PCAF和E-Cadherin在肾上腺皮质肿瘤中的表达及意义 被引量：2

1

作者 肖戈 胡卫列 +3 位作者 徐文清 吴义高 黄福 吴浩明 《山东医药》 CAS 2013年第13期1-4,共4页

目的探讨肾上腺皮质肿瘤中p300/CBP相关因子(PCAF)和E-钙黏蛋白(E-Cadherin)的表达及其意义。方法采用免疫组化Envision法对正常肾上腺12例、肾上腺腺瘤30例、肾上腺皮质癌14例中PCAF和E-Cadherin的表达水平进行检测,比较二者在不同肾... 目的探讨肾上腺皮质肿瘤中p300/CBP相关因子(PCAF)和E-钙黏蛋白(E-Cadherin)的表达及其意义。方法采用免疫组化Envision法对正常肾上腺12例、肾上腺腺瘤30例、肾上腺皮质癌14例中PCAF和E-Cadherin的表达水平进行检测,比较二者在不同肾上腺组织的表达情况。结果 PCAF和E-Cadherin在肾上腺皮质癌组织中的表达阳性率较正常肾上腺、肾上腺腺瘤组织均明显降低,差异均有统计学意义(P均<0.05)。PCAF的表达与肾上腺皮质癌TNM分期相关(P<0.05),E-Cadherin的表达与肾上腺皮质癌的TNM分期、肿瘤转移、2年生存情况均显著相关(P均<0.05)。结论 PCAF和E-Cadherin联合检测可以提高肾上腺皮质癌诊断的灵敏度,PCAF和E-Cadherin有可能作为判断肾上腺皮质癌预后情况的指标。 展开更多

关键词 肾上腺肿瘤 p300 cbp相关因子 E-钙黏蛋白 免疫组织化学

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PCAF通过调控FOXO1活性参与3T3-L1前脂肪细胞分化 被引量：2

2

作者 邹磊 王玉华 +6 位作者 蔡春友 魏凤江 杨付花 焦红肖 凌超 时文涛 李卫东 《天津医科大学学报》 2015年第3期203-207,共5页

目的:在3T3-L1细胞模型中,探讨组蛋白乙酰转移酶PCAF对脂肪细胞分化调控的分子机制。方法:应用Real-time PCR和Western blot检测PCAF在3T3-L1细胞分化过程中的表达;应用重组慢病毒感染细胞,shRNA干扰或过表达PCAF,通过Oil-Red-O染色法观... 目的:在3T3-L1细胞模型中,探讨组蛋白乙酰转移酶PCAF对脂肪细胞分化调控的分子机制。方法:应用Real-time PCR和Western blot检测PCAF在3T3-L1细胞分化过程中的表达;应用重组慢病毒感染细胞,shRNA干扰或过表达PCAF,通过Oil-Red-O染色法观察PCAF表达量变化对细胞分化的影响;应用ChIP on chip和PCRarray的方法筛选PCAF调控的下游基因和通路;应用Westernblot和ChIP qPCR对潜在目的基因进行验证。结果:PCAF在3T3-L1细胞分化过程中表达升高;PCAF表达下调会抑制脂肪细胞的分化;PCAF可以在细胞分化不同时间点诱导PDPK1和FOXO1的表达,并间接影响了FOXO1磷酸化。结论:组蛋白乙酰转移酶PCAF通过胰岛素通路(PI3K/PDPK1/AKT/FOXO1)参与对脂肪细胞分化的转录调控。 展开更多

关键词 pCAF 3T3-L1细胞 FOXO1 转录调控

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HOXA10直接调控人子宫内膜间质细胞中p/CAF启动子的活性

3

作者 赵静 华美娟 +3 位作者 陈林君 颜桂军 李朝军 孙海翔 《生物技术通讯》 CAS 2009年第5期612-615,共4页

目的:筛选与鉴定转录因子同源框蛋白(HOX)A10下游靶基因。方法:用Ad-HOXA10重组腺病毒感染人子宫内膜间质细胞,通过染色体免疫共沉淀(ChIP)方法,筛选HOXA10的下游靶基因;采用萤光素酶报告基因实验结合腺病毒介导的HOXA10过表达和小干扰... 目的:筛选与鉴定转录因子同源框蛋白(HOX)A10下游靶基因。方法:用Ad-HOXA10重组腺病毒感染人子宫内膜间质细胞,通过染色体免疫共沉淀(ChIP)方法,筛选HOXA10的下游靶基因;采用萤光素酶报告基因实验结合腺病毒介导的HOXA10过表达和小干扰RNA介导的基因沉默实验,分析HOXA10对下游靶基因的转录调控作用。结果:ChIP-PCR筛选并鉴定p/CAF(p300/CBP相关因子)为HOXA10直接作用的靶基因;过表达HOXA10抑制p/CAF启动子活性达60%;基因沉默内源性HOXA10的表达可以激活p/CAF启动子活性超过2倍以上。结论:p/CAF是HOXA10新的靶基因,HOXA10可能通过调节p/CAF的表达来调控子宫内膜的发育。 展开更多

关键词 同源框蛋白A10 染色体免疫共沉淀 p300/cbp相关因子 人子宫内膜间质细胞

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P300/CBP相关因子(PCAF)表达水平对人子宫内膜间质细胞增殖的影响 被引量：1

4

作者 朱丽华 刘红玉 +4 位作者 沈晓月 甄鑫 王玢 颜桂军 孙海翔 《生殖与避孕》 CAS CSCD 2013年第3期159-166,共8页

目的:观察P300/CBP相关因子(P300/CBP associated factor,PCAF)对人子宫内膜间质细胞增殖的调控作用。方法:通过Western blotting、实时定量PCR及Cell Counting Kit-8(CCK-8)细胞增殖实验,观察分析Ad-FLAG-PCAF重组腺病毒介导的PCAF过... 目的:观察P300/CBP相关因子(P300/CBP associated factor,PCAF)对人子宫内膜间质细胞增殖的调控作用。方法:通过Western blotting、实时定量PCR及Cell Counting Kit-8(CCK-8)细胞增殖实验,观察分析Ad-FLAG-PCAF重组腺病毒介导的PCAF过表达及PCAF-siRNA介导的PCAF低表达对体外培养的人子宫内膜间质细胞增殖的影响。结果:获得滴度为8×1010ifu/ml的重组Ad-FLAG-PCAF腺病毒,转染体外培养的人子宫内膜间质细胞后,可有效介导细胞内FLAG-PCAF融合蛋白的高表达;而转染PCAF特异的siRNA后,可有效抑制人子宫内膜间质细胞中PCAF的表达。PCAF过表达的人子宫内膜间质细胞中,其细胞周期标志蛋白cyclinD1和cyclinD3的表达水平显著降低(P<0.05),而PCAF低表达的人子宫内膜间质细胞中,其cyclinD1和cyclinD3的表达水平显著升高(P<0.05);此外,CCK-8实验结果显示,PCAF过表达能显著抑制由雌、孕激素共同刺激所引起的人子宫内膜间质细胞的增殖,而基因沉默人子宫内膜间质细胞中内源性PCAF的表达后,间质细胞的增殖增加>20%(P<0.05)。结论:PCAF可能通过蛋白乙酰化修饰作用,参与调控人子宫内膜间质细胞的增殖过程。 展开更多

关键词 p300 cbp相关因子(pCAF) 人子宫内膜间质细胞 增殖

原文传递

沉默PCAF基因抑制人肾上腺皮质癌裸鼠移植瘤生长及血管生成的实验研究

5

作者 陈帅 胡卫列 +2 位作者 欧阳可育 聂奇伟 王尉 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期454-458,共5页

目的探讨靶向沉默肾上腺皮质癌SW13细胞PCAF基因表达对裸鼠移植瘤生长以及血管生成的抑制作用及其机制。方法 p Lenti6.3-Mi RNA-PCAF重组慢病毒及p Lenti6.3-Mi RNA-NC重组慢病毒分别感染SW13细胞,将感染后的两组细胞及未处理的SW13细... 目的探讨靶向沉默肾上腺皮质癌SW13细胞PCAF基因表达对裸鼠移植瘤生长以及血管生成的抑制作用及其机制。方法 p Lenti6.3-Mi RNA-PCAF重组慢病毒及p Lenti6.3-Mi RNA-NC重组慢病毒分别感染SW13细胞,将感染后的两组细胞及未处理的SW13细胞分别接种于15只裸鼠腋下,构建裸鼠移植瘤模型,分为实验组、阴性对照组、空白对照组,并观察各组肿瘤生长情况。Western blot、荧光定量PCR检测移植瘤组织PCAF蛋白、m RNA表达水平,HE染色法观察各组移植瘤组织形态学变化,免疫组织化学法检测VEGF表达及微血管密度。结果实验组小鼠的肿瘤体积较阴性对照组和空白对照组显著缩小,肿瘤抑制率分别为49.2%和52.9%;PCAF蛋白相对表达水平较阴性对照组下降58.4%,m RNA相对表达水平较阴性对照组下降74.3%;实验组与阴性对照组和空白对照组相比,瘤内VEGF蛋白表达明显下调;实验组微血管密度(19.4±4.2)与阴性对照组(42.7±6.5)和空白对照组(51.3±8.6)相比明显下降。结论慢病毒介导的p Lenti6.3-Mi RNAPCAF能有效抑制肾上腺皮质癌细胞裸鼠移植瘤的生长及血管生成。 展开更多

关键词 p300/cbp相关因子(pCAF) 肾上腺皮质癌 血管生成 血管内皮生长因子 移植瘤

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组蛋白乙酰转移酶PCAF通过与PML蛋白的作用而定位于细胞核ND10结构

6

作者 李平法 刘辉 詹合琴 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期21-27,共7页

PCAF(P300/CBP associated factor,P300/CBP相关因子)是一种重要的组蛋白乙酰转移酶,主要通过使核小体组蛋白发生乙酰化而参与基因转录的调控。P300/CBP是一种能够与PCAF相互作用的宿主细胞蛋白,定位于细胞核ND10结构(nuclear dot10)。N... PCAF(P300/CBP associated factor,P300/CBP相关因子)是一种重要的组蛋白乙酰转移酶,主要通过使核小体组蛋白发生乙酰化而参与基因转录的调控。P300/CBP是一种能够与PCAF相互作用的宿主细胞蛋白,定位于细胞核ND10结构(nuclear dot10)。ND10是由70余种蛋白质分子组成的、以分散的斑点或团块样方式存在于细胞核内的大分子复合物,与基因转录调控过程有着密切关系。早幼粒细胞白血病蛋白(promyelocytic leukemia protein,PML)是ND10的主要组成成分,对于维持ND10的正常结构与功能至关重要。在成功构建pGBK-PML3、pGAD-PCAF、pGEX-PCAF、pFlag-PCAF和pcDNA-PML3重组质粒的基础上,用酵母双杂交证明PCAF与PML3之间存在着相互作用;用GST-pull down技术证明GST-PCAF能够将PML3蛋白捕获并沉降下来,表明在体外条件下两者之间存在直接的相互作用;用免疫共沉淀和荧光共定位证明在体内PCAF能够与PML发生直接的相互作用而定位于ND10。这些结果为进一步深入研究PCAF的生物学功能和作用模式奠定了基础。 展开更多

关键词 p300/cbp相关因子(pCAF) 早幼粒细胞白血病蛋白(pML) 核斑10(ND10)

原文传递

p300/CBP及其相关因子PCAF与转录调控 被引量：6

7

作者 林娟玉 黄翔 韩爱东 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期877-882,共6页

p300/CBP及其相关因子PCAF具有乙酰转移酶活性,能通过乙酰化组蛋白和非组蛋白的方式参与基因的转录调控.同时,它们也能介导多种转录因子.与大多数典型的转录辅激活子相同,它们能在转录因子和基本转录复合物之间起到桥梁作用.p300/CBP与... p300/CBP及其相关因子PCAF具有乙酰转移酶活性,能通过乙酰化组蛋白和非组蛋白的方式参与基因的转录调控.同时,它们也能介导多种转录因子.与大多数典型的转录辅激活子相同,它们能在转录因子和基本转录复合物之间起到桥梁作用.p300/CBP与细胞周期调控、细胞凋亡以及癌症的发生等过程之间有着直接的联系.本文概括介绍了p300/CBP与PCAF的基本特性,并简要介绍它们与其它蛋白之间的相互作用,特别是E1A的最新研究进展. 展开更多

关键词 p300/cbp pCAF 组蛋白修饰 组蛋白乙酰化酶 转录调控

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亚溶解型C5b-9刺激GMC诱导KLF4与PCAF结合及结合部位的鉴定

8

作者 虞天一 何风霞 +8 位作者 赵晨卉 余明皓 赵聃 刘玉 宫雅娟 夏露 邱文 张婧 王迎伟 《东南大学学报（医学版）》 CAS 2018年第6期969-973,共5页

目的:鉴定亚溶解型C5b-9刺激大鼠肾小球系膜细胞(GMC)诱导Kruppel样因子4(KLF4)与P300/CBP相关因子(PCAF)相互结合以及结合部位。方法:以亚溶解型C5b-9刺激GMC,应用免疫沉淀(IP)和免疫印迹(IB)法检测KLF4与PCAF相互结合情况。另构建KLF4... 目的:鉴定亚溶解型C5b-9刺激大鼠肾小球系膜细胞(GMC)诱导Kruppel样因子4(KLF4)与P300/CBP相关因子(PCAF)相互结合以及结合部位。方法:以亚溶解型C5b-9刺激GMC,应用免疫沉淀(IP)和免疫印迹(IB)法检测KLF4与PCAF相互结合情况。另构建KLF4、PCAF过表达和KLF4、PCAF不同结构域的质粒,将质粒转染GMC,应用IP和IB鉴定KLF4与PCAF的结合部位。结果与结论:亚溶解型C5b-9刺激GMC后能够诱导KLF4与PCAF相互结合,KLF4结合于PCAF转录结合结构域,而PCAF则结合在KLF4的转录激活结构域。 展开更多

关键词 亚溶解型C5b-9 大鼠肾小球系膜细胞 Kruppel样因子4 p300/cbp相关因子 结合部位

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P300/CBP相关因子在肝细胞癌中的表达及临床意义

9

作者 靳文剑 张焜和 +1 位作者 陈火国 罗庆丰 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1348-1351,共4页

目的:检测P300/CBP相关因子(P300/CBP-associated factor,PCAF)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达情况,分析其与肝癌临床病理特征之间的相关性。方法:收集40例HCC及对应癌旁组织,运用RT-PCR、免疫组化技术检测PCAF在肝... 目的:检测P300/CBP相关因子(P300/CBP-associated factor,PCAF)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达情况,分析其与肝癌临床病理特征之间的相关性。方法:收集40例HCC及对应癌旁组织,运用RT-PCR、免疫组化技术检测PCAF在肝癌及对应癌旁组织中的表达情况,研究PCAF蛋白表达与肝癌临床病理特征之间的相关性;应用Western blot技术检测人正常肝细胞LO2和肝癌细胞HepG2和SMMC-7721中PCAF蛋白的表达。结果:PCAF mRNA及蛋白在肝癌组织中的表达低于对应的癌旁组织(P=0.000);PCAF蛋白低表达与肿瘤肝内转移(r s=0.413,P=0.037)、门脉侵犯(r s=0.589,P=0.011)和高TNM分期(r s=0.513,P=0.029)相关;人肝癌细胞株HepG2和SMMC-7721中PCAF蛋白的表达较正常肝细胞株LO2降低(P=0.000)。结论:肝癌细胞系及肝癌组织中PCAF表达下调,且PCAF的表达下调与肝癌的恶性病理特征相关。 展开更多

关键词 p300 cbp相关因子 肝细胞癌 组蛋白乙酰化 临床意义

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p300／CBP相关因子的生物特性及其与疾病的关系

10

作者 谢靖芸(综述) 田杰 朱静(审校) 《国际儿科学杂志》 2011年第2期139-141,共3页

p300／CBP相关因子（p300／CBP—associated factor，PCAF）是真核细胞内一种重要的组蛋白乙酰转移酶。PCAF除了能乙酰化组蛋白，还能乙酰化非组蛋白。PCAF参与细胞内多种生物学过程，并参与病毒与细胞的相互作用。PCAF失衡可导致多种... p300／CBP相关因子（p300／CBP—associated factor，PCAF）是真核细胞内一种重要的组蛋白乙酰转移酶。PCAF除了能乙酰化组蛋白，还能乙酰化非组蛋白。PCAF参与细胞内多种生物学过程，并参与病毒与细胞的相互作用。PCAF失衡可导致多种器官的发育异常，且与某些肿瘤的发生发展相关。 展开更多

关键词 p300/cbp相关因子 组蛋白乙酰化酶 组蛋白修饰

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组蛋白乙酰转移酶PCAF在原核细胞的表达及其生物学活性检测

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作者 李卫中 张丹桂 +4 位作者 曾俊 王革非 陈小璇 陈幼莹 李康生 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期12-16,共5页

p300/CBP相关因子(p300/CBP-associated factor,PCAF)是真核细胞内一种重要的组蛋白乙酰转移酶,它主要通过催化核心组蛋白的乙酰化,促进特定基因的转录,参与细胞内多种生物学过程。国内目前尚没有制备出具有生物学活性的组蛋白乙酰转移... p300/CBP相关因子(p300/CBP-associated factor,PCAF)是真核细胞内一种重要的组蛋白乙酰转移酶,它主要通过催化核心组蛋白的乙酰化,促进特定基因的转录,参与细胞内多种生物学过程。国内目前尚没有制备出具有生物学活性的组蛋白乙酰转移酶PCAF的报道。为此,PCAF全长cDNA被克隆入原核表达载体pGEX-5X-1,通过对诱导条件进行优化,实现了PCAF在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中的高效可溶性表达并进行了亲和纯化。利用体外乙酰转移酶活性分析实验,检测到所表达的GST-PCAF融合蛋白能够使组蛋白H3发生乙酰化。这种具有生物学活性的PCAF蛋白的成功制备为进一步研究PCAF的转录调控功能以及它与其它蛋白间的相互作用奠定了基础。 展开更多

关键词 p300/cbp相关因子 原核表达 乙酰转移酶活性分析

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