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水稻抗病基因同源序列的克隆及测序分析 被引量:24
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作者 杨勤忠 杨佩文 +4 位作者 王群 刘继梅 鄢波 李家瑞 黄兴奇 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期241-247,共7页
根据已知的 NBS- L RR类及丝 /苏氨酸蛋白激酶类抗病基因结构中氨基酸的保守区域 ,设计了两组简并引物用于扩增广谱抗稻瘟病品种云系 2号中的抗病基因同源序列。结果一共获得 11类的 NBS- L RR类抗病基因同源片段及 16类的丝 /苏氨酸蛋... 根据已知的 NBS- L RR类及丝 /苏氨酸蛋白激酶类抗病基因结构中氨基酸的保守区域 ,设计了两组简并引物用于扩增广谱抗稻瘟病品种云系 2号中的抗病基因同源序列。结果一共获得 11类的 NBS- L RR类抗病基因同源片段及 16类的丝 /苏氨酸蛋白激酶类抗病基因同源片段。所有 11类的抗病基因同源系列均含有 NBS- L RR类抗病基因的保守序列 ,如 P-loop、Kinase 2、Kinase 3a以及跨膜区域等。所有 16类的蛋白激酶的序列均含有丝 /苏氨酸蛋白激酶所共有的催化区 (共有氨基酸序列 :DL KPEN)、 (共有氨基酸序列 :GT/ SXXYXAPE)以及蛋白激酶的其他催化区。两条 NBS- L RR类的抗病基因同源片段 YR1、YR12分别与抗病基因 I2 C- 2及 Xa1氨基酸同源性很高 (>5 0 % )。7条丝 /苏氨酸蛋白激酶类的抗病基因同源片段与已克隆的 Xa2 1、Pto、L r10等抗病基因的氨基酸序列超过 6 0 %的相同以及 76 %~ 展开更多
关键词 水稻 核酸结合位点 丝/苏氨酸蛋白激酶 稻瘟病 抗病基因 同源序列 基因克隆
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西瓜抗枯萎病基因同源序列的克隆与分析 被引量:11
2
作者 郭绍贵 宫国义 +2 位作者 许勇 张海英 毛爱军 《分子植物育种》 CAS CSCD 2008年第4期793-800,共8页
本研究根据已克隆的抗枯萎病基因的NBS保守结构域设计了22条上游简并引物和17条下游简并引物,以西瓜抗枯萎病种质PI296341-FR和感枯萎病品种97103为材料,获得了7条来自基因组DNA的RGA序列(GenBank登录号:DQ156558-DQ156564),均含有NBS... 本研究根据已克隆的抗枯萎病基因的NBS保守结构域设计了22条上游简并引物和17条下游简并引物,以西瓜抗枯萎病种质PI296341-FR和感枯萎病品种97103为材料,获得了7条来自基因组DNA的RGA序列(GenBank登录号:DQ156558-DQ156564),均含有NBS保守区的P-环、kinase-2或kinase-3等抗病基因的特征序列结构,所编码的氨基酸序列与已知抗枯萎病基因Fom-2、I2C-1、I2C-2和I2等编码的氨基酸序列表现出11% ̄72%的同源性,其中来自PI296341-FR的RGA序列175R1与甜瓜抗枯萎病基因Fom-2的同源性最高,为72%。来自PI296341-FR与97103的RGA序列之间同源性较高(73% ̄97%),证明了抗病基因在进化上的保守性。 展开更多
关键词 西瓜 枯萎病 抗病基因同源序列 核苷酸结合位点
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玉米自交系B73全基因组NBS类型抗病基因分析 被引量:9
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作者 汪结明 江海洋 +3 位作者 赵阳 项艳 朱苏文 程备久 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期566-570,共5页
核苷酸结合位点(NBS)类型抗病基因是植物抗病基因中最大的一个类别,也是近年来植物抗病分子育种研究的一大热点。本研究对玉米自交系B73全基因组中含有NBS结构的候选抗病基因进行了基因总数、类型、系统进化关系等分析。在B73全基因组... 核苷酸结合位点(NBS)类型抗病基因是植物抗病基因中最大的一个类别,也是近年来植物抗病分子育种研究的一大热点。本研究对玉米自交系B73全基因组中含有NBS结构的候选抗病基因进行了基因总数、类型、系统进化关系等分析。在B73全基因组中含有165个NBS结构的基因,远远少于水稻中的同类基因,按照N-端结构和亮氨酸富集区(LRR)结构,将其分为153个标准结构和12个非标准结构NBS基因。其中,标准结构基因又分为CC-NBS-LRR、CC-NBS、NBS、NBS-NBS、NBS-LRR、NBS-NBS-LRR、NBS-X、X-NBS等8个类型。系统进化树分析表明,NBS类型抗病基因存在明显的两大分支,与水稻的星状发散型分布有很大差异。通过基因家族分析,还发现了玉米NBS类型基因的复制现象,但发生复制的基因比例低于水稻,可能是造成玉米NBS抗病基因数目较少的原因之一。 展开更多
关键词 玉米 生物信息学 抗病基因 核苷酸结合位点(NBS) 系统进化树
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小麦NBS-LRR类抗病基因同源cDNA序列的克隆与表达分析 被引量:8
4
作者 任晓娣 刘彦慧 +4 位作者 李建嫄 张娜 彭巧慧 杨文香 刘大群 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期69-74,79,共7页
为获得小麦抗叶锈病相关基因,以小麦近等基因系TcLr19所构建的非亲和cDNA文库中获得的EST序列(Contig 914)为靶序列,用RT-PCR方法和cDNA末端快速扩增技术,分离克隆到片段为3 042bp的全长cDNA序列。序列分析表明该序列符合典型单子叶植物... 为获得小麦抗叶锈病相关基因,以小麦近等基因系TcLr19所构建的非亲和cDNA文库中获得的EST序列(Contig 914)为靶序列,用RT-PCR方法和cDNA末端快速扩增技术,分离克隆到片段为3 042bp的全长cDNA序列。序列分析表明该序列符合典型单子叶植物的CC-NBS-LRR结构模式,命名为TaNLR。该基因包含一个完整的2 739bp的开放阅读框(ORF),具有连续的Poly A尾和典型的加尾信号AATTAA。ProtParam程序预测表明该基因编码912个氨基酸。发育树分析显示该氨基酸序列与大麦的NBS-LRR类抗病基因蛋白同源性最高达89%。荧光定量PCR分析表明,在小麦与叶锈菌互作中,TaNLR基因受叶锈菌诱导下调表达。本研究在TcLr19小麦中成功获得了抗病同源基因,这为明确NBS-LRR在小麦抗叶锈病中的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 小麦 核苷酸结合位点(NBS) 富含亮氨酸重复(LRR) 抗病基因同源序列(RGAs) cDNA末端快速扩增技术(RACE) 实时定量PCR(real-time PCR)
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毛果杨全基因组NBS类型抗病基因分析 被引量:5
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作者 吴大强 蔡诚 +1 位作者 魏国 项艳 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第2期152-157,共6页
A full set of disease resistance(R) candidate genes encoding nucleotide-binding sites(NBS) in a complete genome of Populus trichocarpa was identified and characterized by structural diversities,physical positions,phyl... A full set of disease resistance(R) candidate genes encoding nucleotide-binding sites(NBS) in a complete genome of Populus trichocarpa was identified and characterized by structural diversities,physical positions,phylogenetic relationships.Based on structures of N-terminal motif and leucine-rich repeat domains motif,we found 381 NBS-coding sequences with 122 non-regular NBS genes and 259 regular NBS genes that were further classified into 13 types such as TNL,CNL,NL,XNL,TN and other minor types.Meanwhile 81.9% of the NBS genes were distributed in cluster,and 81.8% of the cluster genes had duplicates.The results showed that there were many duplicate phenomenon occurred in the evolution of disease resistance genes of P.trichocarpa.After analysis of NBS standard phylogenetic tree in the genome of P.trichocarpa,the structure of tree exhibited a star topology,and the regular NBS genes were classified into 68 groups by less than 30% amino acid sequence diversity in each domain. 展开更多
关键词 毛果杨 生物信息学 抗病基因 NBS 系统进化树
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乙醇对F_1-ATP酶和H^+-ATP酶的抑制与其核苷酸结合位点状态的关系 被引量:3
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作者 李生广 孙珊 +1 位作者 许桂珍 林治焕 《生物化学杂志》 CSCD 1990年第1期71-75,共5页
本文利用动力学方法研究了乙醇对F_1-ATP酶和H^(+)-ATP酶复合体的抑制与其结合核苷酸位点状态的关系,结果表明天然情况下乙醇对F_1呈现反竞争性抑制类型,对H^(+)-ATP酶呈现非竞争性抑制类型,且乙醇对F_1和H^(+)-ATP酶的抑制与核苷酸结... 本文利用动力学方法研究了乙醇对F_1-ATP酶和H^(+)-ATP酶复合体的抑制与其结合核苷酸位点状态的关系,结果表明天然情况下乙醇对F_1呈现反竞争性抑制类型,对H^(+)-ATP酶呈现非竞争性抑制类型,且乙醇对F_1和H^(+)-ATP酶的抑制与核苷酸结合位点的构象密切相关。游离状态下和膜结合状态下的F_1在部分结合的核苷酸被洗脱前后动力学行为的不同,反映了二种状态下的F_1具有不同的构象,且F_0和膜脂对F_1起着一定的调控作用。 展开更多
关键词 F1-ATP酶 H-ATP酶 乙醇 抑制
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基于晋汾52和晋谷21解析谷子NBS类型抗病基因变异 被引量:2
7
作者 韩彦卿 郑洁 +2 位作者 武彩娟 元香梅 韩渊怀 《山西农业大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2018年第9期8-15,共8页
[目的]为明确抗病品种晋汾52与其辐射诱变的感病品种晋谷21的NBS抗病基因之间存在的变异差异及引起抗性差异的原因。[方法]基于前期全基因组测序筛选出的6个抗病基因为基础,克隆了晋汾52和晋谷21相应的抗病基因,并利用生物信息学软件比... [目的]为明确抗病品种晋汾52与其辐射诱变的感病品种晋谷21的NBS抗病基因之间存在的变异差异及引起抗性差异的原因。[方法]基于前期全基因组测序筛选出的6个抗病基因为基础,克隆了晋汾52和晋谷21相应的抗病基因,并利用生物信息学软件比对抗病基因序列,预测其蛋白结构及系统进化分析。[结果]筛选出2个变异位点差异较大的基因,Si028867和Si033294,经分析推测两个品种之间抗性差异主要由非同义突变引起。[结论]NBS类抗病基因之间的非同义突变可能是导致两个品种之间抗病性存在差异的原因。该研究结果对谷子抗病分子辅助育种具有一定理论指导意义。 展开更多
关键词 谷子 核苷酸结合位点 抗病基因 生物信息学 系统进化
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小麦NBS类序列的分离与特征分析
8
作者 张立荣 杨文香 刘大群 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2011年第9期5093-5095,共3页
[目的]获得小麦近等基因系TcLr24中NBS类抗病基因同源序列。[方法]利用已克隆植物抗病基因NBS序列中的保守结构"P-loop"和"GLPL"合成简并引物,以小麦近等基因系TcLr24基因组DNA为模板进行PCR扩增。[结果]得到13条... [目的]获得小麦近等基因系TcLr24中NBS类抗病基因同源序列。[方法]利用已克隆植物抗病基因NBS序列中的保守结构"P-loop"和"GLPL"合成简并引物,以小麦近等基因系TcLr24基因组DNA为模板进行PCR扩增。[结果]得到13条具有连续ORF的抗病基因类似物序列,包括P-loop、Kinase-2、Kinase-3a、GLPL抗病基因所共有的保守结构,相应推测的氨基酸序列间的相似性系数在36.1%~98.3%,同时对分离的RGAs的氨基酸序列和5个已克隆植物NBS的氨基酸序列进行聚类分析表明,与Xa1、RPS2亲缘关系较近,而与Lr21亲缘关系较远。[结论]TcLr24中NBS类RGAs可能会有与Lr21不同机制的抗病功能。 展开更多
关键词 小麦 NBS 抗病基因类似物
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植物抗病基因及其作用机理 被引量:42
9
作者 王友红 张鹏飞 陈建群 《植物学通报》 CSCD 北大核心 2005年第1期92-99,共8页
综合近年国内外对植物抗病基因的研究和我们对水稻抗病基因的研究成果,对植物抗病基因进行归纳分类,并就其结构、功能、作用机理和信号传导进行分析和讨论。根据植物抗病基因编码蛋白的保守结构,将植物抗病基因分成NBS-LRR、eLRR-TM、eL... 综合近年国内外对植物抗病基因的研究和我们对水稻抗病基因的研究成果,对植物抗病基因进行归纳分类,并就其结构、功能、作用机理和信号传导进行分析和讨论。根据植物抗病基因编码蛋白的保守结构,将植物抗病基因分成NBS-LRR、eLRR-TM、eLRR-TM-pkinase、STK和其他五大类。不同类型的基因在细胞水平上的分布不一样,NBS、激酶和LRR在不同类型的基因之间结构差异也较大,但是它们通过各不相同的作用机理参与细胞对病原体的防御。 展开更多
关键词 植物抗病 作用机理 抗病基因 水稻 基因编码蛋白 细胞水平 分布 不同类型 TM 病原体
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植物抗病基因结构特征及其类似序列的研究进展 被引量:37
10
作者 秦跟基 李万隆 陈佩度 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期102-107,共6页
植物抗病基因的克隆一直为植物遗传学家和病理学家所关注。克隆的抗病基因在氨基酸水平上表现出一定程度的相似性, 在一些区段高度保守, 如 N B S、 L R R、激酶、 L Z等。这些保守序列, 不仅有助于对抗病基因的分类及其作... 植物抗病基因的克隆一直为植物遗传学家和病理学家所关注。克隆的抗病基因在氨基酸水平上表现出一定程度的相似性, 在一些区段高度保守, 如 N B S、 L R R、激酶、 L Z等。这些保守序列, 不仅有助于对抗病基因的分类及其作用机理的理解, 而且为抗病基因克隆提供了一条新途径。根据这些保守序列合成 P C R 引物, 在许多植物中已扩增出大量的抗病基因类似序列 ( R G A)。遗传作图表明 R G A 与抗病性密切相关。对 R G A 与 R 基因的关系及 R G A 的基因组分布一并进行了讨论。 展开更多
关键词 抗病基因 核苷酸 结合位点 类似序列
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云南3种野生稻中抗病基因同源序列的克隆及序列分析 被引量:38
11
作者 刘继梅 程在全 +4 位作者 杨明挚 吴成军 王玲仙 孙一丁 黄兴奇 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期273-280,共8页
根据已报道的NBS LRR类和STK类抗病基因结构中的氨基酸保守区域 ,设计简并引物 ,通过PCR扩增及克隆 ,从普通野生稻 (OryzarufipogonGriff.)、药用野生稻 (OryzaofficinalisWall.)、疣粒野生稻 (Oryzameye rianaBaill.)中共获得 14类NBS ... 根据已报道的NBS LRR类和STK类抗病基因结构中的氨基酸保守区域 ,设计简并引物 ,通过PCR扩增及克隆 ,从普通野生稻 (OryzarufipogonGriff.)、药用野生稻 (OryzaofficinalisWall.)、疣粒野生稻 (Oryzameye rianaBaill.)中共获得 14类NBS LRR类抗病基因同源序列 ,其中普通野生稻中的有 7类 ,药用野生稻中的有 2类 ,疣粒野生稻中的有 6类。药用野生稻中TO12代表序列与普通野生稻中TR19代表序列 ,同属一类 ,且具有 10 0 %的同源性 ,说明不同种野生稻中的同一类 (聚类 )抗病基因同源序列是完全一致的。同时 ,还获得 5类STK类抗病基因同源序列 ,其中普通野生稻中的有 4类 ;药用野生稻中的有 1类。通过氨基酸同源性比较分析 ,发现笔者克隆到的抗病基因同源序列与已克隆的抗病基因L6、N、Bs2、Prf、Pto、Lr10和Xa2 1等的氨基酸同源性都相当低 (均低于 2 5 % ) ,暗示了这些抗病基因同源序列可能是目前尚未报道的抗病基因的同源序列。 展开更多
关键词 序列分析 野生稻 抗病基因 NBS-LRR同源序列 STK同源序列
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甘薯NBS类抗病基因类似物的分离与序列分析 被引量:26
12
作者 陈观水 周以飞 +1 位作者 林生 潘大仁 《热带亚热带植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期359-365,共7页
利用已克隆植物抗病基因NBS(Nucleotidebindingsite)序列中的保守模体(motif)“P-loop”和“GLPL”合成简并引物,以甘薯(Ipomoeabatatas)栽培品种青农2号基因组DNA为模板进行PCR扩增,通过T/A克隆、测序和序列分析,共得到15条具有连续OR... 利用已克隆植物抗病基因NBS(Nucleotidebindingsite)序列中的保守模体(motif)“P-loop”和“GLPL”合成简并引物,以甘薯(Ipomoeabatatas)栽培品种青农2号基因组DNA为模板进行PCR扩增,通过T/A克隆、测序和序列分析,共得到15条具有连续ORF的抗病基因类似物(Resistancegeneanalogues,RGAs)序列,它们之间核苷酸序列间的相似性系数在41.2%-99.4%之间,而相应推测的氨基酸序列间的相似性系数在20.6%-100%之间,同时对分离的RGAs的核苷酸和氨基酸序列进行系统发育树分析,表明甘薯RGAs可分为TIR(DrosophilaTollorhumaninterleukinreceptor-like)和nonTIR两类。对甘薯RGAs和5个已克隆植物NBS的氨基酸序列进行结构分析表明,它们包括“P-loop”、“Kinase-2”、“Kinase-3a”“、GLPL”4个抗病基因所共有的保守模体。这些表明甘薯与其它物种的NBS类RGAs可能具有同样的起源和进化机制。 展开更多
关键词 甘薯 NBS 抗病基因类似物 基因分离 序列分析
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海岛棉NBS类型抗病基因类似物的起源、多样性及进化 被引量:21
13
作者 涂礼莉 张献龙 +2 位作者 朱龙付 聂以春 郭小平 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第11期1071-1077,共7页
利用已克隆植物的R基因NBS序列中保守模体合成简并引物 ,以海岛棉品系Pima 90 (Gossypiumbarba dense)基因组DNA为模板进行PCR扩增 ,通过T A克隆、测序和序列比较分析共得到 31条RGAs ,其中 1 9条具有连续的ORF。利用海岛棉的 31条RGAs... 利用已克隆植物的R基因NBS序列中保守模体合成简并引物 ,以海岛棉品系Pima 90 (Gossypiumbarba dense)基因组DNA为模板进行PCR扩增 ,通过T A克隆、测序和序列比较分析共得到 31条RGAs ,其中 1 9条具有连续的ORF。利用海岛棉的 31条RGAs与GenBank中陆地棉种质系M 2 4 9(Gossypiumhirsutum)的RGAs进行了比较分析 ,RGAs可分为两大类 :其中第Ⅰ类全部为陆地棉的RGAs;第Ⅱ类分别包括了陆地棉和海岛棉的RGAs。同时对海岛棉RGAs的核苷酸和氨基酸序列进行系统发育树分析 ,表明海岛棉RGAs可分为TIR(DrosophilaTollorhumaninter leukinreceptor like)和non TIR两类 ,与前人所报道的R基因进化一致。对 1 9条具有连续ORF的RGAs进行了结构分析 ,结果表明它们包括P loop、Kin 2、“PLAL”及Meyers等所定义的RNBS A、B、C 3个模体。结果表明 。 展开更多
关键词 NBS 抗病基因类似物 棉花 多样性 进化
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Overexpression of potato miR482e enhanced plant sensitivity to Verticillium dahliae infection 被引量:16
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作者 Liu Yang Xiaoying Mu +4 位作者 Chao Liu Jinghui Cai Ke Shi Wenjiao Zhu Qing Yang 《Journal of Integrative Plant Biology》 SCIE CAS CSCD 2015年第12期1078-1088,共11页
Verticillium wilt of potato is caused by the fungus pathogen Verticillium dahliae. Present sRNA sequencing data revealed that miR482 was in response to V. dahliae infection, but the function in potato is elusive. Here... Verticillium wilt of potato is caused by the fungus pathogen Verticillium dahliae. Present sRNA sequencing data revealed that miR482 was in response to V. dahliae infection, but the function in potato is elusive. Here, we characterized potato miR482 family and its putative role resistance to Verticillium wilt. Members of the potato miR482 superfamily are variable in sequence, but all variants target a class of disease-resistance proteins with nucleotide binding site (NBS) and leucine-rich repeat (LRR) motifs. When potato plantlets were infected with V. dahliae, the expression level of miR482e was downregulated, and that of several NBS-LRR targets of miR482e were upregulated. Transgenic potato plantlets overexpressing miR482e showed hypersensitivity to V. dahliae infection. Using sRNA and degradome datasets, we validated that miR482e targets mRNAs of NBS-LRR disease-resistance proteins and triggers the production of trans-acting (ta)- siRNAs, most of which target mRNAs of defense-relatedproteins. Thus, the hypersensitivity of transgenic potato could be explained by enhanced miR482e and miR482e-derived ta- siRNA-mediated silencing on NBS-LRR-disease-resistance pro- teins. It is speculated that a miR482-mediated silencing cascade mechanism is involved in regulating potato resistance against V. dahliae infection and could be a counter defense action of plant in response to pathogen infection. 展开更多
关键词 miR482 nucleotide binding site leucine-rich repeat
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普通野生稻中NBS同源序列的克隆和分析 被引量:8
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作者 周玮斌 史晰 +2 位作者 詹树萱 孙崇荣 曹凯鸣 《复旦学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期516-520,共5页
已知的植物抗病基因大多数具有核苷酸结合位点(NBS)和富含亮氨酸重复区(LRR).根据 NBS的保守区设计引物,应用聚合酶链式反应(PCR),从普通野生稻基因组中克隆了4个不 同的NBS同源序列(OSNBA1~OSN... 已知的植物抗病基因大多数具有核苷酸结合位点(NBS)和富含亮氨酸重复区(LRR).根据 NBS的保守区设计引物,应用聚合酶链式反应(PCR),从普通野生稻基因组中克隆了4个不 同的NBS同源序列(OSNBA1~OSNBA4).同源性比较显示它们均与非TIR类的NBS序列 相似.其中,OSNBA1与双子叶植物拟南芥的RPS2基因更接近;OSNBA2~OSNBA 4与单子叶植物水稻的XA1、RPR1基因更相似. 展开更多
关键词 抗病基因 核苷酸结合位点 聚合酶链式反应 野生稻 基因克隆 同源序列 抗病能力
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易变山羊草抗禾谷孢囊线虫基因中核苷酸结合位点区(NBS)的克隆及序列分析 被引量:7
16
作者 邓洪新 杨晓娟 +1 位作者 邓光兵 余懋群 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期751-755,共5页
大部分已克隆的植物抗病基因都包含有核苷酸结合位点区 (NBS)和富含亮氨酸的重复序列区 (LRR) .利用来自节节麦的抗禾谷孢囊线虫基因Cre3位点NBS区保守序列设计特异引物 ,从含有来自易变山羊草的抗禾谷孢囊线虫基因的小麦品系E 10的基... 大部分已克隆的植物抗病基因都包含有核苷酸结合位点区 (NBS)和富含亮氨酸的重复序列区 (LRR) .利用来自节节麦的抗禾谷孢囊线虫基因Cre3位点NBS区保守序列设计特异引物 ,从含有来自易变山羊草的抗禾谷孢囊线虫基因的小麦品系E 10的基因组中PCR扩增得到一条约 5 30bp的单一条带 .将扩增条带克隆和序列分析发现 ,该克隆 (Rccn4 )的编码区长 5 2 8bp ,含一个不完整的开放读码框 ,没有起始密码子、终止密码子和内含子结构 ,它编码一个 176个氨基酸残基的蛋白质 ,分子量为 2 0 4kD .Rccn4含有NBS LRR类抗病基因NBS区共有的保守模体I(V)LDD、T(T S)R、G(L S)PLA(A I L)、RCF(A L)Y ,并且与Cre3基因的NBS编码区核苷酸和氨基酸同源性分别为99 4 %和 98% . 展开更多
关键词 小麦品系E-10 抗禾谷孢囊线虫基因 核苷酸结合区 克隆 序列分析 易变山羊草 抗虫性
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枯萎病菌胁迫下3种黑籽南瓜HQRGA2表达及抗氧化酶活性差异分析 被引量:10
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作者 丁玉梅 张杰 +6 位作者 谢俊俊 姚春馨 刘庆 周晓罡 周丽英 杨正安 张兴国 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期349-358,共10页
以云南栽培的3个黑籽南瓜(Cucurbita ficifolia)品种(白皮、花皮和绿皮品种)为试材,在室内接种评价枯萎病抗性基础上,研究了3种材料受枯萎病菌胁迫后NBS抗病基因同源序列HQRGA2(GenBank登录号MG946756)的表达差异,以及活性氧产生和抗氧... 以云南栽培的3个黑籽南瓜(Cucurbita ficifolia)品种(白皮、花皮和绿皮品种)为试材,在室内接种评价枯萎病抗性基础上,研究了3种材料受枯萎病菌胁迫后NBS抗病基因同源序列HQRGA2(GenBank登录号MG946756)的表达差异,以及活性氧产生和抗氧化酶活性差异。结果显示,3种黑籽南瓜HQRGA2的表达均受枯萎病菌诱导,与感病白皮品种和中抗花皮品种相比,抗病绿皮品种HQRGA2的表达水平增加迅速且持续能力强,呈增加-降低的表达特点。接种枯萎病菌后,感病品种和中抗品种■产生速率呈上升趋势,抗病品种则在侵染中后期急剧升高。感病品种和中抗品种的POD活性、MDA含量主要呈升-降-升的变化趋势,SOD活性则主要呈先升后降的变化趋势;而抗病品种的POD和SOD活性变化平稳,MDA含量呈逐步增加的趋势。枯萎病抗性与侵染早期POD和SOD活性呈负相关,与后期MDA含量呈正相关,而CAT活性与抗性并无一致性,感病品种和抗病品种的变化平稳,中抗品种表现为平稳-升高。由此表明,枯萎病菌侵染黑籽南瓜后,产生了较高水平的■,感病品种主要依赖SOD和POD,中抗品种依赖POD、SOD和CAT来清除活性氧,以增加植株的抗氧化能力。与感病品种相比,抗病品种能迅速启动并维持NBS类抗病基因序列的高量表达,其抗氧化酶可维持较高的活性水平,但对枯萎病菌胁迫不敏感。 展开更多
关键词 黑籽南瓜 枯萎病 NBS类基因 QRT-PCR 抗氧化酶
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小麦NBS类抗病基因同源cDNA序列的克隆与特征分析 被引量:9
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作者 张楠 王海燕 刘大群 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期605-610,615,共7页
根据已克隆植物抗病(R)基因NBS保守结构域设计简并引物,采用RT-PCR和cDNA末端快速扩增技术(RACE),在小麦抗叶锈病近等基因系材料TcLr19中进行抗病同源基因cDNA全长的扩增。获得了1个通读的NBS类抗病同源基因S11A11cDNA序列,该序列全长29... 根据已克隆植物抗病(R)基因NBS保守结构域设计简并引物,采用RT-PCR和cDNA末端快速扩增技术(RACE),在小麦抗叶锈病近等基因系材料TcLr19中进行抗病同源基因cDNA全长的扩增。获得了1个通读的NBS类抗病同源基因S11A11cDNA序列,该序列全长2923bp,编码878个氨基酸序列。生物信息学分析结果表明,该片段含有NB-ARC保守结构域和多个LRR结构域。聚类分析表明,S11A11编码的蛋白与小麦抗叶锈病基因Lr1编码的蛋白亲缘关系较近,而与Lr10亲缘关系较远。半定量RT-PCR分析表明,该基因在小麦叶片中为低丰度组成型表达。本研究在TcLr19小麦中成功获得了抗病基因同源序列,为最终克隆小麦抗叶锈病目的基因奠定了基础。 展开更多
关键词 小麦 核苷酸结合位点(NBS) 抗病基因同源序列(RGAs) cDNA末端快速扩增技术(RACE) 半定量RT-PCR
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小麦NBS类抗病基因类似序列的多样性和进化关系研究 被引量:7
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作者 张立荣 杨文香 刘大群 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2011年第4期23-26,共4页
利用已克隆植物抗病基因NBS(Nucleotide binding site)序列中的保守结构P-loop和GLPL合成简并引物,以小麦近等基因系TcLr24基因组DNA为模板进行PCR扩增。得到13条具有连续ORF的抗病基因类似物(Resistancegene analogues,RGAs)序列,它们... 利用已克隆植物抗病基因NBS(Nucleotide binding site)序列中的保守结构P-loop和GLPL合成简并引物,以小麦近等基因系TcLr24基因组DNA为模板进行PCR扩增。得到13条具有连续ORF的抗病基因类似物(Resistancegene analogues,RGAs)序列,它们之间相应推测的氨基酸序列间的相似性系数在36.9%~98.3%之间。对甘薯RGAs和4个已克隆植物NBS的氨基酸序列进行结构分析表明,它们包括P-loop、Kinase-2、Kinase-3a、GLPL抗病基因所共有的保守结构。同时对分离的RGAs的氨基酸序列进行系统发育树分析,这些RGAs与Xa1、RPS2聚在一起,并且符合nonTIR RGAs类型。这些结果表明小麦与其他物种的NBS类RGAs可能具有同样的起源和进化机制。 展开更多
关键词 小麦 NBS 抗病基因类似物
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花椰菜遗传图谱的构建及NBS-LRR类抗性同源基因在图谱中的定位 被引量:7
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作者 古瑜 赵前程 +1 位作者 孙德岭 宋文芹 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期751-757,共7页
利用AFLP和NBS profiling技术,以花椰菜自交系“AD白花”与高代自交不亲和系“C-8”杂交得到的F1代自交产生的F2代分离群体为材料,构建了第一个花椰菜遗传连锁图谱。该图谱由234个AFLP标记和21个NBS标记构成了9个连锁群,总图距为668.4cM... 利用AFLP和NBS profiling技术,以花椰菜自交系“AD白花”与高代自交不亲和系“C-8”杂交得到的F1代自交产生的F2代分离群体为材料,构建了第一个花椰菜遗传连锁图谱。该图谱由234个AFLP标记和21个NBS标记构成了9个连锁群,总图距为668.4cM,标记间平均距离为2.9cM。每个连锁群包含的位点数从12到47个,相邻两标记之间的距离范围是0~14.9cM。NBS标记分布在8个连锁群中,这些标记大部分聚在一起。本研究为今后的基因定位及重要农艺性状的分析提供框架图。此外,研究NBS profiling方法在花椰菜中的稳定性和有效性以及NBS-LRR类RGA在花椰菜基因组中的分布和特点。 展开更多
关键词 花椰菜 AFLP NBS profiling 遗传连锁图谱
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