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变应性鼻炎大鼠模型建造 被引量:24
1
作者 刘建国 杨政 刘月辉 《江西医学院学报》 CAS 2008年第5期33-34,37,F0002,共4页
目的建立稳定的实验性变应性鼻炎(AR)SD大鼠模型。方法将SD大鼠雌雄各60只,随机分为实验组(n=60)和对照组(n=60)。实验组经腹腔隔日1次注射卵清蛋白(OVA)变应原7次后,鼻腔滴入OVA鼻内激发;对照组以生理盐水替代OVA。结果实验组SD大鼠均... 目的建立稳定的实验性变应性鼻炎(AR)SD大鼠模型。方法将SD大鼠雌雄各60只,随机分为实验组(n=60)和对照组(n=60)。实验组经腹腔隔日1次注射卵清蛋白(OVA)变应原7次后,鼻腔滴入OVA鼻内激发;对照组以生理盐水替代OVA。结果实验组SD大鼠均出现鼻痒、喷嚏、流清涕等变应性鼻炎的临床特征(评分>5分),鼻黏膜见大量的嗜酸性粒细胞、淋巴细胞浸润,粘膜水肿增厚、腺体增生、分泌旺盛,鼻黏膜表面纤毛破坏等组织形态学变化。对照组SD大鼠仅轻度抓鼻,且喷嚏少(评分<5分),鼻黏膜组织形态学均无实验组上述变化。结论本实验成功建立OVA变应原致敏的变应性鼻炎鼠类模型,具有操作简单、重复性好的优点,为今后变应性鼻炎的病变研究提供了有效的方法及组织形态学依据。 展开更多
关键词 变应性鼻炎 卵清蛋白 嗜酸性粒细胞 动物 实验 大鼠
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化痰活血方对哮喘小鼠IL-17A和IL-13的影响 被引量:14
2
作者 何丽霞 吴赛春 +6 位作者 李秀存 凃苑青 曾静 李满萍 杨丽 童晓云 黄丰 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期490-494,共5页
目的研究化痰活血方(川芎、当归、白芍等)对哮喘小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素IL-17A、IL-13和肺组织血管内皮生长因子-2(VEGFR2)表达的影响。方法小鼠用卵清蛋白(OVA)腹腔注射致敏,并予2%OVA雾化吸入激发的方式建立哮喘小鼠... 目的研究化痰活血方(川芎、当归、白芍等)对哮喘小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素IL-17A、IL-13和肺组织血管内皮生长因子-2(VEGFR2)表达的影响。方法小鼠用卵清蛋白(OVA)腹腔注射致敏,并予2%OVA雾化吸入激发的方式建立哮喘小鼠模型,HE染色观察肺组织病理炎症,PAS染色观察肺组织杯状细胞增生情况,酶联免疫法(ELISA)测定BALF中细胞因子IL-17A和IL-13的量,免疫印迹法(Western blot)测定蛋白VEGFR2在肺组织中的表达。结果哮喘组肺部的炎症评分、杯状细胞增生、BALF中IL-17A和IL-13与蛋白VEGFR2的量均明显高于正常组(P<0.05,P<0.01)。与哮喘组比较,化痰活血方组小鼠肺组织病理炎症和杯状细胞增生均减轻,BALF中IL-17A和IL-13的量降低(P<0.05,P<0.01),而肺组织中蛋白VEGFR2的表达无明显变化(P>0.05)。结论化痰活血方可能通过调节IL-17A和IL-13途径来缓解哮喘小鼠症状。 展开更多
关键词 化痰活血方 哮喘 IL-17A IL-13 支气管肺泡灌洗液(BALF) 卵清蛋白(ova)
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实验性变应性鼻炎鼠类模型的建立 被引量:10
3
作者 张华 赵娟 +1 位作者 雍军 孙捷 《新疆医科大学学报》 CAS 2006年第1期56-57,共2页
目的:建立稳定的实验性变应性鼻炎(AR)鼠类模型。方法:将NIH小鼠和SD大鼠雌雄各60只,随机分为实验组(n=60)和对照组(n=60)。实验组经腹腔隔日1次注射卵清蛋白(OVA)变应原7次后,鼻腔滴入 OVA鼻内激发;对照组以生理盐水替代OVA。结果:实... 目的:建立稳定的实验性变应性鼻炎(AR)鼠类模型。方法:将NIH小鼠和SD大鼠雌雄各60只,随机分为实验组(n=60)和对照组(n=60)。实验组经腹腔隔日1次注射卵清蛋白(OVA)变应原7次后,鼻腔滴入 OVA鼻内激发;对照组以生理盐水替代OVA。结果:实验组均出现鼻痒、喷嚏、流清涕等变应性鼻炎的临床特征 (评分>5分),鼻粘膜和肺组织见大量的嗜酸性粒细胞浸润,粘膜水肿、腺体增生且鼻粘膜表面纤毛破坏等组织形态学变化。对照组均无上述变化。结论:本实验成功建立OVA变应原致敏的变应性鼻炎鼠类模型,具有操作简单、重复性好的优点,为今后变应性鼻炎的诊断、治疗及研究工作提供了有效的方法及组织形态学依据。 展开更多
关键词 鼻炎 变应性 卵清蛋白 动物模型
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翘芩清肺剂对哮喘大鼠Th1/Th2细胞因子失衡的影响 被引量:7
4
作者 韩超 齐春丽 +1 位作者 潘竞锵 吕俊华 《中国现代应用药学》 CAS CSCD 2013年第11期1178-1182,共5页
目的观察翘芩清肺剂对哮喘模型大鼠Th1/Th2失衡的免疫调节作用及机制。方法以10%卵蛋白(OVA)在实验第1天、第8天对大鼠进行腹腔注射。第15天后用1%OVA雾化吸入,每天1次,连续2周;同时,分别用生理盐水、地塞米松、氨茶碱及翘芩清肺剂干预... 目的观察翘芩清肺剂对哮喘模型大鼠Th1/Th2失衡的免疫调节作用及机制。方法以10%卵蛋白(OVA)在实验第1天、第8天对大鼠进行腹腔注射。第15天后用1%OVA雾化吸入,每天1次,连续2周;同时,分别用生理盐水、地塞米松、氨茶碱及翘芩清肺剂干预致哮喘模型大鼠,每天1次,连续4周,观察各组大鼠哮喘潜伏期、喘息程度、肺组织、支气管病理学变化;测定肺泡灌洗液(BALF)中IL-4、IL-5、IFN-γ水平变化,并与阳性药地塞米松及氨茶碱组对照。结果翘芩清肺剂能有效延长OVA致哮喘大鼠模型的潜伏期、减轻喘息程度、改善升高的IL-4水平,降低病鼠的IL-5、INF-γ水平及IL-4/IFN-γ的比值,结果均有显著差异(P<0.05或P<0.01)。病理组织学检查模型组大鼠支气管黏膜上皮细胞及杯状细胞增生,肺泡内有分泌物及炎性细胞浸润,管腔狭窄;各用药物组病理改变均显著减轻。结论翘芩清肺剂可能通过调节哮喘时失衡的Th1/Th2水平,有效改善哮喘状态,减轻哮喘发作。 展开更多
关键词 翘芩清肺剂 卵蛋白 哮喘 IL-4 IL-5 INF-Γ
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转化生长因子-β2在小鼠过敏性气道炎症及重塑中的作用与干预潜能
5
作者 严皎 白红妹 +3 位作者 杨旭 孙文佳 龙琼 马雁冰 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2024年第8期938-944,951,共8页
目的探讨转化生长因子-β2(transforming growth factor-β2,TGF-β2)在过敏原引起的哮喘气道炎症和重塑中的作用及其靶向干预的治疗潜能。方法以呈现TGF-β2肽表位的乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg)/TGF-β2病毒样颗粒(virus-like particl... 目的探讨转化生长因子-β2(transforming growth factor-β2,TGF-β2)在过敏原引起的哮喘气道炎症和重塑中的作用及其靶向干预的治疗潜能。方法以呈现TGF-β2肽表位的乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg)/TGF-β2病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs)免疫6只雌性BALB/c小鼠,ELISA法检测小鼠血清中TGF-β2特异的IgG应答,细胞试验检测抗体对TGF-β2活性的中和能力。卵清白蛋白(ovalbumin,OVA)短期刺激诱导急性气道过敏性炎症,细胞试验检测小鼠支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中TGF-β活性水平;ELISA法检测小鼠血清中OVA特异的IgE水平;光学显微镜下进行BALF中炎性细胞总数及分型计数,并用ELISA法检测BALF中细胞因子水平。经OVA慢性刺激诱导气道纤维化,肺组织切片Masson’s trichrome检测胶原积累,并用Sircol胶原检测试剂盒进行可溶性胶原含量定量分析。结果VLPs免疫诱导了TGF-β2特异性IgG应答,抗血清可有效中和TGF-β2活性。小鼠急性气道过敏性炎症模型中,VLPs免疫下调了气道活性TGF-β水平,显著促进了血清中OVA特异性IgE产生,对气道以嗜酸性粒细胞为主的炎性细胞浸润显示抑制作用,显著促进了Th2炎性细胞因子在气道中的积累。慢性肺纤维化模型中,VLPs免疫显著下调了肺组织胶原沉积及可溶性胶原水平。结论HBcAg/TGF-β2 VLPs免疫是调控TGF-β2作用的有效手段,TGF-β2在过敏原诱导的炎症应答中总体显示抑制作用,但在纤维化中发挥促进作用。 展开更多
关键词 转化生长因子-Β2 病毒样颗粒 卵清白蛋白 气道炎症 纤维化 哮喘
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过敏原卵清白蛋白诱导慢性哮喘小鼠模型的建立及其免疫应答特征的动态分析
6
作者 严皎 白红妹 +3 位作者 杨旭 孙文佳 龙琼 马雁冰 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2024年第4期420-425,432,共7页
目的 建立过敏原卵清白蛋白(ovalbumin,OVA)诱导的慢性哮喘小鼠模型,并对该模型免疫应答特征进行动态分析。方法 以OVA经腹腔致敏22只雌性BALB/c小鼠,并经鼻腔反复滴注刺激气道反应,于不同时间点取样进行分析。收集小鼠支气管肺泡灌洗液... 目的 建立过敏原卵清白蛋白(ovalbumin,OVA)诱导的慢性哮喘小鼠模型,并对该模型免疫应答特征进行动态分析。方法 以OVA经腹腔致敏22只雌性BALB/c小鼠,并经鼻腔反复滴注刺激气道反应,于不同时间点取样进行分析。收集小鼠支气管肺泡灌洗液,进行炎性细胞计数;取灌洗液离心上清,ELISA法检测多种相关细胞因子水平。取小鼠肺组织,制备切片,苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色法检测肺组织炎性细胞浸润情况,高碘酸-希夫(periodic acid-Schiff,PAS)染色法检测气道上皮杯状细胞增生情况;马松三色(Masson′s Trichrome)及Sircol染色法检测肺组织胶原积累情况。采集小鼠静脉血,分离血清,ELISA法检测血清中OVA特异的IgE、IgG1、IgG2a水平。应用FlexiVent小动物肺功能仪的强制低频振荡模式分析小鼠气道反应性。结果 OVA的反复刺激成功诱导了小鼠气道及肺组织炎性细胞应答、炎性细胞因子积累、气道杯状细胞增生、肺组织纤维化、过敏原特异IgE抗体应答、气道高反应性等哮喘典型指标,且呈现不同应答特征。随着OVA反复刺激,炎性细胞应答、杯状细胞增生有所下降,但胶原沉积增加,而气道的高反应性在末次刺激4周后仍存在。转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)伴随炎性应答的持续呈高表达,TGF-β2及白介素-33(interleukin-33,IL-33)在末次刺激4周后才呈高水平表达。结论 本研究采用OVA持续刺激诱导建立了慢性哮喘小鼠模型,并展现了该模型的免疫应答特征,为慢性哮喘机制的研究、治疗靶点及药物研发奠定了基础。 展开更多
关键词 哮喘 卵清白蛋白 过敏原 免疫应答
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不饱和脂肪酸对卵清蛋白糖基化反应的影响 被引量:4
7
作者 赵鑫 王羽璇 +1 位作者 叶博 刘玲 《中国粮油学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2021年第2期74-80,共7页
糖基化反应是高营养食品常见的一类反应,食品中的脂类成分对糖基化反应有很大影响。本研究以葡萄糖和卵清蛋白(OVA)建立糖基化对照体系,与含有不饱和脂肪酸(UFA)的模型组进行对比,探究脂肪酸氧化对于糖基化反应产物二羰基化合物、晚期... 糖基化反应是高营养食品常见的一类反应,食品中的脂类成分对糖基化反应有很大影响。本研究以葡萄糖和卵清蛋白(OVA)建立糖基化对照体系,与含有不饱和脂肪酸(UFA)的模型组进行对比,探究脂肪酸氧化对于糖基化反应产物二羰基化合物、晚期糖基化终产物(AGEs)及糖基化蛋白结构的影响。结果表明UFA通过不同方式促进二羰基化合物的形成,并通过改变OVA高级结构显著促进糖基化反应。脂肪酸的不饱和度与二羰基化合物含量、TBA值、POV值均成正比,与羧甲基赖氨酸和吡咯素含量成反比。通过SEM结构模型的路径分析可知,脂质氧化次级产物对二羰基化合物的影响力较强(路径系数0.814),对两种AGEs的影响力相对较弱(0.246);脂质氧化初级产物对两种AGEs的影响力强于二羰基化合物。 展开更多
关键词 晚期糖基化终产物 美拉德反应 二羰基化合物 卵清蛋白 脂质氧化
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Oral administration of Bacillus coagulans TQ-35 alleviates allergic responses in OVA-sensitive BALB/c mice
8
作者 Yifan Wang Shanjun Chen +4 位作者 Chong Wang Yi Zhang Hongliang Zeng Linglin Fu Yanbo Wang 《Food Science and Human Wellness》 SCIE CSCD 2024年第3期1246-1257,共12页
Bacillus coagulans has been extensively studied so far,but there has been a lack of research on its usage in allergy.In this study,we designed to assess the effect of different concentrations of B.coagulans on food al... Bacillus coagulans has been extensively studied so far,but there has been a lack of research on its usage in allergy.In this study,we designed to assess the effect of different concentrations of B.coagulans on food allergy in a BALB/c mouse model of ovalbumin(OVA)-induced food allergy and its effect on gut microbes.The assessment of symptoms,specific immunoglobulin E(IgE),T-cell differentiation,and related gene expression levels in sensitized mice by assay indicated that high doses of oral B.coagulans could alleviate allergic symptoms.Treatment with B.coagulans,in the high-dose group,significantly reduced IgE and IgG1 levels and modulated the balance of T helper type 1 cell(Th1)and Th2 and the expression of relevant genes in the spleen.16S rRNA analysis showed that probiotics improved the structure of the microbiota,in particular by boosting the percentage of Clostridia,Bacteroides vulgatus and Enterococcus faecium,and by increasing the abundance of microbial species,thereby modulating the immune system.Therefore,this study can provide insights into the practical application of B.coagulans doses to alleviate OVA allergy. 展开更多
关键词 Bacillus coagulans TQ-35 Food allergy ovalbumin(ova) Gut microbiota
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吸入水雾剂的过敏性试验方法研究 被引量:2
9
作者 翁琳琳 宁炼 +3 位作者 盛云华 谷舒怡 唐黎明 陈桂良 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期795-799,共5页
目的:建立与吸入水雾剂临床给药方式相似,可用于评价吸入水雾剂过敏性的实验方法。方法:Hartley豚鼠24只,雌雄各半,随机分为阴性对照组及3个给药组。给药组于1、3、5 d按每只2 mL吸入浓度为1%的雾化卵白蛋白(ovalbumin,OVA)致敏,阴性对... 目的:建立与吸入水雾剂临床给药方式相似,可用于评价吸入水雾剂过敏性的实验方法。方法:Hartley豚鼠24只,雌雄各半,随机分为阴性对照组及3个给药组。给药组于1、3、5 d按每只2 mL吸入浓度为1%的雾化卵白蛋白(ovalbumin,OVA)致敏,阴性对照组以氯化钠注射液(NS)同法处理。于首次致敏后14 d将给药组分别以0.5%、1%或2%OVA激发,阴性对照组以NS代替OVA同法处理。激发后观察豚鼠出现的过敏症状,取血检测血液中嗜酸性粒细胞(eosnophils,EOS)比例。取肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)检测组胺(histamine,HIS)水平。解剖豚鼠,大体观察后取鼻粘膜、气管和肺进行病理学检查。结果:给药组豚鼠出现不同程度过敏症状及相应病理学改变,过敏反应严重程度、EOS比例及HIS水平均与激发液OVA浓度相关。结论:豚鼠吸入致敏与激发的过敏性实验方法能反映典型过敏症状,方法稳定、简易,能较好地应用于吸入水雾剂的过敏性评价。 展开更多
关键词 卵白蛋白(ova) 药物安全性 新型制剂 吸入水雾剂 过敏性评价 病理学检查方法
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小鼠特应性皮炎建模方法的改进 被引量:2
10
作者 纪莲 马铁 +1 位作者 狄正鸿 刘冬妍 《实验动物与比较医学》 CAS 2018年第4期267-271,共5页
目的用卵清蛋白(OVA)致敏小鼠特应性皮炎(atopic dermatitis,AD),建立一种更为简便、稳定的小鼠AD模型。方法采用6周龄BALB/c雌性小鼠,第1日腹腔注射200μg/m L OVA溶液0.5 m L系统致敏,第6日皮下注射100μg/m L OVA溶液0.5 m L再次致... 目的用卵清蛋白(OVA)致敏小鼠特应性皮炎(atopic dermatitis,AD),建立一种更为简便、稳定的小鼠AD模型。方法采用6周龄BALB/c雌性小鼠,第1日腹腔注射200μg/m L OVA溶液0.5 m L系统致敏,第6日皮下注射100μg/m L OVA溶液0.5 m L再次致敏。并于第18、39日背部局部贴含50μL,1 000μg/m LOVA的1.5 cm2的无菌纱布,每日更换,分2次局部致敏,各持续1周。第46日,观察小鼠皮肤及其病理学改变,酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清中总Ig E水平,统计成模率及动物死亡情况。结果 AD模型小鼠皮肤肉眼可见潮红、脱屑、偶见结痂等皮炎改变;病理可见表皮细胞增厚,过度角化,真皮内淋巴细胞等浸润。模型组小鼠血清总Ig E水平为(6 296.17±1 021.28)ng/L,显著高于空白对照组的(1 280.97±501.24)ng/L和生理盐水组的(1 327.57±629.71)ng/L(均P<0.01)。成模率为94%,死亡率6%。结论该方法可以成功建立小鼠AD模型,造模方法简单,成模率高。 展开更多
关键词 小鼠模型 特异性皮炎(AD) 卵清蛋白(ova)
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磺胺二甲嘧啶人工抗原的合成与鉴定 被引量:3
11
作者 张明洲 胡华军 +3 位作者 华加宁 方结红 陈宗伦 俞晓平 《中国计量学院学报》 2009年第4期297-301,共5页
采用重氮化法将磺胺二甲嘧啶(SM2)与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)交联合成人工抗原SM2-BSA与SM2-OVA,并通过紫外扫描、SDS-PAGE电泳、凝胶层析和红外光谱等方法扫描进一步检测合成效果.紫外扫描检测结果显示,SM2与BSA、OVA偶联成功... 采用重氮化法将磺胺二甲嘧啶(SM2)与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)交联合成人工抗原SM2-BSA与SM2-OVA,并通过紫外扫描、SDS-PAGE电泳、凝胶层析和红外光谱等方法扫描进一步检测合成效果.紫外扫描检测结果显示,SM2与BSA、OVA偶联成功,SM2-BSA与SM2-OVA的特征波长分别为2762、77 nm;经计算SM2-BSA与SM2-OVA的分子结合比例分别为5.3∶1和18.4∶1;SDS-PAGE电泳迁移率、凝胶层析出峰时间和红外光谱曲线特征均显示SM2与BSA、OVA偶联成功. 展开更多
关键词 磺胺二甲嘧啶 人工抗原 重氮化 牛血清白蛋白 卵清白蛋白
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吗啡与蛋白质结合物的合成 被引量:1
12
作者 刘晓云 何小维 王继华 《中国药物依赖性杂志》 CAS CSCD 2005年第5期343-346,共4页
目的:利用蛋白质连接法合成吗啡人工全抗原。方法:混合酸酐法和碳二亚胺连接法,用BSA及OVA蛋白做载体蛋白,利用紫外光谱扫描及蛋白质电泳两种方法判断连接是否成功。结果:连接成功,连接产物分子量增加,且每分子牛血清白蛋白连接的吗啡... 目的:利用蛋白质连接法合成吗啡人工全抗原。方法:混合酸酐法和碳二亚胺连接法,用BSA及OVA蛋白做载体蛋白,利用紫外光谱扫描及蛋白质电泳两种方法判断连接是否成功。结果:连接成功,连接产物分子量增加,且每分子牛血清白蛋白连接的吗啡分子数为40-48个,每分子卵清白蛋白(OVA)连接的吗啡分子数为13-16个。结论:此两种方法能成功合成吗啡人工抗原,且该抗原可作为吗啡免疫用抗原以及吗啡免疫检测方法建立所用包被抗原。 展开更多
关键词 吗啡 免疫检测 混合酸酐 牛血清白蛋白 卵清白蛋白 1-乙烷基-3-(3-二甲基胺丙基)碳二亚胺(EDC)
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氯胺酮预处理对卵蛋白激活的致敏大鼠肺泡巨噬细胞丙二醛及超氧化物歧化酶的影响 被引量:3
13
作者 闫芳 谢啟发 +4 位作者 马炳原 刘顺 朱蓉蓉 韩小飞 张小宝 《实用药物与临床》 CAS 2017年第9期987-989,共3页
目的研究不同剂量氯胺酮对卵蛋白(OVA)刺激致敏的大鼠肺泡巨噬细胞丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)的影响。方法致敏的大鼠肺泡巨噬细胞分离培养,氯胺酮(10、100、1 000μmol/L)预处理后给予OVA刺激,培养72 h后检测细胞培养上清液中MD... 目的研究不同剂量氯胺酮对卵蛋白(OVA)刺激致敏的大鼠肺泡巨噬细胞丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)的影响。方法致敏的大鼠肺泡巨噬细胞分离培养,氯胺酮(10、100、1 000μmol/L)预处理后给予OVA刺激,培养72 h后检测细胞培养上清液中MDA及SOD水平。结果与对照组比较,OVA组培养上清液中MDA水平明显增加,伴有SOD水平下降,而较高浓度氯胺酮预处理(100、1 000μmol/L)后可起到一定的抑制作用。结论氯胺酮预处理对OVA引起的肺泡巨噬细胞氧化应激损伤具有一定的保护作用。 展开更多
关键词 氯胺酮 卵蛋白 肺泡巨噬细胞 丙二醛 超氧化物歧化酶
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两个豚鼠品系速发型哮喘模型中组胺受体的表达及对肺功能的影响 被引量:1
14
作者 卫振 娄绘芳 +4 位作者 吴凯 陈雁虹 谢敏 刘迪文 谢强敏 《实验动物与比较医学》 CAS 2016年第2期101-106,共6页
目的建立Zmu-I:DHP和DHP两个豚鼠品系的速发型哮喘模型,探讨组胺受体I(HIR)和组胺受体2(H2R)在肺组织中的表达及对肺功能的影响。方法两个豚鼠品系分别设置模型组(MW,MP)和对照组(BW,BP),模型组采用卵清白蛋白(OVA)致敏... 目的建立Zmu-I:DHP和DHP两个豚鼠品系的速发型哮喘模型,探讨组胺受体I(HIR)和组胺受体2(H2R)在肺组织中的表达及对肺功能的影响。方法两个豚鼠品系分别设置模型组(MW,MP)和对照组(BW,BP),模型组采用卵清白蛋白(OVA)致敏,对照组使用生理盐水。第1,14日致敏豚鼠,第28日用OVA雾化激发,记录0~8min内动态肺顺应性(Cdyn)和气道阻力(Raw)变化。取肺组织样品,进行H1R和H2RmRNA表达检测和免疫组织化学分析。结果OVA雾化激发后,Zmu-1:DHP和DHP品系模型组(MW,MP)Cdyn下降,Raw上升,变化幅度先大后小,约3min达到最大,而两品系对照组(BW,BP)变化较小。其中,MW组反应较MP组更敏感。定量PCR分析,MW模型组的H1R,H2RmRNA表达量高于对照组BW(P〈0.05,P〈0.05),肺组织切片HE染色,模型组(MW,MP)肺泡间可见明显的炎症细胞浸润,而对照组(Bw,BP)未见。免疫组织化学可见,HIR和H2R主要分布在气道和血管周围的平滑肌上。结论速发型哮喘模型,HIR和H2R主要分布在肺部气管周围的平滑肌上,H1R的高表达与哮喘模型的气道敏感性密切相关。 展开更多
关键词 哮喘 卵清白蛋白(ova) 组胺受体 肺功能 豚鼠
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恩诺沙星免疫抗原与检测抗原的制备及鉴定 被引量:2
15
作者 林本夫 张乃生 +2 位作者 杨正涛 原丽红 郭昌明 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期646-648,共3页
采用N-羟基琥珀酰亚胺法将恩诺沙星(Enro)半抗原与载体蛋白-牛血清白蛋白(BSA)相偶联,制备出了抗En-ro单克隆抗体的免疫抗原Enro-BSA。同样的方法,将Enro与卵清白蛋白(OVA)相偶联制备了抗Enro单克隆抗体的检测抗原Enro-OVA。紫外扫描光... 采用N-羟基琥珀酰亚胺法将恩诺沙星(Enro)半抗原与载体蛋白-牛血清白蛋白(BSA)相偶联,制备出了抗En-ro单克隆抗体的免疫抗原Enro-BSA。同样的方法,将Enro与卵清白蛋白(OVA)相偶联制备了抗Enro单克隆抗体的检测抗原Enro-OVA。紫外扫描光谱及动物免疫试验结果表明,其偶联成功。 展开更多
关键词 恩诺沙星 牛血清白蛋白 卵清白蛋白 紫外扫描光谱
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卵清蛋白金纳米簇水浴合成及汞离子检测应用 被引量:2
16
作者 杜娟 杨佳航 +2 位作者 张承越 罗秋水 王文君 《化学研究与应用》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期958-962,共5页
以卵清蛋白为还原剂,通过水浴加热法,合成了具有红色荧光的卵清蛋白-金纳米簇。通过优化得到了反应最佳条件。考察了不同有机溶剂和金属离子对金纳米簇荧光的影响,并测定了检测汞离子的线性范围。试验结果表明,当氯金酸浓度固定为2.33mM... 以卵清蛋白为还原剂,通过水浴加热法,合成了具有红色荧光的卵清蛋白-金纳米簇。通过优化得到了反应最佳条件。考察了不同有机溶剂和金属离子对金纳米簇荧光的影响,并测定了检测汞离子的线性范围。试验结果表明,当氯金酸浓度固定为2.33mM,水浴加热温度固定在37℃时,反应最佳条件为卵清蛋白浓度10.71mg mL^(-1),NaOH浓度0.095M,反应时间6h。生成的金纳米簇在400~600nm范围内无明显紫外吸收峰,最大发射峰位于641nm。金纳米簇呈球形,颗粒大小约为2-3nm,荧光量子产率为0.0516。有机溶剂和金属离子对金纳米簇荧光均有一定影响,其中汞离子对金纳米簇荧光的影响最为显著,在5×10^(-7)-1×10^(-5)M浓度范围呈现良好的线性关系。试验结果表明,通过卵清蛋白合成的金纳米簇具有良好的荧光性能,且可用于水样中汞离子的检测。 展开更多
关键词 金纳米簇 卵清蛋白 汞离子
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粉螨性小鼠哮喘模型的建立与评估 被引量:1
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作者 赵金红 张超 +1 位作者 姜玉新 李朝品 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2011年第10期761-764,F0004,共5页
目的探讨采用椭圆食粉螨提取浸液建立C57BL/6小鼠哮喘模型的方法。方法 45只C57BL/6小鼠随机分成3组:PBS阴性对照组、卵清蛋白(OVA)阳性对照组、椭圆食粉螨(Ale o)哮喘模型组。用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测支气管肺泡灌洗液(BALF)、... 目的探讨采用椭圆食粉螨提取浸液建立C57BL/6小鼠哮喘模型的方法。方法 45只C57BL/6小鼠随机分成3组:PBS阴性对照组、卵清蛋白(OVA)阳性对照组、椭圆食粉螨(Ale o)哮喘模型组。用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测支气管肺泡灌洗液(BALF)、脾细胞培养上清液中IL-4、IL-17和IFN-γ的含量,计数BALF中细胞总数并分类,同时切取小鼠未灌洗侧肺组织进行病理学观察。结果 OVA阳性对照组、Ale o模型组小鼠脾细胞上清和BALF中IL-4、IL-17及IFN-γ含量与PBS阴性对照组相比,差异均具有统计学意义(P<0.05或P<0.01);OVA阳性对照组、Ale o模型组小鼠BALF中细胞总数及各类细胞数与PBS阴性对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);小鼠未灌洗侧肺组织病理学观察显示,OVA阳性对照组和Ale o模型组小鼠肺组织可见大量炎症细胞浸润,以嗜酸性粒细胞、淋巴细胞及巨噬细胞为主。结论用椭圆食粉螨提取浸液建立的C57BL/6小鼠哮喘模型具有过敏性哮喘的主要特征。 展开更多
关键词 椭圆食粉螨 哮喘 卵清蛋白 酶联免疫吸附试验 支气管肺泡灌洗液
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外源性硫化氢对哮喘大鼠肺Muc5ac表达的影响 被引量:1
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作者 陈巧彬 陈琅 +1 位作者 林瑜 陈慧 《中华妇幼临床医学杂志(电子版)》 CAS 2009年第2期11-14,共4页
目的观察卵白蛋白(ovalbumin,OVA)诱导建立的急性支气管哮喘大鼠模型,探讨气体信号分子硫化氢(H2S)在哮喘发病中的作用。方法选取26只健康SD大鼠,按随机数字表法将其分为哮喘组(n=9)、NaHS干预组(n=9)和对照组(n=8)。激发后24h解剖大鼠... 目的观察卵白蛋白(ovalbumin,OVA)诱导建立的急性支气管哮喘大鼠模型,探讨气体信号分子硫化氢(H2S)在哮喘发病中的作用。方法选取26只健康SD大鼠,按随机数字表法将其分为哮喘组(n=9)、NaHS干预组(n=9)和对照组(n=8)。激发后24h解剖大鼠、取肺,观察大鼠支气管周围炎性细胞浸润程度,并进行评分。采用免疫组化染色法测定外源性硫氢化钠(NaHS)、硫化氢为供体处理后的大鼠肺部黏蛋白基因Muc5ac的表达情况。结果光镜下支气管周围炎性细胞浸润程度评分(中位数表示),哮喘组为4分,NaHS组为2分,对照组为1分,三组间比较,差异有显著意义(H=13.75,P<0.05)。哮喘组、NaHS干预组及对照组肺muc5ac蛋白含量(阳性面积表示)分别为(1330.22±662.87)μm2,(715.88±282.49)μm2及(501.75±270.58)μm2,三组间比较,差异有显著意义(F=11.82,P<0.01)。结论哮喘组大鼠黏蛋白基因Muc5ac表达增加,外源性硫化氢可减轻哮喘气管炎症,对哮喘急性发作起保护作用。 展开更多
关键词 硫化氢 哮喘 黏蛋白基因 卵白蛋白
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高效构建卵清白蛋白scFv噬菌体文库及其筛选 被引量:1
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作者 郎巧利 余琳 +2 位作者 何麒麟 葛良鹏 杨希 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期25-31,共7页
目的:建立一种高效噬菌体文库构建方法,获得抗鸡卵清蛋白(ovalbumin,OVA)的单链抗体(scFv)噬菌体展示文库,筛选鉴定获得OVA单链抗体。方法:用OVA蛋白免疫Balb/C小鼠,选取血清抗体效价高的小鼠提取脾脏RNA,利用RT-PCR方法扩增获得小鼠重... 目的:建立一种高效噬菌体文库构建方法,获得抗鸡卵清蛋白(ovalbumin,OVA)的单链抗体(scFv)噬菌体展示文库,筛选鉴定获得OVA单链抗体。方法:用OVA蛋白免疫Balb/C小鼠,选取血清抗体效价高的小鼠提取脾脏RNA,利用RT-PCR方法扩增获得小鼠重链和小鼠轻链基因。通过无缝连接酶一步将小鼠重链基因、轻链基因和linker DNA连接起来,插入噬菌体表达载体中,构建OVA scFv噬菌体展示文库。测定文库容量,对文库进行富集筛选,ELISA鉴定阳性克隆,测序后构建真核表达载体,转入Expi-CHO悬浮细胞进行真核表达,利用Western blot进行鉴定。结果:成功获得库容量为1. 2×10^7cfu的OVA scFv噬菌体展示文库,并从中筛选出8个阳性克隆,选取效价最高的2号克隆,在Expi-CHO悬浮细胞中表达获得可溶性抗体。结论:建立了一种高效构建scFv噬菌体文库的方法,筛选获得高结合活性的OVA单链抗体,并成功进行了真核表达,为OVA ELISA检测试剂盒的研制奠定了基础。 展开更多
关键词 鸡卵清蛋白 SCFV 噬菌体展示 真核表达
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芦荟多糖对卵清蛋白致敏小鼠的脱敏效果 被引量:1
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作者 颜辉 王加利 《江苏大学学报(医学版)》 CAS 2007年第6期471-474,477,共5页
目的:研究芦荟多糖对卵清蛋白(OVA)致敏小鼠的脱敏效果。方法:50只BABL/c小鼠随机分为5组,分别为正常组(A),模型组(B),小、中、高剂量组(C,D,E)组。采用OVA加Al(OH)3注射法复制小鼠OVA致敏模型,期间C,D,E组灌服不同剂量的芦荟多糖干预。... 目的:研究芦荟多糖对卵清蛋白(OVA)致敏小鼠的脱敏效果。方法:50只BABL/c小鼠随机分为5组,分别为正常组(A),模型组(B),小、中、高剂量组(C,D,E)组。采用OVA加Al(OH)3注射法复制小鼠OVA致敏模型,期间C,D,E组灌服不同剂量的芦荟多糖干预。24 d后检测小鼠受OVA激发后的反应、肺泡灌洗液(BALF)中总细胞及嗜酸性粒细胞(EOS)数量、肺组织丙二醛(MDA)及一氧化氮(NO)含量、血清特异性IgE,BALF及淋巴细胞培养液中的IL-4,IFN-γ含量。结果:芦荟多糖能够减轻致敏小鼠受OVA激发所引起的症状,能够下调BALF及淋巴细胞培养液中的IL-4水平,提升IFN-γ,降低肺泡灌洗液(BALF)中总细胞及EOS数量,使肺组织中与炎症相关的MDA及NO浓度降低,下调血清中特异性IgE。结论:芦荟多糖能够纠正致敏小鼠体内的免疫失衡,对致敏小鼠有一定的治疗作用。 展开更多
关键词 芦荟多糖 卵清蛋白 致敏小鼠 脱敏
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