinary albumin excretion rate,UAE)增加,提示进入早期DN阶段,给予30 mg/(kg·d)质粒注射实验2周。光镜观察和肾小球直径测量发现,mi R-451处理组肾小球形态减小(P=0.000)。Real-time PCR检测显示mi R-451组小鼠肾脏组织中mi R-451的表达水平增高1.79倍(P=0.002),Western blot和激光共聚焦结果显示,mi R-451组较未处理组和空质粒组肾脏组织Ywhaz的表达受到下调,同时p38MAPK及上游激酶MKK3蛋白表达水平减少(P均=0.000)。结论:mi R-451可能通过直接靶向Ywhaz基因,调控MAPK途径中关键蛋白p38MAPK、MKK3的表达,从而抑制肾小球肥大,在DN发病机制中可能起着重要的作用。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 微小RNA 酪氨酸-3单氧化酶/色氨酸单氧化酶活化蛋白 p38丝裂原激活的蛋白激酶
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p38 MAPK在高温高湿环境下颅脑火器伤的变化
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作者 钱畅 黄柒金 《广西医学》 CAS 2008年第3期311-313,共3页
目的 研究p38MAPK在高湿环境下颅脑火器伤后活化及其原因。方法 采用高温高湿颅脑枪伤模型,新西兰大白兔30只,随机分成常温[T(22.0±0.5)℃、RH50%]对照组,高温高湿[T(39.0±0.5)℃、RH80%~85%]枪伤后受热10、30... 目的 研究p38MAPK在高湿环境下颅脑火器伤后活化及其原因。方法 采用高温高湿颅脑枪伤模型,新西兰大白兔30只,随机分成常温[T(22.0±0.5)℃、RH50%]对照组,高温高湿[T(39.0±0.5)℃、RH80%~85%]枪伤后受热10、30min,1、1.5、2h组,每组5只。采用Westernblot法检测脑匀浆p38MAPK活性,应用化学发光和X线片显示,凝胶图像分析仪半定量分析。结果 颅脑枪伤受高温高湿环境作用脑皮质和下丘脑的p38MAPK的活性受湿热后迅速增高,于受热1h达高峰,随后下降。下丘脑的p38MAPK活性比脑皮质高。结论 高温高湿环境颅脑火器伤后p38X4APK活性早期明显升高,参与了脑的继发性损害过程。 展开更多
关键词 颅脑火器伤 p38丝裂原激活蛋白激酶 高温 高湿
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p38丝裂原活化蛋白激酶抑制剂SB203580对严重烧伤大鼠离体库普弗细胞促炎性细胞因子分泌的影响
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作者 陈旭林 夏照帆 +2 位作者 贾一韬 韦多 王永杰 《中华损伤与修复杂志(电子版)》 CAS 2008年第3期14-16,共3页
目的探讨p38丝裂原活化蛋白激酶抑制剂SB203580对严重烧伤大鼠离体库普弗细胞促炎性细胞因子肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α和白细胞介素(interleukin,IL)-1β分泌的影响。方法健康成年的SD大鼠10只分为假烫组和烧伤组,假... 目的探讨p38丝裂原活化蛋白激酶抑制剂SB203580对严重烧伤大鼠离体库普弗细胞促炎性细胞因子肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α和白细胞介素(interleukin,IL)-1β分泌的影响。方法健康成年的SD大鼠10只分为假烫组和烧伤组,假烫或烧伤24h后处死分离出库普弗细胞。37℃5%CO2条件下培养60min后加入SB203580,18h后用25ng/孔的脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激。酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定库普弗细胞上清液TNF-α和IL-1β的含量。结果烧伤大鼠的离体库普弗细胞在LPS刺激后分泌的TNF-α和IL-1β量较假烫组增高显著[(2.847±0.398)ng/mlvs(1.232±0.101)ng/ml,P<0.01;(742.1914±103.7009)pg/mlvs(320.5462±26.3022)pg/ml,P<0.01)]。体外使用SB203580既可以抑制烧伤大鼠的离体库普弗细胞分泌TNF-α和IL-1β[(0.1021±0.018)ng/mlvs(2.847±0.398)ng/ml,P<0.01;(26.7167±4.9213)pg/mlvs(742.1914±103.7009)pg/ml,P<0.01)],也可以抑制正常大鼠的离体库普弗细胞分泌TNF-α和IL-1β[(0.113±0.032)ng/mlvs(1.232±0.101)ng/ml,P<0.01;(30.2427±8.9803)pg/mlvs(320.5462±26.3022)pg/ml,P<0.01)]。结论p38MAPK信号转导通路介导了严重烧伤后库普弗细胞TNF-α和IL-1β的产生,在烧伤后全身炎症反应的发生中发挥着重要的调控作用。 展开更多
关键词 p38丝裂原活化蛋白激酶 库普弗细胞 烧伤 肿瘤坏死因子-α 白细胞介素-1β
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芹菜素对脂多糖致小鼠急性肺损伤的作用机制研究 被引量:2
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作者 马明明 李岩 +4 位作者 朱委委 张小强 李君 刘向勇 王晓芝 《中国中西医结合急救杂志》 CAS 北大核心 2014年第3期170-174,共5页
目的观察芹菜素对脂多糖(LPS)诱导小鼠急性肺损伤(ALI)的影响,探讨其可能的作用机制。方法将40只健康雄性昆明小鼠按随机数字表法分为对照组、模型组及芹菜素低、中、高剂量组,每组8只。采用腹腔注射LPS 5mg/kg制备ALI模型;芹... 目的观察芹菜素对脂多糖(LPS)诱导小鼠急性肺损伤(ALI)的影响,探讨其可能的作用机制。方法将40只健康雄性昆明小鼠按随机数字表法分为对照组、模型组及芹菜素低、中、高剂量组,每组8只。采用腹腔注射LPS 5mg/kg制备ALI模型;芹菜素低、中、高剂量组分别于制模前1h腹腔注射芹菜素10、25、50mg/kg进行干预。制模后6h进行指标检测,取右肺上叶行苏木素-伊红(HE)染色观察肺组织病理改变并对其进行病理评分,取右肺下叶称重测湿/干质量(W/D)比值,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清及支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量,逆转录-聚合酶链反应(RT—PCR)检测p38丝裂素活化蛋白激酶(p38MAPK)、ICAM-1和TNF-α的mRNA表达。结果与对照组比较,模型组肺W/D比值增高(17.79±2.89比5.56±0.37,P〈0.05),肺组织病理评分增加(分:10.32±0.23比1.87±0.54,P〈0.05),血清及BALF中ICAM-1、TNF-α含量升高[血清中ICAM-1(ng/L):21.4±2.7比14.3±3.5,TNF—α(ng/L):254.8±10.6比1423±13.7;BALF中ICAM-1(ng/L):20.3±2.4比11.5±3.2,TNF—α(ng/L):230.3±5.8比110.5±11.2,均P〈0.05],且p38MAPK、ICAM-1和TNF—α的mRNA表达亦明显升高(以对照组为1,p38MAPK、ICAM-1、TNF-α的相对表达量分别为4.42±0.37、4.89±0.27、3.28±0.13,均P〈0.05);不同剂量芹菜素可减轻上述损伤效应,以中剂量组改善最为明显,肺W/D比值为13.28±1.21,血清中ICAM-1为(18.5±4.3)ng/L,TNF—α为(169.4±20.8)ng/L,BALF中ICAM-1为(17.8±3.5)ng/L,TNF-α为(150.4±7.1)ng/L,肺组织p38MAPK、ICAM-1、TNF—α的mRNA表达分别为2.99±0.28、3.97±0.17、2.87±0.27,与模型组比较差异均有统计学意义� 展开更多
关键词 芹菜素 脂多糖 急性肺损伤 肿瘤坏死因子-Α 细胞间黏附分子-1 p38丝裂素活 化蛋白激酶
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