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冬虫夏草原生质体制备与再生条件的研究 被引量:12
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作者 郭成金 赵润 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第5期166-170,共5页
采用正交分析方法,对影响冬虫夏草菌株原生质体制备与再生的主要因素进行研究。结果表明,最佳条件组合为培养3d的菌丝体,在2.0%溶壁酶+1.0%蜗牛酶的酶液中,0.6mol/L的KCl作为原生质体制备的渗稳剂,0.6mol/L的甘露醇作为再生培养基的渗稳... 采用正交分析方法,对影响冬虫夏草菌株原生质体制备与再生的主要因素进行研究。结果表明,最佳条件组合为培养3d的菌丝体,在2.0%溶壁酶+1.0%蜗牛酶的酶液中,0.6mol/L的KCl作为原生质体制备的渗稳剂,0.6mol/L的甘露醇作为再生培养基的渗稳剂,32℃酶解2h。在此条件下,原生质体得率可达到2.98×108/ml,再生率可达到42.09×10-2。 展开更多
关键词 冬虫夏草 正交分析 原生质体制备 再生 渗稳剂
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羊肚菌原生质体制备和再生 被引量:3
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作者 陈芳草 谭方河 刘兴蓉 《西南农业学报》 CSCD 2007年第5期1097-1100,共4页
本文从菌丝培养、菌丝酶解、原生质体再生等方面研究了尖顶羊肚菌(M orchella conica)A401和粗腿羊肚菌(M.crassieps)一个菌株E903的原生质体制备与再生条件,结果表明:两供试菌种在20℃下于营养丰富的现配液体培养基③中匀速振荡培... 本文从菌丝培养、菌丝酶解、原生质体再生等方面研究了尖顶羊肚菌(M orchella conica)A401和粗腿羊肚菌(M.crassieps)一个菌株E903的原生质体制备与再生条件,结果表明:两供试菌种在20℃下于营养丰富的现配液体培养基③中匀速振荡培养2~4 d可得菌龄一致、活力强、量大的菌丝体,收集菌丝体洗涤吸干水分后在现配酶液①中于30℃恒温下振荡酶解3.5 h原生质体产量最高(A401为3.8×106个/100 mg.mL,E903为3.6×10^6个/100 mg.mL),再将分离纯化的原生质体悬液单层涂布到新鲜的③号再生平板上,20℃恒温培养3~5 d后可得大量再生菌落(最高再生率A401为0.78%,E903为0.8%)。 展开更多
关键词 羊肚菌 原生质体 制备 再生 酶解 渗透压稳定剂
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产碱性果胶酶的枯草芽孢杆菌ZGL14原生质体制备与再生条件 被引量:3
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作者 于平 徐超超 朱鹏志 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期357-361,共5页
原生质体融合技术是一种重要的微生物育种方法. 以能产碱性果胶酶的枯草芽孢杆菌ZGL14为出发菌株,探讨影响其原生质体制备和再生的主要因素. 通过研究菌龄、溶菌酶浓度、酶解时间、酶解温度、渗透压稳定剂的pH值、再生培养基类型和培... 原生质体融合技术是一种重要的微生物育种方法. 以能产碱性果胶酶的枯草芽孢杆菌ZGL14为出发菌株,探讨影响其原生质体制备和再生的主要因素. 通过研究菌龄、溶菌酶浓度、酶解时间、酶解温度、渗透压稳定剂的pH值、再生培养基类型和培养方式等对枯草芽孢杆菌ZGL14原生质体制备与再生的影响,确定其最优化条件. 结果显示:枯草芽孢杆菌ZGL14原生质体制备的最优条件为菌龄9 h,溶菌酶浓度0.2 mg/mL,酶解时间10 min,酶解温度32 ℃,渗透压稳定剂的pH值 7.0. 在此条件下,枯草芽孢杆菌ZGL14原生质体的形成率为98%,再生率达30%. 枯草芽孢杆菌ZGL14原生质体再生培养基以琥珀酸钠作为渗透压稳定剂并结合Ca2+再生效果较好,再生方式以单层培养较好. 本研究获得了枯草芽孢杆菌ZGL14原生质体制备和再生的最佳条件,可为实现其融合育种提供技术支持. (图7 表1 参14) 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 原生质体制备 原生质体再生 形成率 再生率 渗透压稳定剂
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